《血紅蛋白的提取和分離》試題庫

《血紅蛋白的提取和分離》試題庫總分：41分考試時間：分鐘學校__________班別__________姓名__________分數(shù)__________題號一總分得分一、綜合類（共41分）1.下面是凝膠色譜法分離血紅蛋白時樣品的加入（圖1）和洗脫（圖2）示意圖,請據(jù)圖完成下列問題。圖1圖2(6分)1).在加樣示意圖中，正確的加樣順序是_________。(1分)2).用吸管加樣時，應注意正確操作，分別是：①_________、②_________、③_________。(3分)3).等樣品_________時，才加入緩沖液。(1分)4).待_________接近色譜柱底端時，用試管收集流出液，每mL收集一管,連續(xù)收集。(1分)2.凝膠色譜技術是20世紀60年代初發(fā)展起來的一種快速而又簡單的分離技術，由于設備簡單、操作方便、不需要有機溶劑、對高分子物質有很高的分離效果，目前已經被生物化學、分子生物學、生物工程學、分子免疫學以及醫(yī)學等有關領域廣泛采用，不但應用于科學實驗研究，而且已經大規(guī)模地用于工業(yè)生產。 參照上圖，完成問題：(7分)1).a、b均為蛋白質分子，其中先從層析柱中洗脫出來的是_________，原因是_________。(2分)2).自己制作凝膠色譜柱時，在色譜柱底部d位置相當于多孔板的結構可由_________替代。(1分)3).裝填凝膠色譜柱時，色譜柱內不能有氣泡存在，原因是_________。(1分)4).若選用SephadexG100，則“G”表示，100表示_________。(1分)5).洗脫用的液體應盡量與浸泡凝膠所用的液體_________（相同/不同），洗脫時，對洗脫液的流速要求是_________。(2分)3.對于DNA的粗提取的實驗材料的選擇,經過了多次實驗效果的比較,最終選擇雞血作實驗材料。(8分)1).雞血細胞中紅細胞_________，家雞屬于鳥類,新陳代謝旺盛,因而血液中_________細胞數(shù)目較多,可以提供豐富的_________。(3分)2).實驗前由老師用血細胞液供同學們作實驗材料,而不用雞全血,主要原因是_________。(1分)3).在牧區(qū)采集牛、羊和馬血比較方便,若用該材料按實驗要求完成實驗步驟后,結果是_________,這是因為這些動物和人類一樣,_________,但若改用動物肝臟作實驗材料,實驗能順利進行。這是因為_________。(3分)4).若選用動物肝臟作實驗材料,在提取之前,最好增加_________程序,使組織細胞更易分離。(1分)4.閱讀材料,完成問題： 將哺乳動物（或人）的成熟紅細胞特殊處理后,造成紅細胞破裂發(fā)生溶血現(xiàn)象。再將浴出細胞外的物質沖洗掉,剩下的結構就是較純凈的細胞膜,在生物學上稱為“血影”。(3分)1).如何處理紅細胞才能使其發(fā)生溶血現(xiàn)象?(0分)2).紅細胞溶血后,浴出細胞外的物質應該是_________,這種物質的特性是_________,因而使紅細胞具有_________的功能。(3分)5.下面是4組實驗材料： ①無色洋蔥頭，紫色洋蔥頭；②白蘿卜，胡蘿卜；③鯉魚的卵巢，精巢；④黃瓜葉，黃瓜（果實部分）。請完成下面的問題：(0分)1).用①作質壁分離實驗材料，最好用_______，因為____________________________。(0分)2).用②作可溶性糖的鑒定，最好用______，因為__________________________________。(0分)3).用③作DNA的粗提取實驗材料，最好用______，因為___________________________。(0分)4).用④作葉綠體中色素的提取和分離，最好用______，因為________________________。(0分)5).以鯉魚的精巢為原料，設計一個實驗提取DNA。(0分)6.科學家在分析細胞膜的化學成分時，需要制備較純凈的細胞膜，首選的材料是哺乳動物或人的成熟的紅細胞。將其特殊處理后，紅細胞會破裂發(fā)生溶血現(xiàn)象，再將溶出細胞外的物質沖洗掉，剩下的結構就是較純凈的細胞膜，在生物學上稱之為“血影”。對“血影”進行分析得知其化學組成如下：蛋白質49%，脂質12%，糖類8%。