課本實驗簡析

課本實驗簡析研討、交流合作、共贏實驗一檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)實驗材料1．做可溶性還原性糖鑒定實驗，應選含還原糖多，顏色為白色的植物組織，如蘋果、梨。（因為組織的顏色較淺，易于觀察。）2．做脂肪的鑒定實驗。應選富含脂肪的種子，以花生種子為最好，實驗前一般要浸泡3～4小時（也可用蓖麻種子）。50﹪的酒精作用是洗去浮色.需要顯微鏡.(若用待測組織樣液,試管中鑒定,無需顯微鏡.)3．做蛋白質(zhì)的鑒定實驗，可用富含蛋白質(zhì)的黃豆或稀釋的雞蛋清。比較項目斐林試劑雙縮脲試劑組成溶液的濃度NaOH：0.1g/mlCuSO4：0.05g/mlNaOH：0.1g/mlCuSO4：0.01g/ml使用原理新配制的Cu（OH）2堿性環(huán)境下的Cu2+使用方法先把NaOH和CuSO4等量混合，后立即使用，要加熱先加入NaOH，后滴加CuSO4，CuSO4不能過量鑒定對象還原性糖蛋白質(zhì)顏色反應磚紅色沉淀紫色實驗二用顯微鏡觀察多種多樣的

細胞（1）為什么要先用低倍鏡觀察清楚后，把要放大觀察的物像移至視野的中央，再換高倍鏡觀察？答：如果直接用高倍鏡觀察，往往由于觀察的對象不在視野范圍內(nèi)而找不到。因此，需要先用低倍鏡觀察清楚，并把要放大觀察的物像移至視野的中央，再換高倍鏡觀察。（2）用轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)過高倍鏡后，轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋行不行？答:不行。用高倍鏡觀察，只需微調(diào)即可。轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋，容易壓壞玻片。（3）低倍鏡如何轉(zhuǎn)換成高倍鏡?順序：移裝片→轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器換高倍鏡→調(diào)反光鏡或光圈→調(diào)細準焦螺旋注：換高倍物鏡時只能移動轉(zhuǎn)換器，換鏡后，只準調(diào)節(jié)細準焦和反光鏡（或光圈）。實驗三：通過模擬實驗探究膜的

