GB/T 21102-2007動(dòng)物源性飼料中兔源性成分定性檢測(cè)方法實(shí)時(shí)熒光PCR方法

犐犆犛６５．１２０

犅４６

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

犌犅／犜２１１０２—２００７

動(dòng)物源性飼料中兔源性成分定性

檢測(cè)方法實(shí)時(shí)熒光犘犆犚方法

犐犱犲狀狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀狅犳狉犪犫犫犻狋犱犲狉犻狏犲犱犿犪狋犲狉犻犪犾狊犻狀犪狀犻犿犪犾狅狉犻犵犻狀犪狋犲犱犳犲犲犱狊狋狌犳犳狊—

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２００７１０２４發(fā)布２００８０４０１實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

書

中華人民共和國(guó)

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

動(dòng)物源性飼料中兔源性成分定性

檢測(cè)方法實(shí)時(shí)熒光犘犆犚方法

ＧＢ／Ｔ２１１０２—２００７

中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京西城區(qū)復(fù)興門外三里河北街１６號(hào)

郵政編碼：１０００４５

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電話：（０１０）５１２９９０９０、６８５２２００６

２００７年１２月第一版

書號(hào)：１５５０６６·１３０２９０

版權(quán)專有侵權(quán)必究

舉報(bào)電話：（０１０）６８５２２００６

書

犌犅／犜２１１０２—２００７

前言

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局提出。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位：中華人民共和國(guó)遼寧出入境檢驗(yàn)檢疫局、寶生物工程（大連）有限公司、中國(guó)

檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院、中華人民共和國(guó)山東出入境檢驗(yàn)檢疫局、中華人民共和國(guó)深圳出入境檢驗(yàn)檢疫

局、中華人民共和國(guó)上海出入境檢驗(yàn)檢疫局。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：鄭秋月、李晶泉、王玉萍、徐昊、曹際娟、于愛麗、張舒亞、陳穎、徐寶梁、高宏偉、

宗卉、金東權(quán)。

本標(biāo)準(zhǔn)首次發(fā)布。

Ⅰ

書

犌犅／犜２１１０２—２００７

動(dòng)物源性飼料中兔源性成分定性

檢測(cè)方法實(shí)時(shí)熒光犘犆犚方法

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動(dòng)物源性飼料中兔源性成分實(shí)時(shí)熒光ＰＣＲ檢測(cè)方法，該檢測(cè)方法的檢出限為

０．１％。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于動(dòng)物源性飼料中兔源性成分的定性檢測(cè)。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

ＧＢ６６８２分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

ＧＢ／Ｔ１４６９９．１飼料采樣（ＧＢ／Ｔ１４６９９．１—２００５，ＩＳＯ６４９７：２００２，ＩＤＴ）

ＳＮ／Ｔ１１９３基因檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求

３術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

３．１

實(shí)時(shí)熒光犘犆犚狉犲犪犾狋犻犿犲犘犆犚

實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。

３．２

犆狋值犮狔犮犾犲狋犻犿犲

每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的閾值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。

４原理

采用ＴａｑＭａｎ實(shí)時(shí)熒光ＰＣＲ技術(shù)，根據(jù)線粒體ＤＮＡ的細(xì)胞色素Ｃ氧化酶亞單位Ｉ（ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅＣ

ｏｘｉｄａｓｅｓｕｂｕｎｉｔＩ，ＣＯＸＩ）基因上動(dòng)物種間多態(tài)性的差異而進(jìn)行兔源性成分鑒定。利用裂解液破碎細(xì)

胞，三氯甲烷抽提蛋白質(zhì)，異丙醇沉淀得到