第四章-定量分析

第四章藥物的含量測定方法與驗證主要內容藥品分析方法的驗證定量分析方法的分類與特點233定量分析樣品的前處理方法31定量分析？藥品定量分析－定量分析是依據統(tǒng)計數據，建立數學模型，并計算出分析對象的各項指標及其數值的一種方法。定性分析與定量分析是統(tǒng)一的，相互補充的；定性分析是定量分析的基本前提，沒有定性的定量是一種盲目的、毫無價值的定量；定量分析使之定性更加科學、準確，它可以促使定性分析得出廣泛而深入的結論。藥物含量測定基于化學或物理學原理的含量測定基于生物學原理的效價測定藥物的含量系指所含主成分的量，是評價藥物的重要指標第一節(jié)、定量分析方法的分類與特點含量測定項采用的定量分析方法容量分析法光譜分析法色譜分析法

基本原理：將已知濃度的滴定液由滴定管加到待測藥物的溶液中，直到所加滴定液與被測藥物按化學計量反應完全為止，然后根據滴定液的濃度和消耗的體積可以計算出被測物的含量?；瘜W計量關系特點：所用儀器價廉、易得；操作簡便、快速、測定結果準確（相對標準差一般應不大于0.2％)；專屬性較差，適用于含量較高的樣品指示劑指示反應化學計量點的到達一、容量分析法(滴定法)容量分析的相關計算滴定度－指每1mL規(guī)定濃度的滴定液所相當的被測藥物的質量滴定度（T）的計算(mg/mL)：P144-145aA+bBcC+dD

T(mg/mL)=m(a/b)M

WA=TVBm-滴定液的摩爾濃度（mol/L）；a-被測藥物的摩爾數；b-滴定液的摩爾數；M-被測藥物的摩爾毫摩爾質量（mg/mmol）；含量計算（1）直接滴定法

VxT含量（%）=x100%W實際滴定度－藥典給出的是規(guī)定濃度下，實際滴定度要乘以校正因子

F=實際摩爾濃度/規(guī)定摩爾濃度

VxTxF含量（%）=x100%W間接滴定法生成物滴定法藥物+AB（定量反應）剩余量滴定法（回滴定法）

先加入過量的滴定液A，使其與藥物定量反應，但反應完全后，再用另一滴定液來回滴反應后剩余的滴定液A

藥物B滴定劑例：P146

(VBo-VBs)xTAxFB含量（%）=x100%W實例－溴量法凡取代基中含有雙鍵的巴比妥類藥物，其不飽和鍵可與溴定量地發(fā)生加成反應，故可采用溴量法進行測定。如司可巴比妥鈉的測定原理為：

精密量取維生素C注射液4mL（相當于維生素C0.2g），加水15mL與丙酮2mL，搖勻，放置5分鐘，加稀醋酸4mL與淀粉指示液1mL，用碘滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯藍色，并持續(xù)30秒鐘不退。已知：注射液規(guī)格2mL:0.1g，消耗0.05mol/L碘滴定液（F=1.005）22.45mL，維生素C的分子量為176.12，反應摩爾比為1:1，問：（1）每1mL碘滴定液(0.05mol/L)相當于多少mg的維生素C？（2）求本品相當于標示量的百分含量？課堂練習12023/2/112維生素C1摩爾維生素C與1摩爾碘相當T＝0.05×176.12×1/1=8.806mg/ml標示量%=T×F×V/W×標示量×100%8.806×22.45×1.005=0.2×1000

