常見性病實驗室檢測技術

常見性病實驗室檢測技術第一頁，共一百頁，2022年，8月28日性病實驗室檢測工作概述第二頁，共一百頁，2022年，8月28日病原體淋球菌梅毒螺旋體生殖器皰疹病毒生殖道沙眼衣原體乳頭瘤病毒HIV病毒杜克雷噬血桿菌衣原體念珠菌滴蟲疥蟲陰虱肝炎病毒－－－病種淋病梅毒:生殖器皰疹:生殖道沙眼衣原體感染:尖銳濕疣:HIV感染/艾滋病:軟下疳:性病性淋巴肉芽腫:念珠菌性陰道炎:滴蟲性陰道病:疥瘡:陰虱病:肝炎（乙、丙）：－－－性傳播疾病(STD)/性傳播感染(STI)第三頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒淋病軟下疳性病性淋巴肉芽腫非淋菌性尿道炎生殖器皰疹尖銳濕疣HIV/AIDS梅毒淋病軟下疳性病性淋巴肉芽腫50-60年代經(jīng)典性病80-90年代監(jiān)測性病目前傳染法報告病例監(jiān)測性病梅毒淋病沙眼衣原體感染生殖器皰疹尖銳濕疣我國目前重點防治性傳播疾病（性?。┥逞垡略w:30%～50%生殖支原體:10%～40%其它:20%～30%梅毒淋病HIV/AIDS第四頁，共一百頁，2022年，8月28日1995-2010全國淋病流行狀況全國性病流行狀況1995-2010全國梅毒流行狀況第五頁，共一百頁，2022年，8月28日衛(wèi)生部于2010年6月3日下發(fā)了關于《中國預防與控制梅毒規(guī)劃（2010-2020年）》衛(wèi)生部2011年2月12日下發(fā)《預防艾滋病、梅毒和乙肝母嬰傳播工作實施方案》性病防治管理辦法（修訂征求意見稿）即將下發(fā)近期衛(wèi)生部相關政策/規(guī)劃文件6第六頁，共一百頁，2022年，8月28日預防與控制措施廣泛開展宣傳教育，普及梅毒防治知識開展綜合防治，阻斷梅毒傳播提高監(jiān)測檢測質量，開展主動檢測，

梅毒早期發(fā)現(xiàn)提供規(guī)范化梅毒醫(yī)療服務預防和控制先天梅毒加強國際合作和應用性研究中國預防與控制梅毒規(guī)劃7第七頁，共一百頁，2022年，8月28日性病防治管理辦法(各級機構職責)第十一條

國家級性病預防控制機構：（三）組織制定和完善性病實驗室檢測等技術規(guī)范，開展性病實驗室檢測質量控制，定期開展性病診斷試劑臨床應用質量評價。第十二條

省級及以下性病預防控制機構（四）組織開展本行政區(qū)域性病實驗室檢測質量控制第十三條

性病診療業(yè)務的醫(yī)療機構：

開展實驗室檢驗質量控制8第八頁，共一百頁，2022年，8月28日性病檢測實驗室能力建設與發(fā)展規(guī)劃(2011-2015)（上報稿）第九頁，共一百頁，2022年，8月28日工作目標及原則加強各級性病實驗室的能力建設（1）國家性病參比實驗室應具備。。。（2）省級中心實驗室應具備開展常見重要性病病原體的檢測、藥物敏感性檢測以及質量評價的能力。（3）縣（區(qū)）級以上醫(yī)療衛(wèi)生機構應具備開展梅毒血清學初篩和確證試驗、淋球菌培養(yǎng)以及生殖道沙眼衣原體抗原或核酸檢測的能力；縣（區(qū)）級以下的基層醫(yī)療機構至少應具備開展梅毒快速血清學檢測的能力。10第十頁，共一百頁，2022年，8月28日建設任務和標準1）95%的省級以上醫(yī)療衛(wèi)生機構能夠開展梅毒血清學初篩和確證試驗、淋球菌鏡檢和培養(yǎng)、衣原體抗原檢測或核酸檢測。60%的省級以上醫(yī)療衛(wèi)生機構能夠開展淋球菌藥物敏感性檢測。2）90%的地市級醫(yī)療衛(wèi)生機構能夠開展梅毒血清學初篩和確證試驗、淋球菌鏡檢和培養(yǎng)、衣原體抗原檢測或核酸檢測。3）85%的縣區(qū)級醫(yī)療衛(wèi)生機構能夠開展梅毒血清學初篩和確證試驗、淋球菌鏡檢和培養(yǎng)、衣原體抗原檢測。4）85%的縣區(qū)級以下醫(yī)療衛(wèi)生機構至少能夠開展梅毒快速血清學檢測。11第十一頁，共一百頁，2022年，8月28日常見性病實驗室檢測技術介紹梅毒淋病生殖道沙眼衣原體感染生殖器皰疹及其他第十二頁，共一百頁，2022年，8月28日

