實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)質(zhì)量控制

實驗動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)質(zhì)量控制第一頁，共四十一頁，2022年，8月28日學(xué)習(xí)內(nèi)容實驗動物微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)質(zhì)量控制分類實驗動物的微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)質(zhì)量監(jiān)測實驗動物主要疫病及人獸共患傳染病實驗動物防疫第二頁，共四十一頁，2022年，8月28日第一節(jié)按微生物和寄生蟲學(xué)質(zhì)量控制分類實驗動物分類定義舉例普通級動物（Conventionalanimal，CV)是不攜帶所規(guī)定的人獸共患病病原和動物烈性染病病原的動物。如鼠痘病毒、流行性出血熱病毒、弓形蟲等。清潔級動物(Cleananimal,CL)是指除普通動物應(yīng)排除的病原外，還應(yīng)不攜帶對動物健康危害和對科學(xué)研究干擾較大的病原的動物。如鼠肝炎病毒、仙臺病毒、體外寄生蟲等。無特定病原體動物（Specificpathogenfreeanimal,SPF)是指除清潔動物應(yīng)排除的病原外，還應(yīng)不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科學(xué)實驗干擾大的病原的動物。如綠膿桿菌等。無菌動物（Germfreeanimal,GF)是指在動物體內(nèi)無可檢出一節(jié)生命體的動物。無檢出。以上根據(jù)國標(biāo)GB14922.1-2001,GB14922.2-2001

大鼠和小鼠無普通級，犬和猴無清潔級及無菌級。第三頁，共四十一頁，2022年，8月28日實驗動物質(zhì)量保障體系第四頁，共四十一頁，2022年，8月28日第二節(jié)實驗動物的微生物學(xué)、寄生蟲學(xué)質(zhì)量監(jiān)測(一)實驗動物的微生物、寄生蟲感染的危害1、影響實驗結(jié)果。如仙臺病毒感染引起小鼠肺鱗狀化病變；小鼠肝炎病毒感染引起血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶升高。2、影響動物生產(chǎn)。如鼠痘、兔出血熱病毒、犬細(xì)小病毒性腸炎的感染導(dǎo)致動物的大批死亡。3、威脅人類健康。如漢坦病毒、鉤端螺旋體感染人致病或致死。4、污染實驗材料。如用于疫苗生產(chǎn)的原材料SPF雞胚污染病毒，接種疫苗導(dǎo)致病原的擴散。5、寄生蟲對實驗動物的影響。

1）掠奪宿主的營養(yǎng)；

2）體外寄生蟲對動物的騷擾；

3）對宿主機體產(chǎn)生機械性損傷;4）對宿主產(chǎn)生毒性作用；

5)對宿主生理、生化和免疫系統(tǒng)產(chǎn)生影響。（二）監(jiān)測意義1、保證實驗研究的順利進行和工作人員的身體健康。2、確保實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。第五頁，共四十一頁，2022年，8月28日（三）監(jiān)測方法實驗動物的微生物、寄生蟲檢測具體操作方法詳見《國家標(biāo)準(zhǔn)實驗動物微生物學(xué)檢測方法》（）和《國家標(biāo)準(zhǔn)實驗動物寄生蟲學(xué)的檢測方法》(GB/T18448.1～18448.10)。檢測方法歸納起來有病原學(xué)檢測和血清學(xué)檢測。細(xì)菌、真菌和寄生蟲以病原學(xué)檢測為主，血清學(xué)檢測為輔；但有些病原體也逐漸使用血清學(xué)方法檢測，如支原體、泰澤氏病原體、弓形體等。病毒的常規(guī)定期檢測以血清學(xué)為主，而疾病診斷則以病原學(xué)檢測為主。包括監(jiān)測項目的選定、采樣數(shù)量、檢測頻率、采樣方法、病毒、細(xì)菌、寄生蟲和真菌檢測方法。

1、監(jiān)測項目

我國經(jīng)過十多年來對各地實驗動物感染病原微生物、寄生蟲情況的調(diào)查，結(jié)合其他國家的規(guī)定和經(jīng)驗，制定了我國嚙齒類、兔、犬、猴和雞的微生物學(xué)以及寄生蟲學(xué)等級標(biāo)準(zhǔn)。目前有關(guān)實驗動物的標(biāo)準(zhǔn)有28個。頒布年代主要在2001年，最近對標(biāo)準(zhǔn)又進行了部分修訂。第六頁，共四十一頁，2022年，8月28日GB14925實驗動物環(huán)境與設(shè)施GB14923實驗動物哺乳類實驗動物的遺傳質(zhì)量控制

