標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 22429-2008 食品中沙門氏菌、腸出血性大腸埃希氏菌O157及單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的快速篩選檢驗(yàn) 酶聯(lián)免疫法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，旨在為食品檢測(cè)提供一種基于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）技術(shù)的方法，用于快速篩選出三種特定病原體：沙門氏菌、腸出血性大腸埃希氏菌O157以及單核細(xì)胞增生李斯特氏菌。該標(biāo)準(zhǔn)適用于各類食品樣本中上述微生物污染情況的初步篩查。

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程包括樣品準(zhǔn)備、提取目標(biāo)細(xì)菌抗原或DNA片段、通過(guò)特異性抗體或探針進(jìn)行捕獲與標(biāo)記、最后利用顯色反應(yīng)來(lái)定性判斷是否存在目標(biāo)病原體。具體步驟如下：

  1. 樣品制備階段需要按照規(guī)定方法對(duì)不同類型的食品進(jìn)行預(yù)處理，以確保能夠有效地從復(fù)雜基質(zhì)中釋放出待測(cè)病原體。
  2. 抗原/核酸提取環(huán)節(jié)則要求使用適當(dāng)?shù)脑噭┖谢蜃灾迫芤后w系，高效地分離純化得到可用于后續(xù)分析的目標(biāo)物質(zhì)。
  3. 在包被板上加入已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品后，分別添加針對(duì)每種病原體設(shè)計(jì)好的一抗或多克隆抗體，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間孵育讓其充分結(jié)合。
  4. 清洗去除未結(jié)合成分之后，再依次加入二抗-HRP復(fù)合物、底物溶液等，促使發(fā)生顏色變化。
  5. 最后通過(guò)比色計(jì)讀取吸光度值，并與空白對(duì)照組比較，以此來(lái)判定是否含有相應(yīng)病原體。

此標(biāo)準(zhǔn)還詳細(xì)列出了實(shí)驗(yàn)所需的各種材料清單、儀器設(shè)備規(guī)格要求以及操作過(guò)程中需要注意的關(guān)鍵點(diǎn)和技術(shù)參數(shù)設(shè)定建議，確保了結(jié)果的一致性和可靠性。同時(shí)，對(duì)于可能出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性的原因也給予了說(shuō)明，并提出了相應(yīng)的解決策略。


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  • 2008-10-19 頒布
  • 2009-02-01 實(shí)施
?正版授權(quán)
GB/T 22429-2008食品中沙門氏菌、腸出血性大腸埃希氏菌O157及單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的快速篩選檢驗(yàn)酶聯(lián)免疫法_第1頁(yè)
GB/T 22429-2008食品中沙門氏菌、腸出血性大腸埃希氏菌O157及單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的快速篩選檢驗(yàn)酶聯(lián)免疫法_第2頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

犐犆犛０７．１００．３０

犆５３

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜２２４２９—２００８

食品中沙門氏菌、

腸出血性大腸埃希氏菌犗１５７及

單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的

快速篩選檢驗(yàn)酶聯(lián)免疫法

犚犪狆犻犱狊犮狉犲犲狀犻狀犵犳狅狉犛犪犾犿狅狀犲犾犾犪，

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２００８１０１９發(fā)布２００９０２０１實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

書(shū)

中華人民共和國(guó)

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

食品中沙門氏菌、

腸出血性大腸埃希氏菌犗１５７及

單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的

快速篩選檢驗(yàn)酶聯(lián)免疫法

ＧＢ／Ｔ２２４２９—２００８

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書(shū)

犌犅／犜２２４２９—２００８

前言

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄Ａ為資料性附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)食品工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：杭州市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢測(cè)院、中華人民共和國(guó)上海出入境檢驗(yàn)檢疫局、上海食品

藥品檢驗(yàn)所。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：肖海龍、顧鳴、芮昶、韓偉、徐偉東、鮑英、王穎。

Ⅰ

書(shū)

犌犅／犜２２４２９—２００８

食品中沙門氏菌、

腸出血性大腸埃希氏菌犗１５７及

單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的

快速篩選檢驗(yàn)酶聯(lián)免疫法

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中沙門氏菌、腸出血性大腸埃希氏菌Ｏ１５７及單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的酶聯(lián)

免疫法的檢驗(yàn)步驟和判斷原則。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于各種食品中沙門氏菌、腸出血性大腸埃希氏菌Ｏ１５７及單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的

定性檢驗(yàn)。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

ＧＢ／Ｔ４７８９．４食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)

ＧＢ／Ｔ４７８９．６食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)

ＧＢ／Ｔ４７８９．２８—２００３食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)染色法、培養(yǎng)基和試劑

ＧＢ／Ｔ４７８９．３０

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