一、梅毒第十三頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒概述（一）性接觸是主要的傳染途徑未經(jīng)治療的患者在感染后的1年內(nèi)最具有傳染性隨著病期的延長，傳染性越來越小到感染后2年，通過性接觸一般無傳染性母嬰傳播在妊娠7周時，梅毒螺旋體即可通過胎盤傳染未經(jīng)治療者，雖已無性傳播（病期>2年），但妊娠時仍可傳染給胎兒,病期越長，傳染性越小;

第十四頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒概述（二）一期梅毒硬下疳和(或)腹股溝淋巴結腫大二期梅毒可有一期梅毒史，病期在2年以內(nèi)有多形性皮疹、扁平濕疣等三期（晚期）梅毒可有一期或二期梅毒史，病期在2年以上皮膚黏膜損害等，包括神經(jīng)梅毒、心血管梅毒隱性（潛伏）梅毒早期：病期在2年以內(nèi)；晚期：病期在2年以上。無任何梅毒性的癥狀和體征胎傳（先天）梅毒早期：在2歲前發(fā)生；晚期：在2歲以后發(fā)病。胎傳隱性梅毒：無臨床表現(xiàn)

第十五頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒概述（三）疑似病例、確證病例診斷依據(jù)：病史癥狀實驗室檢查梅毒的實驗室檢查結果對診斷有決定性意義第十六頁，共一百頁，2022年，8月28日常用梅毒實驗室檢測方法病原學檢測血清學檢測第十七頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒病原體小而纖細的螺旋狀微生物長5～20μm，粗細<0.2μm有6～12個規(guī)則的螺旋基本結構為一原生質的圓柱體，為兩層膜所圍繞行動緩慢而有規(guī)律

-圍繞其長軸旋轉中前后移動

-伸縮其圈間之距離而移動

-全身彎曲如蛇行第十八頁，共一百頁，2022年，8月28日病原學檢查原理：一期、二期梅毒時，取硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損部位組織液或淋巴結穿刺術得到的組織液，在暗視野顯微鏡下，光線從聚光器的邊緣斜射到涂片上的梅毒螺旋體而發(fā)出亮光，從而可根據(jù)其特殊形態(tài)和運動方式進行檢測。方法：病原學檢查的主要方法有暗視顯微鏡檢查、鍍銀染色法和直接熒光法第十九頁，共一百頁，2022年，8月28日病原學檢查的臨床意義病原學方法直接鏡檢到梅毒螺旋體，在臨床可確診梅毒，且具有快速、方便、易操作的特點。螺旋體檢查是診斷早期現(xiàn)癥梅毒的最佳方法，對于患者的早期診斷、及時治療、預后和盡早切斷傳染源都有十分重要的意義。如未見到梅毒螺旋體，并不能排除患梅毒的可能性，第二十頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒血清學檢測方法21第二十一頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒血清學檢測分類(1)非梅毒螺旋體抗原血清學試驗（非特異性梅毒抗體）(2)梅毒螺旋體抗原血清學試驗

