環(huán)境中微生物檢測方法

環(huán)境中微生物的檢測們的蹤跡。成為傳染疾病的媒介。通過空氣和水中微生物的檢驗，對環(huán)境質(zhì)量進展掌握。土壤中的微生物土壤是微生物生活的良好環(huán)境在自然界，土壤是微生物生活的良好環(huán)境。由于土壤具有微生物生長生殖所必需的各種環(huán)境條件。養(yǎng)分源、氮源和能源；土壤中豐富的礦質(zhì)元素可以滿足微生物對礦質(zhì)養(yǎng)分的要求。水分和滲透壓物攝取養(yǎng)分。空氣7%-8%。通氣良好的土壤，氧的含量高些，有利于好氧微生物的生長。pH適應(yīng)的微生物生長生殖。溫度10～25℃，適宜多種微生物生長的需要。生物種類最多，數(shù)量最大，是人類利用微生物資源的主要來源。土壤微生物的種類、數(shù)量及其分布如有機物含量豐富的黑土、草甸土等肥沃土壤，微生物含量較高，每克土可含幾億至幾十億個微生物；而紅壤、棕鈣土、鹽土等貧瘠土壤，微生物的含量很少，每克土也含幾百萬至幾千萬個微生物。微生物種類和數(shù)量之，藻類和原生動物等的數(shù)量較少。細菌異養(yǎng)型種類樂觀參與土壤有機質(zhì)的分解和腐殖質(zhì)的合成。自養(yǎng)型種類轉(zhuǎn)化著礦質(zhì)養(yǎng)分的存在狀態(tài)。胞菌、黃桿菌、鉀細菌和鐵細菌等。放線菌含量為每克土幾千萬至幾億個孢子。在偏堿性土壤中數(shù)量較多，都是異養(yǎng)80~100%時，放線菌很少消滅。土壤中常見種類有諾卡氏菌屬、鏈霉菌屬和小單孢菌屬。真菌霉等。藻類1%，但分布卻很普遍。一般生長在土壤表層，多為單細胞綠藻和硅藻。藻類為光合型微生物，受陽光及水分影響較大，土壤下層因無陽光，數(shù)量少。在溫和季節(jié)中，積為土壤積存有機質(zhì)。原生動物鞭毛蟲、肉足蟲等，大多數(shù)種類是異養(yǎng)型的，以吞食各種有機物的碎片、藻類、菌類等為生。性質(zhì)，是構(gòu)成土壤肥力的重要因素。微生物在土壤中的分布狀況〔1〕水平分布微生物；在動植物殘體較多的土壤中則有較多的氨化細菌和硝化細菌。〔2〕垂直分布土壤中微生物的垂直分布與紫外線的照耀、養(yǎng)分、水、溫度、通氣等環(huán)境因子有關(guān)。5～20cm加深，菌數(shù)削減，這是由于缺乏養(yǎng)分和氧氣造成的。土壤微生物的分別和計數(shù)多承受稀釋平皿法，操作步驟如下：取樣10g壤稀釋液，另一份土樣烘干至恒重〔105℃，8h〕，置于枯燥器中冷卻后稱重。制備土壤稀釋液90mL10g10min，制成土壤懸浮液，將土壤懸浮液作1010－～10110－3～1010－210－4為適宜濃度?；炀ń臃N釋度須做平行。如只進展分別而不計數(shù)，對土壤懸浮液可不作系列稀釋，承受劃線分別法或涂布分別法即可。培育〔細菌在371d～2d、放線菌285d～7d〕。計數(shù)30～30010～100進展計數(shù)。如需獵取純種，可取單個菌落進展試管斜面轉(zhuǎn)接，培育后，選用適宜方法保存。計算每克干土含菌數(shù)每克干土含菌數(shù)＝每克濕土含菌數(shù)×濕土重/干土重物進入土壤后，先被土壤吸附，緊接著又被微生物及其他生物降解，使土壤漸漸恢復(fù)到原來的狀態(tài)。水體中的微生物中的微生物，其中包括某些病原微生物。水中微生物的種類、分布差異很大。微生物的種類清水型水生微生物在干凈的水域中，因養(yǎng)分物較少，微生物數(shù)量也較少。在每毫升水中一般只含幾十個到幾百個細菌，〔如絲狀綠藻、硅藻等〕、真菌〔水霉菌屬和綿霉菌屬〕、原生動物〔如鐘蟲及其他固著型纖毛蟲等〕和后生動物〔如枝角類、橈足類等〕。腐敗型水生微生物在受到有機物嚴峻污染的水域中，數(shù)量較多的是細菌，每毫升水中可達幾千萬個甚至幾億個，以異養(yǎng)屋滴蟲、小口鐘蟲等。微生物的分布深等。中的細菌多于水中的細菌。微生物在較深較大的靜水水域中的垂直分布規(guī)律是：在上層水體中〔水面下0~10m深處〕，氧含量較高，主要有好氧細菌〔如假單脆菌、柄桿菌、球衣細菌等〕、真菌和藻類；中層水體〔水深20~30m〕主要有光合細菌〔如紅硫細菌和綠硫細菌〕以及厭氧細菌；底層水體中〔30m〕，主要有脫硫弧菌5~10m地下水由于經(jīng)過土壤過濾、有機物缺乏，故含菌量遠遠少于地面水，在深層地下水中甚至沒有細菌。水的細菌學(xué)檢測細菌總數(shù)〔CFU〕的測定〔1mL〕37℃培育24hmL37℃24h；明水被有機物或糞便污染越重，被病原菌污染的可能性也越大?？稍谏铒嬘盟M展衛(wèi)生學(xué)評價時供給依據(jù)。我國生活飲用水標(biāo)準〔GB5749-85〕100/ml。10～100/mL，為極清潔的水；100～1000/mL，為清潔的水；1000～/mL，為不清潔的水；大于100000/mL，為極不清潔的水。大腸菌群的測定病原菌存在的概率。芽孢桿菌。主要包括大腸埃希氏菌、產(chǎn)氣桿菌、枸櫞酸鹽桿菌、副大腸桿菌。大腸埃希氏菌即大腸桿菌是人和溫血動物腸道中的正常細菌，兼性好氧的革蘭氏陰性、無芽孢、兩頭37℃pH乳糖等多種碳水化合物，并產(chǎn)酸產(chǎn)氣。大腸菌群的各類細菌的生理習(xí)性都相像，只是副大腸桿菌不分解或〔品紅亞硫酸鈉培育基〕或伊紅美藍培育基外表會形成具有特別現(xiàn)象的菌呈淡紅色，中心色深；副大腸桿菌的菌落則無色透亮。這些現(xiàn)象可作為鑒別的依據(jù)。和復(fù)發(fā)酵試驗三個局部。初發(fā)酵試驗發(fā)酵管內(nèi)裝有乳糖蛋白胨液體培育基，并倒置一小倒管。乳糖能起選擇作用，由于很多細菌不能發(fā)酵pH示劑。細菌產(chǎn)酸后，培育基即由原來的紫色變?yōu)辄S色，溴甲酚紫還能抑制其他細菌如有芽胞的細菌生長。水樣接種于發(fā)酵管內(nèi)，37℃下培育，24h中存在大腸菌群，為陽性結(jié)果。對于只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣的，不能說明是陰性結(jié)果，由于在菌量少的狀況下，可不產(chǎn)酸又不產(chǎn)氣的，為陰性結(jié)果。平板分別它可被培育基中的亞硫酸鈉脫色，使培育基呈淡粉紅色，大腸菌群發(fā)酵乳糖后產(chǎn)生的酸和乙醛馬上與品紅伊紅美藍瓊脂培育基則含有伊紅與美藍染料，在此亦作為指示劑，大腸菌群發(fā)酵乳糖造成酸性環(huán)境時，該兩種染料即結(jié)合成復(fù)合物，使大腸菌群產(chǎn)生與遠藤氏培育基上相像的、帶核心的、有金屬光澤的深紫色菌落。3724h，挑取典型的大腸菌群菌落，進展革蘭氏染色，鏡驗后假設(shè)呈陰性，則可認為有此類細菌存在。為了更進一步驗證，可做下一步試驗。復(fù)發(fā)酵試驗24h酸又產(chǎn)氣的，最終確定為大腸菌群陽性結(jié)果。依據(jù)發(fā)酵陽性管的數(shù)量，以確定大腸菌群數(shù)。利用數(shù)理統(tǒng)計原理，計算出每升水樣中大腸菌群的最近似數(shù)〔MPN〕。44.5℃的方法將它們區(qū)分開。凡能在44.5℃生長并發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的，說明主要來自糞便，稱之為“糞大37℃生長并發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣者，則稱之為“總大腸菌群”。的程度，并間接地說明腸道致病菌存在的可能性。很多不同用途的水都對細菌總數(shù)或大腸菌群數(shù)提出了要求。表1.1是我國用途不同的水質(zhì)標(biāo)準。1.1各種用途的水質(zhì)標(biāo)準標(biāo)準名稱及標(biāo)準編號標(biāo)準名稱及標(biāo)準編號工程標(biāo)準值生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準細菌總數(shù)(個/mL)≤100GB5749-85 總大腸菌群(個/L)≤3生活飲用水源水質(zhì)標(biāo)準 總大腸菌群(個/L)CJ3020-93 二級≤10000GB3838-2023

