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第二章第三節(jié)一、選擇題1.下列與動物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的表述中,不正確的是()A.動物細(xì)胞培養(yǎng)需要無菌、營養(yǎng)、適宜的溫度和pH等條件B.用胰蛋白酶作用于離體的動物組織,使其分散成單個細(xì)胞C.放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)動物細(xì)胞的主要目的是為了滿足細(xì)胞對CO2的需求D.細(xì)胞株一般具有恒定的染色體組型、生化特性等解析:解答本題的關(guān)鍵是知道動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件、過程,能準(zhǔn)確識別細(xì)胞株與細(xì)胞系的異同,CO2培養(yǎng)箱中CO2的作用是維持培養(yǎng)液pH的相對穩(wěn)定。答案:C2.對某種動物的肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),下列說法正確的是()A.取單個肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),獲得細(xì)胞群的方法不屬于克隆培養(yǎng)法B.細(xì)胞培養(yǎng)過程中不需考慮細(xì)菌的污染問題C.該培養(yǎng)液也能用來培養(yǎng)乙肝病毒D.在原代培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)的細(xì)胞最終也會出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象解析:A選項(xiàng)的描述屬于細(xì)胞層次的克隆。培養(yǎng)液受細(xì)菌污染后,其中營養(yǎng)成分要發(fā)生改變,不利于細(xì)胞的培養(yǎng),B錯誤。病毒的生存離不開細(xì)胞,用培養(yǎng)液不能培養(yǎng)病毒,C錯誤。一般的細(xì)胞繁殖10代后,將停止增殖,D正確。答案:D3.如圖為克隆羊“多利”的培育過程示意圖。下列各項(xiàng)有關(guān)敘述不正確的是()eq\b\lc\\rc\}(\a\vs4\al\co1(\x(\a\al(甲羊的乳,腺細(xì)胞核)),\x(\a\al(乙羊的去,核卵細(xì)胞))))eq\o(→,\s\up7(核移植))eq\x(\a\al(重,組,細(xì),胞))eq\o(→,\s\up7(適宜),\s\do5(條件))eq\x(\a\al(早,期,胚,胎))eq\o(→,\s\up7(植入丙羊子宮),\s\do5(發(fā)育、分娩))eq\x(\a\al(克隆羊,“多利”))A.由于細(xì)胞核基因完全來自甲羊,所以克隆羊“多利”的性狀與甲羊完全一致B.克隆羊“多利”的培育過程中采用的生物技術(shù)有核移植C.乙羊的去核卵細(xì)胞為重組細(xì)胞基因表達(dá)提供了細(xì)胞內(nèi)的環(huán)境條件D.此過程說明高度分化的動物細(xì)胞核也具有全能性解析:生物的性狀是由細(xì)胞核基因和細(xì)胞質(zhì)基因共同控制的,還要受環(huán)境的影響。題中“多利”的細(xì)胞核基因來自甲羊,而細(xì)胞質(zhì)基因主要來自乙羊,所以“多利”羊的性狀應(yīng)與甲羊基本相同,同時(shí)受乙羊和環(huán)境的影響。答案:A4.某研究小組對某種動物的肝腫瘤細(xì)胞(甲)和正常肝細(xì)胞(乙)進(jìn)行培養(yǎng),下列敘述正確的是()A.制備肝細(xì)胞懸浮液時(shí)先用剪刀剪碎肝組織,再用胃蛋白酶處理B.肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的CO2刺激細(xì)胞呼吸C.為了防止培養(yǎng)過程中雜菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的干擾素D.用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)的方法,可推斷乙細(xì)胞比甲細(xì)胞增殖周期長解析:制備肝細(xì)胞懸浮液時(shí)先用剪刀剪碎肝組織,再用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。肝細(xì)胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的CO2維持培養(yǎng)液pH。為了防止培養(yǎng)過程中雜菌的污染,可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素。答案:D5.下列有關(guān)動、植物細(xì)胞工程的敘述,不正確的是()A.動物細(xì)胞融合過程中,常用的誘導(dǎo)因素有滅活的病毒、PEG等B.動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理組織塊C.植物組織培養(yǎng)過程中,需要用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁D.植物體細(xì)胞雜交過程中,需要用不同濃度的細(xì)胞分裂素和生長素培養(yǎng)雜種細(xì)胞解析:植物組織培養(yǎng)時(shí)不需要去掉細(xì)胞壁,植物體細(xì)胞雜交才需要先去掉細(xì)胞壁。答案:C6.