（特異性梅毒抗體）兩類方法。問題1：為什么梅毒實驗室診斷需要兩類血清學檢測方法？第二十二頁，共一百頁，2022年，8月28日非梅毒螺旋體抗原血清學試驗原理梅毒螺旋體一旦感染人體，宿主迅速對螺旋體表面的脂質作出免應答，在3周-4周產(chǎn)生抗類脂抗原的抗體（反應素）?？贵w主要是IgM和IgG混合抗體。未經(jīng)治療的病人，其血清內(nèi)的反應素可長期存在。經(jīng)正規(guī)治療后，反應素可以逐漸減少至轉為陰性。問題2：臨床上非梅毒螺旋體抗原血清學試驗為什么有定性和定量兩種檢測方法

第二十三頁，共一百頁，2022年，8月28日非梅毒螺旋體抗原血清學原理所有非梅毒螺旋體抗原血清試驗的抗原基本成分都是一樣方法包括：（1）快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗(RPR)

（2）甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）（3）性病研究實驗室試驗(VDRL)等?；境煞质切牧字蚜字湍懝檀伎乖贵w結合形成復合物，凝集成網(wǎng)狀沉淀顆粒被肉眼所見上述方法的敏感性和特異性都基本相似第二十四頁，共一百頁，2022年，8月28日非梅毒螺旋體抗原血清學原理VDRL試驗→USR→RPR/TRUSTVDRL試驗抗原組成：0.03%心磷脂0.21%卵磷脂0.90%膽固醇抗原需新鮮配制不能保存待檢血清需滅活目前主要用于腦脊液檢查顯微鏡觀測結果USR試驗是VDRL試驗的改良抗原組成：同VDRL，另含（1）乙二胺四醋酸(EDTA)使抗原可長期保存，能維持一年；（2）含有氯化膽堿對血清能起到化學滅活的作用不必加熱滅活（3）制成試劑盒使用方便第二十五頁，共一百頁，2022年，8月28日RPR試驗在USR試劑成分的基礎上加入黑色碳顆粒作為沉淀的指示物用白色的硬紙片替代玻片血清不需要滅活不需要顯微鏡觀測結果可作定量試驗有現(xiàn)成的試劑盒攜帶方便操作簡單價格便宜非梅毒螺旋體抗原血清學原理TRUST其原理和成分與RPR試驗相同用紅色的甲苯胺紅替代了碳顆粒其余的特點均與RPR相同第二十六頁，共一百頁，2022年，8月28日非梅毒螺旋體抗原血清學試驗原理示意圖第二十七頁，共一百頁，2022年，8月28日非梅毒螺旋體抗原血清學試驗操作要點1、儀器：水平旋轉儀。2、定性試驗加樣：吸取0.05mL血清(漿)放在卡片圈中，并均勻地涂布在整個圈內(nèi)加抗原：將抗原輕輕搖勻，用9號針頭加1滴抗原反應：將卡片置水平旋轉儀旋轉8分鐘，立即在亮光下觀察結果3、定量試驗稀釋夜準備：在圈內(nèi)加入50uL生理鹽水（根據(jù)需要確定稀釋度），勿將鹽水涂開。加樣：吸取50uL血清（漿）與各圈中鹽水作系列稀釋，并涂布整個圈內(nèi)。下同定性試驗。第二十八頁，共一百頁，2022年，8月28日RPRTRUSTVDRL非梅毒螺旋體抗原血清學試驗結果判斷滴度：出現(xiàn)凝集反應的血清最高稀釋倍數(shù)。第二十九頁，共一百頁，2022年，8月28日非梅毒螺旋體抗原血清學試驗臨床意義早期梅毒（一期、二期）經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒治療后3個月，VDRL試驗抗體滴度下降2個稀釋度，6個月下降4個稀釋度。一期梅毒1年后轉為陰性二期梅毒2年后轉為陰性。晚期梅毒治療后血清滴度下降緩慢，2年后約50%病人血清反應仍為陽性。第三十頁，共一百頁，2022年，8月28日非梅毒螺旋體抗原血清試驗臨床意義非梅毒螺旋體抗原血清試驗方法簡單、快速、敏感性和特異性較好。適用于大量人群的篩查。早期梅毒硬下疳出現(xiàn)1周-2周后，血清可呈陽性。經(jīng)治療后血清滴度可下降并陰性，故可作為療效觀察、判愈、復發(fā)或再感染的指征。第三十一頁，共一百頁，2022年，8月28日非梅毒螺旋體抗原血清學試驗特點非梅毒患者的梅毒血清反應呈陽性，此現(xiàn)象稱為梅毒血清反應假陽性。①技術性假陽性反應由于標本的保存不當（如細胞污染或溶血）、試劑質量差或過期、或實驗室操作錯誤所造成。②生物學假陽性反應是由于患者有其他疾病或生理狀態(tài)發(fā)生變化，使梅毒血清試驗出現(xiàn)陽性

