第2章 色譜基本理論

概述色譜流出曲線基本原理兩個(gè)理論定性與定量第二章色譜基本理論概述色譜法早在1903年由俄國(guó)植物學(xué)家茨維特分離植物色素時(shí)采用。碳酸鈣色素石油醚色譜的兩個(gè)相固定相不動(dòng)的一相流動(dòng)相攜帶樣品流動(dòng)的流體當(dāng)流動(dòng)相中樣品混合物經(jīng)過(guò)固定相時(shí)，由于各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相相互作用的類型、強(qiáng)弱也有差異，因此在同一推動(dòng)力的作用下，不同組分在固定相滯留時(shí)間長(zhǎng)短不同，從而按先后不同的次序從固定相中流出。色譜的分類色譜流出曲線及有關(guān)術(shù)語(yǔ)流出曲線和色譜峰基線柱中僅有流動(dòng)相通過(guò)時(shí)，檢測(cè)器響應(yīng)訊號(hào)的記錄值。理想的基線應(yīng)該是一條水平直線。色譜峰檢測(cè)器對(duì)流動(dòng)相中被分離組分的響應(yīng)訊號(hào)的記錄值保留值死時(shí)間不被固定相吸附或溶解的物質(zhì)進(jìn)入色譜柱時(shí)，從進(jìn)樣到出現(xiàn)峰極大值所需的時(shí)間。保留時(shí)間

試樣從進(jìn)樣開始到柱后出現(xiàn)峰極大點(diǎn)時(shí)所經(jīng)歷的時(shí)間。調(diào)整保留時(shí)間由于組份的tR包含了組份通過(guò)柱子的時(shí)間和在固定相中滯留的時(shí)間，所以t'R實(shí)際上是組份在固定相中停留的總時(shí)間。t'R=tR-tM因物質(zhì)不被固定相吸附或溶解，其流動(dòng)速度與流動(dòng)相的流動(dòng)速度相近。在測(cè)定流動(dòng)相平均線速ū時(shí)，可用柱長(zhǎng)L與tM的比值計(jì)算。tMtR和t'R保留時(shí)間和調(diào)整保留時(shí)間是色譜法定性的基本依據(jù)死體積VM指色譜柱在填充后，柱管內(nèi)固定相顆粒間所剩留的空間、色譜儀中管路和連接頭間的空間以及檢測(cè)器的空間的總和。當(dāng)后兩項(xiàng)很小而可忽略不計(jì)時(shí)，死體積可由死時(shí)間與流動(dòng)相體積流速F0（L/min）計(jì)算：VM=tM·F0

保留體積VR調(diào)整保留體積V'R相對(duì)保留值r2.1某組份2的調(diào)整保留值與組份1的調(diào)整保留值之比，稱為相對(duì)保留值。

相對(duì)保留值只與柱溫及固定相的性質(zhì)有關(guān)，與柱徑、柱長(zhǎng)、填充情況及流動(dòng)相流速無(wú)關(guān)。因此，它是色譜法中，特別是氣相色譜法中，廣泛使用的定性數(shù)據(jù)。必須注意，相對(duì)保留值絕對(duì)不是兩個(gè)組份保留時(shí)間或保留體積之比。選擇因子α在定性分析中，通常固定一個(gè)色譜峰作為標(biāo)準(zhǔn)（s），然后再求其它峰（i）對(duì)這個(gè)峰的相對(duì)保留值。在多元混合物分析中，通常選擇一對(duì)最難分離的物質(zhì)對(duì)，將它們的相對(duì)保留值作為重要參數(shù)。在這種特殊情況下，可用符號(hào)α表示：式中t'R2為后出峰的調(diào)整保留時(shí)間，所以α總是大于1的。區(qū)域?qū)挾葮?biāo)準(zhǔn)偏差σ

是組份在色譜柱中譜帶擴(kuò)張的函數(shù)，它反映了色譜操作條件的動(dòng)力學(xué)因素。0.607倍峰高處色譜峰寬的一半半峰寬W1/2峰高一半處對(duì)應(yīng)的峰寬峰寬W

