實驗生理基本理論

實驗生理基本理論第一頁，共六十八頁，2022年，8月28日第一章緒論

第一節(jié)實驗生理科學(xué)概述一、目的二、特點三、基本要求第二頁，共六十八頁，2022年，8月28日生理學(xué)藥理學(xué)病理生理學(xué)實驗生理科學(xué)實驗課一、目的第三頁，共六十八頁，2022年，8月28日實驗生理科學(xué)實驗的基本理論：4學(xué)時經(jīng)典性實驗：16學(xué)時仿真性實驗：穿插或用業(yè)余時間進(jìn)行綜合性實驗：44學(xué)時探索性實驗：20學(xué)時實驗操作考核：4學(xué)時科研小組活動：部分學(xué)生利用業(yè)余時間進(jìn)行第四頁，共六十八頁，2022年，8月28日1．實驗對象均為活體2．影響因素多3．規(guī)范操作二、特點第五頁，共六十八頁，2022年，8月28日三、基本要求(1)積極準(zhǔn)備閱讀本書和有關(guān)理論了解實驗的目的、要求、步驟和操作程序理解實驗設(shè)計原理，預(yù)測實驗結(jié)果1．實驗前第六頁，共六十八頁，2022年，8月28日(2)設(shè)計好實驗原始記錄的表格(3)結(jié)合實驗內(nèi)容復(fù)習(xí)有關(guān)理論(4)未預(yù)習(xí)者不得參與實驗(5)檢查實驗器材和藥品第七頁，共六十八頁，2022年，8月28日2.實驗中(1)提前到達(dá)，外出請假(2)保持整齊、清潔(3)保持安靜，不進(jìn)行無關(guān)活動(4)愛護(hù)公物，損壞儀器應(yīng)報告(5)按步驟認(rèn)真操作，注意保護(hù)實驗動物和標(biāo)本，節(jié)省實驗器材和藥品。(6)注意安全，嚴(yán)防觸電、火災(zāi)、被動物咬傷及中毒事故的發(fā)生。第八頁，共六十八頁，2022年，8月28日(7)仔細(xì)、耐心地觀察實驗過程中所出現(xiàn)的現(xiàn)象，及時、真實、客觀地記錄實驗結(jié)果，描記實驗曲線或圖形，并加上必要的文字注釋，不可單憑記憶來描述實驗結(jié)果，以免出錯或遺漏，更不可隨意修改。實驗報告中應(yīng)盡可能使用原始結(jié)果。應(yīng)培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)求實的科學(xué)作風(fēng)。第九頁，共六十八頁，2022年，8月28日(8)實驗結(jié)果思考：①取得了什么結(jié)果？②為什么出現(xiàn)這種結(jié)果？③結(jié)果的生理或臨床意義？④非預(yù)期結(jié)果的原因？第十頁，共六十八頁，2022年，8月28日3.實驗后(1)整理實驗儀器，注意復(fù)位，正常關(guān)機(jī)、清潔并防塵。(2)器械應(yīng)清洗、抹干、清點、交還。損壞或短少？賠償!第十一頁，共六十八頁，2022年，8月28日(3)動物尸體、標(biāo)本、紙片和廢品應(yīng)放到指定地點。抹干凈實驗臺。自身安全意識環(huán)境保護(hù)意識。第十二頁，共六十八頁，2022年，8月28日(4)值日生應(yīng)搞好實驗室的清潔衛(wèi)生工作，離開實驗室前應(yīng)關(guān)燈、關(guān)窗、關(guān)水龍頭。(5)整理、分析實驗結(jié)果，認(rèn)真、獨立撰寫實驗報告并按時遞交。第十三頁，共六十八頁，2022年，8月28日第二節(jié)實驗結(jié)果的處理(見后)第十四頁，共六十八頁，2022年，8月28日第三節(jié)實驗報告的寫作文字簡練、通順書寫清楚、整潔明確使用標(biāo)點符號實驗報告的格式和要求如下：第十五頁，共六十八頁，2022年，8月28日1姓名、班次、組別、學(xué)號2實驗序號和題目(日期.室溫.氣壓)3實驗?zāi)康暮啙?、清楚?實驗對象5實驗方法略。6實驗結(jié)果把經(jīng)過處理的結(jié)果寫上并附必要的原始資料。