第三十二頁，共一百頁，2022年，8月28日非梅毒螺旋體抗原血清學試驗特點梅毒假陽性反應的處理技術性假陽性反應一般是由于操作錯誤引起的假陽性反應，經(jīng)過重復試驗即可除外。對急性生物學假陽性反應，應做TPHA（TPPA）等試驗進行排除。第三十三頁，共一百頁，2022年，8月28日非梅毒螺旋體抗原血清學試驗特點前帶現(xiàn)象指非梅毒螺旋體抗原血清試驗中，有時血清中存在高濃度的抗體時出現(xiàn)的弱陽性、不典型或陰性反應的結果，而臨床上又象二期梅毒，此時將血清稀釋后再進行試驗，出現(xiàn)了陽性的結果，該現(xiàn)象稱為前帶現(xiàn)象。第三十四頁，共一百頁，2022年，8月28日非梅毒螺旋體抗原血清學試驗特點耐血清性（血清固定）指經(jīng)抗梅毒治療后，非梅毒螺旋體抗原血清試驗在一定時期內(nèi)不陰轉。早期的耐血清性常與治療量不足或不規(guī)則治療、復發(fā)、再感染或有神經(jīng)系統(tǒng)梅毒等因素有關。第三十五頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒螺旋體抗原血清學試驗第三十六頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒螺旋體抗原血清學試驗原理梅毒螺旋體特異蛋為抗原，檢測梅毒患者血中特異性抗梅毒螺旋體抗原的抗體。感染梅毒螺旋體后，一旦梅毒螺旋體抗體試驗呈陽性，則患者終身陽性。問題3：梅毒螺旋體抗原血清學試驗的定量試驗在梅毒診療中有意義嗎？第三十七頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒螺旋體抗原血清學試驗方法梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(TPPA)

梅毒螺旋體血球凝集試驗(TPHA)

梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）

梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測(RT)

熒光螺旋體抗體吸收試驗（FTA-ABS）

化學發(fā)光免疫分析法（CLIA）

梅毒螺旋體蛋白印跡試驗（WB）第三十八頁，共一百頁，2022年，8月28日TPPA/TPHATPPA試驗原理與TPHA試驗基本相同。TPPA試驗用梅毒螺旋體致敏明膠顆粒替代TPHA試驗中致敏羊紅細胞，此致敏顆粒與人血清中的抗梅毒螺旋體抗體結合，產(chǎn)生可見的凝集反應，具有較高的敏感性和特異性。TPPA是目前WHO認可的梅毒抗原血清學試驗的“金標準”，常用于新方法、新試劑評價的參照標準。第三十九頁，共一百頁，2022年，8月28日+SheepredcellT.pallidum+SensitisedcellSensitisedcellSpecificAntibodyHemagglutinationTPPA(TPHA)試驗原理示意圖第四十頁，共一百頁，2022年，8月28日FTA-ABS試驗

FTA-ABS試驗原理是將有完整形態(tài)的梅毒螺旋體作為抗原，加上經(jīng)吸收劑（用Reiter螺旋體制備而成）吸收過的梅毒患者血清形成抗原抗體復合物，再加入熒光素（FTIC）標記的抗人免疫球蛋白，與抗梅毒螺旋體抗體結合，形成熒光的抗原抗體復合物。在熒光顯微鏡下，螺旋體顯出蘋果綠色的熒光，即為陽性反應。FTA-ABS試驗是檢測梅毒的經(jīng)典“金標準”試驗。但由于操作比較步驟比較繁瑣，所以不適用于常規(guī)實驗室檢測。第四十一頁，共一百頁，2022年，8月28日FTA-ABS試驗示意圖及結果第四十二頁，共一百頁，2022年，8月28日TP—ELISA試驗原理