透性漏斗管內(nèi)的液面為什么會升高？平衡時有沒有水分子的運動?平衡時哪一部分的濃度高?答：由于單位時間內(nèi)透過玻璃紙進入長頸漏斗的水分子數(shù)量多于從長頸漏斗滲出的水分子數(shù)量，使得管內(nèi)液面升高;有;漏斗內(nèi).2．如果用一層紗布代替玻璃紙，漏斗管內(nèi)的液面還會升高嗎？答：用紗布替代玻璃紙時，因紗布的孔隙很大，蔗糖分子也可以自由通透，因而液面不會升高。3．如果燒杯中不是清水，而是同樣濃度的蔗糖溶液，結果會怎樣？答：半透膜兩側(cè)溶液的濃度相等時，單位時間內(nèi)透過玻璃紙進入長頸漏斗的水分子數(shù)量等于滲出的水分子數(shù)量，液面也不會升高。實驗四:觀察植物細胞的質(zhì)壁分離和復原實驗材料：紫色洋蔥鱗片葉的外表皮。因為液泡呈紫色，易于觀察。也可用水綿代替。理論上成熟植物細胞都可以,液泡無色的可染色或適當調(diào)暗視野。若用洋蔥鱗片葉的內(nèi)表皮，則可用胭脂紅染色。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做質(zhì)壁分離劑對細胞無毒害作用。實驗四:觀察植物細胞的質(zhì)壁分離和復原1.如果將表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相同的蔗糖溶液中，這些表皮細胞會出現(xiàn)什么現(xiàn)象？答：表皮細胞維持原狀，因為細胞液的濃度與外界溶液濃度相等。2．當紅細胞細胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時，紅細胞會不會發(fā)生質(zhì)壁分離？為什么？答：不會。因為紅細胞不具細胞壁。只有活的/成熟的植物細胞可發(fā)生.3.如何操作使蓋玻片下的細胞浸沒在0.3g/ml的蔗糖溶液中?答：在蓋玻片的一側(cè)滴0.3g/ml的蔗糖溶液,另一側(cè)用吸水紙吸引,重復幾次.4.本實驗要不要用顯微鏡?要用到高倍鏡嗎?答：要用顯微鏡,但只需要低倍鏡即可.實驗四:觀察植物細胞的質(zhì)壁分離和復原5.如果用蔗糖的質(zhì)量濃度為0.5ｇ/mL的溶液再做此實驗，細胞發(fā)生質(zhì)壁分離后，為什么不再復原？答：細胞過度失水而死亡，原生質(zhì)層失去彈性6.如果以水綿作為實驗材料進行實驗，又會出現(xiàn)什么現(xiàn)象？你有何依據(jù)？答：水綿是水生植物，細胞液濃度更低，細胞質(zhì)壁分離現(xiàn)象更明顯。7.如果用0.18mol/L的KNO3溶液做此實驗，會觀察到什么現(xiàn)象？產(chǎn)生這一現(xiàn)象的生理基礎是什么？答：會發(fā)生質(zhì)壁自動復原現(xiàn)象。K離子和NO3離子通過主動運輸進入細胞，細胞液濃度升高，細胞吸水，質(zhì)壁復原。實驗五探究影響酶活性的因素1.該實驗最后結果的檢測用碘液,能否用斐林試劑?為什么?答:不能用,因為斐林試劑的使用需要水浴加熱,而本實驗是探究溫度對酶活性的影響.2.若用淀粉酶,蔗糖酶和淀粉來驗證酶的專一性,用什么檢測試劑?答:用斐林試劑.不能用碘液的原因是它只能檢測淀粉是否被水解,不能檢測蔗糖是否被水解.3.為什么不能只用不同溫度處理淀粉或酶溶液答：防止混合時，由于兩種溶液的溫度不同而使混合后溫度發(fā)生變化，反應溫度不是操作者所要控制的溫度，影響實驗結果。實驗六:葉綠體色素的提取和分離

1．濾紙條上的濾液細線，為什么不能觸及層析液？答：濾紙條上的濾液細線如觸及層析液，濾紙上的葉綠體色素就會溶解在層析液中，實驗會失敗。2．提取和分離葉綠體色素的關鍵是什么？答：提取葉綠體色素的關鍵是：①葉片要新鮮、濃綠；②研磨要迅速、充分；③濾液收集后，要及時用棉塞將試管口塞緊，以免濾液揮發(fā)。分離葉綠體色素的關鍵是：一是濾液細線要細且直，而且要重復劃幾次；二是層析液不能沒及濾液線。3.實驗結果怎樣?答:如圖色素帶的寬度代表色素的含量;

色素帶的擴散距離代表色素的溶解度,

溶解度最大的是胡蘿卜素,最小的是葉綠素b.胡蘿卜素（橙黃色）葉黃素（黃色）葉綠素a（藍綠色）葉綠素b（黃綠色）實驗六:葉綠體色素的提取和分離4.若色素帶出現(xiàn)異常情況分析原因：(1)色淺原因：提取過程：①老葉，色素少②未加SiO2，研磨不充分③無水乙醇加入過多④用濾紙過濾⑤放置時間過長⑥未及時用棉塞將試管口塞緊或未避光保存