（基線寬度）色譜峰兩側(cè)拐點(diǎn)上的切線在基線上的截距峰面積峰高色譜峰頂點(diǎn)與基線之間的垂直距離。從流出曲線上，可得到許多重要信息：

1.根據(jù)峰的個(gè)數(shù)，判斷樣品中所含組份的最少個(gè)數(shù)2.根據(jù)峰的保留值，進(jìn)行定性分析3.根據(jù)峰面積或峰高，進(jìn)行定量分析4.保留值與區(qū)域?qū)挾?，是評(píng)價(jià)色譜柱分離效能的依據(jù)5.兩峰間的距離，是評(píng)價(jià)色譜條件是否合適的依據(jù)6.判斷儀器是否正常色譜法分析的基本原理色譜分析的目的：將樣品中各組分彼此分離

組分要完全分離，各峰間的距離必須足夠遠(yuǎn)；兩峰間距離是由組分在兩相間的分配系數(shù)決定的，即與色譜過(guò)程的熱力學(xué)性質(zhì)有關(guān)。

兩峰間雖有一定距離，而每個(gè)峰都很寬，以致彼此重疊，則也不能分離。峰的寬窄是由組分在色譜柱中傳質(zhì)和擴(kuò)散行為決定的，即與色譜過(guò)程的動(dòng)力學(xué)性質(zhì)有關(guān)。分配系數(shù)K和分配比k1.分配系數(shù)K

色譜分離是基于樣品組分在固定相和流動(dòng)相之間反復(fù)多次地分配、吸附--脫附、離子交換等過(guò)程。分配系數(shù)是描述分離過(guò)程中樣品分子在兩相間分配的參數(shù)，它是指在一定溫度和壓力下，組分在兩相間分配達(dá)平衡時(shí)的濃度之比。

2.分配比k（k′）

在一定溫度和壓力下，組分在兩相間分配達(dá)平衡時(shí)，分配在固定相和流動(dòng)相中的質(zhì)量比

k值越大，說(shuō)明組分在固定相中的量越多，相當(dāng)于柱的容量大，因此又稱容量因子。它是衡量色譜柱對(duì)被分離組分保留能力的重要參數(shù)；也決定于組分和兩相的熱力學(xué)性質(zhì)，不僅隨柱溫、柱壓變化而變化，還與兩相的體積有關(guān)。

式中CS，Cm分別為組分在固定相和流動(dòng)相的濃度；Vm為柱中流動(dòng)相的體積，近似等于柱死體積。Vs為柱中固定相的體積，在各種不同的類型的色譜中有不同的含義。例如：在分配色譜中，Vs表示固定液的體積；在尺寸排阻色譜中，則表示固定相的孔體積。

分配比k可直接從色譜圖測(cè)得設(shè)流動(dòng)相在柱內(nèi)的線速度為u，組分在柱內(nèi)線速度為us，由于固定相對(duì)組分有保留作用，所以u(píng)s＜u。此兩速度之比稱為滯留因子Rs。

3.分配系數(shù)K與分配比k的關(guān)系

其中β稱為相比率，它是反映各種色譜柱特點(diǎn)的又一個(gè)參數(shù)。如，對(duì)填充柱的β值一般為6～35；對(duì)毛細(xì)管柱的β值為60～600。

4.分配系數(shù)K及分配比k與選擇因子α的關(guān)系

對(duì)A、B兩組分的選擇因子，用下式表示

上述公式表明：通過(guò)選擇因子α把實(shí)驗(yàn)測(cè)量值k與熱力學(xué)性質(zhì)的分配系數(shù)K直接聯(lián)系起來(lái)，α對(duì)兩相的選擇具有實(shí)際意義。如果兩組分的K或k值相等，則α=1，兩個(gè)組分的色譜峰必將重合。兩組分的K或k值相差越大，則分離越好兩組分具有不同的分配系數(shù)是色譜分離的先決條件兩個(gè)理論和分離度塔板理論