TP—ELISA試驗是用重組梅毒螺旋體抗原包被固相板條，加上梅毒血清和單克隆抗體酶標記物，形成抗原抗體復合物與酶標記物結合，用酶聯(lián)檢測儀判定試驗陽性反應。本法可用于大樣本血清檢測。第四十三頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒免疫層析快速檢測方法第四十四頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒螺旋體抗原血清試驗的臨床意義一般情況下，一旦梅毒患者梅毒螺旋體抗原血清試驗呈陽性，即使經(jīng)過正規(guī)有效治療治，仍將終身陽性。問題4：梅毒實驗室確證試驗的意義是什么？第四十五頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒螺旋體抗原血清試驗的臨床意義特異性較高，但報道亦有1%的生物學假陽性發(fā)生。如系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清可使FTA—ABS試驗呈假陽性反應，但大多數(shù)病例中螺旋體呈串株狀熒光。傳染性單核細胞增多癥，可能由于嗜異性抗體所致，可使TPHA呈假陽性。麻風患者也可使特異試驗呈陽性。第四十六頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒螺旋體抗原血清試驗臨床意義作為非梅毒螺旋體抗原血清試驗(如RPR等)初篩陽性標本的確證試驗。TPPA等試驗陽性不能作為療效觀察的指標。TPPA等陽性不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，應結合非梅毒螺旋體抗原血清試驗結果進行診斷。第四十七頁，共一百頁，2022年，8月28日非梅毒螺旋體抗原血清試驗結果解釋示意圖早期晚期一期二期早期潛伏晚期潛伏三期

治療前治療后

陽性陰性第四十八頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒螺旋體抗原血清試驗結果解釋示意圖早期一期二期早期潛伏晚期晚期潛伏三期

治療前治療后陽性陰性第四十九頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒血清學試驗結果的臨床意義總匯RPRTPPA

TRUSTTP-ELISA臨床意義VDRLTP-RT

_

_

排除梅毒

（一期梅毒的早期）

+

+

現(xiàn)癥梅毒

(梅毒孕婦所生的嬰兒除外)

+ -生物學假陽性

-+

早期梅毒經(jīng)治療后

（早早期梅毒）第五十頁，共一百頁，2022年，8月28日先天梅毒的實驗室診斷方法依據(jù)實驗指標診斷查到螺旋體其抗心磷脂抗體滴度持續(xù)上升其抗心磷脂抗體滴度高于其母親四倍（2個稀釋滴度）檢測抗梅毒的IgM特異性抗體陽性隨訪18個月觀察抗體的變化第五十一頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒實驗室診斷檢測策略新進展

-全國梅毒檢測技術規(guī)范簡介第五十二頁，共一百頁，2022年，8月28日背景介紹近年來我國嚴峻的梅毒流行形勢今年衛(wèi)生部出臺梅毒10年控制規(guī)劃全國梅毒檢測技術規(guī)范（討論稿）梅毒實驗室檢測不規(guī)范現(xiàn)狀梅毒血清學檢測新方法、新技術的應用性評估第五十三頁，共一百頁，2022年，8月28日2010年梅毒螺旋體抗原血清學檢測試劑評估結果

（以TPPA作為參照標準）方法試劑簡稱

特異性(%)敏感性（%）ELISA廈門英科100.098.2珠海麗珠100.096.5北京萬泰100.096.5濰坊三維100.096.5北京科衛(wèi)100.095.6北京華大99.599.1上?？迫A99.598.5北京金豪99.197.4化學發(fā)光北京科美100.097.3快速試劑廈門英科99.493.9杭州艾康94.796.5北京萬泰94.793.9北京藍十字93.481.6第五十四頁，共一百頁，2022年，8月28日2010年非梅毒梅毒螺旋體抗原

血清學檢測試劑評估結果

試劑簡稱

敏感性(%)特異性(%)