第十六頁，共六十八頁，2022年，8月28日7討論和結(jié)論分析、推理（解釋）。結(jié)論是對實驗結(jié)果進(jìn)行分析后所得到的概念或論點。結(jié)論應(yīng)與本實驗的目的相呼應(yīng)，本實驗未能驗證的內(nèi)容不要寫到結(jié)論中。也不要羅列具體的經(jīng)過或重復(fù)討論的內(nèi)容。結(jié)論的文字要精煉。（注明參考讀物的出處）第十七頁，共六十八頁，2022年，8月28日第二章實驗生理科學(xué)常用儀器第一節(jié)BL-420生物機(jī)能實驗系統(tǒng)

第二節(jié)MS-2000多媒體生物信號記錄分析系統(tǒng)第三節(jié)721型分光光度計

第四節(jié)TDL-5型臺式離心機(jī)第五節(jié)常用手術(shù)器械第六節(jié)常用生理溶液張力換能器

壓力換能器第十八頁，共六十八頁，2022年，8月28日一、蛙類手術(shù)器械1．剪刀2．鑷子3．金屬探針4．玻璃分針5．蛙心夾6．蛙板第十九頁，共六十八頁，2022年，8月28日二、哺乳類手術(shù)器械1．手術(shù)刀2．剪刀3．鑷子類4．止血鉗5．咬骨鉗6．顱骨鉆7．動脈夾8．氣管插營9．血管插管第二十頁，共六十八頁，2022年，8月28日實驗研究設(shè)計?第二十一頁，共六十八頁，2022年，8月28日楊斌指導(dǎo)、2003級學(xué)生伍國俊等的

“L-芝麻脂素的鎮(zhèn)痛作用及機(jī)制研究”獲二等獎秦箐.鄺曉聰?shù)戎笇?dǎo)、2003級學(xué)生何薇等的“茉莉花化學(xué)成分及其免疫活性研究”共兩項成果獲二等獎“挑戰(zhàn)杯”第二十二頁，共六十八頁，2022年，8月28日

莫曾南指導(dǎo)、我校2003級本科生譚愛花、廖存合寫的論文“Meta-analysis

of

holmium

laser

enucleation

vs

transurethral

resection

of

the

prostate

for

symptomatic

prostatic

obstruction”

已經(jīng)被British

Journal

of

Surgery

英國外科學(xué)雜志接受發(fā)表，將在最近一期刊出。該雜志2005年影響因子為3.722，是國際知名的外科學(xué)臨床雜志。第二十三頁，共六十八頁，2022年，8月28日鐘南山、袁隆平等第二十四頁，共六十八頁，2022年，8月28日2006年安德魯·法爾和克雷格·梅洛

（RNA干擾機(jī)制）2005年巴里·馬歇爾和羅賓·沃倫

（幽門螺桿菌）2004年理查德·阿克塞爾和琳達(dá)·巴克

（氣味受體和嗅覺系統(tǒng)）諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎第二十五頁，共六十八頁，2022年，8月28日第四章實驗研究設(shè)計

第一節(jié)基本程序一、立題二、實驗設(shè)計三、實驗和觀察四、實驗結(jié)果的處理五、研究結(jié)論第二節(jié)第二十六頁，共六十八頁，2022年，8月28日1.選題原則(1)目的性做什么?為什么做?(2)創(chuàng)新性新技術(shù)/方法/理論,

修改完善原有的......(3)科學(xué)性科學(xué)依據(jù)(4)可行性主觀/客觀條件2.假說的建立預(yù)期結(jié)果一、立題研究設(shè)計的前提，決定研究方向和內(nèi)容返回第二十七頁，共六十八頁，2022年，8月28日二、實驗設(shè)計制定研究計劃和方案：研究意義、內(nèi)容、目標(biāo)、方法、技術(shù)路線、實驗手段、技術(shù)關(guān)鍵、設(shè)備、試劑、對象任務(wù)：控制干擾因素節(jié)省人力物力財力多因素多劑量多指標(biāo)返回(目的、專業(yè)、統(tǒng)計學(xué))第二十八頁，共六十八頁，2022年，8月28日三、實驗和觀察1.實驗準(zhǔn)備和預(yù)實驗①理論準(zhǔn)備理論及假說，方法和技術(shù)②實施準(zhǔn)備設(shè)備、藥物及試劑、實驗方法及指標(biāo)、對象③預(yù)實驗熟悉技術(shù)、完善方案第二十九頁，共六十八頁，2022年，8月28日2.實驗及記錄①正式實驗②原始記錄文字、數(shù)字、圖形、照片、表格、錄像、電腦數(shù)據(jù)③結(jié)果判斷錯誤操作?不合理?新發(fā)現(xiàn)?（及時、完整、準(zhǔn)確、整潔）返回(方式、內(nèi)容)第三十頁，共六十八頁，2022年，8月28日四、實驗結(jié)果的處理①整理原始數(shù)據(jù)或資料，計算各組數(shù)據(jù)的均值和標(biāo)準(zhǔn)差，表、圖②統(tǒng)計學(xué)分析(絕不能有研究者的偏見、對數(shù)據(jù)任意取舍)第三十一頁，共六十八頁，2022年，8月28日原始資料①計量資料：用儀器、工具或其它定量方法對每個觀察單位的某項標(biāo)志進(jìn)行測量，并把測量結(jié)果用數(shù)值大小表示出來的資料，有單位。如血壓、呼吸、尿量、血流量等。（連續(xù)變量，均值和標(biāo)準(zhǔn)差）②計數(shù)材料：將觀察單位按某種屬性或類別分組，然后清點各組觀察單位數(shù)所得的資料。（與否：陽性或陰性，有效與無效,生或死）第三十二頁，共六十八頁，2022年，8月28日計量性質(zhì)實驗

