科研隨想基金申報(bào)科研思路及相關(guān)軟件

科研隨想

-基金申報(bào)

-科研思路及相關(guān)軟件陳中山廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院全軍眼科中心全軍眼科中心廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院教育經(jīng)歷2004.9-2008.6第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院眼科博士2001.9-2004.6第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院眼科碩士1994.9-1999.6第三軍醫(yī)大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)系學(xué)士研究工作經(jīng)歷2010.7-至今廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院全軍眼科中心，主治醫(yī)師2009.3-2010.6第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院眼科，講師，主治醫(yī)師2005.7-2009.2第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院全軍眼科中心，講師，主治醫(yī)師2001.9-2005.6第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院全軍眼科中心，醫(yī)師個(gè)人簡(jiǎn)介學(xué)術(shù)任職國(guó)際視覺和眼科研究協(xié)會(huì)(ARVO)會(huì)員國(guó)際臨床視覺電生理協(xié)會(huì)(ISCEV)成員中華醫(yī)學(xué)會(huì)眼科學(xué)會(huì)成員中華眼科醫(yī)師協(xié)會(huì)會(huì)員中華醫(yī)學(xué)會(huì)激光學(xué)會(huì)成員，全軍激光醫(yī)學(xué)委員會(huì)學(xué)術(shù)秘書湖北省激光醫(yī)學(xué)委員兼秘書前中華眼科學(xué)會(huì)視覺生理學(xué)組學(xué)術(shù)秘書期刊編委RetinaIOVSJNeurosciResNeurosciLettOphthalmologicaIJO中華眼底病雜志等參與項(xiàng)目評(píng)審國(guó)家自然科學(xué)基金（包括面上項(xiàng)目、杰出青年基金）重慶市自然科學(xué)基金重慶市科技攻關(guān)項(xiàng)目湖北省自然科學(xué)基金全軍“十二五”項(xiàng)目第1負(fù)責(zé)人序號(hào)課題名稱課題類型經(jīng)費(fèi)1胚胎干細(xì)胞治療致盲性眼病的基礎(chǔ)與臨床轉(zhuǎn)化研究2013年國(guó)家973計(jì)劃分項(xiàng)302視網(wǎng)膜變性中含melanopsin神經(jīng)節(jié)細(xì)胞周圍神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的重構(gòu)及感光基因?qū)雽?duì)視網(wǎng)膜功能重建的研究2012年湖北省衛(wèi)生廳青年科技人才項(xiàng)目43視網(wǎng)膜色素變性疾病中感光神經(jīng)節(jié)細(xì)胞耐受損傷的機(jī)制研究2009年國(guó)家自然科學(xué)基金234RCS大鼠視網(wǎng)膜變性過程中視網(wǎng)膜神經(jīng)層重構(gòu)機(jī)制的研究2007年國(guó)家自然科學(xué)基金30參與申請(qǐng)和完成的基金第2負(fù)責(zé)人序號(hào)課題名稱課題類型經(jīng)費(fèi)1微脈低能量激光對(duì)離體和在體視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的光生物調(diào)制效應(yīng)2013年國(guó)家自然科學(xué)基金822微電極陣列與視覺神經(jīng)系統(tǒng)相互作用機(jī)制研究2012年國(guó)家973計(jì)劃子課題263微脈低能量激光對(duì)離體和在體視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的光生物調(diào)制效應(yīng)2012年湖北省衛(wèi)生廳科研項(xiàng)目自籌4神經(jīng)致盲性眼病的修復(fù)與功能重建研究2011年湖北省研究與開發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目自籌5弱視遠(yuǎn)程診療系統