×100%=99.34%課堂練習2煙酸片的含量測定：取本品20片，精密稱定重量為7.1680g，研細，取片粉0.3729g，加新沸放冷的水50mL，加熱使溶解，放冷，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，消耗25.20mL，每1mLNaOH滴定液（0.1mol/L）相當于12.31mg煙酸，已知煙酸片規(guī)格0.3g，NaOH滴定液（0.1mol/L）的F=1.005，計算每片含煙酸的量。光譜－記錄由能級躍遷所產生的輻射能隨波長的變化所得的圖譜光譜分析法－利用物質的光譜進行定性定量和結構分析的方法。分光光度法－測定被測物質在光譜的特定波長處或一定波長范圍內的吸光度或發(fā)光強度，對該物質進行定性或定量分析的方法。中國藥典收載的光譜分析法包括紫外可見分光光度法（UV-VIS）紅外分光光度法(IR)原子吸收分光光度法(AAS)熒光分析法(FL)光焰光度法(FP)二、光譜光譜分析法紫外分光光度法（UV-VIS）基于物質分子對紫外光譜區(qū)（200-400nm）和可見光區(qū)（400-760nm）的單色光輻射的吸收特性建立的光譜分析法。朗伯－比耳定律：單色光輻射穿過被測物質溶液時，在一定的濃度范圍內被該物質吸收光的量與該物質的濃度和液層的厚度（光程）成正比。吸光度A一般在0.3～0.7（誤差最小）濃度點n＝5，用濃度c對A作線性回歸處理，得一直線方程，r應大于0.999(n＝5)，方程的截距應近于零。A為吸光度T為透光率C為吸光物質的濃度

L為吸收層厚度A=ECLUV－VIS的特點

(1)靈敏度高（10-410-7g/mL)

(2)準確度高(RSD,25%)

(3)儀器價格低廉、操作簡單、易于普及

(4)應用廣泛注意事項儀器校正－波長，準確度溶劑要求－光譜純（甲醇、乙醇、扣除空白）含量測定方法＊對照品比較法原料藥百分含量D：為稀釋體積固體制劑含量液體制劑含量吸收系數法1

含量％＝×100×WA×D×100%

E%cm示例4-6定量計算復習對照法固體制劑------1.容量分析法

（1）直接滴定法（2）剩余滴定法

2.紫外分光光度法（1）吸收系數法（2）對照法

習題1.維生素B12注射液規(guī)格為1mL：0.1mg，含量測定方法如下：精密量取本品7.5mL，置25mL量瓶中，加蒸餾水稀釋至刻度，混勻，置1cm石英池中，以蒸餾水為空白，在361±1nm波長處測得吸收度為0.593，以E1%1cm為207，計算得維生素B12相當于標示量的百分含量2.煙酸片的含量測定：取本品20片，精密稱定重量為7.1680g，研細，取片粉0.3729g，加新沸放冷的水50mL，加熱使溶解，放冷，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，消耗25.20mL，每1mLNaOH滴定液（0.1mol/L）相當于12.31mg煙酸，已知煙酸片規(guī)格0.3g，NaOH滴定液（0.1mol/L）的F=1.005，計算每片含煙酸的量。3.HPLC測定復方SMZ片中SMZ含量，以SG為內標，測得標準液中：SMZ峰高14.90cm，濃度8.0mg/mL，SG峰高13.80cm，濃度4.0mg/mL。樣品液中SMZ峰高11.92cm，SG峰高16.20cm，濃度4.0mg/mL。（進樣量均為5μl）,樣品液中SMZ的濃度為：課堂習題非那西丁含量測定：精密稱取本品0.3630g加稀鹽酸回流1小時后，放冷，用亞硝酸鈉液（0.1010mol/L）滴定，用去20.00mL。每1ml亞硝酸鈉液（0.1mol/L）相當于17.92mg的C10H13O2N。計算非那西丁的含量為（）A.95.55%B.96.55%C.97.55%D.98.55%E.99.72%三、色譜分析法色譜分析法是基于混合物各組分在體系中兩相的物理化學性能差異（如吸附、分配差異等）而進行分離和分析的方法分離原理：吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜法與排阻色譜法分離方法：紙色譜、薄層色譜法、柱色譜、紙色譜、氣相色譜法、高效液相色譜法。色譜法分類高效液相色譜法