如果將“血影”中的脂質提取出來，使其在空氣—水界面上鋪展成單分子層，則所形成的膜面積是原來細胞整個表面積的兩倍。(2分)1).此實驗為什么不選用植物細胞__________。 ①光學顯微鏡下觀察，植物細胞沒有細胞膜②植物細胞有細胞壁，提取細胞膜的過程比較煩瑣③植物細胞內會有其他膜結構干擾④植物細胞細胞液中的有機酸會溶解膜(0分)A.①②B.②③C.②④D.③④2).選擇哺乳動物或人的成熟的紅細胞的主要原因是______。(0分)A.該細胞個大，好操作B.無細胞壁C.紅細胞有顏色便于觀察D.該細胞除了細胞膜外無其他膜結構3).請推測成熟紅細胞的異化作用類型與下列哪種生物相似______。(0分)A.硝化細胞B.酵母菌C.乳酸菌D.煙草4).紅細胞溶血后，溶出細胞外的物質由4條肽鏈（574個氨基酸）組成，則控制該物質合成的基因中至少含有多少個脫氧核糖核苷酸？_________個。(1分)5).脂質單分子層的面積是細胞表面積的兩倍，這說明了_________。(1分)7.有4瓶失去標簽的無色透明液體。已知各裝有：大腸桿菌超標的自來水，丙種球蛋白溶液（一種抗體），溶解著DNA分子的2mol/L的NaCl溶液，葡萄糖溶液。(0分)1).請根據(jù)提供的第一步鑒定方法，簡要寫出用相應物質進行鑒定的其余步驟和結果。 第一步：各取4種液體少許分別倒入4支試管中，緩慢加入蒸餾水并用玻璃棒攪拌，則。 第二步：……(0分)2).除上述鑒定DNA的方法外，還可以用哪些方法進行鑒定？(0分)8.紅細胞含有大量血紅蛋白，紅細胞的機能主要是由血紅蛋白完成的，血紅蛋白的主要功能是攜帶O2或CO2，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實驗，來提取和分離血紅蛋白，請完成下列有關問題：(7分)1).血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步：_________、_________、_________和_________。(4分)2).實驗前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進行離心，收集血紅蛋白溶液。 ①加入檸檬酸鈉的目的是_________。 ②以上所述的過程即是樣品處理，它包括_________、_________收集血紅蛋白溶液。(3分)3).收集的血紅蛋白溶液在透析袋中可以經過透析，這就是樣品的粗分離。 ①透析的目的是______________________________。 ②透析的原理是______________________________。(0分)4).然后通過凝膠色譜法將樣品進一步純化，最后經SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。 ①樣品純化的目的是__________________。 ②血紅蛋白有什么特點？ 。這一特點對進行蛋白質的分離有什么意義？。(0分)9.對血紅蛋白的研究結果表明，血紅蛋白實際上是由珠蛋白、原卟啉和二價鐵離子（Fe2+）所組成的結合蛋白質。有4條肽鏈各結合一個輔基即血紅素，O2結合于Fe2+上，血紅蛋白與氧疏松結合形成氧合血紅蛋白（HbO2），這種氧合作用于氧分壓高時容易進行，于氧分壓低時易于解離。紅細胞結合和攜帶O2的過程并不影響二價鐵離子，也就是說不使之氧化為三價鐵離子（Fe3+無攜帶O2的能力）。CO與Hb的親和力大于O2，結合成HbCO后不能重新分離，致使Hb喪失運輸O2和CO2的機能，此稱一氧化碳中毒即煤氣中毒。(5分)1).用凝膠色譜法分離出血紅蛋白時，待_________接近色譜柱底端時，才用試管收集。血紅蛋白因含_________而呈現(xiàn)紅色。(2分)2).要使血紅蛋白從紅細胞中釋放出來，可選用_________的方法。(1分)3).紅細胞具有運輸氧的功能，是因為具有_________的特性。(1分)4).亞硝酸鹽為強氧化劑，進入人體后，可使血紅蛋白失去運輸氧的功能，導致組織缺氧，其可能的原因是_________。(1分)10.科學家研究發(fā)現(xiàn)，人的血液pH通常在～之間變化，其變化范圍很小，這是由于血液中含有許多對緩沖物質，如H2CO3/NaHCO3、NaH2PO4/Na2HPO4等，其中H2CO3/NaHCO3在血液中濃度最高，緩沖能力最強，對維持血液正常最重要。