醫(yī)院感染監(jiān)測標本采集的標準操作

環(huán)境衛(wèi)生學標本采集操作規(guī)范

感染管理科

醫(yī)院感染病例監(jiān)測消毒滅菌效果監(jiān)測抗菌藥物及耐藥菌監(jiān)測消毒藥械一次性醫(yī)療用品及其他監(jiān)測環(huán)境衛(wèi)生學監(jiān)測醫(yī)院感染監(jiān)測醫(yī)護人員手環(huán)境衛(wèi)生學監(jiān)測范圍空氣物體表面醫(yī)護人員手滅菌后物品使用中的消毒劑及滅菌劑新標準類別范圍空氣cfu/皿物體表面cfu/cm2Ⅰ層流潔凈手術(shù)室、層流潔凈病房≤4（30min）≤5Ⅱ非潔凈手術(shù)部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房；1導管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重癥監(jiān)護病房、血液病病區(qū)等≤4（15min）≤5Ⅲ兒科病房、2母嬰同室、消毒供應中心、血液透析中心（室）；其他普通住院病區(qū)等≤4（5min）≤10Ⅳ3普通門（急）診及其檢查（婦產(chǎn)科檢查室、人流室）、治療（注射、換藥等）；輸血科、感染性疾病科門診和病區(qū)≤4（5min）≤10衛(wèi)生手清毒監(jiān)測的細菌菌落總數(shù)應≤10cfu/㎝2外科手消毒監(jiān)測的細菌菌落總數(shù)應≤5cfu/㎝2

不能檢出致病性微生物手的消毒效果監(jiān)測醫(yī)院空氣消毒與監(jiān)測采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間在潔凈系統(tǒng)自凈后與從事醫(yī)療活動前采樣未采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間在消毒或規(guī)定的通風換氣后與從事醫(yī)療活動前采樣懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時采樣空氣消毒效果監(jiān)測采樣時間空氣消毒效果監(jiān)測監(jiān)測方法潔凈手術(shù)部（室）及其他潔凈用房可選擇沉降法或浮游菌法進行監(jiān)測。浮游菌法可選擇六級撞擊式空氣采樣器或其他經(jīng)驗證的空氣采樣器。監(jiān)測時將采樣器置于室內(nèi)中央0.8m-1.5m高度，按采樣器使用說明書操作，每次采樣時間不應超過30min。房間面積＞10m2者，每增加10m2增設一個采樣點。空氣消毒效果監(jiān)測未采用潔凈技術(shù)凈化空氣的房間采用沉降法：室內(nèi)面積≤30m2，設內(nèi)、中、外對角線三點，內(nèi)、外點應距墻壁1m處；室內(nèi)面積＞30m2，設四角及中央五點，四角的布點位置應距墻壁1m處。空氣消毒效果監(jiān)測將普通營養(yǎng)瓊脂平皿（Φ90mm）放置各采樣點，采樣高度為距地面0.8m-1.5m；采樣時將平皿蓋打開，扣放于平皿旁，暴露規(guī)定時間后蓋上平皿蓋及時送檢?！淌直墼竭^平皿×皿蓋朝上×√注意事項1、采樣前，關(guān)好門、窗，在無人走動的情況下，靜止10分鐘進行采樣2、※放置平板時，放置順序是從里往外放，收起的時候是從外往里收，這樣避免人員走動引起空氣中漂浮粒子震蕩引起結(jié)果偏高。潔凈室空氣消毒效果監(jiān)測監(jiān)測狀態(tài)▲▲⒒醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)規(guī)范-GB2002物體表面消毒效果監(jiān)測采樣方法用5cmx5cm滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用浸有生理鹽水的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動棉拭子，連續(xù)采樣4個規(guī)格板面積被采表面＜100cm2，取全部表面被采面積≥100cm2，取100cm2物體表面消毒效果監(jiān)測物體表面消毒效果監(jiān)測采樣方法剪去手接觸部分，將棉拭子放入裝有10ml無菌檢驗用洗脫液的試管中送檢。門把手等小型物體則采用棉拭子直接涂抹物體表面采樣。采樣物體表面有消毒劑殘留時，采樣液應含相應中和劑。硫代硫酸鈉（0.1%~1.0%）物體表面消毒效果監(jiān)測結(jié)果判定潔凈手術(shù)部、其他潔凈場所，非潔凈手術(shù)部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房、導管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重癥監(jiān)護病房、血液病病區(qū)等；物體表面細菌菌落總數(shù)≤5cfu/cm2兒科病房、母嬰同室、婦產(chǎn)科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應中心、血液透析中心（室）、急診室、化驗室、各類普通病室、感染疾病科門診及其病房等；物體表面細菌菌落總數(shù)≤10cfu/cm2醫(yī)護人員手消毒效果監(jiān)測醫(yī)護人員手消毒效果監(jiān)測采樣時間