特點：高壓、高效、高速高沸點、熱不穩(wěn)定有機及生化試樣的高效分離分析方法。1.儀器要求：高效液相色譜儀AgilentHP11002.對色譜柱要求高效液相色譜：硅膠和化學鍵合硅膠（C18，CN，苯基）離子色譜：離子交換填料分子排阻色譜：凝膠或高分子多孔小球色譜柱是HPLC的心臟部件，它包括柱管與固定相兩部分。3.對檢測器要求紫外檢測器熒光檢測器示差檢測器蒸發(fā)光散射檢測器電化學檢測器質譜檢測器4.流動相要求紫外檢測器：溶劑無干擾蒸發(fā)光散射檢測器、質譜檢測器：不含不揮發(fā)性鹽C18：水、甲醇、乙腈、緩沖液離子色譜(IonChromatography)利用溶液中不同離子與離子交換劑間的交換能力的不同而進行分離的方法。利用多孔性物質對不同大小的分子的排阻作用進行分離的方法。固定相為化學情性多孔物質——凝膠，它類似于分子篩，但孔徑比分子篩大。凝膠內具有一定大小的孔穴，體積大的分子不能滲透到孔穴中去而被排阻，較早地被淋洗出來；中等體積的分子部分滲透；小分子可完全滲透入內，最后洗出色譜柱。這樣，樣品分子基本上按其分子大小，排阻先后由柱中流出。M.W.tR空間排阻色譜(SizeExclusionChromatography)5.系統(tǒng)適用性試驗理論塔板數（N）：色譜柱分離效能分離度（R）：Rs>1.5重復性：RSD<2.0%(n=5)拖尾因子：0.95-1.05(圖例)測定法內標法加校正因子測定法外標法As為內標物質的峰面積或峰高；AR為雜質對照品的峰面積或峰高；Cs為內標物質的濃度；CR為雜質對照品的濃度。Ax為供試品中雜質峰面積或峰高；Cx為供試品中雜質的濃度；As為內標物質的峰面積或峰高；Cs為內標物質的濃度；f為校正因子。

Ax

含量（Cx）＝CR──────AR

氣相色譜法(略）以氣體為流動相的色譜法稱為氣相色譜法。不適用于難揮發(fā)和熱穩(wěn)定性差的物質分析。原理：各組分在固定相與載氣(流動相)間分配系數不等，按大小依次被載氣帶出色譜柱，小先流出。色譜系統(tǒng)適用性問題同高效液相色譜

測定法加入對照品溶液前后校正因子應相同，即：

Ais/Ax=（Cx+△Cx）/Cx則待測組分的濃度Cx可通過如下公式進行計算：

Cx=△Cx/(Ais/Ax)-1前處理的主要目的凈化濃縮增強響應、提高選擇性（比如化學衍生）濃縮痕量的被測組分，提高方法的靈敏度，降低檢測限；去除樣本中的基體與其他干擾物質；通過衍生化，使被測物轉化成為檢測靈敏度更高的物質或轉化為與樣本中干擾組分能夠分離的物質，提高方法的靈敏度和選擇性保護下游分析儀器以及測試系統(tǒng)、避免影響整機性能及壽命第二節(jié)、定量分析樣品的前處理方法為什么要進行前處理?概述對樣品進行前處理以滿足所用分析方法對樣品的要求含金屬、鹵素、硫、磷、棲等特殊元素的藥物分析前處理方法結構決定性質，同時也決定了樣品的前處理方法泛影酸碘番酸磺溴酞鈉三氯叔丁醇碘苯酯含金屬有機物金屬原子不直接與碳原子相連金屬原子直接與碳原子以共價鍵相連-破壞后分析含金屬有機藥物酒石酸銻鉀富馬酸亞鐵卡巴胂金屬有機藥物該類藥物的分析方法通?？煞譃椴唤浻袡C破壞的分析方法經有機破壞的分析方法

一、不經有機破壞的分析方法特點：不對藥物分子中的有機結構部分進行完全破壞，僅選用適當的溶劑使待測元素電離或經簡單回流使之解離為無機鹽后測定。水解后測定還原分解后測定