(tǒng)的建設(shè)及產(chǎn)業(yè)化2009年重慶市科技攻關(guān)重點(diǎn)項(xiàng)目206Müller細(xì)胞對(duì)視網(wǎng)膜色素變性中內(nèi)層神經(jīng)元變性的觸發(fā)機(jī)制研究2009年重慶市自然科學(xué)基金計(jì)劃項(xiàng)目47Fubulin-5對(duì)脈絡(luò)膜新生血管的阻抑及其對(duì)AMD修復(fù)機(jī)制的研究2008年國(guó)家自然科學(xué)基金208我國(guó)重要神經(jīng)性致盲眼病的發(fā)病機(jī)制及防治研究2007年國(guó)家“973”項(xiàng)目2759基于MEMS的視皮層外結(jié)創(chuàng)新芯片關(guān)鍵技術(shù)及應(yīng)用研究2007年國(guó)家“863”課題90第3負(fù)責(zé)人序號(hào)課題名稱課題類型經(jīng)費(fèi)1RNAi抑制黃斑部新生血管形成的實(shí)驗(yàn)研究2011年湖北省自然科學(xué)基金計(jì)劃項(xiàng)目42全固態(tài)多波長(zhǎng)激光眼底病治療設(shè)備2010年國(guó)家863計(jì)劃213視網(wǎng)膜組織/干細(xì)胞移植治療視網(wǎng)膜變性眼病的實(shí)驗(yàn)研究2006年重慶自然基金重點(diǎn)項(xiàng)目204視神經(jīng)假體移植治療視網(wǎng)膜變性眼病的基礎(chǔ)與臨床研究2005年國(guó)家“973”計(jì)劃課題分題505RCS大鼠視網(wǎng)膜移植后神經(jīng)元突觸傳導(dǎo)功能的研究2002年國(guó)家自然科學(xué)基金20指導(dǎo)過的國(guó)家自然科學(xué)基金轉(zhuǎn)錄因子OCT4/SOX2-TGFβ通路在Barrett食管向食管腺癌轉(zhuǎn)化中的機(jī)制研究，2012年國(guó)家自然科學(xué)基金；Muller細(xì)胞鉀離子通道Kir.4.1在視網(wǎng)膜變性疾病中的作用及其調(diào)控機(jī)制的研究，2012年國(guó)家自然科學(xué)基金，編號(hào)：81200710，經(jīng)費(fèi)23萬(wàn)元；小膠質(zhì)細(xì)胞CX3CR1受體在慢性低灌注腦白質(zhì)損害中的作用及機(jī)制研究，2010年國(guó)家自然科學(xué)基金，編號(hào)：81070930，經(jīng)費(fèi)30萬(wàn)元；P2X7受體在少突膠質(zhì)前體細(xì)胞缺氧缺血性損傷中作用的研究，2009年國(guó)家自然科學(xué)基金，編號(hào)：30900467，經(jīng)費(fèi)19萬(wàn)元參加的臨床課題研究康柏西普眼用注射液治療糖尿病黃斑水腫的有效性和安全性試驗(yàn)—三期臨床Sailing實(shí)驗(yàn)，成都康弘生物科技有限公司；一項(xiàng)隨機(jī)、雙盲、III期研究，在因繼發(fā)于視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞（CRVO）的黃斑水腫（ME）導(dǎo)致視力損害的患者中，評(píng)估雷珠單抗玻璃體內(nèi)注射相對(duì)于假注射的有效性和安全性—三期Camellia試驗(yàn)；一項(xiàng)隨機(jī)、雙盲、III期研究，在因繼發(fā)于視網(wǎng)膜分支靜脈阻塞（BRVO）的黃斑水腫（ME）導(dǎo)致視力損害的患者中，評(píng)估雷珠單抗玻璃體內(nèi)注射相對(duì)于假注射的有效性和安全性—三期Blossom試驗(yàn)；一項(xiàng)為期12個(gè)月的隨機(jī)、雙盲、多中心、陽(yáng)性對(duì)照III期臨床研究，在因繼發(fā)于病理性近視的脈絡(luò)膜新生血管導(dǎo)致視力損害的患者中，評(píng)估雷珠單抗0.5mg的兩種個(gè)體化給藥方案對(duì)比維替泊芬PDT的有效性和安全性—三期Brilliance試驗(yàn)；一項(xiàng)24個(gè)月、隨機(jī)、雙盲、對(duì)照、多中心研究，在新生血管性年齡相關(guān)性黃斑變性的中國(guó)患者中，評(píng)價(jià)雷珠單抗0.5mg兩種給藥方案的療效和安全性—四期臨床Dragon試驗(yàn)；前瞻性、觀察性濕性（新生血管性）年齡相關(guān)性黃斑變性患者登記研究；AMD患者健康知識(shí)教育—光明項(xiàng)目；康柏西普眼用注射液（Conbercept）治療繼發(fā)于高度近視的脈絡(luò)膜新生血管病變的有效性和安全性試驗(yàn)—三期臨床Shiny試驗(yàn)；Q開關(guān)脈沖Nd:YAG激光眼科治療機(jī)JLER-Y21臨床試驗(yàn)；全固態(tài)多波長(zhǎng)眼底激光治療儀Renolas

