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第2課時基因工程的原理和技術1.判斷正誤(1)若目的基因的堿基序列未知,可用化學合成法合成目的基因。(×)(2)利用PCR擴增目的基因時,需要已有的目的基因做模板。(√)(3)構建重組DNA時需要用的工具酶有:限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶、質(zhì)粒。(×)(4)可用質(zhì)粒上的標記基因篩選導入重組DNA的受體細胞。(√)2.要使目的基因與對應的載體重組,所需的兩種酶是()①限制性核酸內(nèi)切酶②DNA連接酶③解旋酶④還原酶A.①②B.③④C.①④D.②③解析目的基因與對應的載體重組時,首先需要用同一種限制性核酸內(nèi)切酶,切割出相同的末端,再依靠DNA連接酶對目的基因和載體進行“縫合”形成重組DNA分子。答案A3.將目的基因?qū)胛⑸锛毎?,要給予一定處理和適宜件,下列敘述錯誤的是()A.CaCl2處理 B.酒精處理C.溫度、pH影響導入 D.增加細胞壁通透性解析將目的基因?qū)胛⑸锛毎埃寐然}(CaCl2)處理微生物,增加其細胞壁的通透性,當然也受溫度和pH影響,而酒精對細胞則有毒害作用。答案B4.如圖為用于基因工程的一個質(zhì)粒示意圖。用EcoRⅠ限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和該質(zhì)粒,再用DNA連接酶連接形成重組質(zhì)粒,然后導入大腸桿菌,最后將大腸桿菌放在四種培養(yǎng)基中培養(yǎng):a—無抗生素的培養(yǎng)基,b—含四環(huán)素的培養(yǎng)基,c—含氨芐青霉素的培養(yǎng)基,d—含四環(huán)素和氨芐青霉素的培養(yǎng)基。含重組質(zhì)粒的大腸桿菌能生長的是()A.a(chǎn)B.a(chǎn)和cC.a(chǎn)和bD.b和c解析據(jù)圖,EcoRⅠ限制性核酸內(nèi)切酶的切點位于四環(huán)素抗性基因的內(nèi)部,用該酶切割質(zhì)粒則會損壞四環(huán)素抗性基因的結構,從而導致含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌不具有四環(huán)素抗性。答案B5.在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kanr)常作為標記基因,只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下圖為獲得抗蟲棉的技術流程。請據(jù)圖回答:(1)A過程需要的酶有________________________________________________________________。(2)B過程及其結果體現(xiàn)了質(zhì)粒作為載體必須具備的兩個條件是________________________________________________________。(3)C過程的培養(yǎng)基中除含有必要營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外,還必須加入______________________________________________________。(4)在D過程中,抗蟲基因遺傳信息的傳遞過程是_________________________________________________________________。解析(1)將目的基因和質(zhì)粒結合形成重組質(zhì)粒的過程需要用同一種限制性核酸內(nèi)切酶,連接時還需要DNA連接酶。(2)作為基因工程的載體,必須具備三個條件:①在宿主細胞中能穩(wěn)定保存并能大量復制;②有多個限制性核酸內(nèi)切酶切點,而且每種酶的切點最好只有一個;③有一定的標記基因,便于篩選。題目中能體現(xiàn)的是①③。(3)由題可知,我們需要的植株是含有抗蟲基因的植株,因此要進行篩選,含有抗蟲基因的植株也一定含有卡那霉素抗性基因,所以要利用卡那霉素進行篩選。(4)抗蟲基因最終要表現(xiàn)出抗蟲的性狀就必須表達,即通過轉(zhuǎn)錄和翻譯來實現(xiàn)。

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