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文檔簡介
葉綠素a的測定生命組作品
成員:靳麗、陽樂怡、何淑紅、左柯凡2015年5月10日葉綠素a是什么?葉綠素a是有機物,不溶于水,但能溶于丙酮、乙醇等有機溶劑。究竟是什么?葉綠素a的分子結(jié)構(gòu)由4個吡咯環(huán)通過4個甲烯基(=CH—)連接形成環(huán)狀結(jié)構(gòu),稱為卟啉(環(huán)上有側(cè)鏈)。卟啉環(huán)中央結(jié)合著1個鎂原子,并有一環(huán)戊酮(Ⅴ),在環(huán)Ⅳ上的丙酸被葉綠醇(C20H39OH,分子量893)酯化、皂化后形成鉀鹽具水溶性。二、測定原理
葉綠素a是有機物,不溶于水,但能溶于有機溶劑。先用醋酸纖維濾膜抽濾水樣,然后破碎細胞,用90%丙硐提取葉綠素a,再用分光光度計測葉綠素a的吸光度,最后利用公式計算葉綠素a的含量。一、測定意義1.是指示浮游植物生物量的一個重要指標2.是研究水體富營養(yǎng)化的一種有效方法三、測定方法和步驟
1.水樣的采集與保存
湖泊、水庫:采樣500mL;池塘:300mL
2、
濃縮水樣抽濾3、取出濾膜在冰箱內(nèi)低溫干燥6~8h→研磨器(加入少量碳酸鎂粉末及2~3mL90%的丙酮),充分研磨,離心(3000~4000轉(zhuǎn)/分)10分鐘上清液倒入容量瓶。再研磨離心,上清液再轉(zhuǎn)入容量瓶中,重復l~2次,用90%的丙酮定容
4.將上清液在分光光度計上,用1cm光程的比色皿,分別讀取750nm、663nm、645nm、630nm波長的吸光度,并以90%的丙酮作空白吸光度測定。四、計算方法
葉綠素a=V--水樣體積(L)V1--定容體積(mL)D
--吸光度δ--比色皿厚度(cm)五、環(huán)境標準
葉綠索a含量(mg/m3)
營養(yǎng)類型
<4貧營養(yǎng)型
4~10中營養(yǎng)型
10~50富營養(yǎng)型
>50高度富營養(yǎng)型
湖泊富營養(yǎng)化葉綠素a的評價標準六、思考
1.測定葉綠素a有何意義?2、試述葉綠素a測定的原理。3、繪制葉
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