低密度脂蛋白膽固醇測定試劑盒(直接法-表面活性劑清除法)標準化操作規(guī)程LDLC-SOP

低密度脂蛋膽固醇測定劑盒（直接-表面活性劑除法）標準化操作程1目的規(guī)范實驗室操作，保證檢驗工作順利有效進行特制定此規(guī)程。2授權(quán)作人3適用圍4檢驗法

經(jīng)培訓且考核通過的臨床檢驗人員。本試劑用于體外定量檢測血清中低密度脂蛋白膽固醇的濃度。本試劑采用直接測試法測定低密度脂蛋白膽固醇的濃度。5檢驗理樣本中的低密度脂蛋白膽固醇在試劑中表面活性劑的作用下被膽固醇脂酶選擇性地催化水解為膽固醇和游離脂肪酸，生成的膽固醇經(jīng)膽固醇氧化酶氧化生成膽-4-烯-3-酮過氧化氫，過氧化氫在過氧化物酶的催化下與苯胺類色原物質(zhì)4-氨基安替比林作用產(chǎn)生水和醌亞胺色素，醌亞胺色素的生成量與樣本中低密度脂蛋白膽固醇的含量成正比，通過測定特定波長處反應最終生成的色素量，可以計算出樣本中低密度脂蛋白膽固醇的濃度。低密度脂蛋白膽固醇脂＋HO2

膽酯酶

膽固醇＋游離脂肪酸膽固醇+O2

膽醇化

膽甾-4-烯-3-酮＋HO2

2HO+4-氨基安替比林+苯胺類色原物質(zhì)22

過氧化物酶

醌亞胺色素+水6標本求6.1樣本為血清,不得使用溶血、脂血或被污染的樣本。6.2樣本在2℃8℃可穩(wěn)定7天，-20℃可穩(wěn)定1個月。避免樣本反復凍融。7試劑配套品7.1試劑來源長春迪瑞醫(yī)療科技股份有限公司低密度脂蛋白膽固醇試劑盒（直接測試法）7.2試劑組成試劑盒組成試劑1(R1)試劑2(R2)

主要組成成份4－氨基安替比林膽固醇氧化酶膽固醇酯酶過氧化物酶非離子表面活性劑緩液高分子化合物DSBmT非離子表面活性劑緩液

濃度/含量1mmol/L500U/L800U/L800U/L0.5%100mmol/L適量1.2%0.5%100mmol/L7.3試劑的穩(wěn)定性與貯存：7.3.1試劑在2℃8℃條件下，干燥、避光、密封貯存，有效期為個月。

7.3.2試劑開封后在2℃~8℃條件下可穩(wěn)定30天7.3.3請勿于0℃以下保存試劑。8實驗器及性能指8.1實驗儀器迪瑞CS系列全自動生化分析儀8.2試劑性能指標8.2.1試劑空白吸光度：A＜0.05。8.2.2分析靈敏度：測試1.00mmol/L的樣本時，吸光度變化△＞0.03。8.2.3線性范圍劑線性在[0.20區(qū)間內(nèi)性回歸系數(shù)r≥0.9950[0.202.00]mmol/L范圍內(nèi)，線性絕對偏差應不超過±0.30mmol/L；2.00，11.60]mmol/L圍內(nèi)，線性相對偏差不超過±10％。8.2.4準確度：相對偏差應在±10%范圍內(nèi)。8.2.5測量精密度：重復性：CV≤3.0%。批間差：R≤7.0%。9校準序9.1校準品來源低密度脂蛋白膽固醇校準品9.2校準品的存貯使用注意事項：參見低密度脂蛋白膽固醇校準品使用說明書。9.3校準程序建議使用迪瑞公司配套校準品，以純化水和校準品進行校準測定，測定后儀器自動擬合成校準曲線。當試劑批號更換或質(zhì)控失控時，需要重新校準。10質(zhì)量控制10.1質(zhì)控品來源低密度脂蛋膽固醇白質(zhì)控品10.2質(zhì)控品存貯及使用注意事項參見低密度脂蛋白膽固醇質(zhì)控品使用說明書。10.3質(zhì)量控制建議使用迪瑞公司配套質(zhì)控品，進行質(zhì)量控制。實驗室應自行建立質(zhì)控區(qū)間和限值。若質(zhì)控值失控，每個實驗室應采取糾正措施。11作程序11.1試劑配制試劑1和試劑2均為液體試劑，可直接使用。11.2項目參數(shù)：