GB14922.1實驗動物寄生蟲學(xué)等級及檢測GB14922.2實驗動物微生物學(xué)等級及檢測

GB14924.1實驗動物配合飼料通用質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

GB14924.2實驗動物配合飼料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

GB14924.3實驗動物小鼠、大鼠配合飼料

GB14924.4實驗動物兔配合飼料

GB14924.5實驗動物豚鼠配合飼料

GB14924.7實驗動物犬配合飼料GB14924.8實驗動物猴配合飼料GB14924.6實驗動物地鼠配合飼料

GB/T14927.1實驗動物近交系小鼠、大鼠生化標(biāo)記檢測方法GB/T14927.2實驗動物近交系小鼠、大鼠皮膚移植法GB/T14926.42～14926.43實驗動物微生物學(xué)檢測方法（1）GB/T14926.1～14926.6實驗動物微生物學(xué)檢測方法（2）GB/T14926.8～14926.17GB/T14926.41GB/T14926.44～14926.49GB/T14926.50～14926.55實驗動物微生物學(xué)檢測方法（3）GB/T14926.18～14926.32實驗動物檢測方法（4）GB/T14926.56～14926.64GB/T18448.1～18448.10實驗動物寄生蟲學(xué)檢測方法GB/T14924.9實驗動物配合飼料常規(guī)營養(yǎng)成分的測定GB/T14924.10實驗動物配合飼料氨基酸的測定GB/T14924.12實驗動物配合飼料礦物質(zhì)和微量元素的測定GB/T14924.11實驗動物配合飼料維生素的測定GB/T17998SPF雞微生物學(xué)監(jiān)測總則第七頁，共四十一頁，2022年，8月28日標(biāo)準(zhǔn)要求檢測的項目分為必須檢測項目和必要時檢測項目。必須檢測項目：是指在進行實驗動物質(zhì)量評價時必須檢測的項目。必要時檢測項目：是指從國外引進實驗動物時；懷疑有本病流行時；申請實驗動物生產(chǎn)許可證和實驗動物質(zhì)量合格證時必須檢測的項目。我國的實驗動物微生物和寄生蟲檢測標(biāo)準(zhǔn)是我國實驗動物質(zhì)量要求的最低標(biāo)準(zhǔn)，各個地區(qū)和生產(chǎn)企業(yè)還可以根據(jù)當(dāng)?shù)丶膊〉牧餍星闆r，或者提高企業(yè)產(chǎn)品制定相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，但要求不能低于國家標(biāo)準(zhǔn)要求。與國外標(biāo)準(zhǔn)相比較，我國的標(biāo)準(zhǔn)要求還是偏高，主要表現(xiàn)在條件致病菌檢測方面。第八頁，共四十一頁，2022年，8月28日SPF級動物監(jiān)測項目類別病原菌病毒寄生蟲動物種類小鼠、大鼠豚鼠、兔犬、猴小鼠、大鼠豚鼠、兔犬、猴小鼠、大鼠豚鼠、兔犬、猴項目沙門菌、支原體、泰澤病原體等沙門菌、多殺巴氏桿菌、支氣管鮑特桿菌等志賀菌、結(jié)核桿菌等鼠痘病毒、漢坦病毒、仙臺病毒和小鼠肝炎病毒等兔瘟、仙臺病毒等B病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒等體外寄生蟲、弓形體等弓形體、兔腦原蟲、球蟲等弓形體、溶組織阿米巴等數(shù)量(項）161491489765我國實驗動物質(zhì)量要求的最低標(biāo)準(zhǔn)，其它行業(yè)、地方標(biāo)準(zhǔn)不能低于國家標(biāo)準(zhǔn)要求。第九頁，共四十一頁，2022年，8月28日2、采樣數(shù)量我國國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：選擇成年動物用于檢測。取樣數(shù)量：每個小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠和兔生產(chǎn)繁殖單元；以及每個犬、猴生產(chǎn)繁殖群體，根據(jù)動物多少，取樣數(shù)量見表。群體大?。ㄖ唬┤訑?shù)量〈100不少于5只100-500不少于10只〉500不少于20只隔離器每個檢測2只第十頁，共四十一頁，2022年，8月28日3、檢測頻率普通級動物：每三個月至少檢測動物一次。清潔級動物：每三個月至少檢測動物一次。無特定病原體動物：每三個月至少檢測動物一次。無菌動物：每年檢測動物一次。每2-4周檢查一次動物的生活環(huán)境標(biāo)本和糞便標(biāo)本。一般來說，一旦病原體入侵動物群體引起感染，初期分離病原體較容易，隨后抗體的檢出率上升，2-3個月后可因某些個體抗體水平的降低以及新出生的非感染個體的增加等原因，抗體檢出率下降。第十一頁，共四十一頁，2022年，8月28日4、采樣方法可用隨機抽樣法或哨兵動物法。隨機抽樣法采樣時，宜在動物群中不同方位隨機采取成年動物，選擇至少4個不同的位置采集樣品（例如四角和中央）。哨兵動物法將經(jīng)過檢測符合質(zhì)量要求的同種系實驗動物即哨兵動物放入群內(nèi)，不時調(diào)換位置，飼養(yǎng)一定時間后解剖檢查抗體或病原。采樣樣品從采樣點到檢測實驗室運輸途中應(yīng)保證動物的安全和避免污染。一般來說，無論病原學(xué)或血清學(xué)檢測，檢測結(jié)果陽性者表示該群動物有該病原體感染的存在。但作為疾病病原體的確定，還需要進一步分析。如果檢測結(jié)果陰性，一般來說可作為無此病原體存在的依據(jù)。但檢測結(jié)果亦受多種因素的影響。如:取材數(shù)量、感染率的高低、取材頻率、取材對象(動物年齡、疾病的早晚期等)、方法學(xué)的選擇(病原學(xué)或血清學(xué)檢測)、方法學(xué)的敏感性等，均與檢測結(jié)果密切相關(guān)。第十二頁，共四十一頁，2022年，8月28日5、檢測方法-病毒檢測

包括血清學(xué)檢測和病原學(xué)檢測。（1）血清學(xué)檢測：適用于各級各類實驗動物的經(jīng)常性檢測和疫情普查。常用的方法有:酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、免疫熒光試驗(IFA)、免疫酶染色試驗(IEA)、血凝試驗(HA)、血凝抑制試驗(HI)、病毒中和試驗、補體結(jié)合試驗、瓊脂擴散實驗等。（2）病原學(xué)檢測：適用于動物群中有疾病流行，需要檢出病毒或確認(rèn)病毒存在的情況。檢測方法有:病毒分離與鑒定，病毒顆粒、抗原或核酸的檢出，潛在病毒的激活，抗體產(chǎn)生試驗等。例如:采用免疫組化的方法在光鏡下檢查病變組織中的特異性抗原；采用HA方法檢查患病動物排泄物或組織懸液中的血凝素抗原;采用電鏡技術(shù)或免疫電鏡技術(shù)檢查組織或排泄物中的病毒顆粒;采用聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)檢查病毒的蛋白質(zhì);采用核酸分子雜交技術(shù)或聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢出組織或排泄物中的病毒核酸。第十三頁，共四十一頁，2022年，8月28日檢測方法-細(xì)菌檢測

