GB/T 27819-2011化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)方法

ICS1330011100

;

A80..

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T27819—2011

化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)方法

Chemicals—Testmethodofinvitromammaliancelltransformation

2011-12-30發(fā)布2012-08-01實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T27819—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)與歐盟委員會(huì)法規(guī)歐洲議會(huì)和歐盟理事會(huì)關(guān)于化學(xué)品注冊評估許可和限制

440/2008:、、

的第號法規(guī)的測試方法法規(guī)的方法年體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)化試

(REACH)1907/2006B.21(2008)《

驗(yàn)英文版技術(shù)性內(nèi)容一致

》()。

本標(biāo)準(zhǔn)作了下列結(jié)構(gòu)和編輯性修改

:

增加了范圍一章

———;

計(jì)量單位改成我國法定計(jì)量單位

———。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國危險(xiǎn)化學(xué)品管理標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC251)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國疾病預(yù)防控制中心職業(yè)衛(wèi)生與中毒控制所北京市疾病預(yù)防控制中心中國

:、、

化工經(jīng)濟(jì)技術(shù)發(fā)展中心

。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人穆效群李朝林王曉兵熊曉燕趙素娟吳維皚

:、、、、、。

Ⅰ

GB/T27819—2011

化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化學(xué)品體外哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)的試驗(yàn)原則試驗(yàn)方法試驗(yàn)數(shù)據(jù)和報(bào)告

、、。

本標(biāo)準(zhǔn)可以作為化學(xué)品的致癌作用的替代檢測方法

。

2試驗(yàn)原則

哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)系統(tǒng)可用于檢測化學(xué)品引起的表型改變這種改變與其在體內(nèi)系統(tǒng)的惡性

,

轉(zhuǎn)化有關(guān)廣泛使用的細(xì)胞株包括大鼠細(xì)胞主要觀察細(xì)胞的形態(tài)

。C3H10T1/2、3T3、SHE、Fischer,、

在軟瓊脂中轉(zhuǎn)化灶的形成或錨著獨(dú)立性的改變該系統(tǒng)還用于檢測細(xì)胞暴露于化學(xué)品后的其他一些生

。

理和形態(tài)學(xué)改變但應(yīng)用不廣泛目前尚無任何體外試驗(yàn)檢測終點(diǎn)被證實(shí)與癌癥發(fā)生機(jī)制有明確關(guān)系

,。。

某些檢測系統(tǒng)可以檢出促癌劑通過測定受試物對克隆形成能力克隆形成率或培養(yǎng)細(xì)胞的生長率的

。()

影響可反映其細(xì)胞毒性的大小故可通過計(jì)算染毒與毒性作用的相關(guān)性評價(jià)細(xì)胞毒性但由于有些試驗(yàn)

,,

需要延長培養(yǎng)時(shí)間或更換培養(yǎng)皿因此有時(shí)細(xì)胞毒性數(shù)據(jù)不能用于計(jì)算轉(zhuǎn)化率

,,。

3試驗(yàn)方法

31試驗(yàn)準(zhǔn)備

.

311細(xì)胞

..

很多細(xì)胞株和原代細(xì)胞都可作為受試細(xì)胞應(yīng)根據(jù)所選擇的轉(zhuǎn)化試驗(yàn)方法選擇適宜的細(xì)胞種類

,。

試驗(yàn)前研究者應(yīng)保證受試細(xì)胞接觸致癌物后會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的表型改變本實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)有記錄表明這種表

,,

型改變是有效可靠的

、。

312培養(yǎng)基液

..()

所用培養(yǎng)基和實(shí)驗(yàn)條件應(yīng)適合細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)

。

313受試物

..

在細(xì)胞染毒前受試物應(yīng)與培養(yǎng)基混合均勻也可用適當(dāng)?shù)娜軇┫热芙饣蛑瞥蓱腋∫号囵B(yǎng)基中溶

,,。

劑的終濃度不應(yīng)對細(xì)胞活性生長率或轉(zhuǎn)化率造成影響

、。

314代謝活化

..

細(xì)胞應(yīng)分別在有無適宜代謝活化系統(tǒng)存在的條件下染毒當(dāng)所用細(xì)胞類型自身具備代謝活化能力

、;

時(shí)則應(yīng)考慮其活化特點(diǎn)是否適合受試物的化學(xué)特性

,。

32試驗(yàn)條件

.

321陰性對照和陽性對照

..

每個(gè)試驗(yàn)中均應(yīng)分別選用一個(gè)直接作用的化合物和一個(gè)需要代謝活化的化合物作為陽性對照