NY/T 565-2002梅迪-維斯納病瓊脂凝膠免疫擴散試驗方法

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中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準

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梅迪┐維斯納病瓊脂凝膠免疫擴散

試驗方法

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┐┐發(fā)布┐┐實施

中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布

犖犢／犜５６５—２００２

前言

梅迪維斯納（ＭａｅｄｉＶｉｓｎａ）病是羊的慢性致死性傳染病，世界動物衛(wèi)生組織［ＷｏｒｌｄＯｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ

ｆｏｒＡｎｉｍａｌＨｅａｌｔｈ（英），ＯｆｆｉｃｅＩｎｔｅｎｔｉｏｎａｌｄｅｓＥｐｉｚｏｏｔｉｃ（法），ＯＩＥ］將之列為Ｂ類、我國將其列為二類

動物疫病。

梅迪維斯納?。ǎ郑椋螅睿幔停幔澹洌椋┯址Q綿羊進行性肺炎、進行性間質(zhì)性肺炎等，是在臨床和病理學上明

顯不同的兩種慢性進行性傳染病。這兩種病的潛伏期均長達數(shù)月至數(shù)年，病程長，發(fā)展緩慢，均以死亡

而告終。梅迪病以慢性進行性間質(zhì)性肺炎為特征，病羊消瘦，呼吸困難，出現(xiàn)干咳，最后死亡，羊群病死

率達２０％～３０％。維斯納病以慢性脫髓鞘的亞急性腦炎為特征，病羊口唇震顫，頭部姿勢異常，后肢麻

痹，隨后發(fā)展為截癱病，全身麻痹，羊群病死率為６％～１０％。盡管梅迪病和維斯納病在臨床癥狀和病

理變化上有很大差別，但病毒學、血清學、分子生物學和動物試驗都證明，這兩種病的病原是同一種病

毒，即梅迪維斯納病毒。１９２３年在加拿大蒙大拿綿羊中首先發(fā)現(xiàn)梅迪病，１９３３年在冰島綿羊中大流

行，其后發(fā)現(xiàn)維斯納病。目前此病主要發(fā)生或曾經(jīng)發(fā)生于冰島、德國、法國、荷蘭、美國、南非、肯尼亞、印

度、以色列、秘魯?shù)葒偷貐^(qū)。

我國６０年代也曾發(fā)現(xiàn)可疑病例，其臨床癥狀和剖檢變化與梅迪病相似。１９８４年從澳大利亞和新

西蘭引進的邊區(qū)萊斯特綿羊及其后代檢出了抗體，并于１９８５年分離出病毒。該病既無疫苗可供預防，

又無有效治療方法，羊群一旦感染本病，生產(chǎn)性能下降，最終死亡，給養(yǎng)羊業(yè)造成巨大損失。

本標準是根據(jù)ＯＩＥ《診斷試驗和生物試劑標準手冊》（２０００年版）（ＭａｎｕａｌｏｆＳｔａｎｄａｒｄｓｆｏｒＤｉａｇ

ｎｏｓｔｉｃＴｅｓｔｓａｎｄＶａｃｃｉｎｅｓ，２０００）第２．４．４／５章所規(guī)定的“瓊脂免疫擴散試驗（國際貿(mào)易指定試驗）”和本

國的多年實驗研究及實踐制定的，但進行了以下修改：試驗的孔徑和孔距稍有不同，不影響試驗結(jié)果且

更易于操作和觀察。

本標準的附錄Ａ為規(guī)范性附錄。

本標準由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)局提出。

本標準由全國動物檢疫標準化技術委員會歸口。

本標準起草單位：中國農(nóng)業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所。

本標準主要起草人：榮駿弓、魏仁山。

Ⅰ

書

犖犢／犜５６５—２００２

梅迪維斯納病瓊脂凝膠免疫擴散

試驗方法

１范圍

本標準規(guī)定了梅迪維斯納病瓊脂凝膠免疫擴散試驗的技術要求。

本標準適用于梅迪維斯納病感染的檢測、診斷和流行病學調(diào)查。

２瓊脂免疫凝膠擴散試驗

２．１材料準備

２．１．１瓊脂板，制備方法見附錄Ａ（規(guī)范性附錄）。

２．１．２抗原，標準陽性血清、陰性血清。

２．２操作方法

２．２．１瓊脂平皿，制備、打孔見附錄Ａ。

２．２．２吸取抗原滴加中心孔，加滿為止。

２．２．３吸取標準陽性血清分別滴加外周２、４、６孔，加滿為止。每一試驗應包括一弱陽性對照。

２．２．４吸取被檢血清分別滴加外周１、３、５孔，加滿為止。

２．３判定

２．３．１抗原、標準陽性血清和被檢血清滴加完畢后，將平皿倒置，放濕盒內(nèi)置３７℃下孵育，并于２４ｈ及

４８ｈ觀察是否有沉淀線出現(xiàn)。

２．３．２當標準陽性血清與抗原孔間有明顯沉淀線，而被檢血清與抗原孔間也有明顯沉淀線，并與標準

陽性血清的沉淀線相融合，或標準陽性血清與抗原孔的沉淀線末端明顯在毗鄰的被檢血清孔處向中央

孔方向偏彎時，該被檢血清為陽性（＋）。

當標準陽性血清與抗原孔間有明顯沉淀線，而被檢血清與抗原孔間無沉淀線，或標準陽性血清與