堿水解后測定法

含鹵素的有機藥物溶解于適當溶劑中，加氫氧化鈉溶液回流使其水解，鹵素轉變?yōu)殡x子，用間接銀量法測定。適用于含鹵素的不穩(wěn)定有機藥物。如：鹵素和脂肪碳相連（2)酸水解后測定法含金屬的有機藥物與適當的礦酸共熱，將不溶性金屬鹽類水解置換為可溶性鹽，然后用配位滴定或剩余酸滴定。（一）經水解后測定法

原理三氯叔丁醇在氫氧化鈉溶液中加熱回流水解，氯元素全部轉變成氯化鈉，然后用剩余滴定法，即于水解液中加硝酸酸化，再加入定量過量的硝酸銀滴定液，使Cl-生成AgCl沉淀，過量的硝酸銀，以Fe3+為指示劑，用硫氰酸銨液回滴定。例三氯叔丁醇的測定CCl3-C(CH3)2-OH+4NaOH

△回流(CH3)2-CO+3NaCl+HCOONa+2H2ONaCl+AgNO3

AgCl↓

+NaNO3

AgNO3+

NH4SCNAgSCN↓+

NH4NO3（淡棕紅色）(Ksp=1.56×10–10)(Ksp=1.0×10-12)Fe3+

+SCNˉFe(SCN)2+

（2)酸水解后測定法含金屬的有機藥物與適當的礦酸共熱，將不溶性金屬鹽類水解置換為可溶性鹽，然后用配位滴定或剩余酸滴定。3.經還原分解后測定法

本法是將含鹵素有機藥物在堿性或酸性下，加還原劑（如鋅粉）加熱回流，藥物產生還原裂解反應，使有機結合的鹵素轉變?yōu)闊o機的鹵素離子，然后采用銀量法測定。本法適用于測定結構中碘與苯環(huán)直接相連，且一個苯環(huán)上含多個碘原子的含鹵素有機藥物。例泛影酸的含量測定取本品約0.4g，精密稱定，加氫氧化鈉溶液30ml與鋅粉1.0g，加熱回流30min，放冷，冷凝管用少量水洗滌，濾過，燒瓶與濾器用水洗滌3次，每次15ml，洗液與濾液合并，加冰醋酸5ml與曙紅鈉指示液5滴，用硝酸銀滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當于20.46mg的C11H9I3N2O4。COOHINHCOCH3IIH3COCHN+11NaOH+Zn回流△COONaNH2

H2N+3NaI+2CH3COONa+2Na2ZnO2+H2ONaI+AgNO3AgI+NaNO3二、經有機破壞的分析方法含金屬藥物、鹵素、氮、硫、磷等與碳原子以共價鍵相連，結合比較牢固，水解或氧化還原的方法難以湊效，需采用有機破壞的方法。濕法破壞干法破壞使用硫酸作為分解劑（消解劑或消化劑），常加入氧化劑（硝酸、高氯酸、過氧化氫）作為輔助分解劑。分解劑組合方式：硫酸-硝酸法硫酸-高氯酸法硫酸-硫酸鹽法

濕法破壞（凱氏定氮法，含氮有機藥物定量分析方法）

硫酸-硫酸鹽法原理是首先將試樣放入凱氏燒瓶中，加入濃硫酸及催化劑(硒、汞或銅鹽)加熱分解消解試樣，使試樣中的氮轉化為銨態(tài)氮(硫酸銨)；有機結構被氧化成二氧化碳和水（消解），消解好的試樣轉移入蒸餾器中，加濃苛性鈉液，使揮發(fā)出的氨氣(NH3)用過量的標準酸溶液吸收，剩余的酸用標準堿溶液返滴定；或用硼酸作吸收液，再用標準酸溶液直接滴定。1.有機物中的氨根在強熱和CuSO4，濃H2SO4