最常用的方法是病原菌的分離與培養(yǎng)或進行動物接種。部分病原菌，如:布氏桿菌、支原體等，可采取血清學(xué)方法。對于泰澤氏病原體，由于不能在人工培養(yǎng)基上生長，因此宜采用血清學(xué)檢測方法，動物誘導(dǎo)實驗進行組織壓片、鏡檢的方法進行檢查，并結(jié)合病理檢查結(jié)果最后做出診斷。檢測方法-真菌檢測目前主要采用沙氏培養(yǎng)基分離培養(yǎng)。皮膚真菌通常在25℃培養(yǎng)，深部真菌通常在37℃培養(yǎng)。不同的真菌具有一定的菌落特點，結(jié)合鏡下染色檢查可進行種屬鑒定，有時，還需借助于生化反應(yīng)結(jié)果和免疫學(xué)方法進行最后診斷。檢測方法-寄生蟲檢測（1）體外寄生蟲：如肉眼觀察法、透明膠紙粘取法、拔毛取樣法、皮屑刮取法、黑背景檢查法、解剖鏡下通體檢查法等，主要適用于檢查蚤、虱、螨等節(jié)肢動物。（2）體內(nèi)寄生蟲：主要檢查蠕蟲和原蟲，可用直接涂片法(糞便、血液、臟器、腸內(nèi)容物)、飽和鹽水漂浮法或沉淀法、透明膠紙肛門周圍粘取法、組織或器官剖面壓印法、病變組織切片或壓片法、尿液的離心法

(如檢查鼠膀胱線蟲)等。第十四頁，共四十一頁，2022年，8月28日我省近5年實驗動物微生物、寄生蟲感染狀況動物等級動物種類攜帶病原微生物和寄生蟲細(xì)菌病毒寄生蟲普通級動物兔、豚鼠皮膚真菌B病毒體外寄生蟲清潔級動物小鼠、大鼠-小鼠肝炎病毒蠕蟲SPF級動物小鼠、大鼠嗜肺巴斯德桿菌、金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、泰澤病原體小鼠肝炎病毒、小鼠腦脊髓炎病毒、大鼠冠狀病毒蠕蟲、鞭毛蟲第十五頁，共四十一頁，2022年，8月28日國外小鼠病毒感染情況病毒種類方法樣本數(shù)感染狀況（%）北美歐洲總數(shù)鼠痘病毒血清學(xué)2468570.020.000.02漢坦病毒血清學(xué)1449460.000.000.00K病毒血清學(xué)2253530.000.000.00淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢病毒血清學(xué)2414530.010.020.01小鼠腺病毒1和2血清學(xué)2303510.020.220.02小鼠巨細(xì)胞病毒血清學(xué)1465110.040.000.04小鼠肝炎病毒血清學(xué)5586731.573.251.59小鼠諾沃克病毒血清學(xué)4487632.6424.0332.37小鼠細(xì)小病毒NS-1血清學(xué)5784641.651.921.65小鼠細(xì)小病毒1和2血清學(xué)5945391.833.641.86小鼠微小病毒血清學(xué)5959030.330.460.33小鼠肺炎病毒血清學(xué)4476560.010010.01多瘤病毒血清學(xué)2258680.020.200.02呼腸孤病毒血清學(xué)4288210.010.050.01乳鼠腹瀉病毒血清學(xué)4665720.560.350.56仙臺病毒血清學(xué)4622090.000.000.00小鼠腦脊髓炎病毒血清學(xué)4357720.260.270.26第十六頁，共四十一頁，2022年，8月28日細(xì)菌種類方法樣本數(shù)感染狀況（%）北美歐洲總數(shù)支氣管敗血波氏桿菌培養(yǎng)1098020.000.000.00呼吸道相關(guān)纖毛狀桿菌血清學(xué)1587410.010.000.01鼠類檸檬酸桿菌培養(yǎng)823370.000.000.00鼠棒狀桿菌培養(yǎng)1098040.000.000.00螺桿菌屬PCR9111915.8821.2816.08肝螺桿菌PCR9146312.4510.2312.37膽汁螺桿菌PCR913862.201.492.17產(chǎn)酸克氏桿菌培養(yǎng)1859370.381.320.38肺炎克雷伯菌培養(yǎng)1866670.100.850.10肺支原體培養(yǎng)、血清、PCR61592455102437770.000.010.00Nt0.16Nt0.000.010.00多殺巴氏桿菌培養(yǎng)1093760.000.000.00嗜肺巴氏桿菌培養(yǎng)10940313.24.0012.90其它種培養(yǎng)1062320.310.000.31任一種沙門氏菌培養(yǎng)1096550.000.000.00金黃色葡萄球菌培養(yǎng)1070026.0311.566.07念珠狀鏈桿菌培養(yǎng)28420.000.000.00肺炎鏈球菌培養(yǎng)1098040.000.000.00β溶血鏈球菌B群培養(yǎng)106910.240.000.24β溶血念鏈球菌G群培養(yǎng)1097330.000.110.00國外小鼠細(xì)菌感染情況第十七頁，共四十一頁，2022年，8月28日寄生蟲種類方法樣本數(shù)感染狀況（%）北美歐洲總數(shù)兔腦原蟲血清學(xué)1450530.000.000.00虱鏡檢1264820.00Nr0.00螨鏡檢1309760.110.430.12蠕蟲無刺線蟲鏡檢1358600.19鼠管狀線蟲鏡檢1286570.011.310.25隱藏管狀線蟲鏡檢1286570.11原蟲鞭毛蟲屬濕涂片948903.74Nr0.00內(nèi)阿米巴屬濕涂片948908.08Nr8.08賈第蟲屬濕涂片1020930.000.000.00六鞭蟲屬濕涂片948904.45Nr4.45類單鞭滴蟲屬濕涂片948900.04Nr0.04曲滴蟲屬濕涂片948900.03Nr0.03螺旋核蟲屬濕涂片1020930.080.000.08毛滴蟲屬濕涂片948908.88Nr8.88國外小鼠的寄生蟲感染情況第十八頁，共四十一頁，2022年，8月28日病毒種類方法樣本數(shù)感染狀況（%）北美歐洲總數(shù)漢坦病毒血清學(xué)232480.011.090.07淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢病毒血清學(xué)377090.000.000.00腺病毒1和2血清學(xué)350840.060.160.07細(xì)小病毒NS-1血清學(xué)638082.003.342.05H-1（Toolan’s）血清學(xué)794511.372.851.41大鼠病毒血清學(xué)4867641.234.051.03大鼠微小病毒血清學(xué)475961.392.991.46大鼠細(xì)小病毒血清學(xué)859011.191.861.21小鼠肺炎病毒血清學(xué)799540.061.240.10大鼠冠狀病毒血清學(xué)827330.280.610.29大鼠呼吸道病毒組織病理39016.36Na6.36大鼠theilovirus血清學(xué)359201.431.321.43呼腸孤病毒血清學(xué)728860.010.000.01仙臺病毒血清學(xué)808510.010.510.02國外大鼠病毒感染情況第十九頁，共四十一頁，2022年，8月28日細(xì)菌種類方法樣本數(shù)感染狀況（%）北美歐洲總數(shù)支氣管敗血波氏桿菌培養(yǎng)82820.000.000.00呼吸道相關(guān)纖毛狀桿菌血清學(xué)260570.274.63048鼠棒狀桿菌培養(yǎng)82890.000.000.00螺桿菌屬PCR89150.460.310.45肝螺桿菌PCR9146312.4510.2312.37膽汁螺桿菌PCR89150.420.310.42產(chǎn)酸克氏桿菌培養(yǎng)73150.370.000.37肺炎克雷伯菌培養(yǎng)75130.550.000.53肺支原體培養(yǎng)、血清、PCR34338152437340.060.160.29Nt2.57Nt0.060.230.29多殺巴氏桿菌培養(yǎng)82230.000.000.00嗜肺巴氏桿菌培養(yǎng)82414.923.994.81其它種培養(yǎng)73460.450.000.44任一種沙門氏菌培養(yǎng)82350.000.000.00金黃色葡萄球菌培養(yǎng)736523.5030.6323.61念珠狀鏈桿菌培養(yǎng)7970.000.000.00肺炎鏈球菌培養(yǎng)82890.000.000.00β溶血鏈球菌B群培養(yǎng)75033.741.343.67β溶血念鏈球菌G群培養(yǎng)83140.012.710.35國外大鼠細(xì)菌感染情況第二十頁，共四十一頁，2022年，8月28日寄生蟲種類方法樣本數(shù)感染狀況（%）北美歐洲總數(shù)兔腦原蟲血清學(xué)224860.081.550.16虱鏡檢82020.00Nr0.00螨鏡檢92410.000.000.00蠕蟲無刺線蟲鏡檢92330.00鼠管狀線蟲鏡檢92331.103.581.10隱藏管狀線蟲鏡檢92330.10原蟲鞭毛蟲屬濕涂片77411.65Nr1.65內(nèi)阿米巴屬濕涂片77413.18Nr3.18賈第蟲屬濕涂片98100.000.000.00六鞭蟲屬濕涂片77414.60Nr4.60類單鞭滴蟲屬濕涂片77410.09Nr0.09曲滴蟲屬濕涂片77410.17Nr0.17螺旋核蟲屬濕涂片77410.19Nr0.19毛滴蟲屬濕涂片77411.58Nr1.58國外大鼠的寄生蟲感染情況第二十一頁，共四十一頁，2022年，8月28日實驗動物常見的寄生蟲