(3分)1).當人體內堿性物質（如Na2CO3）增加時，H2CO3/NaHCO3緩沖液中的_________就與之作用，生成_________，過多的該物質可由腎臟排出，從而維持pH基本不變。(2分)2).若人體內酸性物質（如無氧呼吸產物乳酸）增加時，則該緩沖對中的_________就會與乳酸作用，從而維持pH基本不變。(1分)題號一總分得分二、填空類（共0分）1.為了純化提取的DNA,可以將濾液放在_________的恒溫水浴箱中保溫_________min。2.在作凝膠色譜分析時,加樣前，_________流出口,使緩沖液緩慢下降到與_________平齊,關閉出口。加樣后,打開出口,使樣品滲入_________內。等樣品完全進入后_________。3.在提取和分離血紅蛋白時,所用的緩沖液是濃度為_________的_________緩沖液4.采集血樣后,及時分離紅細胞。采用_________速短時間離心,如_________離心2min。用吸管吸出_________層血漿,下層暗紅色紅細胞液倒入燒杯,加入五倍體積的_________緩慢攪拌_________min,低速短時間離心,重復洗滌_________次,至上清液中無_________，則表明紅細胞洗滌干凈。解析：離心后試管內會出現(xiàn)分層現(xiàn)象,血漿成分輕，在上層,細胞成分重，在下層,所以要將血漿吸去,可以減少雜質,另外也可以提高DNA的相對含量。加入生理鹽水的目的是為了使之與紅細胞的滲透壓相平衡,使紅細胞目前不至于破裂,便于進行充分的洗滌。5.分離血紅蛋白溶液時,將混合液離心后可看到試管中的溶液分為4層；第1層為_________的_________,第2層為_________固體,是_________的沉淀層,第3層是_________的液體,是_________的水溶液,第4層是其他雜質的_________的沉淀物。6._________和_________是兩種常用的電泳方法,在_________時通常運用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳。7.蛋白質各種特性的差異,如_________、_________、溶解度、_________和對其他分子的親和力等等,可以用來分離不同的蛋白質。題號一總分得分三、單選類（共0分）1.將攪拌好的混合液離心來分離血紅蛋白溶液時,第二層是A.甲苯B.血紅蛋白水溶液C.脂溶性物質的沉淀層D.其他雜質的沉淀2.提取分離DNA時,加入洗滌劑的目的是A.破壞細胞質B.瓦解細胞壁和細胞膜C.溶解DNAD.溶解蛋白質3.假設PCR反應中,只有一個DNA的片段作為模板,在5次循環(huán)后,反應物中大約有這樣的DNA片段個A.8B.16C.32D.644.符合PCR反應條件的一項是（） ①穩(wěn)定的緩沖液環(huán)境②DNA模板③合成引物④四種脫氧核苷酸⑤DNA聚合酶⑥DNA解旋酶⑦限制性內切酶⑧溫控設備A.①②③④⑤⑥B.①②③④⑤⑥⑦⑧C.③④⑤⑥⑦⑧D.①②③④⑤⑧5.在DNA的粗提取過程中,初步析出DNA和提取較純凈的DNA所用的藥品的濃度及其名稱分別是（） ①g/mL的檸檬酸鈉溶液②2mol/L的NaCl溶液③mol/L的NaCl溶液④體積分數(shù)為95%的酒精溶液 ⑤mol/L的NaCl溶液⑥mol/L的NaCl溶液A.①③⑤B.③④C.②④D.②③④6.蛋白酶能將蛋白質水解而使染色質中的DNA分離出來,下列藥品可達到上述同一目的的是A.蒸餾水B.NaCl溶液C.NaOH溶液D.鹽酸7.在PCR反應中,只有一個DNA的片段作為模板,經過一次循環(huán)后,含引物Ⅰ的DNA單鏈占DNA總單鏈數(shù)的A.1/2B.1/4C.1D.1/88.一分子血紅蛋白最多可攜帶的O2分子數(shù)和CO2分子數(shù)分別是A.4、2B.4、4C.2、1D.1、19.在DNA的粗提取過程中，先后兩次向燒杯加入蒸餾水的作用分別是A.稀釋血液；沖洗樣品B.使血細胞破裂；降低NaCl濃度使DNA析出C.使血細胞破裂；增大DNA溶解量D.使血細胞破裂；提取含雜質較少的DNA10.有關PCR技術,下列敘述不正確的是A.是聚合酶鏈式反應,是以DNA聚合酶在體外擴增DNA片段的技術B.