微生物知識(shí)培訓(xùn)

微生物及污染控制張啟明2023/2/31微生物1）微生物的定義

微生物是個(gè)體微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，無法用肉眼看到，只能借助顯微鏡觀察的一群微小生物的總稱。2微生物2）微生物的特點(diǎn)

1.種類多，分布廣：一克沃土中含菌量高達(dá)幾億甚至幾十億2.代謝能力強(qiáng)，繁殖速度快：大腸桿菌（Escherichiacoli）在適宜的條件下，每20分鐘即繁殖一代，24小時(shí)即可繁殖72代。

3.受環(huán)境影響大，容易發(fā)生變異：自發(fā)突變頻率為10-6左右

4.個(gè)體小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單:細(xì)胞大小以微米和納米計(jì)量。3微生物3）微生物分類：

按照結(jié)構(gòu)分為：細(xì)菌、放線菌、真菌、病毒細(xì)菌菌落霉菌菌落霉菌放線菌冠狀病毒Sars病毒艾滋病病毒（HIV）放線菌菌落4（一）細(xì)菌：細(xì)菌是一類細(xì)胞細(xì)而短、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、細(xì)胞壁堅(jiān)韌，以二等分裂方式繁殖的原核微生物，分布廣泛。細(xì)菌菌落常表現(xiàn)為濕潤(rùn)、粘稠、光滑、較透明、易挑取、質(zhì)地均勻以及菌落正反面或邊緣與中央部位顏色一致等。細(xì)菌的菌落特征因種而異。可作為鑒定細(xì)菌種的依據(jù)。5各類細(xì)菌菌落圖粘質(zhì)沙雷氏菌的菌落特征

沙門氏菌的菌落特征

銅綠假單孢菌的菌落特征

弗氏志賀氏菌的菌落特征

粘質(zhì)沙雷氏菌的菌落特征

6細(xì)菌的形態(tài)細(xì)菌的形態(tài)球菌桿菌弧菌、螺旋菌7（二）霉菌（真菌）真菌在微生物世界中可以稱得上是個(gè)"巨人家族"，真菌的個(gè)頭較大，其中的許多成員對(duì)我們來說都是很熟悉的。例如，在潮濕的天氣里，常常發(fā)現(xiàn)糧食、衣服、皮鞋上長(zhǎng)了霉，我們做醬、醬油、豆腐乳用的曲霉和毛霉等霉菌；發(fā)面、釀酒用的酵母菌等都是真菌，就連人們愛吃的蘑菇、木耳等蕈子，也都是真菌大家族的成員。真菌是微生物中的一大類群，屬于真核微生物，與人類關(guān)系非常密切。真菌是抗生素（如青霉素、頭孢霉素）、有機(jī)酸等多種發(fā)酵工業(yè)的基礎(chǔ)，在自然界中則扮演著各種復(fù)雜有機(jī)物分解者的角色。然而有些真菌是病原菌，引起人類和動(dòng)植物病害，有些真菌產(chǎn)生毒素，使人、畜中毒，嚴(yán)重者引起癌癥。如黃曲霉產(chǎn)生的黃曲霉毒素毒害肝臟，易引發(fā)肝癌。8各種曲霉的菌落各種病原真菌的菌落青霉的菌落

青霉的菌落9（三）酵母菌我們每天吃的面包和饅頭、喝的啤酒就是有酵母菌的參與制成的；酵母菌的細(xì)胞里含有豐富的蛋白質(zhì)和維生素，所以也可以做成高級(jí)營(yíng)養(yǎng)品添加到食品中，或用作飼養(yǎng)動(dòng)物的高級(jí)飼料。喜歡在偏酸性且含糖較多的環(huán)境中生長(zhǎng)，例如，在水果、蔬菜、花蜜的表面和在果園土壤中最為常見。酵母菌是單細(xì)胞真核微生物。酵母菌細(xì)胞的形態(tài)通常有球形、卵圓形、臘腸形、橢圓形、檸檬形或藕節(jié)形等。比細(xì)菌的單細(xì)胞個(gè)體要大得多，一般為1-5微米×5-30微米。酵母菌無鞭毛，不能游動(dòng)。酵母菌具有典型的真核細(xì)胞結(jié)構(gòu),有細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、液泡、線粒體等，有的還具有微體。10啤酒酵母的菌落紅酵母的菌落各種酵母菌的菌落