Multiwave；玻璃體腔注射重組人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-抗體融合蛋白注射液（KH902）治療繼發(fā)于年齡相關(guān)性黃斑變性的脈絡(luò)膜新生血管病變的有效性和安全性試驗(yàn)—三期臨床Phoenix實(shí)驗(yàn)（獲得美國(guó)威斯康辛州立大學(xué)眼科中心眼科影像師認(rèn)證）；眼底激光治療儀Renolas532，上海奧通激光技術(shù)有限公司；光學(xué)相干斷層掃描儀RetiView3DOCT臨床實(shí)驗(yàn)發(fā)表的的論文（2012-）ZChen,YSong,JYao,CWeng,ZQYin.AlterationsofSodiumandPotassiumChannelsofRGCsinRCSRatwiththeDevelopmentofRetinalDegeneration.JMolNeurosci,2013:Aug10.劉會(huì)娟,陳中山,丁琴,宋艷萍.362例息肉樣脈絡(luò)膜血管病變患者的臨床特征分析。中華眼底病雜志.2013;29(4):361-364.葉湘湘,陳中山,丁琴,宋艷萍.玻璃體腔注射雷珠單抗與光動(dòng)力療法聯(lián)合玻璃體腔注射雷珠單抗治療特發(fā)性脈絡(luò)膜新生血管的療效比較.中華眼底病雜志.2013;29(4):313-317.葉湘湘,陳中山,丁琴,宋艷萍.VEGF基因RNA干擾質(zhì)粒的構(gòu)建與鑒定.華南國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志.2013;27(5):299-304.葉湘湘,宋艷萍,陳中山.偽狂犬病毒在視覺系統(tǒng)跨突觸神經(jīng)示蹤中的應(yīng)用.中華實(shí)驗(yàn)眼科雜志.2013;15(10).SongYP,ChenZS,MoGY,DingQ,YanM.AnopticatrophydifferentiallydiagnosedasspinocerebellarataxiasfromLeber’shereditaryopticneuropathybygenemutationanalysis.JIntMedRes,2012,40(5):2009-2013.（通訊作者）ChenZS,DingQ,SongYP,ZhuL,HuangZJ,YanM.Differentoutcomesofserpiginouschoroiditiswithorwithoutocularandsystemictreatment.IntJOphthalmol.2012,5(4):535-538.LiY,LiC,ChenZ,HeJ,TaoZ,YinZQ.AmicroRNA,mir133b,suppressesmelanopsinexpressionmediatedbyfailuredopaminergicamacrinecellsinRCSrats.CellSignal.2012;24:685-698.閆明，宋艷萍，李付亮，陳中山.視網(wǎng)膜變性大鼠神經(jīng)節(jié)細(xì)胞變化及其觸發(fā)因素探討。中華眼底病雜志.2012;28(3):272-275.（通訊作者）基金申報(bào)摘要重要意義和現(xiàn)狀創(chuàng)新技術(shù)方法研究基礎(chǔ)ChenZS,etal.ClinExpOphthalmol,2006;

ChenZS,etal.Neuroreport,2005;YinZQ,ChenZS,etal.OphthalmicRes,2005;ChenZhongS,YinZhengQ,etal.ProgBiochemBiophys.2004C.RCS60dH.Control60dD.RCS90dI.Control90dE.RCS120dJ.Control120d(Scalebar=20μm)

RCS鼠于P60d起發(fā)現(xiàn)視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層的Müller細(xì)胞突起排列紊亂，于P90d開始細(xì)胞明顯變得肥大，P120d時(shí)發(fā)現(xiàn)部分Müller細(xì)胞突起延伸至視網(wǎng)膜下腔在局部形成纖維層樣結(jié)構(gòu)。