作用下，硝化生成（NH4）2SO4

反應式為：2NH2+H2S04+2H＝(NH4)2S04

（其中CuSO4做催化劑）

2.在凱氏定氮器中與堿作用，通過蒸餾釋放出NH3

，收集于H3BO3溶液中

反應式為:(NH4)2SO4+2NaOH＝2NH3+2H2O+Na2SO4

2NH3+4H3BO3＝(NH4)2B4O7+5H2O

3.用已知濃度的H2SO4（或HCI）標準溶液滴定，根據H2SO4消耗的量計算出氮的含量，然后乘以相應的換算因子，既得含氮（蛋白質）的含量

反應式為：(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O＝(NH4)2SO4+4H3BO3

(NH4)2B4O7+2HCl+5H2O＝2NH4Cl+4H3BO3

本法是往樣品中加入濃硫酸作氧化劑，加入硫酸鹽提高硫酸的沸點，增強硫酸的氧化破壞能力，且防止硫酸的分解損失。

消解劑：硫酸，并加入硫酸鉀（無水硫酸鈉）－提高硫酸沸點進而提高消解溫度。催化劑：加快消解速度、縮短消解時間。常用的催化劑包括汞或汞鹽、硒粉、銅鹽、二氧化錳。輔助催化劑：適用于某些難以分解的含氮雜環(huán)類藥物。包括30％的過氧化氫、高氯酸。使用注意事項適用范圍：含有氨基或酰胺類結構的藥物。偶氮類、肼結構：需加鋅粉先還原后消解以避免生產氮氣而影響測定雜環(huán)類：先用HI酸或紅磷還原為氫化雜化，后消解；含氮量高>10%，加入少量多碳化合物還原劑（如蔗糖、淀粉）以利于氮轉變?yōu)榘蓖ㄟ^高溫灼燒的方式實現對有機結構的破壞。適用于含鹵素、硫、磷、硒及砷鹽等有機合成藥物的前處理。高溫熾灼法氧瓶燃燒法

干法破壞高溫熾灼法－將含待測元素的有機藥物經高溫灼燒灰化，使有機結構分解而待測元素轉化為無機元素或可溶性無機鹽。適用對象：含鹵素類藥物鑒別、含磷藥物的定量測定和藥物中砷鹽的檢查。加入無水碳酸鈉、硝酸鎂、氫氧化鈣、氧化鋅等輔助灰化。含碘藥物鑒別含氟、氯、溴等元素藥物的鑒別含磷藥物的定量測定砷鹽的檢查

氧瓶燃燒法－將含待測元素的有機藥物置于充滿氧氣的密閉的燃燒瓶中充分燃燒，使有機結構徹底分解為二氧化碳和水，而待測元素轉化為不同價態(tài)的氧化物（或無氧酸），被吸收到適當吸收液中，再采用適宜的方法分析。特點：設備簡單、破壞完全，尤其適用于微量樣品的分析適用對象：含鹵素、硫、磷等元素的鑒別、限度檢查和含量測定。（2）儀器與材料①儀器裝置燃燒瓶為500、1000或2000ml無色、磨口、厚壁、硬質玻璃錐型瓶；瓶塞空心，底部熔封鉑絲一根，下端呈螺旋狀或網狀②稱樣用材料及稱樣（樣品制備）:

A.固體樣品無灰濾紙；B.液體樣品紙袋；C.軟膏類樣品：將適量樣品置不含被測成分的蠟油紙中包裹嚴密，外層再用無灰濾紙包裹③吸收液

吸收液：

作用將樣品經燃燒分解所產生的各種價態(tài)的鹵素、硫、氮、硒等，定量地吸收并轉變?yōu)橐欢ǖ谋阌跍y定的價態(tài)；吸收液的選擇氟水

（茜素氟藍比色法）

氯

氯化氫水中溶解度低，NaOH溶液溴H2O-NaOH

NaOH-二氧化硫（還原劑）飽和溶液碘NaOH－水-二氧化硫飽和溶液硫濃H2O2

與水的混合液

（SO3SO42-)

硒硝酸溶液（SeO3H2SO4)