最早由Martin等人提出。把色譜柱比作一個(gè)精餾塔，沿用精餾塔中塔板的概念來(lái)描述組分在兩相間的分配行為，同時(shí)引人理論塔板數(shù)（n）作為衡量柱效率的指標(biāo)。

iii）所有組分開始時(shí)存在于第0號(hào)塔板上，且試樣組分沿軸（縱）向擴(kuò)散可忽略

iv）組分的分配系數(shù)在所有塔板上是常數(shù)，與其在某一塔板上的量無(wú)關(guān)

i）在柱內(nèi)一小段長(zhǎng)度內(nèi)，組分在兩相間可迅速達(dá)到平衡。這一小段柱長(zhǎng)稱為理論塔板高度（H）

ii）以氣相色譜為例，載氣是脈動(dòng)而不是連續(xù)進(jìn)入色譜柱的，每次進(jìn)氣為一個(gè)塔板體積（ΔVm）為簡(jiǎn)單起見(jiàn)，設(shè)色譜柱由5塊塔板組成；某組分的分配比k=2；組分的量為81。0#1#2#3#4#5427815436182718918/1836241224129631682412211260.670.335.332.6716821.3310.6710.675.33ΔV0ΔV1ΔV2ΔV3ΔV40#81=54+2754=36+1836=24+1224=16+8161#27=18+918+18=24+1224+12=24+1224+82#9=6+36+12=12+612+123#3=2+12+64#1由塔板理論可建流出曲線方程：W越小，n就越大，而H就越小，柱效能越高。故n和H是描述柱效能的指標(biāo)。通常氣相填充色譜柱的n＞103，H＜1mm；毛細(xì)管柱n=105~106，H＜0.5mm。由于tm包括在tR中，而tm不參與柱內(nèi)分配，因此n值盡管較大，而H卻很小，與實(shí)際柱效能相差甚遠(yuǎn)。所以把tm扣除，用有效塔板數(shù)neff和有效塔板高Heff評(píng)價(jià)柱效能。

塔板理論用熱力學(xué)觀點(diǎn)形象地描述了溶質(zhì)在色譜柱中的分配平衡和分離過(guò)程，導(dǎo)出流出曲線的數(shù)學(xué)模型，并成功地解釋了流出曲線的形狀及濃度極大值的位置，還提出了計(jì)算和評(píng)價(jià)柱效的參數(shù)。但由于它的某些基本假設(shè)并不完全符合柱內(nèi)實(shí)際發(fā)生的分離過(guò)程。如，未考慮縱向擴(kuò)散造成譜帶擴(kuò)張和影響板高的各種因素，也不能說(shuō)明為什么在不同流速下可以測(cè)得不同的理論塔板數(shù)。

1956年VanDeemter等提出的色譜過(guò)程動(dòng)力學(xué)理論。它吸收了塔板理論中板高的概念，并充分考慮了組分在兩相間的擴(kuò)散和傳質(zhì)過(guò)程，在動(dòng)力學(xué)基礎(chǔ)上較好地解釋了影響板高的各種因素。該理論模型對(duì)氣、液相色譜都適用。范氏方程的數(shù)學(xué)簡(jiǎn)化式為：式中u為流動(dòng)相的線速度；A，B，C為常數(shù)，分別代表渦流擴(kuò)散項(xiàng)系數(shù)、分子擴(kuò)散項(xiàng)系數(shù)、傳質(zhì)阻力項(xiàng)系數(shù)。速率理論1.渦流擴(kuò)散項(xiàng)A

在填充色譜柱中，當(dāng)組分隨流動(dòng)相向柱出口遷移時(shí)，流動(dòng)相由于受到固定相顆粒阻礙，不斷改變流動(dòng)方向，使組分分子在前進(jìn)中形成紊亂的類似“渦流”的流動(dòng)，故稱渦流擴(kuò)散。A＝2λdpA與填充物的平均直徑dp的大小和填充不規(guī)則因子λ有關(guān)，與流動(dòng)相的性質(zhì)、線速度和組分性質(zhì)無(wú)關(guān)。為了減少渦流擴(kuò)散，提高柱效，使用細(xì)而均勻的顆粒，并且填充均勻是十分必要的。對(duì)于空心毛細(xì)管，不存在渦流擴(kuò)散，因此A＝0。