線蟲螨

螨蜱第二十二頁，共四十一頁，2022年，8月28日第三節(jié)實驗動物主要疫病和人畜共患傳染病

流行性出血熱淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎猴B病毒病和免疫缺陷病狂犬病（同上節(jié)，省略）弓形體鉤端螺旋體病結(jié)核分支桿菌病重要的人獸共患病動物烈性傳染病

鼠痘小鼠肝炎病毒仙臺病毒兔出血熱第二十三頁，共四十一頁，2022年，8月28日流行性出血熱流行性出血熱（EpidemicHemorrhagicFever，EHF）是由流行性出血熱病毒（EHFV）引起的以發(fā)熱、出血和腎臟損害為主要臨床表現(xiàn)的烈性傳染病。1981年，WHO統(tǒng)一命名為腎綜合征出血熱（HemorrhagicFeverWithRenalSyndrome，HFRS）。病原

HFRS是由布尼亞病毒科，漢坦病毒屬的漢坦病毒引起。該病毒對脂溶劑敏感，乙醚、氯仿、丙酮、去氧膽酸鹽等均可滅活，PH5.0以下，60℃，1h可使其全部殺死，紫外線照射30分鐘也能滅活病毒。流行病學(xué)

HFRS屬自然疫源性疾病，嚙齒類動物為主要宿主。人類感染主要是接觸帶毒動物以及排泄物，吸入型感染。實驗大鼠感染主要是與帶毒野鼠接觸，感染后長期向外排毒，從而危及人類健康。我國20世紀(jì)后期多次發(fā)生人類感染流行性出血熱病毒，特別是實驗人員感染較多，在多個省市均有發(fā)生。臨床癥狀及病理

人感染表現(xiàn)高熱、出血性腎臟損傷。實驗大鼠和野鼠感染不表現(xiàn)臨床癥狀，無病理變化。據(jù)報道，在乳小鼠、乳長爪沙鼠的動物模型中，能觀察到病變組織的廣泛充血、出血、滲出、壞死等，其中腎臟最為嚴(yán)重。潛伏期14d。診斷

定期的血清學(xué)檢測。特異性抗體檢測，間接免疫熒光試驗是經(jīng)典檢測方法。其他血清學(xué)方法還包括免疫酶染色法、ELISA試驗、血凝抑制試驗和空斑減少試驗等。病原檢測也是腎綜合癥出血熱病毒常用的診斷方法，鼠肺冰凍切片免疫熒光檢測是經(jīng)典的病原檢測方法，近年來，熒光定量PCR技術(shù)也常用于大鼠腎綜合癥出血熱病毒的檢測。預(yù)防與控制