（3）操作方法①燃燒瓶燃燒前的準備用洗液洗凈后，按各藥品項下的規(guī)定加入吸收液，將瓶口用水濕潤，小心急速地通入氧氣1min，立即用表面皿覆蓋瓶口。②樣品的準備取樣品適量，精密稱定后按規(guī)定方法包裹，固定于鉑絲下端的網內或螺旋處。③樣品的燃燒點燃包有供試品的濾紙尾部，迅速放入燃燒瓶中，按緊瓶塞，加水少量封閉瓶口，俟燃燒完畢（應無黑色碎片），充分振搖，使生成的煙霧完全吸入吸收液中，放置15min，用水少量沖洗瓶塞及鉑絲，合并洗液及吸收液，同法另做空白試驗。然后按各藥品項下規(guī)定的方法進行鑒別、檢查或含量測定。①根據被燃燒分解的樣品量選用適宜大小的燃燒瓶。藥典規(guī)定的燃燒瓶體積為500、1000或2000ml三種，采用常量或半微量分析（4）注意事項待分解樣品量燃燒瓶的體積

3~5mg（微量分析）

150~250ml

20~30mg（半微量分析）

300~500ml

50~60mg

1000ml

0.6~0.7g或更多

2000ml或特殊結構的燃燒瓶正確選用燃燒瓶的目的在于：樣品能在足夠的氧氣中燃燒分解完全；有利于將燃燒分解產物較快地吸收到吸收液中；防止爆炸的可能性。②測定含氟有機藥物時，用石英制燃燒瓶③鉑絲燃燒時起催化作用④應同時做空白試驗⑤燃燒時要注意防爆⑥燃燒產生的煙霧完全被吸收例碘苯酯的含量測定原理碘苯酯系有機碘化物，用氧瓶燃燒分解，轉變?yōu)榈饣?，繼而氧化為游離的碘，并被定量地吸收于吸收液中，和氫氧化鈉反應，生成碘化物與碘酸鹽，加入溴-醋酸溶液，使全部轉變?yōu)榈馑猁}，過量的溴以甲酸及通空氣去除。加入碘化鉀，使與碘酸鹽反應析出游離碘，用硫代硫酸鈉液滴定，碘與淀粉結合所顯的藍色消失即為終點。碘苯酯I2(HIO3,HIO,HI)

取本品約20mg，精密稱定，照氧瓶燃燒法進行有機破壞，用氫氧化鈉試液2ml與水l0ml為吸收液，待吸收完全后，加溴醋酸溶液(取醋酸鉀10g，加冰醋酸適量使溶解，加溴0.4ml，再加冰醋酸使成1000m1)l0ml，密塞，振搖，放置數分鐘，加甲酸約lml，用水洗滌瓶口，并通入空氣流約3～5min以除去剩余的溴蒸氣，加碘化鉀2g，密塞，搖勻，用硫代硫酸鈉滴定液(0.02mol/L)滴定，至近終點時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍色消失，并將滴定的結果用空白試驗校正。每lml的硫代硫酸鈉滴定液(0.02mol/L)相當于1.388mg的C19H29IO2。

測定法滴定度的計算2mol碘苯酯→1molI21molI2→1molNaIO+1molNaI1molNaIO→1/3molNaIO3+2/3molNaImolNaI+Br2→molNaIO3即2mol碘苯酯→2molNaIO32molNaIO3+10molI-→6molI2即2mol碘苯酯→6molI2→12molNa2S2O3反應摩爾比為1∶6第三節(jié)藥品質量標準分析方法驗證一、目的

證明所采用的分析方法適合于相應的檢測要求，方法驗證過程和結果均應記載在藥品標準起草和修訂說明中。二、用途（一）藥品質量標準起草時，分析方法需經驗證。（二）藥物合成方法變更、制劑的組分變更、原分析方法進行修訂時，分析方法需經驗證。三、需驗證的分析項目

鑒別試驗；雜質定量或限度檢查；

原料或制劑中有效成分含量測定；

制劑中其它成分（降解產物、防腐劑等）的測定；

溶出度、釋放度等功能檢查中的溶出量等的測試方法。四、驗證內容

1.準確度

2.精密度

3.專屬性

4.檢測限

5.定量限

6.標準曲線

7.線性范圍

8.耐用性重復性中間精密度重現性

準確度是指用該方法測定的結果與真實值或參考值接近的程度，用百分回收率表示。測定回收率R（recovery）的具體方法可采用“回收試驗法”和“加樣回收試驗法”。

（一）準確度（accuracy）空白+已知量A的對照品（或標準品）測定，測定值為M回收試驗已準確測定藥物含量P的真實樣品+已知量A的對照品（或標準品）測定，測定值為M。加樣回收試驗