2.分子擴(kuò)散項(xiàng)B/u（縱向擴(kuò)散項(xiàng)）

縱向分子擴(kuò)散是由濃度梯度造成的。組分從柱入口加入，其濃度分布的構(gòu)型呈“塞子”狀。隨著流動(dòng)相向前推進(jìn)，由于存在濃度梯度，必然自發(fā)地向前和向后擴(kuò)散，造成譜帶展寬。

B＝2γDgγ是填充柱內(nèi)流動(dòng)相擴(kuò)散路徑彎曲的因素，也稱彎曲因子，它反映了固定相顆粒的幾何形狀對(duì)自由分子擴(kuò)散的阻礙情況。Dg為組分在流動(dòng)相中擴(kuò)散系數(shù)（cm2·s-1）。3.傳質(zhì)阻力項(xiàng)Cu由于氣相色譜以氣體為流動(dòng)相，液相色譜以液體為流動(dòng)相，它們的傳質(zhì)過(guò)程不完全相同。對(duì)于氣液色譜，傳質(zhì)阻力系數(shù)C包括氣相傳質(zhì)阻力系數(shù)Cg和液相傳質(zhì)阻力系數(shù)Cl兩項(xiàng)，即C＝Cg＋Cl

。傳質(zhì)固定液載體對(duì)于填充柱，氣相傳質(zhì)阻力系數(shù)Cg為：由上式看出，氣相傳質(zhì)阻力與填充物粒度直徑的平方成正比、與組分在載氣流中的擴(kuò)散系數(shù)成反比。因此，采用粒度小的填充物和相對(duì)分子質(zhì)量小的氣體（如氫氣）做載氣，可使Cg減小，提高柱效。

液相傳質(zhì)阻力系數(shù)C1為：上式看出，固定相的液膜厚度df薄，組分在液相的擴(kuò)散系數(shù)Dl大，則液相傳質(zhì)阻力就小。減少固定液的量，可降低df

，但k隨之變小，又會(huì)使Cl增大。固定液量一定，df隨載體的比表面積增加而降低。因此，一般采用比表面積較大的載體來(lái)降低df，但比表面太大，由于吸附造成峰拖尾，對(duì)分離也不利。提高柱溫可增大Dl，但會(huì)使k值減小，為有適當(dāng)?shù)腃l值，應(yīng)控制適宜的柱溫。將上面各式總結(jié)，即可得氣液色譜速率板高方程：液液色譜速率板高方程為：該式與氣液色譜速率方程的形式基本一致，主要區(qū)別在液液色譜中縱向擴(kuò)散項(xiàng)可忽略不計(jì)，影響柱效的主要因素是傳質(zhì)阻力項(xiàng)。

4.流動(dòng)相線速度以及分子擴(kuò)散項(xiàng)和傳質(zhì)阻力項(xiàng)對(duì)板高的影響

5.固定相粒度大小對(duì)板高的影響

當(dāng)然，固定相顆粒愈細(xì)，柱流速愈慢。只有采取高壓技術(shù)，流動(dòng)相流速才能符合實(shí)驗(yàn)要求。分離度兩峰距離近并且峰形寬；兩峰嚴(yán)重相疊，選擇性和柱效都很差兩峰距離雖遠(yuǎn)，峰形仍很寬；說(shuō)明選擇性好，但柱效低分離理想；說(shuō)明選擇性和柱效均好單獨(dú)用柱效或選擇性都不能真實(shí)反映組分在色譜柱中的分離情況。既能反映柱效率又能反映選擇性的指標(biāo)，稱總分離效能指標(biāo)。它又叫分辨率，其定義為相鄰兩組分色譜峰保留值之差與兩組分色譜峰底寬總和之半的比值，即分離度RR值越大，表明相鄰兩組分分離越好當(dāng)R＜1時(shí)，兩峰有部分重疊；當(dāng)R=1時(shí)，分離程度可達(dá)98%；當(dāng)R=1.5時(shí)，分離程度可達(dá)99.7%。通常用R=1.5作為相鄰兩組分已完全分離的標(biāo)志。