防止野鼠進入設(shè)施；實驗大、小鼠群定期進行血清學(xué)檢測；加強實驗室管理，防止飼料、墊料等被野鼠污染。飼養(yǎng)人員和實驗人員應(yīng)加強防護措施，定期體檢。第二十四頁，共四十一頁，2022年，8月28日淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎由淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒（LCMV）引起的一種急性傳染病，也感染人。感染后目前還無法治療。主要侵害中樞神經(jīng)系統(tǒng)，呈現(xiàn)腦脊髓炎癥狀。病原LCMV屬砂粒病毒科、砂粒病毒屬。該病毒對乙醚和去污劑敏感，不耐熱，56℃20min即可滅活。0.1％甲醛、紫外線也可將其滅活。流行病學(xué)小鼠、大鼠、豚鼠、倉鼠、人都易感。小鼠可持續(xù)帶毒，而且病毒可存在感染小鼠的所有器官，包括唾液腺，因此，感染小鼠可經(jīng)唾液、鼻分泌物和尿液向外排毒，并且可通過子宮、乳汁傳給子代，據(jù)報道普通小鼠抗體陽性率為3%。臨床癥狀和病理變化小鼠感染LCMV依年齡、感染途徑及其他因素的不同，可表現(xiàn)為腦型、內(nèi)臟型和遲發(fā)型三種類型。小鼠帶毒后可表現(xiàn)為無癥狀的帶毒者。人感染后可引起流感樣癥狀或腦膜炎。對實驗的干擾抑制體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答（能在B、T淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中大量復(fù)制）；在腫瘤學(xué)研究中，常引起移植腫瘤污染。診斷（1）病毒分離與鑒定：可將病鼠的腦、肝等臟器制成勻漿接種于易感成年小鼠腦內(nèi)，小鼠通常在接種后4～5天發(fā)病，病鼠震顫、痙攣，隨即死亡。取病死小鼠的腦組織制成冰凍切片，采用免疫熒光技術(shù)檢查腦細(xì)胞中的LCMV抗原。（2）血清學(xué)試驗：ELISA試驗等。預(yù)防與控制首先防止野鼠進入動物房。發(fā)現(xiàn)小鼠已被感染，應(yīng)將小鼠全部淘汰，房舍徹底消毒后，重新引種，建立新種群。若為非常珍貴的品系，可篩選無病毒血癥及抗體陰性的種鼠。LCMV可經(jīng)胎盤垂直傳播，因此，通過剖腹產(chǎn)凈化鼠群需要注意選擇不帶LCMV的母鼠方能有效。第二十五頁，共四十一頁，2022年，8月28日猴皰疹病毒1型感染（B病毒）由猴B病毒又稱皰疹病毒引起的人和猴共患的一種傳染病。猴是B病毒的自然宿主，感染率可達10-60％。人類接觸性感染，主要表現(xiàn)腦脊髓炎癥狀，多數(shù)病人發(fā)生死亡。病原猴B病毒又稱為猴皰疹病毒1型（Ceropithecineherpesvirus1）。屬于皰疹病毒科，皰疹病毒亞科，單純皰疹病毒屬。在35種非人靈長類皰疹病毒中，只有B病毒對人有致病性。B病毒對乙醚、脫氧膽酸鹽、氯仿等脂溶劑敏感，對熱敏感，56℃30min即可滅活。紫外線也可將其滅活。流行病學(xué)

B病毒可感染猴、兔、豚鼠、小鼠。野生猴B病毒抗體陽性率遠(yuǎn)高于自繁猴。病毒主要經(jīng)性交、咬傷或帶毒唾液經(jīng)損傷的皮膚或粘膜直接傳播，也可以通過污染物間接傳播。B病毒可由感染處經(jīng)外周神經(jīng)傳到中樞神經(jīng)系統(tǒng)，形成潛伏感染。病毒還可長期潛伏于上呼吸道或泌尿生殖器官附近神經(jīng)節(jié)及組織器官，可經(jīng)唾液、尿液、精液間歇性排毒。隨著年齡增長，B病毒的感染率增加。臨床癥狀和病理變化猴感染B病毒后，初期在舌表面和口腔粘膜與皮膚交界的唇緣有皰疹，最后形成潰瘍表面，有纖維素性壞死痂皮，7-14天自愈。人感染該病毒后癥狀非常嚴(yán)重，主要呈上行性脊髓炎或腦脊髓炎。診斷血清抗體的檢測方法是主要的診斷方法，多用ELISA、免疫熒光檢測方法。由于猴B病毒對人的危害性較大，病原分離的診斷方法一般不提倡。近年來病毒核酸檢測方法應(yīng)用于猴B病毒感染的病原檢測，可以檢測到低于10個拷貝的病毒DNA。預(yù)防與控制定期檢疫，淘汰陽性猴，建立B病毒陰性的隔離區(qū)。與猴接觸的管理人員或?qū)嶒炄藛T要重視自身防護工作，一旦抓傷要立即用肥皂水洗凈傷口，再用碘酒消毒，并隔離觀察3周，出現(xiàn)臨床癥狀，及時對癥治療。第二十六頁，共四十一頁，2022年，8月28日猴免疫缺陷病毒感染由猴逆轉(zhuǎn)D型病毒（SimianretrovirusD,SRV）、猴免疫缺陷病毒（Simianimmunodeficiencyvirus,SIV）、猴T細(xì)胞趨向性病毒1型（SimianTlymphotropic,STLV-1）、泡沫病毒（Simianfoamyvirus,SFV）引起的免疫缺陷病毒病。猴感染后主要表現(xiàn)為亞臨床攜帶，免疫抑制、腫瘤的形成。目前，泡沫病毒還未列入檢測。病原

猴SIV病毒屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科，慢病毒亞科。該病毒與人的HIV病毒的遺傳同源性較高，在AIDS疾病的病原調(diào)查中，推測HIV病毒可能是從猿類免疫缺陷病毒SIV進化而來的。猴SRV病毒屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科，腫瘤病毒亞科，D型腫瘤病毒屬，具有多種血清型SRV/D1，2，3，4，5型。STLV-1病毒屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科，腫瘤病毒亞科，C型腫瘤病毒屬。該病毒與人的HTLV-1在生物學(xué)和基因?qū)W上具有很多相似的特性，它們有90-95%的核酸序列同系，在傳染的地理分布和地方性流行病的概況上，兩種病毒也有相關(guān)性，所以兩者的關(guān)聯(lián)性值得探討和研究。SFV病毒屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科，泡沫病毒亞科，泡沫病毒屬。SFV是有囊膜的單股正鏈RNA病毒，在感染細(xì)胞培養(yǎng)中形成巨大、多核、大量空泡，類似“泡沫”而被命名。泡沫病毒有11個血清型，1-3、9、10可從舊大陸猴和新大陸猴中獲得，4、6可從新大陸猴中獲得，11可從猩猩中獲得。第二十七頁，共四十一頁，2022年，8月28日流行病學(xué)