一般來說,動物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件()①無毒的環(huán)境②無菌的環(huán)境③合成培養(yǎng)基需加血漿④溫度與動物體溫相近⑤需要O2,不需要CO2⑥CO2能調(diào)節(jié)培養(yǎng)液pHA.①②③④⑤⑥ B.①②③④C.①③④⑤⑥ D.①②③④⑥解析:一般來說,動物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件:無菌、無毒的環(huán)境,與體內(nèi)培養(yǎng)相同的營養(yǎng),適宜的溫度和pH,還要有適量的CO2。答案:D7.乙馬的卵細(xì)胞核被甲馬的體細(xì)胞核置換后,這個卵細(xì)胞經(jīng)過多次分裂發(fā)育成重組胚胎,再植入丙馬的子宮內(nèi)發(fā)育,結(jié)果產(chǎn)下一匹小馬。下列敘述正確的是()A.直接在體外對甲馬的體細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)也能培養(yǎng)出胚胎B.小馬的性狀與甲馬完全相同C.此項(xiàng)技術(shù)可用于保護(hù)瀕危物種D.該過程可以很好地證明動物細(xì)胞的全能性解析:克隆過程中細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來自一方,而細(xì)胞核中遺傳物質(zhì)來自另一方,所以小馬的性狀與甲馬不完全一致。該過程只能說明動物細(xì)胞核具有全能性而不能證明動物細(xì)胞的全能性。答案:C8.動物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí),通常要在培養(yǎng)基中補(bǔ)充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下列從該圖提供的信息獲得的結(jié)論中不正確的是()A.正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率相同B.有無血清對正常細(xì)胞與癌細(xì)胞培養(yǎng)的影響不同C.培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清有助于正常細(xì)胞的培養(yǎng)D.培養(yǎng)基中是否補(bǔ)充血清對癌細(xì)胞的培養(yǎng)影響不大解析:從圖中可以看出,隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長,癌細(xì)胞的數(shù)量比正常細(xì)胞顯著增多,因此正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的增殖速率不同。從圖中還可以看出,有無血清對正常細(xì)胞培養(yǎng)影響很大,而對癌細(xì)胞影響不大,因此在培養(yǎng)基中補(bǔ)充血清對正常細(xì)胞的培養(yǎng)有利,而對癌細(xì)胞的培養(yǎng),有無血清其結(jié)果都一樣,都是快速增殖。答案:A9.如圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程,有關(guān)敘述不正確的是()A.圖中給實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原B.利用聚乙二醇、滅活的病毒和電激等方法均可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙C.用特定的選擇培養(yǎng)基對乙進(jìn)行篩選,融合細(xì)胞均能生長,未融合細(xì)胞均不能生長D.對丙需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,經(jīng)多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁解析:本題考查單克隆抗體的制備,意在考查考生的識圖、析圖能力。圖中給實(shí)驗(yàn)小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原,A正確;常用于誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的物質(zhì)或方法有滅活的病毒、聚乙二醇和電激等,B正確;用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞會死亡,只有融合的雜種細(xì)胞才能生長,C錯誤。答案:C10.某實(shí)驗(yàn)室做了如圖所示的實(shí)驗(yàn)研究,下列與該實(shí)驗(yàn)相關(guān)的敘述正確的是()A.過程①導(dǎo)入的誘導(dǎo)基因使成纖維母細(xì)胞發(fā)生基因突變B.過程②是干細(xì)胞中的所有基因全部表達(dá)的過程C.丙細(xì)胞既能持續(xù)分裂,又能分泌單一的抗體D.過程③④所用的培養(yǎng)基中都含有聚乙二醇解析:過程①是將高度分化的成纖維母細(xì)胞誘導(dǎo)形成干細(xì)胞,屬于基因重組;過程②的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),屬于細(xì)胞分化;丙細(xì)胞是由B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后形成的,它同時(shí)具備了B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能無限增殖,又能分泌特異性抗體;過程③是動物細(xì)胞融合,可使用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑,過程④是動物細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體,不需要使用聚乙二醇。