分離度受柱效（n）、選擇因子(α)和容量因子（k）三個(gè)參數(shù)的控制。對(duì)于難分離物質(zhì)對(duì)，由于它們的分配系數(shù)差別小，可合理地假設(shè)k1≈k2=k，W1≈W2＝W?；旧V分離方程式1.分離度與柱效的關(guān)系由分離方程式看出，具有一定α的物質(zhì)對(duì)，R直接和neff有關(guān)，說(shuō)明neff能正確地代表柱效能。分離方程式還表明，R與n的關(guān)系還受熱力學(xué)性質(zhì)的影響。當(dāng)兩相和被分離物質(zhì)對(duì)的α確定后，R將取決于n。對(duì)于一定理論板高的柱子，R的平方與L成正比。用較長(zhǎng)的柱子可以增加R，但延長(zhǎng)了分析時(shí)間。

提高R的好方法是：制備性能優(yōu)良的柱子，通過(guò)降低H，以提高R。

由基本色譜方程式判斷，當(dāng)α=1時(shí)，R=0。顯然，α越大，選擇性越好。一般通過(guò)改變固定相和流動(dòng)相的性質(zhì)和組成或降低柱溫，可有效增大α值。

2.分離度與選擇因子的關(guān)系3.分離度與容量因子的關(guān)系如果設(shè)：則分離方程式寫成由圖可看出：當(dāng)k＞1O時(shí)，隨容量因子增大，分離度的增長(zhǎng)是微乎其微的。一般取k為2～10最宜。對(duì)于GC，通過(guò)提高柱溫，可選擇合適的k值，以改進(jìn)分離度。對(duì)于LC，只要改變流動(dòng)相組成，就能有效地控制k值，對(duì)分離能起到立竿見(jiàn)影的效果（見(jiàn)下圖）。4.分離度與分析時(shí)間的關(guān)系分析時(shí)間與分離度呈指數(shù)型正相關(guān)關(guān)系；分離度越大，所需分析時(shí)間越長(zhǎng)。5.基本色譜分離方程式的應(yīng)用例1

有一根lm長(zhǎng)的柱子，分離組分1和2得到的色譜圖如圖所示。圖中橫坐標(biāo)為記錄筆走紙距離。若欲得到R=1.2的分離度，有效塔板數(shù)應(yīng)為多少？色譜柱要加到多長(zhǎng)？解：先求組分2對(duì)組分1的相對(duì)保留值r2,1（即α值）求有效塔板數(shù)：neff＝16×0.82×[1.1/(1.1-1)]2＝1239若使R=1.2，所需塔板數(shù)可計(jì)算，即因此，欲使分離度達(dá)到1.2，需有效塔板數(shù)為2788塊，則所需柱長(zhǎng)為：

L=2788/1329×1m=2.25m例2

已知某色譜柱的理論塔板數(shù)為3600，組分A和B在該柱上的保留時(shí)間為27mm和30mm，求兩峰的峰半寬和分離度。解:∵w1/2=w/1.7WA=27/(3600/16)1/2=1.8mm(WA)1/2＝1.8/1.7＝1.06mmWB=30/(3600/16)1/2=2.0mm(WB)1/2＝2.0/1.7＝1.18mmR＝2(30-27)/(1.8+2)＝6/3.8＝1.6例3

已知物質(zhì)A和B在一個(gè)30.00cm長(zhǎng)的色譜柱上的保留時(shí)間分別為16.40和17.63min。不被保留組分通過(guò)該柱的時(shí)間為1.30min。峰寬為1.11和1.21min，計(jì)算：

(1)

柱分辨本領(lǐng)；

(2)

柱的平均塔板數(shù)目；

(3)

塔板高度；

(4)