亞洲的獼猴自然感染SIV很少，但是將不同物種上分離的SIV病毒接種到獼猴上，能表現(xiàn)出AIDS的疾病特征。有報道在從事SIV感染恒河猴的模型研究的工作人員中，有3名工作人員意外接觸病毒感染。能從實驗人員體內(nèi)成功地檢測相應(yīng)抗體，但不引起病癥。亞洲的獼猴屬是猴SRV病毒的主要宿主，血清檢測顯示亞洲猴感染SRV的感染率比其它逆轉(zhuǎn)錄病毒要高?？尚纬傻胤叫愿腥?，疾病癥狀主要表現(xiàn)為亞臨床快速致死，免疫抑制，機會感染以及腫瘤形成，類似AIDS疾病。這種疾病癥狀正在逐漸轉(zhuǎn)向無癥狀感染，產(chǎn)生高抗體。猴可通過血、尿、唾液、奶、眼淚排出病毒，感染其它動物。STLV-1感染多種舊大陸靈長類，引起的病癥是T-細(xì)胞白血病或T-淋巴瘤，與人的T-細(xì)胞白血病的癥狀相似。猴感染STLV-1的年齡較大，自然感染的途徑是通過交配和母子垂直傳播。目前還沒有人類感染的報道。SFV病毒具有較高的感染性，猴群感染率大于80%。SFV病毒能感染淋巴組織和非淋巴組織，在口腔粘膜細(xì)胞、上皮細(xì)胞內(nèi)大量繁殖。通過唾液傳播到其它動物和人。動物的感染不通過性傳播途徑，咬傷或者被舔推測是被感染的主要途徑。對人的感染已有報道，感染人群主要是與非人靈長類密切接觸的人群，包括獸醫(yī)、動物飼養(yǎng)員、屠宰人員以及動物園管理人員。診斷血清抗體檢測方法是常用的猴逆轉(zhuǎn)錄病毒感染的診斷方法，主要包括

ELISA、免疫熒光、免疫印跡等檢測方法。目前熒光定量PCR的檢測方法也常被用于逆轉(zhuǎn)錄病毒的病原診斷中。防治目前無有效的治療手段，應(yīng)做好猴群的檢疫隔離工作。第二十八頁，共四十一頁，2022年，8月28日弓形體由剛地弓形體引起的一種世界范圍內(nèi)分布的人獸共患原蟲病。弓形體的終末宿主是貓。人和大多數(shù)動物通常呈隱性感染。豬、犬、貓等可呈顯性感染，隔離飼養(yǎng)的實驗動物少見感染。病原弓形體在整個生活史中可出現(xiàn)5個形態(tài)階段：速殖子、包囊、裂殖體、配子體和卵囊。流行病學(xué)本病傳染源主要是患病動物和帶蟲動物，人類、實驗動物及其他畜禽對弓形體都有易感性。實驗動物中以小鼠、地鼠最敏感，豚鼠、兔也能人工感染。此病主要經(jīng)口、胎盤、皮膚、粘膜感染。秋冬季和早春易發(fā)。生活史弓形體的整個發(fā)育過程需兩個宿主，小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、犬和猴為中間宿主，貓為終末宿主。弓形蟲在終末宿主的腸上皮細(xì)胞內(nèi)完成有性生殖隨糞便排出卵囊，在體外完成孢子化過程成為侵襲性卵囊，中間宿主動物吞食侵襲性卵囊后，在其體內(nèi)進行無性生殖，主要經(jīng)消化道感染。臨床癥狀和病理變化不同動物受侵害的部位不同，表現(xiàn)出不同的癥狀。大、小鼠感染后無臨床癥狀，但組織切片上可見灶性腦炎，幼齡鼠可出現(xiàn)角弓反射，排便、排尿紊亂。豚鼠主要表現(xiàn)為肝、脾腫大，局灶性壞死。貓急性感染后癥狀是昏睡、厭食、發(fā)熱、呼吸困難、黃疸和淋巴結(jié)病。慢性病例出現(xiàn)昏迷、貧血、流產(chǎn)、呼吸困難、下痢和神經(jīng)紊亂。診斷通過病變臟器涂片檢查蟲體，動物接種進行病原學(xué)診斷。也可采用血清學(xué)診斷，如間接血凝試驗、間接熒光試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗等方法。防治防止實驗動物的飼料、飲水被貓糞污染；避免與野鼠接觸。第二十九頁，共四十一頁，2022年，8月28日鉤端螺旋體病鉤端螺旋體病（Leptospirosis）是一種人獸共患傳染病。其病原體是多種鉤端螺旋體，而最常見的是波摩那型鉤端螺旋體。病原鉤端螺旋體個體非常纖細(xì)，長6～20μm，寬0.1～0.2μm，具有細(xì)密而規(guī)則的螺旋。流行病學(xué)各種家畜和野生的哺乳動物以及人等均可感染，鼠類最易感。病畜和帶菌動物是傳染源，病原體在腎小管中生長繁殖，從尿液排出后，污染周圍的水源、土壤，經(jīng)過損傷的皮膚、粘膜及消化道而感染。本病多發(fā)生于夏秋季節(jié)，以氣候溫暖、潮濕多雨、鼠類繁多的地區(qū)發(fā)病較多。實驗動物的感染通常是與帶菌野鼠接觸。臨床癥狀和病理變化人感染鉤端螺旋體所致疾病的臨床癥狀主要為發(fā)熱、貧血、黃疸、出血、血紅蛋白尿以及粘膜和皮膚壞死。許多動物均可感染本菌，多發(fā)生于幼齡動物，且大多呈一過性臨床反應(yīng)。診斷病原檢查、血清學(xué)診斷包括炭粉凝集試驗、乳膠凝集試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗和微囊凝集試驗。防治首先杜絕傳染源。要消滅實驗動物場周圍的鼠類，減少接觸鼠類和污染水的機會。其次，污染的場地及水源，可用漂白粉或2％氫氧化鈉液消毒。另外，在本病常發(fā)地區(qū)，應(yīng)注射鉤端螺旋體多價菌苗進行免疫。第三十頁，共四十一頁，2022年，8月28日結(jié)核病結(jié)核病是由分支桿菌(Mycobacterumsp.)引起的人和動物共患的一種烈性傳染病。在實驗動物中猴、犬、豚鼠、兔和貓等均可感染，以猴發(fā)病率最高。病原猴感染的分支桿菌主要有結(jié)核分支桿菌（Mycobacteriumtuberculosis）、牛型結(jié)核分支桿菌（M.bovis），以及非結(jié)核性分支桿菌（atypicalmycobacteria），最常見的是結(jié)核分支桿菌。結(jié)核分支桿菌屬分支桿菌屬，是革蘭氏陰性桿菌，菌體細(xì)長帶有彎曲，兩端鈍圓，長1～4μm，寬0.3～0.6μm，單個或并行相聚排列，有時呈分支狀。無鞭毛、無芽胞，菌體內(nèi)有明顯的顆粒。流行病學(xué)結(jié)核病人及結(jié)核病患畜為本病的傳染源，尤其開放性結(jié)核患者，能通過多種途徑向外界散播病原。獼猴可以經(jīng)消化道及呼吸道感染。結(jié)核病患猴可通過痰液、糞、尿等排出大量結(jié)核桿菌，被這種排泄物污染的塵埃就成為主要的傳播媒介。臨床癥狀和病理變化獼猴一旦感染結(jié)核病，很快發(fā)展成進行性疾病，很少像人一樣出現(xiàn)慢性抑制性癥狀。新大陸猴比舊大陸猴對結(jié)核病有抵抗?；\養(yǎng)猴一般看不到臨床癥狀，嚴(yán)重患病猴可見咳嗽、消瘦，呼吸困難，聽診有啰音，體溫升高不明顯，X線透視可見明顯的結(jié)核陰影，淋巴結(jié)腫大、脾腫大和肝腫大。有的皮膚產(chǎn)生結(jié)核性結(jié)節(jié)，有滲出物流出。結(jié)核分支桿菌和牛型結(jié)核分支桿菌在感染猴的肺、淋巴結(jié)、脾、肝等器官都能形成彌散性的黃白色干酪樣病灶。診斷主要通過結(jié)核菌素試驗，X線透視，紅細(xì)胞沉降率測定和細(xì)菌學(xué)檢驗、病理診斷等。防治