綠色為mGluR6，紅色為Synaptophysin，藍(lán)色為DAPi復(fù)染細(xì)胞核；ONL為外核層，INL為內(nèi)核層。紅色箭頭所指為來(lái)源于多個(gè)ON-RBCs的異常突起的纏結(jié)CD為RCS大鼠，GH為局部放大bar=10μm申報(bào)基金RCS大鼠視網(wǎng)膜變性過程中視網(wǎng)膜神經(jīng)層重構(gòu)機(jī)制的研究，2007年國(guó)家自然科學(xué)基金，編號(hào)：30772371，經(jīng)費(fèi)30萬(wàn)元我國(guó)重要神經(jīng)性致盲眼病的發(fā)病機(jī)制及防治研究，2007年國(guó)家“973”項(xiàng)目，編號(hào)：2007CB512203，經(jīng)費(fèi)275萬(wàn)元2007年NSFC

RCS大鼠視網(wǎng)膜色素變性過程中神經(jīng)視網(wǎng)膜重構(gòu)機(jī)制研究視網(wǎng)膜色素變性是嚴(yán)重的致盲性眼病，至今尚無(wú)有效治療方法，原因在于感光細(xì)胞變性死亡之后神經(jīng)視網(wǎng)膜病理變化機(jī)制尚不明確。視網(wǎng)膜色素變性發(fā)生發(fā)展過程中各級(jí)神經(jīng)元功能狀態(tài)如何、各層神經(jīng)元之間的突觸聯(lián)系從結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生了怎樣的改變尚不清楚。本項(xiàng)目以RCS大鼠為對(duì)象，采用視網(wǎng)膜膜片鉗全細(xì)胞記錄結(jié)合神經(jīng)藥理學(xué)、細(xì)胞內(nèi)熒光標(biāo)記、免疫組織化學(xué)染色、激光共聚焦、電鏡和基因槍標(biāo)記等方法，研究RCS大鼠視網(wǎng)膜變性過程中神經(jīng)節(jié)細(xì)胞、雙極細(xì)胞、Muller細(xì)胞的電學(xué)特性和軸樹突形態(tài)的改變，以及視網(wǎng)膜三級(jí)神經(jīng)元之間突觸結(jié)構(gòu)、傳導(dǎo)功能、興奮性和抑制性神經(jīng)遞質(zhì)及受體介導(dǎo)的突觸后電流的變化。闡明視網(wǎng)膜色素變性過程中感光細(xì)胞輸入障礙導(dǎo)致的各級(jí)神經(jīng)元突觸結(jié)構(gòu)和功能的改變與視網(wǎng)膜神經(jīng)層發(fā)生“重構(gòu)”反應(yīng)的相互作用機(jī)制。從分子水平和神經(jīng)元信號(hào)傳導(dǎo)通路研究視網(wǎng)膜色素變性的病理機(jī)制，為探索治療視網(wǎng)膜色素變性疾病的臨床途徑奠定實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)。（400字符數(shù)）2007年國(guó)家973計(jì)劃

我國(guó)重要神經(jīng)性致盲眼病的發(fā)病機(jī)制及防治研究VPSSCNOPNRHTVLPOSPZNVPS非圖像視覺感光系統(tǒng)NVPS(引自MenakerM,Science,2003)

RCSNormalRCSNormal申報(bào)基金視網(wǎng)膜色素變性疾病中感光神經(jīng)節(jié)細(xì)胞耐受損傷的機(jī)制研究，2009年國(guó)家自然科學(xué)基金，編號(hào)：30900446，經(jīng)費(fèi)23萬(wàn)元神經(jīng)致盲性眼病的修復(fù)與功能重建研究，2011年湖北省研究與開發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目，經(jīng)費(fèi)：150萬(wàn)元（自籌），項(xiàng)目編號(hào)：2011BHC006視網(wǎng)膜變性中含melanopsin神經(jīng)節(jié)細(xì)胞周圍神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的重構(gòu)及感光基因?qū)雽?duì)視網(wǎng)膜功能重建的研究，2012年湖北省衛(wèi)生廳青年科技人才項(xiàng)目，編號(hào)：QJX2012-23，經(jīng)費(fèi)：4萬(wàn)元2013.01-2014.122009年NSFC

