生理實(shí)驗(yàn)十一 血液組成、紅細(xì)胞比容和紅細(xì)胞脆性試驗(yàn)以及瘤胃微生物觀察及對(duì)飼料成分的消化分析

實(shí)驗(yàn)十一血液組成、紅細(xì)胞比容和紅細(xì)胞脆性試驗(yàn)（實(shí)驗(yàn)）以及瘤胃微生物觀察及對(duì)飼料成分的消化分析（示教）

血液組成和紅細(xì)胞比容測(cè)定

目的：了解血液的組成，區(qū)別血漿、血清、血細(xì)胞及纖維蛋白，測(cè)定紅細(xì)胞比容。原理：血液是一種廣義的結(jié)締組織，它是由液態(tài)的血漿和懸浮于其中的血細(xì)胞所組成。抗凝情況下離心，由于血細(xì)胞比重略大于血漿，將出現(xiàn)分層，上部為血漿。下部壓緊的血細(xì)胞占全血的體積比稱為紅細(xì)胞壓積（packedcellvolum,簡(jiǎn)稱PCV），又叫比容。若不加抗凝劑，血液凝固會(huì)析出血清。實(shí)驗(yàn)對(duì)象：家兔實(shí)驗(yàn)用品：注射器、溫（Wintrobe）氏比容管、吸管、離心機(jī)、抗凝劑（肝素鈉等）。步驟：1）家兔以烏拉坦（1g/kg，i.v.）麻醉、背位固定2）頸總動(dòng)脈插管（用0.1％肝素溶液濕潤(rùn)），放血入肝素抗凝燒杯內(nèi)3）吸取10ml抗凝血徐徐注入溫氏管，定容至刻度“0”,3000r/min離心30min。取出，讀取血細(xì)胞柱刻度；再次離心5min,若刻度不變，即為血細(xì)胞壓積值。4）觀察比容管中血液，上層為血漿，下層為紅細(xì)胞，中間一白色薄層為白細(xì)胞和血小板。5）讀數(shù)，計(jì)算紅細(xì)胞比容（％）

結(jié)果：男：40～50％女：37～48％選做：6）取新鮮血置試管中，靜置片刻?？梢姕啙岬难?yōu)橐粭l血凝塊，周圍有清亮的血清析出。為加速此過程，可先離心幾分鐘或略加溫。7）取新鮮血置小燒杯中，立即用小竹刷攪動(dòng)。取出竹刷，用自來水沖洗，可見上面纏繞的白色有韌性的纖維蛋白。脫纖維蛋白血不再凝固。紅細(xì)胞滲透脆性目的：學(xué)習(xí)滲透脆性實(shí)驗(yàn)方法，進(jìn)一步理解紅細(xì)胞生理特性和血漿滲透壓的理論知識(shí)。原理：紅細(xì)胞在低滲溶液中，會(huì)因過多水分進(jìn)入紅細(xì)胞而膨脹，甚至破裂，血紅蛋白釋出，稱為溶血。紅細(xì)胞膜對(duì)低滲溶液具有一定的抵抗力，這一特征稱紅細(xì)胞的滲透脆性（osmoticfragility）。將血液滴入不同濃度的低滲溶液中，可檢查紅細(xì)胞膜對(duì)于低滲溶液抵抗力的大小。開始出現(xiàn)溶血現(xiàn)象的低滲溶液濃度為該血液紅細(xì)胞的最小抵抗力，即最大脆性；出現(xiàn)完全溶血時(shí)的低滲溶液濃度則為該血液紅細(xì)胞的最大抵抗力，即最小脆性。材料和方法：材料：家兔、兔手術(shù)臺(tái)、哺乳動(dòng)物手術(shù)器械一套、動(dòng)脈夾、細(xì)塑料管（或動(dòng)脈插管）、注射器和針頭、20%氨基甲酸乙酯溶液、10ml小試管、試管架、滴管、1ml吸管、1%NaCl液、蒸餾水。方法：溶液配制取小試管10個(gè)，編號(hào)后排列于試管架上，按表6.1-1要求向各試管內(nèi)加入不同體積的1%NaCl溶液和蒸餾水，配制出10種不同濃度的NaCl的低滲溶液：見下表試管號(hào)123456789101%NaCl(ml)0.900.650.600.550.50.450.400.350.300.25蒸餾水（ml）0.10.350.400.450.50.550.60.650.700.75NaCl溶液濃度（%）0.90.650.600.550.50.450.400.350.300.25加抗凝血用滴管吸取抗凝血，在各試管中各加1滴，搖勻，靜置1～2h。結(jié)果判斷根據(jù)各管中液體顏色和混濁度的不同，判斷紅細(xì)胞脆性。未發(fā)生溶血的試管（－）：液體下層為混濁紅色，上層為無色，表明無紅細(xì)胞破裂。部分溶血的試管（±）：液體下層為混濁紅色，上層出現(xiàn)透明紅色，表明部分紅細(xì)胞已破裂，稱為不完全溶血。全部溶血的試管（＋）：液體完全變成透明紅色，表明紅細(xì)胞完全破裂，稱為完全溶血。結(jié)果：記錄紅細(xì)胞滲透脆性的范圍，報(bào)告該血樣的紅細(xì)胞最小滲透抵抗力和最大滲透抵抗力。注意事項(xiàng)：配制不同濃度的低滲溶液時(shí)，小試管應(yīng)干燥。加抗凝血量要準(zhǔn)確一致?；靹驎r(shí)，用手指堵住試管口，輕輕傾倒1～2次，減少機(jī)械震動(dòng)，避免人為的溶血。抗凝劑最好用肝素，其他抗凝劑可改變?nèi)芤旱臐B透壓。討論：紅細(xì)胞的形態(tài)與生