在接觸患者、進行診療活動前采樣。醫(yī)護人員手消毒效果監(jiān)測采樣方法

被檢者五指并攏，用浸有含相應中和劑硫代硫酸鈉（0.1%~1.0%）的無菌洗脫液浸濕的棉拭子在雙手指曲面從指端到指根再到指端為往返1次，共往返涂擦2次，一只手涂擦面積約30cm2，涂擦過程中同時轉(zhuǎn)動棉拭子將棉拭子接觸操作者的部分剪去，投入10ml含相應中和劑的無菌洗脫液試管內(nèi)，及時送檢醫(yī)護人員手消毒效果監(jiān)測衛(wèi)生手清毒監(jiān)測的細菌菌落總數(shù)應≤10cfu/㎝2外科手消毒監(jiān)測的細菌菌落總數(shù)應≤5cfu/㎝2

不能檢出致病性微生物手的消毒效果監(jiān)測使用中的消毒劑及滅菌劑監(jiān)測采樣方法：用無菌注射器按無菌操作方法吸取1.0mL被檢消毒液，加入9mL中和劑中混勻使用中的消毒劑及滅菌劑監(jiān)測監(jiān)測頻率：消毒劑每季度監(jiān)測一次滅菌劑每月監(jiān)測一次結(jié)果判斷：使用中滅菌用消毒液：無菌生長使用中皮膚黏膜消毒液染菌量≤10cfu/ml其他使用中消毒液染菌量≤100cfu/ml注意事項：采樣后4h內(nèi)檢測