視網(wǎng)膜色素變性疾病中感光神經(jīng)節(jié)細(xì)胞耐受損傷的機(jī)制研究視網(wǎng)膜內(nèi)含黑視素(melanopsin)的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞能直接感光，謂感光神經(jīng)節(jié)細(xì)胞（mRGCs），在生物節(jié)律、瞳孔反射等方面具有重要的生理作用。我們前期研究發(fā)現(xiàn)視網(wǎng)膜變性疾病中繼感光細(xì)胞喪失之后內(nèi)層神經(jīng)元也發(fā)生變性死亡，而mRGCs數(shù)量上卻得以保存，變性晚期其離子通道、神經(jīng)遞質(zhì)及受體究竟發(fā)生了怎樣的改變，在mRGCs對(duì)變性損傷耐受機(jī)制中發(fā)揮了什么樣的作用，至今未見報(bào)道。本研究采用視交叉上核（SCN）熒光金逆行標(biāo)記mRGCs、視網(wǎng)膜切片膜片鉗全細(xì)胞記錄結(jié)合神經(jīng)藥理學(xué)方法、細(xì)胞內(nèi)染色和免疫組織化學(xué)染色、激光共聚焦等方法，研究RCS大鼠視網(wǎng)膜變性過程中mRGCs鈉鉀離子通道、神經(jīng)遞質(zhì)及受體分布、突觸后電流的變化，以及與RGCs變性的關(guān)系。探討視網(wǎng)膜變性疾病中RGCs繼發(fā)感光細(xì)胞變性死亡的機(jī)制，探索維持視網(wǎng)膜變性疾病中RGCs結(jié)構(gòu)和功能的方法，為視網(wǎng)膜變性疾病的治療和視功能重建奠定實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)。2013年NSFC

視網(wǎng)膜變性中mRGCs周圍神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的重構(gòu)及構(gòu)建感光神經(jīng)元修復(fù)視覺功能的研究前一課題研究提示視網(wǎng)膜變性中含感光蛋白melanopsin的神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(mRGCs)能耐受變性損傷，這些存留的mRGCs與周圍神經(jīng)細(xì)胞之間會(huì)建立怎樣的網(wǎng)絡(luò)連接，是否有功能突觸形成，對(duì)視覺功能重建有何意義尚不清楚。本項(xiàng)目擬以RCS大鼠為對(duì)象，采用激光共聚焦、計(jì)算機(jī)三維重建、視網(wǎng)膜膜片鉗等方法，研究RCS大鼠視網(wǎng)膜變性過程中mRGCs與周圍視網(wǎng)膜細(xì)胞之間的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)重構(gòu)，探討該自主重構(gòu)對(duì)視覺功能重建的意義。鑒于自主重構(gòu)對(duì)視功能修復(fù)的不足，以及不同感光蛋白的功能差異，擬構(gòu)建雙表達(dá)感光基因melanopsin和Channelrhodopsin-2的納米顆粒，靶向?qū)е罵CS大鼠雙極細(xì)胞，采用膜片鉗、視覺電生理、瞳孔光反射、動(dòng)物行為測(cè)試等分別從視網(wǎng)膜和中樞水平檢測(cè)視覺功能的重建。由此闡明視網(wǎng)膜變性過程中感光細(xì)胞輸入障礙致視網(wǎng)膜神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)發(fā)生“重構(gòu)”反應(yīng)的相互作用機(jī)制，并探索光基因?qū)胫委熞暰W(wǎng)膜變性的可能。不予資助工作條件不足內(nèi)容繁多2008年NSFC

