標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 34746-2017 犬細(xì)小病毒基因分型方法》是一項(xiàng)國家標(biāo)準(zhǔn),旨在提供一套科學(xué)、準(zhǔn)確的方法來對犬細(xì)小病毒(Canine Parvovirus, CPV)進(jìn)行基因分型。該標(biāo)準(zhǔn)適用于獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室及研究機(jī)構(gòu)對于CPV的分子流行病學(xué)調(diào)查以及疫苗株的選擇與評估等方面的工作。

根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn),首先需要從疑似感染了CPV的犬只身上采集樣本,如糞便或腸道組織等。接著采用PCR技術(shù)擴(kuò)增出特定區(qū)域的DNA片段,這一步驟是基于已知的CPV基因序列設(shè)計(jì)引物完成的。然后通過凝膠電泳分析擴(kuò)增產(chǎn)物,并選擇合適大小的目標(biāo)片段用于后續(xù)測序。最后,將獲得的序列信息與國際上公認(rèn)的參考序列對比,從而確定樣品中所含有的CPV類型。


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....

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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2017-11-01 頒布
  • 2018-05-01 實(shí)施
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文檔簡介

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T34746—2017

犬細(xì)小病毒基因分型方法

Genotypingmethodofcanineparvovirus

2017-11-01發(fā)布2018-05-01實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T34746—2017

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國動(dòng)物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAC/TC181)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位揚(yáng)州大學(xué)江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院中國動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心中華人民共和

:、、、

國深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人劉文博張小榮王海燕徐向明邵衛(wèi)星王濤劉靜詹愛軍

:、、、、、、、。

GB/T34746—2017

犬細(xì)小病毒基因分型方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了犬細(xì)小病毒caninearvovirusCPV基因分型方法要求

(p,)。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于犬細(xì)小病毒的病原分型犬細(xì)小病毒感染疫情監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查

、。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

犬細(xì)小病毒

CPV:(canineparvovirus)

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

PCR:(polymerasechainreaction)

脫氧核糖核酸

DNA:(deoxyribonucleicacid)

核糖核酸

RNA:(ribonucleicacid)

磷酸鹽緩沖液

PBS:(phosphate-bufferedsalinebuffer)

乙二胺四乙酸

EDTA:(ethylenediaminetetraaceticacid)

Taq酶Taq脫氧核糖核酸聚合酶Taq

:(DNApolymerase)

三羥甲基氨基甲烷

Tris:[tris(hydroxymethyl)aminomethane]

脫氧核糖核苷三磷酸混合物

dNTPs:(deoxyribonucleotidetriphosphatesmixture)

脫氧腺苷三磷酸

dATP:(deoxyadenosinetriphosphate)

脫氧鳥苷三磷酸

dGTP:(deoxyguanosinetriphosphate)

脫氧胞苷三磷酸

dCTP:(deoxycytidinetriphosphate)

脫氧胸苷三磷酸

dTTP:(deoxythymidinetriphosphate)

核糖核酸酶

RNase:(ribonuclease)

4儀器

41擴(kuò)增儀

.PCR。

42高速臺式冷凍離心機(jī)可控溫至離心速度可達(dá)以上

.:4℃、12000r/min。

43組織研磨器或者研缽

.。

44及冰箱和以下超低溫冰箱

.2℃~8℃-20℃-70℃。

45核酸電泳儀和水平電泳裝置

.。

46微量移液器量程分別和

.0.2μL~2μL、1μL~10μL、10μL~100μL、20μL~200μL

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