1.采樣時間:采取更換前使用中的消毒劑與無菌器械保存液。2.采樣量及方法:在無菌條件下，用無菌吸管吸取1ml被檢樣液，加入9ml稀釋液中混均，對于醇類與酚類消毒劑，稀釋液用普通營養(yǎng)肉湯即可；對于含氯消毒劑、含碘消毒劑、過氧化物消毒劑，需在肉湯中加入0.1%硫代硫酸鈉；對于洗必泰、季銨鹽類消毒劑，需在肉湯中加入3%吐溫80和0.3%卵磷脂；對于醛類消毒劑，需在肉湯中加入0.3%甘氨酸；對于含有表面活性劑的各種復方消毒劑，需在肉湯中加入3%吐溫80，以中和被檢樣液的殘效作用。使用中的消毒劑及滅菌劑監(jiān)測3.細菌菌落總數(shù)檢查:采樣管于混旋儀上混勻2分鐘，取1ml采樣液放入無菌平皿內(nèi)，用普通營養(yǎng)瓊脂作傾注培養(yǎng)，每份樣品同時做2個平行樣，一平板置于28℃培養(yǎng)7天，觀察霉菌生長情況；另一個平板置于36±1℃培養(yǎng)72小時計數(shù)菌落數(shù)。4.結(jié)果計算：消毒液染菌量（cfu/ml）=平板上的菌落平均數(shù)×10×稀釋倍數(shù)（常為1）。使用中的消毒劑及滅菌劑監(jiān)測5.結(jié)果分析:平板上有菌生長,證明被檢樣液有殘存活菌,若每個平板菌落數(shù)在10個以下,仍可用于消毒處理(但不能用于滅菌),若每個平板菌落數(shù)超過10個,說明每毫升被檢樣液含菌量已超過100個,即不宜再用。6.判斷標準6.1使用中滅菌用消毒液：無菌生長6.2使用中皮膚黏膜消毒液染菌量≤10cfu/ml6.3其他使用中消毒液染菌量≤100cfu/ml使用中的消毒劑及滅菌劑監(jiān)測1環(huán)境衛(wèi)生學監(jiān)測23常見多重耐藥菌的監(jiān)測壓力蒸氣滅菌的生物學檢測壓力蒸氣滅菌的生物學檢測壓力蒸氣滅菌：其中生物指標為檢查滅菌效果的直接監(jiān)測指標。通常采用嗜熱脂肪芽胞桿菌(ATCC7953)作為觀察滅菌效果的指示菌。生物指示劑：嗜熱脂肪芽孢桿菌，定期監(jiān)測（每月一次）化學指示劑：變色的指示帶（每鍋監(jiān)測）壓力表定期檢測（每半年一次）安全閥檢測、校驗（每年一次）壓力蒸氣滅菌的生物學檢測培養(yǎng)方法：經(jīng)一個滅菌周期后，在無菌條件下取出標準試驗包的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，經(jīng)56℃±1℃培養(yǎng)7d（自含式生物指示物按產(chǎn)品說明書執(zhí)行），觀察培養(yǎng)結(jié)果；結(jié)果判定：陽性對照組培養(yǎng)陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，試驗組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格。陽性對照組培養(yǎng)陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，試驗組培養(yǎng)陽性，則滅菌不合格；同時應進一步鑒定試驗組陽性的細菌是否為指示菌或是污染所致。自含式生物批示物不需要做陰性對照；注意事項：監(jiān)測所用菌片應取得衛(wèi)生部消毒產(chǎn)品衛(wèi)生許可批件，并在有效期內(nèi)使用。過氧化氫低溫等離子滅菌、環(huán)氧乙烷氣體滅菌效果的監(jiān)測標準指示菌株：枯草桿菌黑色變種芽孢監(jiān)測方法：將常規(guī)生物測試包放在滅菌器最難滅菌的部位（整個裝載滅菌包的中心部位）。滅菌周期完成后應立即取出指示菌片接種于含有復方中和劑的0.5%的葡萄糖肉湯培養(yǎng)基管中，36℃±1℃培養(yǎng)7d（自含式生物指示物應遵循產(chǎn)品說明），觀察培養(yǎng)基顏色變化，同時設陽性對照；結(jié)果判定：陽性對照組培養(yǎng)陽性，試驗組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格。陽性對照組培養(yǎng)陽性，試驗組培養(yǎng)陽性，則滅菌不合格；同時應進一步鑒定試驗組陽性的細菌是否為指示菌或污染所致；注意事項：監(jiān)測所用菌片應取得衛(wèi)生部消毒產(chǎn)品衛(wèi)生許可批件，并在有效期內(nèi)使用。赤峰學院附屬醫(yī)院紅山院區(qū)2014年環(huán)境衛(wèi)生學監(jiān)測計劃1環(huán)境衛(wèi)生學監(jiān)測23常見多重耐藥菌的監(jiān)測壓力蒸氣滅菌的生物學檢測幾種多重耐藥菌監(jiān)測耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）耐青霉素的肺炎鏈球菌的檢測（PRSP）耐萬古霉素腸球菌（VRE）產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶細菌（ESBLs）多重耐藥/泛耐藥的鮑曼不動桿菌（MDR/PDR-AB）多重耐藥/泛耐藥的銅綠假單胞菌（MDR/PDR-PA）耐碳青霉烯類抗菌藥物腸桿菌科細菌（CRE包括NDM-1）耐碳青霉烯類抗菌藥物鮑曼不動桿菌（CR-AB）耐萬古霉素金黃色葡萄球菌（VRSA）多重耐藥結(jié)核分枝桿菌（MDRMT）幾種多重耐藥菌監(jiān)測2010-2013年主要細菌分離情況趨勢圖

2010-2013年臨床多重耐藥菌分離趨勢圖2013年赤峰學院附屬醫(yī)院細菌耐藥監(jiān)測年鑒

謝謝大家！希望我們互相溝通，一起做好感控工作！課件----公共郵箱chifengjianyan@163.com密碼：cf1234物體表面的清潔與消毒

物體表面（地面）的清潔與消毒地面的清潔與消毒

地面無明顯污染時，采用濕式清潔。當?shù)孛媸艿交颊哐?、體液等明顯污染時，先用吸濕材料去除可見的污染物，再清潔和消毒

室內(nèi)用品如桌子、椅子、凳子、床頭柜等的表面無明顯污染時，采用濕式清潔。當受到明顯污染時，先用吸濕材料去除可見的污染物，然后再清潔和消毒

感染高風險部門地面和物體表面的清潔與消毒

感染高風險的部門如手術(shù)部、產(chǎn)房、導管室、潔凈病房、器官移植病房、ICU、新生兒室、血透、燒傷病房、感染疾病科、口腔科、檢驗科、急診等病房與部門的地面與物體表面，應保持清潔、干燥，每天進行消毒，遇明顯污染隨時去污、清潔與消毒

物體表面消毒劑濃度選擇地面采用400mg/L～700mg/L有效氯的含氯消毒液擦拭，作用30min

消毒方法同地面或采用1000mg/L～2000mg/L季銨鹽類消毒液擦拭。

地面和物體表面的清潔與消毒地面無明顯污染當受到患者血液、體液等明顯污染

濕式清潔

先用吸濕材料去除可見的污染物，再清潔和消毒

被排泄物、嘔吐物等污染的地面，用漂白粉或生石灰覆蓋，作用60min