(高低、長短、快慢、輕重、多少等)（標(biāo)注單位和數(shù)值定量，列成表格）

記錄、整理結(jié)果第三十三頁，共六十八頁，2022年，8月28日做表格應(yīng)注意：①將觀察的項目列于表的左側(cè)，由上而下逐項填入。②表的右側(cè)可按時間或數(shù)量變化的順序或觀察的指標(biāo)的不同由左至右逐格寫入。③必要時可根據(jù)表格的數(shù)值繪圖。第三十四頁，共六十八頁，2022年，8月28日曲線記錄實驗(標(biāo)注說明、刺激記號、時間記號等）

整理曲線圖第三十五頁，共六十八頁，2022年，8月28日繪圖注意：①附繪圖所依的數(shù)值表格。②橫軸表示刺激條件或給藥劑量大小，縱軸表示反應(yīng)的強(qiáng)度，坐標(biāo)軸應(yīng)給予適當(dāng)?shù)淖⒔?。③圖的大小應(yīng)恰當(dāng)。④在圖的下方寫上圖號和標(biāo)題。⑤圖中各點間可用直線連接；如果不是連續(xù)的變化也可用柱形圖表示。第三十六頁，共六十八頁，2022年，8月28日第三十七頁，共六十八頁，2022年，8月28日第三十八頁，共六十八頁，2022年，8月28日第三十九頁，共六十八頁，2022年，8月28日需要一定數(shù)量標(biāo)本的結(jié)果并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理返回記錄對照資料?。?！第四十頁，共六十八頁，2022年，8月28日五、研究結(jié)論分析實驗結(jié)果和現(xiàn)象概括出結(jié)論（緊扣假說）（嚴(yán)謹(jǐn)、精練、準(zhǔn)確）返回結(jié)果整理、分析→變化的規(guī)律性→規(guī)律的成因及機(jī)制第四十一頁，共六十八頁，2022年，8月28日第二節(jié)實驗設(shè)計三大要素一、處理因素二、受試對象三、實驗效應(yīng)第三節(jié)電刺激對大鼠體感Ⅱ區(qū)痛單位活動的影響山梗菜堿對家兔嗎啡所致呼吸抑制的影響第四十二頁，共六十八頁，2022年，8月28日１.抓住主要因素過多？過少？２.確定因素的強(qiáng)度如刺激強(qiáng)度、藥物劑量３.處理因素的標(biāo)準(zhǔn)化如刺激參數(shù)４.非處理因素的控制如溫度一、處理因素返回第四十三頁，共六十八頁，2022年，8月28日二、受試對象1.動物：蛙、大鼠、小鼠、兔（選擇）2.人返回模型、特征第四十四頁，共六十八頁，2022年，8月28日三、實驗效應(yīng)1.實驗方法的選擇：