北京萬泰TRUST97.888.0上海榮盛TRUST96.797.7上?？迫ARPR96.790.3鄭州安圖TRUST92.497.2北京金豪TRUST92.492.6英科新創(chuàng)TRUST91.398.6北京科衛(wèi)RPR89.187.0表3非梅毒螺旋體抗原血清學試驗用試劑評估結果第五十五頁，共一百頁，2022年，8月28日

梅毒實驗室檢測策略思考56非梅毒螺旋體抗原血清學試驗梅毒螺旋體抗原血清學試驗排除試驗假陽性確證梅毒螺旋體現(xiàn)癥感染排除治愈的既往感染者確證梅毒螺旋體現(xiàn)癥感染？RPR：初篩試驗TPPA：確證試驗第五十六頁，共一百頁，2022年，8月28日梅毒實驗室檢測策略選擇根據(jù)目的選擇檢測方法及檢測策略。其中梅毒螺旋體抗原血清學試驗方法選用原則：

臨床檢測：推薦選用“金標準”方法，如TPPA等

血液篩查：可選用快速、簡便的方法，

如免疫層析快速檢測、ELISA等

流行病調查：可選用大通量的檢測方法，如ELISA等可采用任何一類敏感性高的梅毒血清學檢測方法作為篩查試驗臨床上采用兩種方法同時檢測，可以快速診斷梅毒，使病人能夠得到及時治療。策略一采用任何一種非梅毒螺旋體抗原血清試驗對樣品進行初篩策略二采用任何一種梅毒螺旋體抗原血清試驗對樣品進行初篩策略三？同時采用任何一種梅毒螺旋體抗原血清試驗和任何一種非梅毒螺旋體抗原血清試驗對樣品進行檢測第五十七頁，共一百頁，2022年，8月28日二、淋病第五十八頁，共一百頁，2022年，8月28日1995-2010年全國淋病疫情趨勢男女性別比：3.86︰1第五十九頁，共一百頁，2022年，8月28日概況-病原學淋病是指由淋病奈瑟菌(Neisseriagonorrhoeae,簡稱淋球菌)引起的各種化膿性感染，是一種經(jīng)典的常見的性傳播疾病.淋球菌為革蘭陰性雙球菌，大小約0.6~0.8μm。通常成對生長，兩菌接觸面平坦。淋球菌與奈瑟屬的另一種致病菌腦膜炎球菌及其他共棲奈瑟菌在生物學上有許多相似性，可通過生化特性加以鑒別。發(fā)性感染部位主要為男性尿道或女性宮頸管內(nèi)膜第六十頁，共一百頁，2022年，8月28日標本的采集

取材部位依據(jù)年齡性別性接觸方式臨床表現(xiàn)取材拭子種類藻酸鈣拭子普通棉拭子滌綸拭子第六十一頁，共一百頁，2022年，8月28日取材部位男性異性戀者:采集尿道標本，有口淫史者加取咽部標本；同性戀者:采集尿道、直腸及咽部標本.女性

采集宮頸標本，必要時從尿道、直腸、咽部、前庭大腺和尿道旁腺取材.幼女幼女和/或處女膜未破的感染者標本：采集陰道分泌物新生兒眼炎患者

采集眼結膜分泌物

第六十二頁，共一百頁，2022年，8月28日取材方法尿道男性患者用手指從陰莖根部向尿道口方向擠壓，有癥狀患者可擠出膿液，用取樣拭子蘸取膿液作涂片或培養(yǎng)。對擠壓后無明顯分泌物時，采用男用取材拭子插入尿道2～3cm，稍用力轉動，保留數(shù)秒鐘再取出，以采集到粘膜上皮細胞。女性患者

