檢驗(yàn)科血脂檢驗(yàn)操作規(guī)程

檢驗(yàn)科血脂檢驗(yàn)操作規(guī)程標(biāo)本采集與處理1．受檢者抽血前二周應(yīng)保持平衡的飲食習(xí)慣，近期體重穩(wěn)定無(wú)外傷，手術(shù)等意外情況。并注意如有使用降糖、降脂、降壓、避孕藥，獷受體阻滯劑，免疫抑制劑，激素藥物等，則應(yīng)根據(jù)所用藥物特性停藥數(shù)天或數(shù)周后再作血液脂類(lèi)檢測(cè)。2?空腹抽血，TG，脂蛋白，載脂蛋白測(cè)定應(yīng)至少禁食12小時(shí)（僅作膽固醇測(cè)定不必強(qiáng)求空腹）24小時(shí)內(nèi)不作劇烈運(yùn)動(dòng)。抽血前不要久站立。至少應(yīng)靜坐5分鐘。抽血時(shí)止血帶使用不可超過(guò)1分鐘。3?標(biāo)本用血清，也可用肝素或EDTA?Na2抗凝之血漿。EDTA.Na2濃度不宜太高。4?血標(biāo)本室溫放置不得超過(guò)3h，放置30~45分鐘后應(yīng)即時(shí)分離出血清（漿）蓋封於4°C冰箱中可穩(wěn)定至少4天，如需長(zhǎng)期保存，應(yīng)於-70C中冰凍存放，不可反復(fù)凍融。血清總膽固醇（TC）測(cè)定酶法（CHOD~PAP法）【試劑】市售現(xiàn)成試劑?！静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說(shuō)明書(shū)要求設(shè)定程序，輸入?yún)?shù)用自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀測(cè)定（速率法）終點(diǎn)法可手工操作，用普通分光光度計(jì)比色測(cè)定。波長(zhǎng)500nm或520nm?！緲?biāo)本】血清（漿）參看本節(jié)的標(biāo)本采集與處理?！靖阶ⅰ勘痉橹腥A醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)學(xué)會(huì)推薦的TC測(cè)定常規(guī)方法（中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1995、18：185）。膽固醇標(biāo)準(zhǔn)液以定值參考血清為宜，而不宜用Chol的水溶液作標(biāo)準(zhǔn)。Chol定值質(zhì)控血清亦不應(yīng)用作標(biāo)準(zhǔn)液。主要技術(shù)指標(biāo)：冬點(diǎn)法批內(nèi)CVV1.5%、批間CVW2.5%。靈敏度：顯色劑用酚時(shí)，TC5?2mmol/L（200mg/dl）時(shí)的吸光度（A500nm）約0.30~0.35,故A500nm=0.005時(shí)TC濃度約為0.08mmol/L（3mg/dL）。測(cè)定范圍：當(dāng)血清與試劑用量之比為1:100時(shí)其測(cè)定的上界為13mmo1/L（500ng/dL）。血清甘油三酯（TG）測(cè)定酶法（GPO~PAP法）【試劑】市售現(xiàn)成試劑。有兩種。一步酶法單一試劑，二步酶法雙試劑。標(biāo)準(zhǔn)液（參考物）一步酶法之用三油酸甘油酯水溶液，也可用甘油，但甘油不適用於二步酶法?！静僮鳌堪丛噭┘皟x器使用說(shuō)明書(shū)要求設(shè)定程序和參數(shù)，用自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，終點(diǎn)法可用普通分光光度計(jì)手工操作，比色測(cè)定。波長(zhǎng)500nm?！緲?biāo)本】血清（漿）參看本節(jié)標(biāo)本采集與處理。【附注】本法在操作程序上分為一步酶法與二步酶法，二步酶法為中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)會(huì)的推薦方法（中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志1995、18：249）。