分離過程：①未重復畫濾液細線，積累色素過少②層析液觸及濾液線③未加培養(yǎng)皿蓋（2）色素帶重疊原因：濾液線畫得過粗、濾液細線畫得過高、濾紙不干燥、濾紙下端未剪去兩角（3）色素帶殘缺不全原因：葉片枯黃、層析液波及濾液線、未加CaCO3。實驗七:探究酵母菌的呼吸方式需要注意的幾個問題1）各裝置的連通管盡量不漏氣2）檢測酒精生成時，配藥后要馬上檢測3）由于裝置簡單，不可能形成完全的有氧或無氧條件，因此不排除裝置1中有酒精生成。檢測酒精生成，裝置1可能出現(xiàn)少許的灰綠色4）最好設置對照裝置：同裝置1或裝置2，但要將酵母液換成葡萄糖液。5)裝置1間歇性通氣目的是什么?答:為了保證NaOH能充分吸收無菌空氣中的CO2,又能保證酵母菌充分進行有氧呼吸6)裝置2錐形瓶先封口放置一段時間再連通澄清石灰水,為什么?答:讓酵母菌充分消耗掉瓶中的O2,排除酵母菌因有氧呼吸產(chǎn)生的CO2的干擾實驗八觀察細胞的有絲分裂（1）為什么洋蔥根尖培養(yǎng)至5cm，但制作裝片時僅切取2～3mm的根尖？（2）為什么取材時間通常選擇上午10時至下午2時？試分析影響細胞分裂的可能生態(tài)因素。（3）為什么要用鹽酸對根尖進行解離？解離時間不足會怎樣影響實驗觀察？（4）解離后為什么要用清水進行漂洗？不漂洗或漂洗時間不足會怎樣影響實驗觀察？（5）為什么要用龍膽紫溶液（或醋酸洋紅液）進行染色？主要染色結構是什么？（6）制裝片時為什么要把根尖弄碎和壓片？（7）視野中哪個時期的細胞數(shù)目最多？為什么？（8）視野中觀察到的是活細胞還是死細胞？實驗九觀察細胞的減數(shù)分裂觀察減數(shù)分裂的材料最好是雄性個體的精母細胞。不可用哺乳動物的卵巢觀察的原因是：一是細胞少，二是看不全完整的分裂時期。實驗十調(diào)查常見的人類遺傳病調(diào)查時，最好選取群體中發(fā)病率較高的單基因遺傳病，如紅綠色盲、白化病、高度近視（600度以上）等。調(diào)查發(fā)病率應在足夠大的群體中隨機調(diào)查

調(diào)查遺傳方式應在患者家系中逐個調(diào)查實驗十一探究植物生長調(diào)節(jié)劑對扦插枝條生根的作用設置生長素類似物的濃度梯度：用容量瓶將母液分別配成0.2、0.4、0.6、0.8、1、2、3、4、5mg/mL的溶液，分別放入小磨口瓶，及時貼上相應標簽。再設置一個蒸餾水的空白對照組.選擇插條：以1年生苗木為最好（1年或2年生枝條形成層細胞分裂能力強、發(fā)育快、易成活）。處理插條：枝條的形態(tài)學上端為平面，下端要削成斜面，這樣在扦插后可增加吸收水分的面積，促進成活。每一枝條留3-4個芽（不可太多），所選枝條的芽數(shù)盡量一樣多。誤差分析：（1）不生根：生長素濃度過高、枝條倒插、枝條上沒有芽（2）都能生出不定根：芽過多，產(chǎn)生的生長素就多。實驗十二:探究培養(yǎng)液中酵母種群數(shù)量的變化1.怎樣進行酵母菌的計數(shù)?答:1)方法:抽樣檢測.2)加樣品:先將蓋玻片血球計數(shù)板的計數(shù)室上，然后用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去；3)計數(shù):稍待片刻（約5min），待酵母菌細胞全部沉降到計數(shù)室底部后，將計數(shù)板放在載物臺的中央，先在低倍鏡下找到計數(shù)室所在位置后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察、計數(shù)并記錄。