Fibulin-5對(duì)脈絡(luò)膜新生血管的阻抑及其對(duì)AMD修復(fù)機(jī)制的研究老年黃斑病變（AMD）是50歲以上人群致盲的重要原因，脈絡(luò)膜新生血管（CNV）是其主要病理基礎(chǔ)。最新研究表明fibulin-5與AMD具有密切關(guān)聯(lián)性:fibulin-5表達(dá)減低或突變阻礙彈性纖維的組裝，并降低對(duì)VEGF的拮抗。據(jù)此推測(cè)以fibulin-5作為靶標(biāo)，進(jìn)行AMD的CNV抑制和修復(fù)機(jī)制研究具有較強(qiáng)的特異性。本項(xiàng)目在成功構(gòu)建fibulin-5表達(dá)載體基礎(chǔ)上，擬構(gòu)建Rpe65啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的fibulin-5腺病毒表達(dá)載體，體外檢測(cè)對(duì)視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞生物學(xué)性狀影響；體內(nèi)大鼠模型視網(wǎng)膜下腔注射轉(zhuǎn)染的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞，檢測(cè)抑制CNV生成效率和Bruch膜的修復(fù)能力，評(píng)估其在AMD修復(fù)中的作用。并研究其阻抑新生血管形成和修復(fù)Bruch膜的機(jī)制，探討轉(zhuǎn)染視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞移植的修復(fù)機(jī)制。本研究有助于揭示fibulin-5作用的靶位點(diǎn)，進(jìn)而為深入闡明其作用機(jī)制。2010年NSFC

小膠質(zhì)細(xì)胞CX3CR1受體在慢性低灌注腦白質(zhì)損害中的作用及機(jī)制研究我們既往表明，小膠質(zhì)細(xì)胞的激活和少突膠質(zhì)細(xì)胞的減少在慢性低灌注腦白質(zhì)損害(WMLs)中起重要作用，但目前尚不清楚小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)WMLs發(fā)生的確切分子機(jī)制。CX3CL1/CX3CR1受體系統(tǒng)-p38MAP/PKC在小膠質(zhì)細(xì)胞的增殖、激活、炎性因子的釋放、細(xì)胞遷移和吞噬中起重要作用。為此我們假設(shè)：如能調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞CX3CL1/CX3CR1-p38MAPK/PKC信號(hào)傳導(dǎo)通路、影響少突膠質(zhì)細(xì)胞的活性，則能干預(yù)WMLs的發(fā)生。為此本項(xiàng)目擬研究缺血缺氧條件下小膠質(zhì)細(xì)胞CX3CL1/C3XCR1受體表達(dá)及其功能改變；探討p38MAPK/PKC介導(dǎo)CX3CL1/CX3CR1調(diào)控小膠質(zhì)細(xì)胞激活的作用及機(jī)制；靶向沉默和激活CX3CL1/CX3CR1受體基因?qū)MLs模型鼠小膠質(zhì)細(xì)胞活性、少突膠質(zhì)細(xì)胞凋亡及髓鞘形成、整體認(rèn)知功能的影響。旨在揭示小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)WMLs的分子機(jī)制及其可能的干預(yù)方法。2011年NSFC

Müller細(xì)胞鉀離子通道(Kir4.1)在視網(wǎng)膜變性疾病中的作用機(jī)制研究視網(wǎng)膜色素變性是神經(jīng)元變性的致盲性眼病，胞外谷氨酸聚積是病變進(jìn)展的重要因素。Kir4.1通道特異分布在視網(wǎng)膜Müller細(xì)胞和CNS星形膠質(zhì)細(xì)胞，對(duì)CNS胞外谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)很重要，但對(duì)視網(wǎng)膜胞外谷氨酸的作用不清楚。我們前期工作發(fā)現(xiàn)：視網(wǎng)膜色素變性大鼠(RCS)中，Müller細(xì)胞活化，Kir4.1先增加后降低。由此本項(xiàng)目假設(shè)：視網(wǎng)膜色素變性中Müller細(xì)胞Kir4.1通道變化，改變細(xì)胞膜電位，使胞外谷氨酸不能及時(shí)轉(zhuǎn)運(yùn)，加重視網(wǎng)膜變性。本課題擬研究RCS大鼠及視網(wǎng)膜下腔注射Kir4.1-shRNA大鼠的Müller細(xì)胞活化、Kir4.1和谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)、膜電位和胞外谷氨酸濃度，及視網(wǎng)膜神經(jīng)元形態(tài)和功能；并采用Müller和光感受器細(xì)胞共培養(yǎng)，阻斷Müller細(xì)胞Kir4.1后，觀察光感受器細(xì)胞活性。從而探討Müller細(xì)胞Kir4.1通道在視網(wǎng)膜變性中作用機(jī)制，為尋找治療靶點(diǎn)提供理論依據(jù)2012年NSFC