對結(jié)核菌素檢測陽性的實驗動物立即捕殺淘汰，并對同群飼養(yǎng)動物進行隔離檢疫；或?qū)嶒瀯游锝臃N卡介苗，一般無治療價值。第三十一頁，共四十一頁，2022年，8月28日鼠痘鼠痘是由鼠痘病毒（MousePoxVirus）感染實驗小鼠引起的一種烈性傳染病。本病多呈暴發(fā)性流行，致死率較高，危害極大。臨床表現(xiàn)為全身或局部皮膚痘疹，四肢、尾和頭部腫脹、潰爛、壞死甚至腳趾脫落為特征，故又稱為傳染性脫腳病。病原屬于痘病毒科，脊椎動物痘病毒亞科，正痘病毒屬。鼠痘病毒對干燥、低溫抵抗力較強，在潮濕環(huán)境下60℃10分鐘即可滅活。氧化劑、次氯酸鹽和氯化錳能滅活病毒。0.2%甲醛可破壞病毒的傳染性。流行病學(xué)本病的傳染源主要是病鼠和隱性帶毒鼠，經(jīng)皮膚病灶和糞尿向外排毒，污染周圍環(huán)境。病毒可經(jīng)皮膚傷口侵入機體，也可經(jīng)呼吸道和消化道感染。被感染的動物于10天左右皮膚損傷部位出現(xiàn)特征性病變?？祻?fù)小鼠可通過糞便長期排毒，成為主要傳染源。近年來，由于腫瘤的接種移植，可將鼠痘病毒直接接種給實驗小鼠。臨床癥狀和病理變化臨床上分為三種病型。急性致死型：多見于初次發(fā)生此病的鼠群，常于4～12小時死亡。病理變化可見肝壞死嚴(yán)重，脾、腸也可見到壞死灶。亞急性型～慢性經(jīng)過型：可見典型的缺腳畸形癥狀，病理變化可見脾臟腫大和淋巴結(jié)腫大，皮膚炎性水腫、壞死。無癥狀耐過型：動物外觀健康無病變，但在小鼠體內(nèi)有病毒增殖，成為帶毒動物。診斷鼠痘可通過臨床癥狀、病理學(xué)變化、血清學(xué)檢驗、病毒分離或在組織中檢查病毒抗原等方法進行診斷。組織病理學(xué)診斷，確認(rèn)特征性壞死病變，發(fā)現(xiàn)嗜酸性包涵體及電鏡下見到痘病毒即可做出診斷。防治對鼠痘沒有治療辦法。一旦鼠群被污染，容易發(fā)生持續(xù)性感染、隱性感染，很難清除，所以將鼠群全部淘汰，污染的飼養(yǎng)室、器具及感染鼠接觸過的實驗用具等均需用甲醛、次氯酸鈉等滅菌消毒或高壓滅菌消毒。

第三十二頁，共四十一頁，2022年，8月28日對實驗的干擾：

對與免疫有關(guān)實驗研究的影響，可嚴(yán)重影響體液和細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答；引起小鼠自發(fā)性自體免疫疾??；抑制吞噬細(xì)胞的吞噬能力；