①生理學(xué)、生物化學(xué)、毒理學(xué)、免疫學(xué)等②整體方法、局部分析法③整體、器官/系統(tǒng)、細(xì)胞/分子水平④急性（在體/離體）、慢性第四十五頁，共六十八頁，2022年，8月28日①特異性：②客觀性：③靈敏度：④精確度：⑤可行性：⑥認(rèn)可性：（低→假陽性）（避免主觀因素的影響）（低→假陰性）（又稱準(zhǔn)確度，含精密度、正確度）技術(shù)/設(shè)備依據(jù)或經(jīng)鑒定2.實驗指標(biāo)（檢測指標(biāo)）選擇的基本條件：返回研究對象中某些可被檢測儀或研究者感知的特征或現(xiàn)象。第四十六頁，共六十八頁，2022年，8月28日圖1計量的精密度、正確度和精確度的示意圖（圓心O為被測量的“真實值”，黑點為其測得值）圖(a)：正確度較高、精密度較差；圖(b)：精密度較高、正確度較差；圖(c)：精確度(準(zhǔn)確度)較高，即精密度和正確度都較高。精密度：多次測得值的一致性正確度：測得值與真實值的接近程度第四十七頁，共六十八頁，2022年，8月28日第三節(jié)實驗設(shè)計三大原則一、對照原則三、重復(fù)原則二、隨機(jī)原則第四節(jié)第四十八頁，共六十八頁，2022年，8月28日1.空白對照

不給任何處理

2.假處理對照3.安慰劑對照雙肓4.歷史對照

5.自身對照

（處理組與對照組前后效應(yīng)）6.標(biāo)準(zhǔn)對照(陽性對照)

標(biāo)準(zhǔn)方法或同類藥物7.相互對照

多個平行實驗組互為對照一、對照原則返回第四十九頁，共六十八頁，2022年，8月28日(1)假處理對照組：麻油+假燙傷(37℃水)(2)單純阻斷假處理組：RU38486+假燙傷(3)燙傷對照組：麻油+95℃水(切片證實)(4)燙傷+GR阻斷組：RU38486+燙傷iv生理鹽水1mliv甘露醇1ml第五十頁，共六十八頁，2022年，8月28日二、隨機(jī)原則機(jī)會均等，減少誤差返回分層隨機(jī)第五十一頁，共六十八頁，2022年，8月28日三、重復(fù)原則

P≤0.05或P≤0.01生物個體差異小處理因素強(qiáng)度較大實驗技術(shù)較先進(jìn)計量資料高效實驗設(shè)計大動物例數(shù)可以較少返回重現(xiàn)性與重復(fù)數(shù)動物計量資料計數(shù)資料小動物（小鼠、大鼠、蛙）≤10≥30

中等動物（豚鼠、兔）≥6≥20

大動物（貓、猴、犬）≥5≥10第五十二頁，共六十八頁，2022年，8月28日第四節(jié)常用實驗設(shè)計方法一、完全隨機(jī)設(shè)計二、配對設(shè)計三、配伍設(shè)計四、拉丁方設(shè)計五、正交設(shè)計第五十三頁，共六十八頁，2022年，8月28日單因素設(shè)計(t、F、x2)編號，取隨機(jī)數(shù)字，奇數(shù)A，偶數(shù)B，加一個隨機(jī)數(shù)兔號1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

數(shù)字84

42

17

53

31

57

24

55

06

88

77

04

74

47

67

21

76組別BBAAAABABBABBAAA調(diào)整B76/9=4一、完全隨機(jī)設(shè)計：16只大白兔隨機(jī)分為二組，A組9只，調(diào)1只到B組：第17位隨機(jī)數(shù)為76，76/9得余數(shù)4，故A組的第4只兔即6號兔調(diào)到B組第五十四頁，共六十八頁，2022年，8月28日單因素設(shè)計(配對t)配對并編號，取隨機(jī)數(shù)字，奇數(shù)第1個為A，偶數(shù)第1個為B

對數(shù)1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

數(shù)字31

16

93

32

43

50

27

89

87

19

20

15

第1個ABABABAAAA

BA

第2個BABABABBBBAB二、配對設(shè)計：第五十五頁，共六十八頁，2022年，8月28日雙因素設(shè)計(雙因素F)三、配伍設(shè)計：第五十六頁，共六十八頁，2022年，8月28日四、拉丁方設(shè)計：三因素設(shè)計(三因素F)ABCDBADCCDBADCAB

標(biāo)本號1

23

4

用1

ABCD

藥2BDAC

順3CADB

序4

DCBA

n×n第五十七頁，共六十八頁，2022年，8月28日五、正交設(shè)計：高效多因素設(shè)計記為L9(34)，L表示正交實驗，L的右下標(biāo)表示實驗次數(shù)，括號內(nèi)數(shù)字表示水平數(shù)，右上角的數(shù)字表示因素數(shù)下例表示做9次實驗，每個因素有三個水平，安排4個因素

(適于藥物配比)(四種藥物三個劑量)第五十八頁，共六十八頁，2022年，8月28日實驗號藥物A藥物B藥物C藥物D1低低低低

2低中中中

3低高高高

4中低中高

5中中高低

6中高低中

7高低高中

8高中