4)公式:實驗十二:探究培養(yǎng)液中酵母種群數(shù)量的變化2.從試管中吸出培養(yǎng)液計數(shù)之前,應怎么做?為什么?答:要將試管輕輕震蕩幾次,目的是使培養(yǎng)液中酵母分布均勻,減少誤差。若未曾搖勻，吸管在上部取樣，則數(shù)據(jù)偏小，在下部取樣，則數(shù)據(jù)偏大。

3.本實驗要不要設置對照?為使實驗結果更準確,該怎么辦?答:不需設對照,自身前后形成對照.需要做重復實驗.4.記錄結果時,要不要計數(shù)起始數(shù)目?每天計數(shù)時間一樣嗎?答:要計數(shù)起始數(shù)目.每天計數(shù)時間要固定.5.如果一個方格內(nèi)酵母菌過多,怎么辦?計數(shù)時,應數(shù)一個小方格內(nèi)的哪些酵母菌?答:應適當稀釋。計數(shù)小方格內(nèi)和左、上邊及其頂角的酵母菌.實驗十三果酒、果醋和腐乳的制作

果酒、果醋和腐乳的制作過程中有哪些措施能防止雜菌污染?果酒果醋發(fā)酵----------裝置要清洗、用70﹪的酒精消毒或用洗潔精洗滌;葡萄要先沖洗后去枝梗;簡易裝置果酒發(fā)酵時只每隔12h擰松而非擰開一次,果醋發(fā)酵時打開瓶塞要蓋上一層紗布,另一裝置排氣管要長而彎曲(若較短,則需要用夾子夾住,然后定期排氣),而充氣管要用夾子夾住,果醋發(fā)酵時通入無菌空氣;果酒發(fā)酵時,在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中酵母菌可以生長;

腐乳制作--------玻璃瓶洗凈后用沸水消毒;裝瓶時要迅速小心,封瓶時,最好將瓶口通過酒精燈的火焰,防止瓶口被污染;加鹽、酒精和香辛料都有防腐殺菌作用;加鹽時要逐層加鹽,隨層數(shù)的加高而增加鹽量,接近瓶口表面要鋪厚一些.實驗十三果酒、果醋和腐乳的制作果酒選用的微生物主要來源于何處？沖洗的要求是什么？答:酵母菌來自葡萄皮;不能反復沖洗，沖洗后再去枝梗，防止污染。充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用？答:充氣口-------果醋發(fā)酵時通入空氣排氣口--------排出CO2

出料口--------用于取樣檢測如何檢驗酒精的產(chǎn)生？試設計實驗。答:兩支試管1號2號,1號加2ml發(fā)酵液,2號加2ml白酒(對照),然后1號2號均滴入3滴硫酸,混勻后再滴加重鉻酸鉀3滴,觀察顏色變化.

果酒、果醋和腐乳的制作所涉及的酶從分布看有什么不同?答:果酒、果醋發(fā)酵相關的酶是胞內(nèi)酶,而腐乳制作涉及的是蛋白酶脂肪酶等以大分子為底物的酶,故為胞外酶.實驗十四:酵母細胞的固定化固定化酵母細胞,酵母細胞活化用蒸餾水還是清水?答:蒸餾水,可排除雜菌和其他雜質(zhì)的污染.實驗的關鍵步驟是什么?要注意什么?答:關鍵步驟是配制海藻酸鈉溶液.注意點：

(1)要邊加熱邊攪拌,用小火或間斷加熱,最后定容到10ml.(2)濃度不能過高或過低,過高-----不易形成凝膠珠,過低------形成的凝膠珠包埋的酵母細胞少,凝膠珠顏色過淺，影響實驗結果.(3)要等冷卻至室溫才可加入活化的酵母菌.