對移植免疫的影響可加速同種異系，甚至同系小鼠間皮膚移植的排斥；

對致瘤作用研究的干擾，被感染后的組織易被誤診為浸潤性肺癌；能抑制某些化學(xué)藥致瘤作用。第三十三頁，共四十一頁，2022年，8月28日小鼠肝炎病毒由小鼠肝炎病毒（MouseHepatitisVirus，MHV）引起實驗小鼠的一種傳染性較高的疾病，臨床表現(xiàn)為肝炎、腦炎和腸炎。病原小鼠肝炎病毒屬冠狀病毒科、冠狀病毒屬。該毒株對酸穩(wěn)定，不同毒株對熱的穩(wěn)定性不同，其中低毒力毒株和對熱穩(wěn)定的毒株是實驗鼠群最嚴(yán)重的污染物。流行病學(xué)

MHV自然感染只發(fā)生于小鼠，通常呈隱性或亞臨床感染，但具高度傳染性。MHV的自然傳染是經(jīng)口和呼吸道途徑，感染的小鼠經(jīng)糞便、鼻咽滲出液、甚至尿液向環(huán)境中排出病毒，直接接觸感染小鼠或污染的糞便和墊料等是主要的傳播途徑。不同品系的小鼠對MHV的易感性不同，BALB/c及ICR小鼠較易感。臨床癥狀和病理特征臨床上通常分急性型和神經(jīng)型。急性型，小鼠表現(xiàn)精神沉郁、食欲廢絕、被毛粗亂、營養(yǎng)不良、腹瀉、脫水和消瘦等癥狀。神經(jīng)型，發(fā)病鼠兩后肢松弛性麻痹，結(jié)膜炎，全身抽搐，轉(zhuǎn)圈運動，2～4天內(nèi)死亡。剖檢以肝臟病變?yōu)橹?，肝臟表面散在出血點和灰黃色壞死點，也可伴有黃疸，帶血的腹腔滲出液和腸道的出血。嗜神經(jīng)毒株感染時，可產(chǎn)生中樞神經(jīng)系統(tǒng)的病變，主要為脫髓鞘性腦脊髓炎。

診斷根據(jù)臨床癥狀和病理變化可做出初步診斷。確診需進行病毒分離鑒定、電鏡檢查和血清學(xué)診斷，血清學(xué)診斷ELISA和IFA方法為常用方法。預(yù)防在未感染鼠群，應(yīng)加強飼養(yǎng)管理和環(huán)境消毒，嚴(yán)禁病毒侵入，所有引進的動物必須來自無MHV的鼠群，鼠群一旦感染，必須淘汰整個鼠群。第三十四頁，共四十一頁，2022年，8月28日對實驗研究的干擾：1、引起小鼠致死性肝炎、腦炎和腸炎2、改變機體的各種免疫應(yīng)答參數(shù)（產(chǎn)生高水平的IL-6、IFN-gamma和低水平的IL-2和IL-l0）。3、是許多酶系統(tǒng)發(fā)生改變，增高某些肝酶活性（異檸檬酸脫氫酶，葡萄糖-6-磷酸脫氫酶和肝谷-草轉(zhuǎn)氨酶）而抑制另一些肝臟的酶（P-450,NADAH，肝氧化酶琥珀酸脫氫酶）。4、裸鼠感染可嚴(yán)重影響腫瘤免疫學(xué)的研究。第三十五頁，共四十一頁，2022年，8月28日仙臺病毒小鼠仙臺病毒（MouseSendaiVirus）感染是最難控制的病毒感染之一，感染可分為兩種類型，急性型多見于斷乳小鼠，主要表現(xiàn)呼吸道癥狀；多數(shù)情況下呈隱性感染型，可對實驗研究產(chǎn)生嚴(yán)重干擾。病原

仙臺病毒屬副粘病毒科副粘病毒屬。病毒對乙醚及熱敏感，pH3條件下極易滅活。流行病學(xué)

自然條件下仙臺病毒可感染小鼠、大鼠、倉鼠和豚鼠。在未感染過仙臺病毒的易感鼠群，新生乳鼠和未成年小鼠最為易感。不同品系小鼠對仙臺病毒的易感性不同（NIH、129/ReJ、DBA等較易感）。主要的傳播和擴散方式是直接接觸感染和空氣傳播。臨床癥狀和病理變化

急性型：常不表現(xiàn)臨床癥狀，短時間內(nèi)自愈或轉(zhuǎn)變?yōu)榈胤叫粤餍小Ｂ孕停撼３实胤叫粤餍校《驹谑笕褐虚L期存在。大體解剖觀察：主要可見呼吸道和局部淋巴結(jié)病變。診斷

根據(jù)臨床癥狀和病理變化可做出初步診斷，確診需進行雞胚尿囊腔培養(yǎng)病毒分離鑒定和血清學(xué)診斷。血清學(xué)診斷以ELISA和IFA實驗敏感性和特異性好。防治

在未感染鼠群，應(yīng)加強飼養(yǎng)管理和環(huán)境消毒，嚴(yán)禁病毒侵入，所有引進的動物必須來自無仙臺病毒的鼠群。定期進行血清學(xué)檢測，及時發(fā)現(xiàn)感染鼠。一旦感染，淘汰感染鼠群。對實驗的感染作用1、嚴(yán)重影響機體體液與細(xì)胞免疫應(yīng)答2、影響干擾實驗性致瘤作用3、影響胚胎的發(fā)育，對鼠類生殖繁育造成影響第三十六頁，共四十一頁，2022年，8月28日兔出血癥兔出血癥（RabbitHemorrhagicDisease）是由兔出血癥病毒（RHDV）引起的兔的一種烈性傳染病，又稱“兔瘟”，主要特征是病兔突然死亡，臨死興奮，掙扎、抽搐、慘叫。病原兔出血癥病毒屬細(xì)小病毒科，細(xì)小病毒屬。病毒對氯仿和乙醚不敏感，能耐酸，病毒對紫外線和干燥等不良環(huán)境的抵抗力較強。1%氫氧化鈉4小時、1%～2%甲醛、1%漂白粉3小時才被滅活。流行病學(xué)本病只發(fā)生于兔，傳染源主要是病兔和帶毒兔，可通過直接接觸感染，也可通過排泄物、分泌物