酵母菌的細(xì)胞形態(tài)

酵母菌的細(xì)胞形態(tài)

酵母菌細(xì)胞結(jié)構(gòu)的顯微照片

11你相信嗎？污染源就在我們身邊！直接接觸藥品（半成品、成品）的生產(chǎn)人員的手、工作衣、帽如不經(jīng)常清洗消毒，就會(huì)有大量的微生物附著而污染食品，鼠、蠅及蟑螂等一旦接觸藥品，其體表面與消化道內(nèi)大量微生物會(huì)給藥品造成污染。生產(chǎn)車間內(nèi)外環(huán)境不良時(shí)，空氣中的微生物及其粘附在灰塵上的飛物均可沉降于藥品，生產(chǎn)操作人員談話、咳嗽、打噴嚏等，均會(huì)直接或間接地污染藥品。用一只蟑螂作細(xì)菌試驗(yàn)培養(yǎng)出不計(jì)其數(shù)的細(xì)菌。打一個(gè)噴嚏，培養(yǎng)出不計(jì)其數(shù)的細(xì)菌。12微生物污染控制13GMP的宗旨GMP第一章第三條本規(guī)范作為質(zhì)量管理體系的一部分，是藥品生產(chǎn)管理和質(zhì)量控制的基本要求，旨在最大限度地降低藥品生產(chǎn)過程中污染、交叉污染以及混淆、差錯(cuò)等風(fēng)險(xiǎn)，確保持續(xù)穩(wěn)定的生產(chǎn)出符合預(yù)定用途和注冊(cè)要求的藥品。14兩種最常見的污染形式：塵粒污染和微生物污染★塵粒污染及其三個(gè)特點(diǎn)：▲塵粒的普遍存在：幾乎任何物料都能轉(zhuǎn)變成塵粒形式并通過空氣流傳播到整個(gè)藥廠。典型塵粒有：泥土、塵埃、沙、棉絨、頭發(fā)、皮膚、煙霧、金屬、噴嚏和咳嗽排出物▲制藥企業(yè)中大量存在塵粒：每立方英尺（1英尺=0.3048米）的空氣中可能含有20萬至1千萬塵粒。（99%）▲塵粒大小區(qū)別很大：大部分塵粒肉眼不能看到，必須用靈敏的測(cè)量?jī)x器才能檢出，所以容易被忽視?！镂⑸铮ㄖ饕羌?xì)菌）污染：細(xì)菌得到了必要的養(yǎng)料、水分及合適的溫度，一個(gè)細(xì)菌24小時(shí)后可生產(chǎn)出281兆個(gè)細(xì)菌。污染的形式及特點(diǎn)15傳播污染的四大媒介及應(yīng)對(duì)措施★空氣：是侵襲產(chǎn)品的污染物的主要媒介。

建立密閉的潔凈廠房：這是最有效的戰(zhàn)略措施；

過濾：是控制空氣質(zhì)量的最有效方法。最常見的空氣過濾系統(tǒng)之一是層流裝置。能達(dá)到

10，000級(jí)和100級(jí)潔凈度。在層流系統(tǒng)中，HEPA可達(dá)到高于99.97%的除塵效果。一個(gè)主持生產(chǎn)工作的中層干部，對(duì)過濾原理、濾器等級(jí)各能力以及比較各類濾器性能的方法等，應(yīng)具備基本的理解。16傳播污染的四大媒介及應(yīng)對(duì)措施★水：水是生命物質(zhì)的組成部分，水中含有微生物賴以生存和繁殖所必需的養(yǎng)料。

水可以分為生水、標(biāo)準(zhǔn)飲用水、純化水（通過蒸餾、離子交換、反滲透制得）、注射用水。

在生產(chǎn)過程中，水是應(yīng)用最廣泛的原料，并且要用來清洗我們的設(shè)備、容器、工具。

最好的措施是對(duì)水進(jìn)行凈化：現(xiàn)在最常用的是用二級(jí)反滲透法制備純化水，再通過蒸餾制備注射用水。17傳播污染的四大媒介及應(yīng)對(duì)措施★表面：（包括包裝材料、建筑、設(shè)備、原料、容器工具）由于空氣中的濕度、所有表面都被包上了一層含水的薄膜、這層薄膜由于靜電吸引而飽含塵埃，許多時(shí)候，表面還覆蓋一層油狀物，此油膜易受到塵粒污染。