在用PCR技術擴增DNA時,DNA的復制過程與細胞內DNA的復制類似C.PCR反應只需在一定的緩沖溶液中提供：DNA模板以及四種脫氧核苷酸D.PCR一般經歷三十多次循環(huán),每次循環(huán)分為變性、復性、延伸11.在裝填凝膠柱時,不得有氣泡存在的原因是A.氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序,降低分離效果B.氣泡阻礙蛋白質的運動C.氣泡能與蛋白質發(fā)生化學反應D.氣泡會在裝填凝膠的時候,使凝膠不緊密12.關于凝膠色譜柱的裝填不正確的是（）A.交聯(lián)葡聚糖凝膠（G75）“G”表示凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍,75表示凝膠得水值B.色譜柱內不能有氣泡存在,一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡,必須重裝C.用300mL的物質的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液充分洗滌平衡凝膠12hD.凝膠用自來水充分溶脹后,配成凝膠懸浮液13.凝膠色譜法之所以能將相對分子質量不同的蛋白質分開,是因為A.凝膠是大小不同的實心球體B.凝膠是大小相同的實心球體C.凝膠是大小相同的多孔球體,小分子蛋白質可以進入D.凝膠是大小相同的多孔球體,大分子蛋白質可以進入14.TaqDNA聚合酶與一般DNA聚合酶相比,具有的特點是A.具有高效性B.具有專一性C.耐高溫D.能催化子鏈按5′→3′的方向延伸15.有關DNA復制過程中,下列物質的作用敘述正確的是A.解旋酶的作用是破壞磷酸和脫氧核糖之間相連的化學鍵B.DNA聚合酶能催化合成DNA分子C.引物的作用是使DNA聚合酶能夠從引物的5′端開始連接脫氧核苷酸D.DNA母鏈能提供DNA復制的模板16.在DNA濾液中加入NaCl,當NaCl濃度為2mol/L時,是為了除去什么,當NaCl濃度為mol/L時,是為了除去什么,依次為A.不溶性雜質,溶液中的可溶性雜質B.可溶性雜質,溶液中的可溶性雜質C.可溶性雜質,溶液中的不溶性雜質D.不溶性雜質,溶液中的不溶性雜質17.蛋白酶不能破壞下列哪種物質的結構A.胰島素B.卵清蛋白C.生長激素D.DNA18.從雞血細胞中提取DNA所用的提取液是（）A.NaCl溶液B.酒精C.二苯胺D.檸檬酸鈉19.在盛有紅褐色的Fe(OH)3膠體的U形管的兩個管口，各插一個電極，通直流電后，發(fā)現(xiàn)陰極附近的顏色逐漸加深，這說明()A.Fe(OH)3膠體粒子帶正電荷，向陰極移動B.Fe(OH)3膠體粒子帶負電荷，向陽極移動C.Fe(OH)3膠體粒子帶正電荷，向陽極移動D.Fe(OH)3膠體粒子帶負電荷，向陰極移動20.洗滌紅細胞的目的是()A.去除血清B.去除雜蛋白C.除去血小板D.除去水21.血紅蛋白因含有而呈紅色()A.O2B.COC.CO2D.血紅素22.緩沖溶液的作用是()A.維持pH基本不變B.使pH升高C.使pH降低D.改變溶液pH23.亞鐵血紅素基團可攜帶()A.一分子COB.一分子NOC.一分子O2或CO2D.一分子NO224.裝填凝膠色譜柱時，下端的尼龍管應()A.先打開后關閉B.關閉C.先關閉后打開D.打開25.凝膠色譜法中移動速度快的是()A.相對分子質量大的B.溶解度高的C.相對分子質量小的D.溶解度低的26.催化合成DNA子鏈的是()A.解旋酶B.DNA聚合酶C.引物D.淀粉酶27.引物與DNA母鏈的關系是()A.堿基順序相同B.長度相同C.堿基互補配對D.完全相同28.DNA的粗提取和分離實驗中，選擇的生物材料()A.DNA含量高B.DNA含量低C.蛋白質豐富D.蛋白質含量低29.TaqDNA聚合酶的特點是()A.耐高溫B.耐強酸C.耐強堿D.不耐熱30.在PCR反應中，只有一個DNA的片段作為模板，經過一次循環(huán)后，含引物Ⅰ的DNA單鏈占DNA總鏈數(shù)的()A.1/2B.1/4C.1D.1/831.PCR反應的延伸過程，所需溫度大約是()A.90℃以上B.50℃左右C.72℃左右D.30℃左右32.將攪拌好的混合液離心來分離血紅蛋白溶液時，第2層是()A.甲苯B.血紅蛋白水溶液C.脂溶性物質的沉淀層D.其他雜質的沉淀33.DNA遇二苯胺（沸水?。境?)A.磚紅色B.紅色C.紫色D.藍色34.