現(xiàn)階段允許二法并存，要求逐步過(guò)渡到統(tǒng)一采用二步酶法，在方法尚未統(tǒng)一前，實(shí)驗(yàn)室報(bào)告TG測(cè)定結(jié)果時(shí)應(yīng)注明“除FG值”或“未除FG值”。主要枝術(shù)指標(biāo)：酶試劑用緩沖液配制后，20~25°C應(yīng)穩(wěn)定1天，C可穩(wěn)定3~7天，試劑空白為A500nmW0.05；顯色后穩(wěn)定三30min：測(cè)定上界11.3mmo1/L（100mg/dL）；精密度：批內(nèi)CVW3%，批間CVW5%：靈敏度：2mmol/LTGA500nm三0.2。血清高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）測(cè)定磷鎢酸鎂沉淀法【試劑】市售成套試劑，沉淀劑，酶試劑（同TG測(cè)定）?！静僮鳌堪丛噭┖姓f(shuō)明書(shū)操作。1．沉淀含apoB的脂蛋白。2?測(cè)定上清液（只含HDL）的膽固醇含量（方法同酶法TC測(cè)定）?！緲?biāo)本】血清（漿）。硫酸葡聚糖一鎂沉淀法【試劑】市售成套試劑：總HDL試劑，HDL3試劑，酶試劑（同TC試劑）?！静僮鳌堪丛噭┱f(shuō)明書(shū)操作：1?沉淀含apoB的脂蛋白，（總HDL試劑）；2?沉淀含apoB的脂蛋白及HDL2（HDL3試劑）；3?測(cè)定總HDL~C及HDL3~C（同酶法TC測(cè)定），并計(jì)算出HDL2~C量?！緲?biāo)本】血清（漿）血樣在室溫中不宜久放，應(yīng)即時(shí)測(cè)定，原則應(yīng)低溫保存。直接HDL~C測(cè)定法【試劑】市售專(zhuān)門(mén)的試劑，無(wú)沉淀劑。酶試劑同TC測(cè)定。（如日本第一化學(xué)藥品株式會(huì)社的產(chǎn)品）?！静僮鳌堪丛噭┖屑皟x器使用說(shuō)明書(shū)要求設(shè)置程序，輸入?yún)?shù)直接用自動(dòng)或半自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，無(wú)須沉淀離心分離出HDL步驟。【標(biāo)本】血清（漿）。血清低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）測(cè)定1.Friedwald工式計(jì)算法：（1）LDL-C二TC—HDL-C—TG/5（以mg/dl為單位計(jì)）；（2）LDL-C二TC—HDL-C—TG/2.2（以mmo1/L為單位計(jì)）；（3）只有當(dāng)血TGV4?52mmo/L結(jié)果才較準(zhǔn)確；（4）只有TC、TG、HDL-C三項(xiàng)測(cè)定都準(zhǔn)確且符合標(biāo)準(zhǔn)化要求時(shí)，才可計(jì)算出LDL-C的近似值。2．聚乙烯硫酸沉淀法【試劑】沉淀劑市售，酶試劑同TC測(cè)定?！静僮鳌?．TC測(cè)定。2?選擇性沉淀血清中LDL，測(cè)定上清液之HDL—C與VLDL－C之和的量，（同TC測(cè)定）。3?計(jì)算出LDL—C的含量?！緲?biāo)本】血清。血清載脂蛋白Al（apoAl）測(cè)定免疫透射比濁法。波長(zhǎng)340nm，本法批間CVV5%。【試劑】市售試劑盒，試劑2?8°C保存，不同批號(hào)試劑不能混合使用，抗血清效價(jià)不應(yīng)低於l6。【操作】按試劑及儀器使用說(shuō)明書(shū)要求，設(shè)定程序和參數(shù)用自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，也可用特定蛋白分析儀作速率法散射比濁測(cè)定，或用含340nm的分光光度計(jì)手工操作測(cè)定。【標(biāo)本】