可抵著恥骨聯(lián)合輕輕按摩尿道口，擠壓出分泌物。如果無明顯分泌物，可用同男性相似的上述方法取材。第六十三頁，共一百頁，2022年，8月28日取材方法宮頸避免使用防腐劑和潤滑劑，因為這些物質對淋球菌有抑制作用。仔細檢查陰道壁和宮頸，如果宮頸口外面的分泌物較多，先用無菌棉拭清除過多的宮頸粘液。將一取樣拭子插入宮頸管內(nèi)1～2cm，稍用力轉動，保留10～30秒后取出。眼部用男性采樣拭子在眼結膜處蘸取分泌物或輕繞眼結膜。直腸將取樣拭子插入肛門2～3cm，從緊靠肛環(huán)邊的隱窩中取材。避免接觸糞便。陰道青春期前女孩可采集陰道標本。將取樣拭子置于陰道后穹窿10～15秒，采集陰道分泌物。咽部從咽后壁或扁桃體隱窩取材第六十四頁，共一百頁，2022年，8月28日常用淋病檢測方法直接顯微鏡檢查分離培養(yǎng)淋球菌第六十五頁，共一百頁，2022年，8月28日直接顯微鏡檢查原理：男性淋菌性尿道炎患者常有大量黃白色膿性分泌物，其多形核白細胞內(nèi)可找到革蘭染色陰性的雙球菌。方法：革蘭染色為一傳統(tǒng)方法，革蘭染色將菌分為二大類，即染成紫色的革蘭陽性菌及染成紅色的革蘭陰性菌。第六十六頁，共一百頁，2022年，8月28日直接顯微鏡檢查的臨床意義男性淋菌性尿道炎的尿道標本

敏感性及特異性可高達95%～99%，具診斷價值。宮頸標本、無癥狀男性尿拭子及取自直腸的涂片時敏感性僅40～70%。不推薦直接顯微鏡檢查診斷直腸和咽部淋球菌感染。亦不能用于療后判愈。如果在多形核細胞外見到形態(tài)典型的革蘭陰性雙球菌，需做培養(yǎng)進行確證。第六十七頁，共一百頁，2022年，8月28日淋球菌培養(yǎng)1．原理：淋球菌在適宜的培養(yǎng)基上可生長出特征性的菌落，根據(jù)菌落大小、形態(tài)、光澤、邊緣、顏色等情況，可以作為淋球菌的鑒定依據(jù)之一。2、方法特點：敏感性81~100%。特異性100%

第六十八頁，共一百頁，2022年，8月28日淋球菌培養(yǎng)培養(yǎng)條件：35℃～36℃，含5%～10%CO2，濕潤（70%濕度）的環(huán)境。CO2環(huán)境可由CO2培養(yǎng)箱、CO2產(chǎn)氣袋及燭缸提供。使用燭缸時，應使用白色、無芳香味的無毒性蠟燭。在燭缸底部放些浸水棉球以保持一定的濕度。培養(yǎng)時間：24~48小時第六十九頁，共一百頁，2022年，8月28日淋球菌的初步鑒定初步鑒定淋球菌的依據(jù)菌落特征氧化酶試驗革蘭染色第七十頁，共一百頁，2022年，8月28日淋球菌的鑒定試驗菌落形態(tài)淋球菌樣革蘭染色革蘭陰性雙球菌氧化酶試驗陽性糖發(fā)酵試驗G+L-M-S-第七十一頁，共一百頁，2022年，8月28日糖發(fā)酵試驗糖發(fā)酵試驗檢測奈瑟球菌分解特定糖類(葡萄糖、麥芽糖、乳糖及蔗糖)產(chǎn)酸的能力。根據(jù)淋球菌僅分解葡萄糖，腦膜炎球菌分解葡萄糖和麥芽糖，乳屑奈瑟球菌分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖或不分解這些糖類，可將淋球菌與可能在淋球菌選擇性培養(yǎng)基上分離出的其他奈瑟球菌加以鑒別。第七十二頁，共一百頁，2022年，8月28日糖發(fā)酵試驗-奈瑟球菌屬的糖發(fā)酵特征細菌葡萄糖麥芽糖乳糖蔗糖淋球菌+---腦膜炎球菌++--乳酰胺奈瑟菌+++-灰色奈瑟球菌----布蘭漢卡他球菌----第七十三頁，共一百頁，2022年，8月28日淋球菌培養(yǎng)的臨床意義培養(yǎng)法為診斷淋病的金標準.用于女性感染者、亞臨床感染者、以及來自直腸和咽部的感染的確診試驗。第七十四頁，共一百頁，2022年，8月28日