達(dá)到1.5分離度所需的柱長(zhǎng)度；

(5)在較長(zhǎng)柱上把物質(zhì)B洗脫所需要的時(shí)間。

解:(1)R=2(17.63-16.40)/(1.11+1.21)=1.06(2)nA=16(16.40/1.11)2=3493

nB=16(17.63/1.21)2=3397

nav=(3493+3397)/2=3445=3.44×103(3)H=L/n=30/3445=8.71×10-3cm(4)n2=3445×2.25/1.12=6.92×103

源于n1/n2=(R1/R2)2L=nH=6.92×103×8.71×10-3=60.27cm(5)tR2=tR1(R2/R1)2=17.63×1.52/1.062

=35.44min定性與定量定性分析色譜定性分析就是要確定各色譜峰所代表的化合物。由于各種物質(zhì)在一定的色譜條件下均有確定的保留值，因此保留值可作為一種定性指標(biāo)。但是不同物質(zhì)在同一色譜條件下，可能具有相似或相同的保留值。因此僅根據(jù)保留值對(duì)一個(gè)完全未知的樣品定性是困難的。目前各種色譜定性方法均基于保留值在了解樣品的來(lái)源、性質(zhì)、分析目的的基礎(chǔ)上，對(duì)樣品組成作初步的判斷，再結(jié)合下列的方法進(jìn)行定性。1.已知純物質(zhì)對(duì)照色譜條件不變，則組分的保留時(shí)間是一定值。這是色譜定性分析中最方便，最可靠的方法。如果未知樣品較復(fù)雜，可采用在未知樣品中加入已知對(duì)照，通過(guò)未知樣品中哪個(gè)峰增大，來(lái)確定未知樣品中的某成分----加標(biāo)定性法。只適用于組分性質(zhì)已有所了解，組成比較簡(jiǎn)單，且被定性成分有標(biāo)準(zhǔn)品（對(duì)照品）。2.經(jīng)驗(yàn)規(guī)律當(dāng)沒(méi)有待測(cè)組分的純標(biāo)準(zhǔn)樣時(shí)，用氣相色譜中的經(jīng)驗(yàn)規(guī)律定性。（l）碳數(shù)規(guī)律一定溫度下，同系物的調(diào)整保留時(shí)間的對(duì)數(shù)與分子中碳原子數(shù)成線性關(guān)系式中A1和C1是常數(shù)，n為分子中的碳原子數(shù)（n≥3）。如果知道某一同系物中兩個(gè)或更多組分的調(diào)整保留值，則可根據(jù)上式推知同系物中其它組分的調(diào)整保留值。（2）沸點(diǎn)規(guī)律

同族具有相同碳數(shù)碳鏈的異構(gòu)體化合物，其調(diào)整保留時(shí)間的對(duì)數(shù)和它們的沸點(diǎn)呈線性關(guān)系式中A2和C2均為常數(shù)，Tb為組分的沸點(diǎn)（K）。根據(jù)同族同碳數(shù)碳鏈異構(gòu)體中幾個(gè)已知組分的調(diào)整保留時(shí)間的對(duì)數(shù)值，可求得同族中具有相同碳數(shù)的其他異構(gòu)體的調(diào)整保留時(shí)間。有時(shí)利用相對(duì)保留值定性比用保留值定性更為方便、可靠。用保留值定性時(shí)，必須使兩次分析條件完全一致，有時(shí)不易做到。而用相對(duì)保留值定性時(shí)，只要保持柱溫不變即可。方法要求找一基準(zhǔn)物質(zhì)，常選易得純品的，且與被分析組分相近的物質(zhì)作基準(zhǔn)物質(zhì)，如正丁烷、環(huán)己烷、正戊烷、苯、對(duì)二甲苯、環(huán)己醇、環(huán)己酮等。3.相對(duì)保留值又稱Kováts指數(shù)，重視性較其他保留數(shù)據(jù)都好的定性參數(shù)，可根據(jù)所用固定相和柱溫直接與文獻(xiàn)值對(duì)照，而不需標(biāo)準(zhǔn)樣品。也是一種相對(duì)保留值，它是把正構(gòu)烷烴中某兩個(gè)組分的調(diào)整保留值的對(duì)數(shù)作為相對(duì)的尺度，并假定正構(gòu)烷烴的保留指數(shù)為n100。被測(cè)物的保留指數(shù)值可用內(nèi)插法計(jì)算。