提取出的含雜質少的DNA應是（）A.白色塊狀B.黃色絲狀C.黃色塊狀D.白色絲狀35.解旋酶的作用是（）A.打開DNA雙鏈B.提供DNA復制的模板C.催化合成DNA子鏈D.增加PCR的效率36.許多生物大分子具有的可解離的基團，在______條件下，會帶上正電或負電（）A.一定溫度B.一定pHC.一定壓強D.一定容器37.DNA中磷酸基團末端稱為（）A.3′端B.2′端C.5′端D.1′端38.DNA的直徑約為（）A.20×10-20mB.20×10-10mC.20×20-20mD.20×20-10m39.利用凝膠色譜法什么樣的蛋白質先洗脫出來（）A.相對分子質量大的B.溶解度高的C.相對分子質量小的D.所帶電荷多的40.用凝膠色譜法分離蛋白質時，相對分子質量大的蛋白質（）A.路程較長，移動速度較慢B.路程較長，移動速度較快C.路程較短，移動速度較慢D.路程較短，移動速度較快41.提取分離DNA時，加入洗滌劑的目的是（）A.破壞細胞質B.瓦解細胞膜C.溶解DNAD.溶解蛋白質42.選用紅細胞作分離蛋白質的實驗材料，有何好處（）A.血紅蛋白是有色蛋白B.紅細胞無細胞核C.紅細胞蛋白質含量高D.紅細胞DNA含量高43.DNA在波長為______的紫外線波段有一強烈的吸收峰（）A.100nmB.200nmC.150nmD.260nm44.假設PCR反應中，只有一個DNA的片段作為模板，在5次循環(huán)后，反應物中大約有個這樣的DNA片段（）A.8B.16C.32D.6445.在向溶解DNA的NaCl溶液中，不斷加入蒸餾水的目的是（）A.加快溶解DNA的速度B.加快溶解雜質的速度C.減少DNA的溶解度，加快DNA析出D.減少雜質的溶解度，加快雜質的析出46.用某種藥飼喂動物，一段時間后測得實驗組比對照組動物血漿中血紅蛋白含量明顯增高。該藥物的作用可能是（）A.增強血紅蛋白的合成能力B.提高血漿蛋白的含量C.增加紅細胞的生成數(shù)量D.對紅細胞有破壞作用47.凝膠色譜法分離蛋白質中使用的凝膠是交聯(lián)葡聚糖凝膠（SephadexG75）,其中G、75的含義分別是（）A.G表示凝膠的使用量,75表示加75g水B.G表示凝膠的交聯(lián)程度,75表示需加熱至75℃C.G表示凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍,75表示每克凝膠及膨脹時吸水gD.G表示凝膠的膨脹體積,75表示每克凝膠膨脹后體積可達75cm348.有關透析的敘述,錯誤的是（）A.用于透析的薄膜要具有選擇透過性B.透析膜一般是用硝酸纖維素制成的C.透析能使小分子自由出入,而將大分子保留在袋內D.透析可用于更換樣品的緩沖液49.在采血容器中預先加入檸檬酸鈉的目的是（）A.調節(jié)pHB.維持紅細胞的能量供應C.防止微生物生長D.防止血液凝固50.使用十二烷基硫酸鈉—聚丙烯酰胺電泳過程中,不同蛋白質的電泳遷移率完全取決于（）A.電荷的多少B.分子的大小C.肽鏈的多少D.分子形狀的差異51.蛋白質的提取和分離一般分為四步,符合要求的一項為（）A.粗分離→樣品處理→純化→純度鑒定B.粗分離→純化→樣品處理→純度鑒定C.樣品處理→粗分離→純化→純度鑒定D.純化→純度鑒定→粗分離→樣品處理52.用凝膠色譜法分離蛋白質的過程中,關于蛋白質的敘述,正確的是（）A.相對分子質量較小的蛋白質行程大于相對分子質量較大的蛋白質B.相對分子質量較小的蛋白質行程小于相對分子質量較大的蛋白質C.相對分子質量較小的蛋白質行程等于相對分子質量較大的蛋白質D.二者根本無法比較53.蛋白質的各種特性的差異,可以用來分離不同種類的蛋白質,下列對這種特性的描述中正確的一項是（）A.分子的形狀、大小和溶解度B.所帶電荷的性質和多少、吸附性質C.對其他分子的親和力D.以上三項都是54.隨著人類跨入蛋白質組時代,對蛋白質的研究和應用越來越深入,首先要做的一步是（）A.弄清各種蛋白質的空間結構B.弄清各種蛋白質的功能C.弄清各種蛋白質的合成過程D.獲得高純度的蛋白質55.血紅蛋白由____________個肽鏈組成（）A.2B.4C.3D.556.制作凝膠色譜柱時，橡皮塞頂部凹穴內插入的移液管的部位及長度是（）A.移液管頭部5cmB.移液管尾部5cmC.移液管頭部3cmD.移液管尾部3cm57.SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳法中加入SDS的作用是（）A.