加入已知純度對照品的量為原制劑中含量的80%、100%、120%,每一濃度測3份.規(guī)定的范圍內，至少用9次測定結果評價，如制備三個不同濃度樣品各測三次。數據要求UV、HPLC、GC法

98.0102.0%容量法

99.7100.3%體內藥物分析

85.0115.0%RSD≤2%雜質定量測定的準確度可向原料藥或制劑中加入已知量雜質進行測定。如果不能得到雜質或降解產物，可用本法測定結果與另一成熟的方法進行比較。是指在規(guī)定條件下，同一個均勻樣品，經多次取樣測定所得結果之間的接近程度。用偏差（d）、標準偏差(SD)、相對標準偏差(RSD)（變異系數，CV）表示。（二）精密度（precision）精密度偏差（d）：測量值與平均值之差標準（偏）差（SD或S）相對標準（偏）差（RSD），也稱變異系數（CV）重復性

在相同條件下，由同一個分析人員測定所得結果的精密度；在規(guī)定的范圍內，至少用9次測定結果評價，如制備三個不同濃度樣品各測三次或把被測物濃度當作100%，至少測6次進行評價。2.中間精密度

同一實驗室，不同時間由不同分析人員用不同設備所得結果的精密度?？疾祀S機變動因素的影響。變動因素為不同日期、不同分析人員、不同設備驗證內容3.重現性

不同實驗室，不同分析人員測定結果的精密度。當分析方法將被法定標準采用時，應進行重現性試驗。如建立藥典分析方法時通過協(xié)同檢驗得出重現性結果，協(xié)同檢驗的過程、重現性結果均應記載在起草說明中。RSD允許值容量分析

≤0.2%重量分析法

≤0.5%氧瓶燃燒法、凱氏定氮法

≤0.5%紫外、原子吸收分析法

≤1%HPLC、GC、TLC分析法

≤

2%指有其他成分（雜質、降解物、輔料等）可能存在情況下采用的方法能準確測定出被測物的特性，能反映該方法在有共存物時對供試物準確而專屬的測定能力。是指該法用于復雜樣品分析時相互干擾程度的度量。

（三）專屬性（specificity）

專屬性不夠,應采用多個方法予以補充1.鑒別反應不含被測成分的樣品,以及結構相似或組分中的有關化合物,均呈負反應2.含量測定和雜質測定注明成分在譜圖中的位置雜質是否干擾含量測定(是否和主峰分離)降解試樣峰純度檢查(PDA)兩法比較測定結果檢測限系指試樣中被測物能被檢測出的最低量。是限度檢查效能指標，反應方法是否靈敏,無需定量測定。常用%、ppm、ppb表示。

（四）檢測限（limitofdetection，LOD）

1．非儀器分析目視法用已知濃度的被測物，試驗出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。5g/mL10g/mL20g/mL50g/mL100g/mL

2．信噪比法用于能顯示基線噪音的分析方法（儀器分析方法），是把已知低濃度試樣測出的信號與空白樣品測出的信號進行比較，算出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。一般以信噪比（S/N）3∶1或2∶1時的相應濃度或注入儀器的量確定檢測限。

3．數據要求應附測試圖譜，說明測試過程和檢測限結果。指樣品中被測物能被定量測定的最低量，結果應具有一定準確度和精密度。常用%、ppm、ppb表示。（五）定量限（1imitofquantitation，LOQ）常用信噪比法確定定量限，一般以信噪比（S/N）為10∶1時相應的濃度或注入儀器的量進行確定，也可用儀器所測空白背景響應標準差（SD）的10倍為估計值，再經試驗確定。在設計的范圍內，測試結果與試樣中被測物濃度直接呈正比關系的程度。數據要求：應列出回歸方程、相關系數和線性圖