4.保留指數(shù)內(nèi)插法求IX示意圖信號(hào)

tR(Z)

tR(i)tR(Z+1)

t進(jìn)樣例下圖為乙酸正丁酯在阿皮松L柱上的流出曲線（柱溫100℃）。由圖中測(cè)得調(diào)整保留距離為：乙酸正丁酯310.0mm，正庚烷174.0mm，正辛烷373.4mm，求乙酸正下酯的保留指數(shù)。乙酸正丁酯的保留指數(shù)為775.6。在與文獻(xiàn)值對(duì)照時(shí)，一定要重視文獻(xiàn)值的實(shí)驗(yàn)條件，如固定液、柱溫等。而且要用幾個(gè)已知組分進(jìn)行驗(yàn)證。解：已知n=7色譜與質(zhì)譜、Fourier紅外光譜、發(fā)射光譜等儀器聯(lián)用是目前解決復(fù)雜樣品定性分析最有效工具之一。5.雙柱、多柱6.與其他方法結(jié)合對(duì)于復(fù)雜樣品的分析，利用雙柱或多柱法更有效、可靠，使原來(lái)一根柱子上可能出現(xiàn)相同保留值的兩種組分，在另一柱上就有可能出現(xiàn)不同的保留值。當(dāng)色譜峰峰型好的時(shí)候，有時(shí)也采用峰高來(lái)進(jìn)行定量計(jì)算。定量分析

定量分析是根據(jù)檢測(cè)器對(duì)溶質(zhì)產(chǎn)生的響應(yīng)信號(hào)與溶質(zhì)的量成正比的原理，通過(guò)色譜圖上的峰面積或峰高，計(jì)算樣品中溶質(zhì)的含量。

峰面積是色譜圖提供的基本定量數(shù)據(jù)，現(xiàn)在幾乎都是積分法獲得峰面積。注意積分參數(shù)的設(shè)定需將面積乘上一個(gè)換算系數(shù)，使組分的面積轉(zhuǎn)換成相應(yīng)物質(zhì)的量，即Wi=fi′Ai。式中Wi為組分i的量，Ai為峰面積，fi′為定量校正因子。1.定量校正因子fi′定義為：?jiǎn)挝环迕娣e的組分的量。與檢測(cè)器靈敏度Si的關(guān)系為：fi′=1/Si

定量校正因子同一檢測(cè)器對(duì)不同物質(zhì)具有不同的響應(yīng)值，所以兩個(gè)相等量的物質(zhì)得不出相等峰面積；或者說(shuō)，相同峰面積并不意味著相等的量。相對(duì)定量校正因子由于物質(zhì)量Wi不易準(zhǔn)確測(cè)量。實(shí)際工作中，以相對(duì)定量校正因子fi代替定量校正因子fi′fi定義為：樣品中各組分的定量校正因子與標(biāo)準(zhǔn)物的定量校正因子之比。式中m和A分別代表質(zhì)量和面積，下標(biāo)i和s分別代表待測(cè)組分和標(biāo)準(zhǔn)物。fi(m)表示相對(duì)質(zhì)量校正因子，由于進(jìn)入檢測(cè)器的物質(zhì)量也可以用摩爾或體積表示，因此也可用相對(duì)摩爾校正因子fi(M)和相對(duì)體積校正因子fi(V)表示。

凡文獻(xiàn)查得的校正因子都是指相對(duì)校正因子，可用fM，fm分別表示摩爾校正因子和質(zhì)量校正因子（通常把相對(duì)二字略去）。相對(duì)校正因子只與試樣、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和檢測(cè)器類型有關(guān)，與操作條件、柱溫、載氣流速、固定液性質(zhì)無(wú)關(guān)。校正因子測(cè)定方法：分別準(zhǔn)確