增大蛋白質的相對分子質量B.改變蛋白質的形狀C.掩蓋不同種蛋白質間的電荷差別D.減少蛋白質的相對分子質量58.洗滌紅細胞時，分離所用方法為（）A.低速長時間離心B.低速短時間離心C.高速長時間離心D.高速短時間離心59.透析時取血紅蛋白溶液裝入透析袋內，放入緩沖溶液中（）A.2mLB.mLC.mLD.1mL60.________________的蛋白質能進入凝膠內部通道（）A.相對分子質量大的B.吸附性高的C.相對分子質量小的D.溶解度低的61.將攪拌好的混合液轉移到離心管中，離心后，可以明顯看到試管中的溶液分為4層，其中第3層是（）A.無色透明的甲苯層B.脂溶性物質的沉淀層C.血紅蛋白的水溶液D.其他雜質的暗紅色沉淀物62.血紅蛋白由條肽鏈組成（）A.2B.4C.3D.563.凝膠色譜法分離蛋白質的依據(jù)是（）A.對其他分子的親和力B.溶解度C.所帶電荷多少D.相對分子質量的大小64.分離血紅蛋白溶液時，離心后試管中的溶液分四層，血紅蛋白在第_______層（）A.一B.二C.三D.四65.凝膠色譜法中所用的凝膠的化學本質大多是（）A.糖類化合物B.脂質C.蛋白質D.核酸66.下列關于凝膠色譜法的原理及操作不正確的是（）A.是利用凝膠把分子大小不同的物質分離開的一種方法B.在洗脫過程中，大分子不能進入凝膠內部而最先流出，而小分子可以進入凝膠內部而流速緩慢，最后流出C.凝膠內部有很微細的多孔網狀結構，其孔隙大小與被分離的物質分子的大小無相應關系D.一般情況下，凝膠對要分離的物質沒有吸附作用，因此所有要分離的物質都應該被洗脫出來題號一總分得分四、簡答類（共0分）1.閱讀下列材料，完成問題： 用冰冷的稀三氯醋酸或稀高氯酸溶液在低溫下抽提菜花勻漿，以除去酸溶性小分子物質；再用有機溶劑，如乙醇、乙醚等抽提，去掉脂溶性的磷脂等物質。最后用濃鹽溶液（10%氯化鈉溶液）和mol·L-1高氯酸（70℃）分別提取DNA和RNA，再進行定性鑒定。由于核糖和脫氧核糖有特殊的顏色反應，經顯色后所呈現(xiàn)的顏色深淺在一定范圍內和樣品中所含的核糖和脫氧核糖的量成正比，因此可用定糖法來定性定量測定核酸。測定核酸的常用方法是苔黑酚（即3，5二羥甲苯）法（Orcinol反應）。當含有核糖的RNA與濃鹽酸及3，5二羥甲苯在沸水中加熱10～20分鐘后，有綠色物質產生。測定脫氧核糖的常用方法是二苯胺法。DNA在酸性條件下和二苯胺在沸水浴中共熱10分鐘后，產生藍色。(1)用菜花作實驗材料提取DNA和RNA，補充實驗步驟：①取菜花的花冠20g，剪碎后置于研缽中，加入20mL95%乙醇和400mg海砂，研磨成勻漿。然后用布氏漏斗抽濾，棄去濾液。②_______________________________________，抽濾，棄去濾液。③再向濾渣中加入20mL丙酮，攪拌5分鐘后抽干（用力擠壓濾渣，盡量除去丙酮）。④在冰鹽浴中，將濾渣懸浮在預冷的20mL5%高氯酸溶液中。攪拌抽濾，棄去濾液。⑤將濾渣懸浮于20mL95%乙醇中，抽濾，棄去濾液。⑥向濾渣中加入20mL丙酮，攪拌5分鐘。抽濾至干，用力擠壓濾渣盡量除去丙酮。⑦_________________________________；在沸水浴中加熱15分鐘。放置，冷卻，抽濾至干，留濾液。并將此操作重復進行一次。將兩次濾液合并，為提取物Ⅰ。⑧_________________________________，加熱到70℃，保溫20分鐘（恒溫水浴）后抽濾，留濾液（提取物二）。(2)用二苯胺法和苔黑酚法來檢驗提取物Ⅰ和提取物Ⅱ，請預測現(xiàn)象。2.蘿卜貯藏根組織細胞中是否存在蛋白質和DNA？某生物小組對此進行研究，他們從網上查閱資料得知： ①蛋白質在10%NaCl溶液中可沉淀析出； ②在蛋白質溶液中，加入雙縮脲試劑，溶液呈現(xiàn)特有的顏色； ③DNA溶于10%NaCl溶液但在95%酒精中呈白色絮狀沉淀，析出。 實驗材料：白蘿卜。實驗用具：粉碎機、燒杯、漏斗、試管、濾紙、玻棒、鑷子、載玻片、天平、紗布。 藥品及試劑：蒸餾水、NaCl、95%酒精、甲基綠染液、雙縮脲試劑、蛋白質標準樣品。 請你根據(jù)所提供的條件參與實驗設計并完成實驗。 