答案:C11.如下圖是單克隆抗體制備過程示意圖,其中1過程注射的物質(zhì)和A細(xì)胞的名稱為()A.抗體、T淋巴細(xì)胞 B.抗原、T淋巴細(xì)胞C.抗體、B淋巴細(xì)胞 D.抗原、效應(yīng)B淋巴細(xì)胞解析:單克隆抗體制備時(shí),小鼠必須先要注射抗原,獲得產(chǎn)生特異性抗體的效應(yīng)B細(xì)胞,圖中1代表的是抗原,A代表的是B淋巴細(xì)胞,B代表的是骨髓瘤細(xì)胞,C是雜交瘤細(xì)胞。答案:D12.有人用間接免疫熒光測定細(xì)胞表面抗原的分布;以不同熒光染料標(biāo)記抗體,被標(biāo)記的抗體分別與小鼠細(xì)胞和人細(xì)胞膜的抗原結(jié)合分別產(chǎn)生綠色和紅色熒光,然后做下圖所示的實(shí)驗(yàn),對有關(guān)現(xiàn)象的解釋錯誤的是()A.抗體結(jié)合熒光物的部位不同于與抗原結(jié)合的部位,因而能介導(dǎo)熒光物標(biāo)記膜抗原B.細(xì)胞膜具有流動性,因而能用適當(dāng)誘導(dǎo)方法使兩種細(xì)胞彼此融合C.膜分子在膜上擴(kuò)散移動,因而才會發(fā)生融合后膜抗原的分布變化D.人和小鼠細(xì)胞具有相同的抗原,因而能借免疫系統(tǒng)制備標(biāo)記抗體解析:人和小鼠細(xì)胞表面的抗原結(jié)構(gòu)是不同的;兩種生物的細(xì)胞能融合,其理論基礎(chǔ)為細(xì)胞膜的流動性;抗體與熒光物的結(jié)合部位和抗體與抗原的結(jié)合部位不同,因此抗體能同時(shí)與熒光物及抗原結(jié)合;抗原是細(xì)胞膜上的一種成分,兩種細(xì)胞融合后,由于膜分子(抗原)的擴(kuò)散移動,因而使得兩種細(xì)胞上的抗原(帶熒光標(biāo)記)能均勻分布。答案:D二、非選擇題13.如圖所示為動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖,請據(jù)此圖回答下列問題。(1)容器A中放置的是動物器官或組織,它一般取自_____________。(2)容器A中的動物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是________,然后用______酶處理,這是為了使細(xì)胞分散開來。這樣做的目的是________。(3)培育首先在B瓶中進(jìn)行,瓶中的培養(yǎng)基成分有____________等。在此瓶中培養(yǎng)一段時(shí)間后,有許多細(xì)胞衰老死亡,這時(shí)培養(yǎng)到__________代,到此時(shí)的培養(yǎng)稱為___________。(4)為了把B瓶中的細(xì)胞分裝到C瓶中,用____________處理,然后配置成____________,再分裝。(5)在C瓶中正常培養(yǎng)了一段時(shí)間后,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全部死亡,原因是_________________。解析:(1)培養(yǎng)的動物細(xì)胞一般取自動物胚胎或幼齡動物的器官或組織的原因是這部分細(xì)胞的分化程度低,增殖能力強(qiáng),更易于培養(yǎng)。(2)在進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)應(yīng)盡量分散成單個細(xì)胞,便于與培養(yǎng)液充分接觸進(jìn)行物質(zhì)交換,使其分散需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。(3)動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中盡量使培養(yǎng)基成分與體內(nèi)基本相同,所以需要添加糖、氨基酸、無機(jī)鹽、動物血清、促生長因子和微量元素等。培養(yǎng)的過程分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩大階段,當(dāng)培養(yǎng)到第10代左右,出現(xiàn)許多細(xì)胞衰老死亡的現(xiàn)象,這時(shí)的培養(yǎng)為原代培養(yǎng)。(4)到第10代左右需要用胰蛋白酶處理,使細(xì)胞分散,從玻璃瓶壁上脫離下來,配制成細(xì)胞懸浮液繼續(xù)培養(yǎng)。(5)在C瓶中的培養(yǎng)屬于傳代培養(yǎng),在傳代培養(yǎng)過程中到第10~50代細(xì)胞死亡,有些細(xì)胞可能發(fā)生遺傳物質(zhì)的改變能繼續(xù)增殖即發(fā)生癌變。如果無此現(xiàn)象則說明細(xì)胞遺傳物質(zhì)沒有改變,無癌變的特點(diǎn)。答案:(1)動物胚胎或幼齡動物的器官或組織(2)剪碎胰蛋白使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸(3)糖、氨基酸、無機(jī)鹽、動物血清、促生長因子和微量元素10原代培養(yǎng)(4)胰蛋白酶細(xì)胞懸浮液(5)細(xì)胞沒有發(fā)生癌變14.下圖所示用兩棲動物的未受精卵所做的實(shí)驗(yàn)圖解,據(jù)圖回答下列問題:(1)蝌蚪腸上皮細(xì)胞核中含有青蛙發(fā)育所需的__________,重新組合的細(xì)胞相當(dāng)于青蛙的________細(xì)胞,經(jīng)過__________和__________形成組織和器官。