標(biāo)準(zhǔn)解讀
GB/T 14926.57-2001 是一項由中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會發(fā)布的國家標(biāo)準(zhǔn),全稱為《實驗動物 犬細(xì)小病毒檢測方法》。這項標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了在實驗動物領(lǐng)域中,針對犬細(xì)小病毒(Canine Parvovirus, CPV)的檢測方法和程序,旨在確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性,以及提升實驗動物管理和疾病防控水平。以下是該標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容概覽:
標(biāo)準(zhǔn)適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)適用于實驗動物中犬細(xì)小病毒的檢測與診斷,主要針對使用實驗犬進(jìn)行科研活動的機(jī)構(gòu),包括但不限于實驗室、獸醫(yī)院、動物繁育中心等。
檢測原理
標(biāo)準(zhǔn)推薦使用血清學(xué)方法和分子生物學(xué)方法(如聚合酶鏈反應(yīng),PCR)來檢測犬細(xì)小病毒。血清學(xué)方法通過檢測動物血清中對犬細(xì)小病毒的特異性抗體來判斷病毒感染狀態(tài);而分子生物學(xué)方法則直接檢測樣本中的病毒核酸,具有更高的靈敏度和特異性。
樣本要求
標(biāo)準(zhǔn)明確了適合用于檢測的樣本類型,通常包括新鮮或冷凍保存的糞便、組織樣本、以及血液樣本(主要用于血清學(xué)檢測)。樣本采集、處理及保存需嚴(yán)格遵循無菌操作,以防止污染和保持病毒活性。
檢測步驟
- 樣本預(yù)處理:根據(jù)樣本類型,采取相應(yīng)的方法進(jìn)行前處理,如糞便樣本需進(jìn)行離心濃縮。
- 病毒抗原或核酸提取:從預(yù)處理后的樣本中提取犬細(xì)小病毒的抗原或核酸。
- 檢測實施:
- 血清學(xué)方法可能包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)等,通過特異性抗體與病毒抗原的結(jié)合來判定。
- 分子生物學(xué)方法,尤其是PCR技術(shù),通過擴(kuò)增病毒特異性核酸序列來檢測病毒的存在。
- 結(jié)果判定:依據(jù)實驗中陽性與陰性對照的結(jié)果,判斷樣本中是否含有犬細(xì)小病毒及其感染狀況。
質(zhì)量控制
標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)調(diào)了實驗過程中必須實施嚴(yán)格的質(zhì)量控制措施,包括使用標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)、設(shè)立陰性和陽性對照,以及定期進(jìn)行方法驗證和實驗室間比對,以確保檢測結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。
報告要求
檢測報告應(yīng)詳細(xì)記錄樣本信息、檢測方法、所用試劑與儀器、實驗過程、結(jié)果分析及結(jié)論等,以便于結(jié)果的審核和追蹤。
結(jié)論
該標(biāo)準(zhǔn)為實驗動物中犬細(xì)小病毒的檢測提供了科學(xué)、統(tǒng)一的技術(shù)指導(dǎo),有助于提升實驗動物健康管理、疾病監(jiān)控及研究數(shù)據(jù)的可靠性,對促進(jìn)動物福利和保障科研質(zhì)量具有重要意義。
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- 被代替
- 已被新標(biāo)準(zhǔn)代替,建議下載現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)GB/T 14926.57-2008
- 2001-08-29 頒布
- 2002-05-01 實施
文檔簡介
ICS65.020.30B44中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/Tr14926.57-2001實驗動物犬細(xì)小病毒檢測方法Laboratoryanimal-Methodforexaminationofcanineparvovirus(CpV)2001-08-29發(fā)布2002-05-01實施中華民民共.和.發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局
GB/T14926.57-2001前本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定丁犬細(xì)小病毒的檢測方法。犬細(xì)小病毒性腸炎是犬的主要烈性傳染病之一,在我國犬群中廣泛流行,是普通級犬和SPF犬的必檢項目。因此增加該病毒的檢測方法。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國科學(xué)技術(shù)部提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:中國實驗動物學(xué)會。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:田克恭。
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)實物GB/T14926.57-2001犬細(xì)小病毒檢測方法Lahorntoryanimal-MethodforexaminationofCanineparvovirus(CPV)范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了犬細(xì)小病毒(CPV)的檢測方法、試劑等本標(biāo)準(zhǔn)適用于犬CPV的檢測2引用標(biāo)準(zhǔn)下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文·通過在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)淮出版時,所示版本均為有效。所有標(biāo)準(zhǔn)都會被修訂,使用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)最新版本的可能性。GB/T14926.50-2001實驗動物酶聯(lián)免疫吸附試驗GB/T14926.54-2001實驗動物血凝抑制試驗3原理根據(jù)免疫學(xué)原理,采用CPV抗原檢測犬血清中CPV抗體:或根據(jù)CPV在一定的條件下,能凝集豬紅細(xì)胞,這種凝集紅細(xì)胞的能力可被特異性抗體所抑制的原理,檢測犬血清中CPV抗體。主要試劑和器材4.1試劑4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特異性抗原CPV感染FK81細(xì)胞·接種3~5d后.當(dāng)病變達(dá)十十十~十十十十時收獲。凍融三次或超聲波處理后,低速離心去除細(xì)胞碎片,上清液再經(jīng)超速離心濃縮后制成EIISA抗原。4.1.1.2正??乖璅K81細(xì)胞凍融破碎后,經(jīng)低速離心去除細(xì)胞碎片而獲得的上清液4.1.2血凝素CPV接種FK81細(xì)胞,培養(yǎng)3~5d,當(dāng)病變達(dá)十十十~十十十十時收獲。凍融三次或超聲波處理后·低速離心去除細(xì)胞碎片,上清液分裝后低溫保存。4.1.3陽性血清CPV實驗感染或自然感染的犬血清。4.1.4陰性血清無CPV感染、未經(jīng)
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