一、材料處理： 二、提取： 三、鑒定及結果： 四、討論： (1)蛋白質在蘿卜貯藏根組織細胞中所起的作用是___________________________________________________________________________。 (2)DNA主要來自蘿卜貯藏根組織細胞的______。參考答案:一、綜合類（共41分）1.本題答案如下1)④→①→②→③ 2)(1)不要觸及破壞凝膠面 (2)貼著管壁加樣 (3)使吸管管口沿管壁環(huán)繞移動 3)完全進入凝膠層 4)紅色的蛋白質5 2.本題答案如下1)(1)a (2)a相對分子質量大，無法進入凝膠內部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動速度較快 2)尼龍網和尼龍紗 3)氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，降低分離效果 4)凝膠的交聯(lián)程度、膨脹程度及分離范圍凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時吸水10g 5)(1)相同 (2)保持穩(wěn)定 3.本題答案如下1)(1)有細胞核 (2)紅 (3)DNA 2)DNA主要存在于細胞核中,而血漿中不含 3)(1)很難提取出DNA (2)成熟紅細胞中無細胞核 (3)肝細胞中有細胞核 4)研磨 4.本題答案如下1)在盛紅細胞的燒杯中加入蒸餾水，使其吸水漲破 2)(1)血紅蛋白 (2)既容易與氧結合，也容易與氧分離 (3)運輸氧 5.本題答案如下1)紫色洋蔥細胞壁呈紫色，易于觀察 2)白蘿卜可溶性還原糖的鑒定，要用斐林試劑最后形成磚紅色沉淀，而胡蘿卜有色素接近磚紅色，干擾效果，說服力不強 3)精巢卵巢的卵中含有豐富的營養(yǎng)物質，增加DNA提取的難度 4)黃瓜葉黃瓜葉色素含量比黃瓜果實高 5)①在鯉魚精巢中提取精子，放入燒杯中。 ②在燒杯中加入蒸餾水，用玻璃棒沿一個方向快速攪拌5分鐘，過濾后收集濾液。 ③在濾液中加入2mol·L-1的NaCl溶液（體積為濾液的2倍），使其混合均勻。 ④沿燒杯內壁加入蒸餾水，同時用玻璃棒沿一個方向不停地輕輕攪拌，直到黏稠物不再增加時停止加入蒸餾水。過濾，留取黏稠物。 ⑤用2mol·L-1的NaCl溶液再溶解黏稠物，過濾，收集濾液。 ⑥在濾液中加入冷卻的、體積分數(shù)為95%的酒精溶液，用玻璃棒沿一個方向攪拌。 6.本題答案如下1)B2)D3)C4)3444 5)構成細胞膜的磷脂分子呈雙層排列 7.本題答案如下1)第一步:出現(xiàn)絲狀物的溶液，為溶解著DNA分子的2mol/L的NaCl溶液第二步:向其余3支試管中加入伊紅—美藍試劑，呈現(xiàn)深紫色的為大腸桿菌超標的自來水。第三步:將其余2種溶液各取少許倒入2支試管中，加入雙縮脲試劑，呈現(xiàn)紫色反應的為丙種球蛋白溶液。最后一瓶為葡萄糖溶液。 2)用二苯胺沸水浴變?yōu)樗{色；或加入冷卻的酒精，攪拌出現(xiàn)絲狀物。 8.本題答案如下1)(1)樣品處理 (2)粗分離 (3)純化 (4)純度鑒定 2)(1)①防止血液凝固 (2)②紅細胞的洗滌 (3)血紅蛋白的釋放 3)①去除相對分子質量較小的雜質②透析袋能使小分子自由進出，而大分子則保留在袋內 4)①通過凝膠色譜法將相對分子質量大的雜質蛋白除去②血紅蛋白呈現(xiàn)紅色，在凝膠色譜分離時可以通過觀察顏色來判斷什么時候應該收集洗脫液這使血紅蛋白的分離過程非常直觀，大大簡化了實驗操作。 9.本題答案如下1)(1)紅色區(qū)帶 (2)血紅素 2)將紅細胞置于蒸餾水中，加體積分數(shù)為40%的甲苯，并攪拌使之破裂 3)紅細胞中的血紅蛋白與氧在氧分壓高時容易結合，在氧分壓低時又容易分離 4)亞硝酸鹽可使血中低鐵血紅蛋白氧化成高鐵血紅蛋白 10.本題答案如下1)(1)H2CO3 (2)NaHCO3 2)NaHCO3 二、填空類（共0分）1.(1)60～75℃ (2)10 2.(1)打開 (2)凝膠面 (3)凝膠床 (4)關閉下端出口 3.(1)20mmol·L-1 (2)磷酸 4.(1)低 (2)500r/min (3)上 (4)生理鹽水 (5)10 (6)三 (7)黃色 5.(1)無色透明 (2)甲苯層 (3)白色薄層 (4)脂溶性物質 (5)紅色透明 (6)血紅蛋白 (7)暗紅色 6.(1)瓊脂糖凝膠電泳 (2)聚丙烯酰胺凝膠電泳 (3)測定蛋白質相對分子質量 7.