清洗：從表面除去泥土和其它微粒，從而阻止污染物聚積和生長(zhǎng)的過程。

消毒滅菌：消滅清洗后常常留在表面的致病菌的過程。

對(duì)于地板、墻壁、設(shè)備和容器的有效清洗和消毒滅菌來說是至關(guān)重要的。18傳播污染的四大媒介及應(yīng)對(duì)措施★人：人是藥廠中最不清潔的成份，是最常見的、永不休止的污染源。

每分鐘從人類皮膚中要散發(fā)約10，000個(gè)微生物。一小粒糖大的頭發(fā)中能裝載4億個(gè)微生物。

一次咳嗽或噴嚏將把千百萬個(gè)微生物引入工作環(huán)境。

衣物、發(fā)膠、香水、脂粉、耳環(huán)、戒指是極好的污染源。

所有的生產(chǎn)操作及清潔操作都要由人來完成。實(shí)施各項(xiàng)關(guān)于人員的衛(wèi)生措施，包括體檢及個(gè)人衛(wèi)生★人是最大污染源19殺死物體上病原微生物的方法,并不一定能殺死含芽胞的細(xì)菌或非病原微生物殺滅物體上所有微生物的方法。不存在活菌的意思。

防止或抑制體外細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法。消毒：AsepsisSterilizationAntisepsis消毒與滅菌Disinfection滅菌：無菌：防腐：20熱力滅菌法一、物理消毒滅菌法高溫殺滅細(xì)菌焚燒----最徹底的滅菌方法燒灼----直接用火焰滅菌方法干烤----加熱干熱滅菌法常用烘箱：用于耐高溫的物料、金屬、玻璃制品，滅芽孢效果好。

135~145℃3~5小時(shí)160~170℃2~4小時(shí)180~200℃0.5~1小時(shí)250℃0.5小時(shí)或200以上45mim(熱原)遭破壞21濕熱滅菌法加壓蒸汽滅菌法最有效的滅菌方法121℃20~30分鐘煮沸消毒法水煮100℃5分鐘(繁殖體)~2小時(shí)(芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法間歇蒸汽滅菌法反復(fù)多次流動(dòng)蒸汽間歇加熱滅菌較低的溫度（61℃30分鐘）殺滅致病菌115℃，67kPa30mim121℃，97kPa20mim126℃，139kPa15mim22濕熱滅菌與干熱滅菌的比較同一溫度下，濕熱滅菌比干熱滅菌效果好原因1、濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固2、濕熱的穿透力比干熱大3、濕熱的蒸汽有潛熱23輻射殺菌法紫外線殺菌機(jī)理：干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄紫外線穿透力較弱不耐熱物品的表面消毒特點(diǎn)：應(yīng)用范圍：空氣消毒手術(shù)室、傳染病房、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室用波長(zhǎng)200～300nm（253.7nm處殺菌力最強(qiáng)）的紫外線進(jìn)行滅菌，紫外滅菌燈平均壽命為2000小時(shí)，設(shè)計(jì)為0.4w/m2以上，被滅菌物品離光源不超過1.5米，一般滅菌30min~1h。24應(yīng)用范圍：電離輻射包括高速電子、X射線和γ射線如Co60、環(huán)氧乙烷、臭氧一次性醫(yī)用塑料制品的消毒不破壞其營(yíng)養(yǎng)成分的滅菌空氣的消毒環(huán)氧乙烷滅菌，利用其強(qiáng)氧化性，對(duì)微生物繁殖體、芽孢有強(qiáng)的滅菌作用。臭氧滅菌：臭氧在常溫下不穩(wěn)定，很快自行分解成氧氣（O2）及氧原子（O），氧原子對(duì)微生物具有的氧化作用。25濾過除菌法用物理阻留的方法將液體或空氣中的細(xì)菌除去,以達(dá)到除