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食品安全快速檢測(cè)技術(shù)--農(nóng)藥殘留檢測(cè)專題2/7/20232/7/2023酶抑制率法2/7/2023注意事項(xiàng)2/7/2023項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)實(shí)驗(yàn)二、蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)GB/T5009.199-2003蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)習(xí)快速卡法測(cè)定有機(jī)磷農(nóng)殘快速檢驗(yàn)法及熟悉檢驗(yàn)結(jié)果評(píng)定2/7/2023項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)2/7/2023項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)2/7/2023快速檢測(cè)試紙法2/7/2023項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)四、速測(cè)卡測(cè)定農(nóng)藥殘留的主要步驟1)整體測(cè)定法剪成1cm碎片,取5g放入帶蓋瓶,加入10ml緩沖液,振搖50次,靜置2min。取1片速測(cè)片,用白色藥品蘸取提取液,放置10min以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng)速測(cè)卡對(duì)折,用手捏3min或用恒溫3min,使紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng),每批設(shè)定一個(gè)空白2/7/2023項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)四.速測(cè)卡測(cè)定農(nóng)藥殘留的主要步驟2)表面測(cè)定法(粗篩法)滴2-3滴緩沖液溶液在蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦取1片速測(cè)卡,將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上放置10min以上,進(jìn)行預(yù)反應(yīng)將速測(cè)卡對(duì)折,用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min,使紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)。每批測(cè)定設(shè)一個(gè)空白對(duì)照2/7/2023請(qǐng)注意2/7/20232/7/2023項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)五、速測(cè)卡測(cè)定農(nóng)藥殘留的注意事項(xiàng)1)空白對(duì)照2)次生物質(zhì)3)預(yù)反應(yīng)溫度4)反應(yīng)時(shí)間5)滴加溶液的數(shù)量6)預(yù)反應(yīng)時(shí)間一致7)觀察結(jié)果時(shí)間1min2/7/2023項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)六、檢測(cè)結(jié)果判斷

1、結(jié)果判斷結(jié)果以酶被有機(jī)磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥抑制(為陽(yáng)性)、未抑制(陰性)表示。與空白對(duì)照卡比較:白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色均為陽(yáng)性結(jié)果。白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或與空白對(duì)照卡相同為陰性結(jié)果。對(duì)陽(yáng)性結(jié)果的樣品可用其他方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。

2、樣品檢測(cè)結(jié)果記錄并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。2/7/2023說(shuō)明2/7/2023知識(shí)擴(kuò)展12/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/2023項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)第二法:酶抑制率分光光度法2/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/20232/7/2023項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)開(kāi)機(jī):插上電源,打開(kāi)儀器背面綠色電源開(kāi)關(guān),儀器顯示開(kāi)機(jī)畫面,按畫面提示操作,按下回車鍵,儀器開(kāi)始自檢,時(shí)間約1min自檢完畢后,儀器進(jìn)入待機(jī)檢測(cè)狀態(tài)2/7/2023項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)2、試劑配制2.1、緩沖液:取1包緩沖劑加入500mL蒸餾水或純凈水中,攪拌溶解制成磷酸緩沖液(pH7.6),常溫保存。2.2、顯色劑:取1瓶顯色劑加25mL緩沖液溶解,使用時(shí)取100μL,4℃冰箱保存。2.3、底物:取1瓶底物加12.5mL蒸餾水或純凈水溶解,使用時(shí)取100μL,4℃冰箱保存;或取1瓶底物加2.5mL蒸餾水或純凈水溶解,使用時(shí)取20μL,4℃冰箱保存。2.4、膽堿酯酶:酶制劑無(wú)需配制,可直接取用,使用時(shí)取100μL,4℃冰箱保存。2/7/2023項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)3、樣品提取取2g果蔬樣品(塊莖類取4g),葉菜剪成25px左右見(jiàn)方的碎片,塊莖類取橫截面樣品或取其表皮,放入三角瓶中,加入10mL緩沖液,振蕩1~2min,倒出提取液,靜置2min,待測(cè)2/7/2023項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)4、測(cè)試1)對(duì)照測(cè)試:2.5mL緩沖液——加入100μL酶液——顯色劑——混勻,靜置10min——加入100μL(或20μL)底物——搖勻,立即倒入比色杯中。及時(shí)放入儀器的測(cè)量室第1通道,合上蓋。按〈B〉鍵,顯示屏下方延遲10s后,測(cè)量時(shí)間開(kāi)始倒計(jì)時(shí),計(jì)時(shí)完畢,顯示屏顯示吸光度增量(ΔC)及抑制率。在進(jìn)行對(duì)照測(cè)試時(shí),2~8通道可同時(shí)進(jìn)行樣品測(cè)試。2/7/2023項(xiàng)目二農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)4、測(cè)試2)樣品測(cè)試:2.5mL待測(cè)液——加入100μL酶液和顯色劑,混勻——靜置10min——加入100μL(或20μL)底物,搖勻并立即倒入比色杯中。及時(shí)放入儀器的測(cè)量室通道,合上蓋。按〈M〉鍵,顯示屏下方延遲

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