(1)分子的形狀和大小 (2)所帶電荷的性質和多少 (3)吸附性質 三、單選類（共0分）1.C2.B3.C4.D5.B6.B7.B8.B9.B10.C11.A12.D13.C14.C15.D16.A17.D18.A19.A20.B21.D22.A23.C24.D25.A26.B27.C28.A29.A30.B31.C32.C33.D34.D35.A36.B37.C38.B39.A40.D41.B42.A43.D44.C45.C46.D47.C48.A49.D50.B51.C52.A53.D54.D55.B56.A57.C58.B59.D60.C61.C62.B63.D64.C65.A66.C四、簡答類（共0分）1.（1）②向濾渣中加入20mL丙酮，攪拌均勻 ⑦將干燥的濾渣重新懸浮在40mL10%的NaCl溶液中 ⑧將濾渣重新懸浮在20mol·L-1的高氯酸溶液中 （2）提取物Ⅰ遇二苯胺（沸水?。┳兯{；提取物Ⅱ無此現(xiàn)象；提取物Ⅰ為DNA。 提取物Ⅱ用苔黑酚法檢測，產生綠色物質；提取物Ⅰ無此現(xiàn)象；提取物Ⅱ為RNA。 2.一、稱取50g白蘿卜洗凈切塊，加入30mL蒸餾水，粉碎機粉碎，將勻漿經紗布過濾。 二、（1）向經紗布過濾得到的濾液中加入10%NaCl，直至沉淀析出。經濾紙過濾，將濾紙上的沉淀物放入試管中，加入1mL蒸餾水，振蕩，用于蛋白質鑒定。 （2）在除去蛋白質的濾液中，加入95%酒精，用玻棒輕輕攪拌，見有白色絮狀沉淀產生，經濾紙過濾，用鑷子將濾紙上的絮狀沉淀置于載玻片上，用于DNA鑒定。 三、（1）在用于蛋白質鑒定的實驗試管中，加入雙縮試劑，產生呈色反應，同時將蛋白質標準樣品和1mL蒸餾水放入另一試管，加入雙縮脲試劑產生呈色反應，觀察到兩試管中顏色基本一致，說明實驗試管中有蛋白質存在。 （2）在用于DNA鑒定的載玻片上，滴加甲基綠染液，DNA呈現(xiàn)藍綠色。說明該白色絮狀沉淀為DNA。 （3）通過對白蘿卜貯藏根勻漿過濾液的檢測，說明有蛋白質和DNA的存在。 四、（1）是細胞膜等生物膜的結構成分，酶等功能蛋白質的組成成分，也是糊粉粒等貯存蛋白質的成分（2）細胞核 解析:一、綜合類（共41分）1.無解析1)無解析2)無解析3)無解析4)無解析2.無解析1)無解析2)無解析3)無解析4)無解析5)無解析3.無解析1)無解析2)無解析3)無解析4)無解析4.無解析1)無解析2)無解析5.無解析1)無解析2)無解析3)無解析4)無解析5)無解析6.無解析1)無解析2)無解析3)無解析4)無解析5)無解析7.無解析1)無解析2)無解析8.無解析1)無解析2)無解析3)無解析4)無解析9.無解析1)無解析2)無解析3)無解析4)無解析10.無解析1)無解析2)無解析二、填空類（共0分）1.無解析2.無解析3.無解析4.無解析5.無解析6.無解析7.無解析三、單選類（共0分）1.無解析2.無解析3.無解析4.無解析5.無解析6.無解析7.無解析8.無解析9.無解析10.無解析11.無解析12.無解析13.無解析14.無解析15.無解析16.無解析17.無解析18.DNA在不同濃度的氯化鈉溶液中，溶解度不同。19.Fe（OH）3膠體離子帶正電荷，向陰極移動，從而使陰極附近聚集大量的紅褐色Fe（OH）3粒子而顏色逐漸加深。20.洗滌紅細胞的目的是去除雜蛋白，以利于后續(xù)步驟的分離和純化。21.無解析22.緩沖溶液的作用是維持pH基本不變，在pH升高和降低的時候及時調節(jié)。23.血紅蛋白的每條肽鏈環(huán)繞一個亞鐵血紅素基團，此基團攜帶一個O2分子和一個CO2分子。24.裝填凝膠色譜柱時，下端的尼龍管應打開，防止裝填時有氣泡存在。25.相對分子質量較小的蛋白質容易進入凝膠內部通道，路程長，移動速度慢。26.在DNA復制過程中，起催化作用的是DNA聚合酶。27.引物是一小段DNA或RNA，它能與DNA母鏈的一段堿基序列互相配對。28.無解析29.考查酶的耐熱性特點。TaqDNA能耐高溫。30.經過一次循環(huán)后，DNA單鏈共4條，含引物Ⅰ的DNA單鏈只有1條。31.PCR反應與溫度關系密切，其中每次循環(huán)中變性、復性和延伸溫度不同，延伸溫度大約為72℃。32.血紅蛋白液離心后分四層，其中第二層是脂溶性物質的沉淀層。33.DNA可用二苯胺試劑鑒定，DNA遇二苯胺試劑在加熱的情況下呈藍色。34.考查