測定溫度主波長副波長比色杯光徑測定模式反應方向

37℃540nm～570nm660nm1.0cm2點終點法正反應

R1用R2用樣本用量反應時間吸光度范圍

300L100L4μL300s0A2A11.3樣本測試步驟：樣本用量:4L試劑R1用:300μL

記錄吸光度A1加試劑R2:100μL

溫度:37℃主波長:546nm副波長:660nm記錄吸光度A2300s300s11.4計算方法：-C/

樣本管△值校準管△值

-C校準mmol/L）單位換算：mmol/L×38.7=mg/dL11.5注意事項11.5.1本品僅用于體外診斷。11.5.2避免測試中途添加試劑。11.5.3試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器的要求按比例改變。12果判斷12.1樣本LDL-C濃度超過檢測范圍時，請用生理鹽水稀釋后重測，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。12.2血清中低密度脂蛋白膽固醇濃度的檢測只是臨床醫(yī)師對患者進行診斷的指標之一床醫(yī)師還要根據(jù)患者的體癥、病史以及其它的診斷項目、診斷手段進行綜合判斷。13參考區(qū)間膽固醇值合適范圍與高膽固醇血癥判斷標準血清總膽固醇膽固醇值合適范圍5.17mmol/L以下

低密度脂蛋白膽固醇3.10mmol/L以下臨界范圍高膽固醇血癥

5.17～5.66mmol/L5.68mmol/L以上

3.10～3.59mmol/L3.62mmol/L以上引用的參考值范圍代表本法的期望值僅供參考建議各實驗室驗證這一參考范圍或建立自己的參考值范圍。14臨床意義低密度脂蛋白膽固醇上升是動脈粥樣硬化性疾病，特別是冠心病的危險因素。檢測動脈粥樣硬化性疾病病因之一的高脂血癥診斷以往廣泛采用總膽固醇測定與總膽固醇值相比，

低密度脂蛋白膽固醇值與虛血性心疾患具有更高的相關(guān)性。15檢操作序按儀器使用說明書進行復查操作。16方法局限16.1檢驗結(jié)果的準確性依賴于儀器的校正和測定溫度、時間的控制。16.2當樣本中黃疸＞68.8umol/L、血紅蛋白＞10g/L甘油三脂＞37mmol/L、抗壞血酸＞1.7mmol/L可能會影響檢測結(jié)果。17注意事項樣本、廢液等有潛在生物傳染性，操作者應遵守實驗室安全操作規(guī)定，并按當?shù)蒯t(yī)療廢棄物、感染性廢棄物、產(chǎn)業(yè)廢棄物等規(guī)定處理廢液。18個人防護18.1請把標本當作可能感染、HBV、HCV等的危險物質(zhì)處置。為了避免或減少相關(guān)傳染風險，請使用一次性手套。18.2若本試劑誤入眼內(nèi)或口中接觸到皮膚時迅速用水沖洗要時請接受醫(yī)生治療。19當檢測系不能工時，所采取補救措器時。20參考文獻20.1YoungDS.EffectsofDrugsonClinicalLaboratoryTests.AACCPress,1990.20.2郭占軍等低密度脂蛋白膽固醇均相測定方法研究進展國外醫(yī)學臨床生物化學與檢驗學分冊，21/6，p289～290200020.3劉兆銀等血清LDL-C動化分析方法的研究進展國外醫(yī)學臨床生物化學與檢驗學分冊，20/2，5