轉(zhuǎn)錄因子OCT4/SOX2-TGFβ通路在Barrett食管向食管腺癌轉(zhuǎn)化中的機(jī)制研究Barrett食管（BE）是食管腺癌的癌前病變，最新研究顯示BE中干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子OCT4和SOX2表達(dá)明顯增強(qiáng)，而TGF-β通路中關(guān)鍵調(diào)控因子表達(dá)下降，由此推測(cè)：BE異常微環(huán)境致食管干細(xì)胞niche破壞，OCT4和SOX2激活并形成復(fù)合體，抑制TGF-β通路，使下游效應(yīng)分子表達(dá)顯著改變，從而細(xì)胞增殖失去控制，導(dǎo)致BE食管細(xì)胞惡變。本研究擬采用基因工程技術(shù)、干細(xì)胞分離鑒定和培養(yǎng)、免疫細(xì)胞化學(xué)、RT-PCR、western-blot、激光共聚焦等方法檢測(cè)OCT4、Sox2，以及TGF-β通路調(diào)控關(guān)鍵因子β2SP、Smads和下游靶基因p21以及RUNX3、c-myc的表達(dá)，通過基因工程上調(diào)和下調(diào)Oct4、Sox2的表達(dá)，探討其對(duì)BE細(xì)胞化生和增殖的調(diào)控效應(yīng)，從而為最終了解Barrett食管向食管腺癌轉(zhuǎn)化的機(jī)制以及未來(lái)可能的基因調(diào)控干擾或藥物治療提供理論線索。2013年NSFC

微脈沖閾值下光凝對(duì)離體和在體視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的光生物調(diào)制效應(yīng)研究病理狀態(tài)下視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(RPE)結(jié)構(gòu)和功能的改變引發(fā)的黃斑病變是眾多眼底病的病理學(xué)基礎(chǔ)，可嚴(yán)重?fù)p害視功能，而常規(guī)激光光凝、藥物、手術(shù)等眾多治療方法可促使眼底瘢痕形成、視力下降、藥物副作用以及損害RPE和視網(wǎng)膜屏障功能，因此主動(dòng)誘導(dǎo)RPE細(xì)胞增殖活化并分泌相應(yīng)細(xì)胞因子對(duì)于視覺功能修復(fù)具有重要意義。鑒于微脈沖低能量激光對(duì)生物組織的光調(diào)制效應(yīng)，本項(xiàng)目擬從離體培養(yǎng)RPE、正常大鼠在體RPE層和大鼠誘導(dǎo)CNV模型三個(gè)層次，利用免疫組化、RT-PCR、westernblot、高效液相色譜分析、視網(wǎng)膜電圖等技術(shù)方法，探索微脈沖閾值下光凝如何刺激RPE產(chǎn)生活性氧和轉(zhuǎn)錄因子，觸發(fā)下游生物學(xué)效應(yīng)，抑制VEGF的表達(dá)，釋放PEDF等血管生長(zhǎng)抑制因子，同時(shí)分泌神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)因子，從而改善RPE結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能，最終從分子水平揭示微脈沖低能量激光對(duì)RPE的生物調(diào)制效應(yīng)，為黃斑部病變的治療提供新思路、新方法。二、科研思路及相關(guān)軟件確定大的方向自己最感興趣的廣泛閱讀文獻(xiàn)摘要深入閱讀文獻(xiàn)全文如何閱讀科研論文閱讀過程中始終思考如下問題(Keeptheseinmind)

文章所要闡述的主要問題(majorquestion)是什么?這一問題是否重要(important)，為什么?本文所采用的方法(approaches)，以及這些方法對(duì)于回答這一問題是否適當(dāng)和足夠(adequate)?新穎的想法(novelidea)，或者創(chuàng)新性的方法(innovativeapproaches)是什么?本文所提出來(lái)的新概念(concept)是什么?提供的結(jié)果是否支持這一新的概念(newconcept)?

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Critical,appreciative論文分級(jí)WhatIsaFirst-ClassPaper?Majoradvanceinaclassicfield干細(xì)胞是如何分化成特定組織細(xì)胞的，膽固醇在人體的正常功用Newtechniquesandmethodsthatcanbewidelyused人類基因組研究中的自動(dòng)測(cè)序技術(shù),PCR,PatchclampDiscoverieswithobviouspracticalimp