Ⅰ≤200 Ⅱ≤2023Ⅲ≤10000Ⅳ≤20230Ⅴ≤40000GB/T14848-93

細菌總數(shù)(個/mL)Ⅰ～Ⅲ≤100 Ⅳ≤1000Ⅴ﹥1000總大腸菌群(個/L)Ⅰ～Ⅲ≤3 Ⅳ≤100 Ⅴ﹥100景觀消遣用水水質(zhì)標(biāo)準總大腸菌群(個/L)A類≤10000GB12941-91GB5084-92漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準GB11107-89海水水質(zhì)標(biāo)準GB3097-1997

糞大腸菌群(個/L)≤10000≤5000總大腸菌群(個/L)≤500〔貝類養(yǎng)殖水質(zhì)〕≤10000總大腸菌群(個/L)≤700〔貝類養(yǎng)殖水質(zhì)〕注：GB國家強制標(biāo)準，CJ城鎮(zhèn)建設(shè)行業(yè)標(biāo)準?？諝庵械奈⑸飶姷奈⑸飫t可以存活幾天、幾周甚至數(shù)月，最終沉降到土壤、水體、建筑物、動植物體外表?？諝庵形⑸锏膩碓?、數(shù)量進入空氣。1.11.1〔個/m3空氣〕場所場所微生物場所微生物畜舍1000000~2023000700～1100宿舍20230試驗室200城市街道5000市區(qū)公園200教室2500住房180辦公室1400海洋上空1~2〔摘自王家玲.環(huán)境微生物學(xué).北京：高等教育出版社.1988〕紫外線輻射的強弱以及微生物的適應(yīng)性和對惡劣環(huán)境的抵抗力量。球菌、溶血鏈球菌、金黃色葡萄球菌、麻疹病毒、流感病毒和脊髓灰質(zhì)病毒等?？諝馕⑸锏臋z驗方法的安康，要掌