生殖道沙眼衣原體感染第七十五頁，共一百頁，2022年，8月28日生殖道沙眼衣原體感染簡介50年代80年代梅毒淋病軟下疳性病性淋巴肉芽腫梅毒淋病軟下疳性病性淋巴肉芽腫非淋菌性尿道炎生殖器皰疹尖銳濕疣HIV/AIDS沙眼衣原體:30%～50%生殖支原體:10%～40%其它:20%～30%第七十六頁，共一百頁，2022年，8月28日生殖道沙眼衣原體感染簡介50年代80年代梅毒淋病軟下疳性病性淋巴肉芽腫梅毒淋病軟下疳性病性淋巴肉芽腫非淋菌性尿道炎生殖器皰疹尖銳濕疣HIV/AIDS2007年后梅毒淋病生殖道沙眼衣原體感染生殖器皰疹尖銳濕疣HIV/AIDS第七十七頁，共一百頁，2022年，8月28日生殖道沙眼衣原體感染－病例定義確診病例

同時符合1（流行病學史）（可缺）和2（臨床表現(xiàn)）和3（實驗室檢查）病原攜帶者

符合3（實驗室檢查）且無癥狀78第七十八頁，共一百頁，2022年，8月28日生殖道沙眼衣原體感染特點高流行無癥狀感染嚴重并發(fā)癥依賴實驗室診斷病原體檢測:鏡檢,培養(yǎng)抗原檢測:快速,EIA核酸檢測:PCR79第七十九頁，共一百頁，2022年，8月28日生殖道沙眼衣原體感染特點新發(fā)感染每年以10％的速度遞增新發(fā)病例300萬/年，治療費20億美元/年中國至今無確切病例報告數(shù)：

部分地區(qū)調查：MSM：28%FSW:58%全國105哨點監(jiān)測：2008：27112 2009：24821 上升9.23%80第八十頁，共一百頁，2022年，8月28日生殖道沙眼衣原體感染特點感染后：約70％女性和50％男性為無癥狀86％的女性和55％的男性感染者持續(xù)感染時間為1年以上。不尋求治療…….81第八十一頁，共一百頁，2022年，8月28日生殖道沙眼衣原體感染特點近年來研究：

引起活動性關節(jié)炎，與動脈硬化、冠心病有關與HIV感染的促進作用沙眼衣原體感染已成為全世界范圍的公共衛(wèi)生問題!82第八十二頁，共一百頁，2022年，8月28日常用生殖道衣原體感染檢測方法抗原檢測

酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）免疫層析快速檢測核酸檢測第八十三頁，共一百頁，2022年，8月28日酶聯(lián)免疫吸附試驗1、原理：于衣原體特異性單克隆抗體形成抗原抗體復合物，通過酶聯(lián)顯色反應檢測衣原體抗原。2、方法特點敏感性：79－97％特異性:97－99％試驗結果陰性時，不能完全排除沙眼衣原體感染，有可能是沙眼衣原體數(shù)量不足或標本采集不當?shù)木壒实诎耸捻?，共一百頁?022年，8月28日結果判讀客觀性強，適宜于大樣本沙眼衣原體感染的檢測。在沙眼衣原體高流行率的人群臨床和健康體檢；低流行率（小于5%）的人群中應用時，結果解釋應慎重。酶聯(lián)免疫吸附試驗臨床意義第八十五頁，共一百頁，2022年，8月28日抗原快速檢測1、原理：利用免疫層析法原理，采用膠體金標記的沙眼衣原體抗體濾紙條或卡，快速檢測標本中的沙眼衣原體抗原。2、方法特點簡易，方便，快速，尤其適用于基層單位標本中需要足夠數(shù)量的沙眼衣原體抗原，否則有假陰性結果第八十六頁，共一百頁，2022年，8月28日抗原快速檢測臨床意義該方法主要適用于女性患者宮頸標本的檢測，敏感性較低。該法快速、簡便，無需特殊儀器，因此，較適合基層實驗室開展。第八十七頁，共一百頁，2022年，8月28日核酸擴增檢測1、原理：核酸擴增技術是通過擴增沙眼衣原體的多拷貝基因（如隱蔽