實驗十四:酵母細胞的固定化CaCl2的作用是什么？答:CaCl2溶液中形成穩(wěn)定的凝膠珠,凝膠珠在CaCl2溶液中浸泡30min,是為了形成穩(wěn)定的結構.固定化酵母細胞時,應注意哪些?答:要以恒定的速度緩慢的將注射器中的溶液滴加到CaCl2溶液中.固定好的凝膠珠可以直接使用嗎?答:不可以,要用蒸餾水沖洗2-3次.為什么選擇配制10%的葡萄糖溶液，若濃度較高對實驗有什么影響？答:10%是比較合適的,若過高,會使酵母細胞失水過多而死亡.實驗十五DNA的粗提取與鑒定提取DNA可利用DNA的哪些特性?答:DNA在NaCl溶液中的溶解性,DNA不溶于95﹪的冷酒精;DNA對蛋白酶、高溫(60-75℃)和洗滌劑(破壞細胞膜)的耐受性.提取DNA可用哪些材料?答:理論上含提取DNA的材料均可,動物植物微生物均可,但哺乳動物成熟紅細胞不行,而雞的紅細胞比較理想,注意加檸檬酸鈉.實驗步驟怎樣?答:選材→破碎細胞，釋放DNA(雞血用蒸餾水+攪拌+過濾；洋蔥用洗滌劑(瓦解細胞膜)和食鹽(溶解DNA)+研磨+攪拌+過濾)→溶解DNA(用2mol/L的NaCl溶液)→析出DNA(加蒸餾水稀釋至0.14mol/L)→再溶解(2mol/L的NaCl溶液)和提純(95﹪的冷酒精)實驗十五DNA的粗提取與鑒定實驗過程中的攪拌要注意什么?過濾要注意什么?答:攪拌------沿一個方向,第一次快速,其余的都是輕緩,以免加劇DNA分子的斷裂.過濾------用紗布,不能用濾紙.鑒定DNA時怎么設置對照?答:取1號2號兩支試管,均加入2mol/L的NaCl溶液5ml,1號加DNA,2號不加,然后都加入4ml的二苯胺試劑,并沸水浴5min,觀察比較結果是否變藍.從細胞中提取DNA與提取蛋白質(zhì)相比,哪個更容易?為什么?答:提取DNA更容易,因為DNA相對較穩(wěn)定,而蛋白質(zhì)對溫度、PH、、鹽度等較敏感,易失活,且空間結構多種多樣,理化性質(zhì)各不相同,使提取蛋白質(zhì)沒有一種統(tǒng)一的方法,特定的蛋白質(zhì)提取需特定的方法.實驗十六:血紅蛋白的提取與分離分離蛋白質(zhì)的依據(jù)有哪些?答:分子的形狀和大小,所帶電荷的性質(zhì)和多少,溶解度,吸附性質(zhì)和對其他分子的親和力等.電泳的依據(jù)什么?答:電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度.

電泳帶只代表樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小，不代表蛋白質(zhì)的肽鏈條數(shù)。透析的原理是什么?答:利用透析袋的半透性,讓小分子雜質(zhì)進入外面的緩沖液中,而大分子的蛋白質(zhì)留在透析袋內(nèi).注意只能出去小分子雜質(zhì),大分子如DNA通過透析無法除掉,可以依靠電泳等其他方法.提高透析效果的措施有哪些？答：增大透析液（緩沖液，維持pH的相對穩(wěn)定）的量、更換緩沖液。消毒與滅菌消毒：指使用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。滅菌：指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有微生物，包括芽孢和孢子。滅菌與消毒技術是微生物有關工作中最普通也是最重要的技術。微生物培養(yǎng)技術消毒的方法：1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min3、化學藥劑消毒法:用75%酒精、新潔爾滅等進行皮膚消毒;氯氣消毒水源4、紫外線或化學藥物消毒滅菌的方法：1、灼燒滅菌2、干熱滅菌：160-170℃下加熱1-2h。3、高壓蒸汽滅菌：100kPa、121℃下維持15-30min.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟如何倒平板？1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？問題討論

答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進行倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？

答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？

答：平板冷凝后，皿蓋上會凝結水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。純化大腸桿菌接種方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法

平板劃線法:通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)畫線的操作,將聚集的菌鐘逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面.