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明____________具有全能性。(2)圖中A過程采用的技術(shù)手段稱為________技術(shù)。如果用生物技術(shù)使番茄和馬鈴薯的體細(xì)胞融合,首先要獲得__________,其方法是________,然后誘導(dǎo)______________。要將其融合形成的細(xì)胞培養(yǎng)成植株,要用______________技術(shù)。從理論上講,用融合后的細(xì)胞培育出的“番茄—馬鈴薯”植株是________(填“可育”或“不可育”)的。(3)圖中培養(yǎng)過程所用的營養(yǎng)液與植物組織培養(yǎng)基成分的主要不同是__________。(4)通過圖示過程產(chǎn)生新個體的生殖方式是__________,如果長期依賴這種繁殖方式繁衍后代,會造成什么后果?________________________________________。答案:(1)全部基因(全部遺傳物質(zhì))受精卵細(xì)胞分裂細(xì)胞分化動物細(xì)胞核(2)核移植原生質(zhì)體酶解法原生質(zhì)體融合植物組織培養(yǎng)可育(3)前者必須含有動物血清、血漿等(4)無性繁殖后代無更大變異性,環(huán)境是多變的,適應(yīng)能力降低,容易被淘汰15.如圖所示為細(xì)胞融合技術(shù)的一些過程:(1)從A、B細(xì)胞到C細(xì)胞的過程中,必須用________處理。(2)若A、B細(xì)胞為植物細(xì)胞,那么這樣的細(xì)胞已經(jīng)用酶降解脫掉了________,這種酶可能是________________酶,由此生成的A和B細(xì)胞稱為________________。(3)若A細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞,B細(xì)胞為B淋巴細(xì)胞,那么D細(xì)胞稱為________細(xì)胞,由D細(xì)胞連續(xù)分裂產(chǎn)生大量細(xì)胞的過程,稱為________過程。這種細(xì)胞既能無限繁殖,又能產(chǎn)生____________________________。(4)若A細(xì)胞為人細(xì)胞,B細(xì)胞為鼠細(xì)胞,并分別用紅、綠熒光染料標(biāo)記細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì),在形成C細(xì)胞時(shí),細(xì)胞一半發(fā)紅色熒光,一半發(fā)綠色熒光。到D細(xì)胞階段,兩種顏色的熒光均勻分布,請解釋原因。________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析:此題是對植物體細(xì)胞雜交、動物細(xì)胞融合以及細(xì)胞膜的特性比較全面的考查。植物細(xì)胞外有一層細(xì)胞壁,阻礙了植物體細(xì)胞的雜交,因此,植物體細(xì)胞雜交的第一步是去掉細(xì)胞壁,分離出有活力的原生質(zhì)體。要去掉細(xì)胞壁就要利用酶的專一性這一特點(diǎn),因?yàn)榧?xì)胞壁成分為纖維素和果膠,所以要用纖維素酶、果膠酶分解植物細(xì)胞的細(xì)胞壁。第二步就是讓不同植物體細(xì)胞的原生質(zhì)體融合,融合必須通過一定的技術(shù)手段進(jìn)行人工誘導(dǎo)。單克隆抗體制備過程需得到化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。科學(xué)家發(fā)現(xiàn),在動物發(fā)生免疫過程中,每一個B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體,要想獲得大量的單一抗體,必須用單個B淋巴細(xì)胞進(jìn)行克隆,形成細(xì)胞群。但在體外培養(yǎng)條件下,一個B淋巴細(xì)胞不可能無限增殖,這就需B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞在滅活的仙臺病毒或聚乙二醇的誘導(dǎo)下融合,再篩選出雜交瘤細(xì)胞。由于雜交瘤細(xì)胞繼承了雙親細(xì)胞的遺傳物質(zhì),既能分泌特異性抗體,又能大量繁殖。細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是具有一定的流動性,即構(gòu)成細(xì)胞膜的磷脂、蛋白質(zhì)等是可以運(yùn)動的。答案:(1)誘導(dǎo)劑(2)細(xì)胞壁纖維素酶和果膠原生質(zhì)體(3)雜交瘤克隆特異性抗體(4)細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)是可以移動的16.人絨毛膜促性腺激素(HCG)是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白,制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。下圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖,請分析回答問題:(1)制備單克隆抗體過程中要用到____________和____________技術(shù)。(2)制備單克隆抗體過程中,給小鼠注射的HCG相當(dāng)于________,使
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