第七章-三萜及其苷類-1

第八章三萜類化合物概述結構與分類理化性質和溶血作用提取分離檢識結構研究實例人參功效：大補元氣、復脈固脫、補脾益肺、生津、安神黃芪功效：補氣固表，托毒排膿，利尿，生肌。甘草與柴胡甘草功效：補脾益氣,清熱解毒,祛痰止咳,緩急止痛,

調和諸藥。柴胡功效：和解表里、疏肝、升陽。學習目標1.了解三萜及三萜皂苷的含義2.熟悉三萜的主要結構類型及結構特點3.掌握三萜類的理化性質和檢識方法4.掌握三萜類的提取、分離方法5.掌握人參皂苷的結構類型、性質和生理活性6.熟悉甘草中主要化合物的類型和性質第一節(jié)、概述一、三萜的定義

定義:由30個碳原子組成的萜類化合物，分子中有6個異戊二烯單位。

三萜類存在形式：三萜苷類化合物多數(shù)可溶于水，水溶液振搖后產生似肥皂水溶液樣泡沫，故被稱為三萜皂苷。三萜皂苷多具有羧基，所以有時又稱之為酸性皂苷。而甾體皂苷稱為中性皂苷。游離三萜－三萜皂苷元

糖苷－三萜皂苷第一節(jié)、概述二、三萜的分布三萜類廣泛存在于自然界的菌類、蕨類、單子葉、雙子葉植物、動物及海洋生物中，尤以雙子葉植物中分布最多。它們以游離、成苷、成酯的形式存在。游離三萜主要來源于菊科、豆科、大戟科、楝科、衛(wèi)茅科、茜草科、橄欖科、唇形科等植物。三萜皂苷在豆科、五加科、桔?？?、遠志科、葫蘆科、毛茛科、石竹科、傘形科、鼠李科、報春花科等植物分布較多。少數(shù)三萜類成分也存在于動物體，如從羊毛脂中分離出羊毛脂醇，從鯊魚肝臟中分離出鯊烯；從海洋生物如海參、軟珊瑚中也分離出各種類型的三萜類化合物。第一節(jié)、概述多數(shù)是醇苷，也有酯苷據(jù)分子中糖鏈數(shù)目：單糖鏈、雙糖鏈、三糖鏈皂苷成苷位置：3-OH、28-COOH（酯苷）、其它位-OH原生皂苷：天然產生，未發(fā)生水解的皂苷次生皂苷：原生苷因水解或酶解，部分糖被降解生成的苷三、三萜皂苷的組成苷元：常見四環(huán)三萜、五環(huán)三萜糖：葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖，葡萄糖醛酸，特殊糖（如芹糖、呋糖、雞納糖、乙酰氨基糖等）。多數(shù)為吡喃糖。這些糖多以低聚糖形式與苷元成苷，多為吡喃型糖苷，少數(shù)為呋喃型糖苷四、生理活性：

溶血、抗癌、抗炎、抗菌、抗病毒、降低膽固醇、殺軟體動物、抗生育等。少數(shù)三萜類分子中的碳原子多于或少于30個，如齒孔酸(C31H50O3)，楝烷型僅有26個碳原子組成等，過去認為它們不屬于三萜類范疇，后來根據(jù)植物生源關系將其劃入三萜類化合物。

三萜類化合物的生物合成途徑從生源來看，是由鯊烯(squalene)通過不同的環(huán)化方式轉變而來的，而鯊烯是由焦磷酸金合歡酯(farnesylpyrophosphate，F(xiàn)PP)尾尾縮合生成。焦磷酸金合歡酯

焦磷酸金合歡酯

鯊烯

五、生源途徑第一節(jié)、概述六、研究進展近30年來，三萜類成分的研究進展很快，特別是近10年從海洋生物中得到不少新型三萜化合物，是萜類成分研究中較為活躍的領域之一。

人參皂苷能促進RNA蛋白質的生物合成，調節(jié)機體代謝，增強免疫功能。柴胡皂苷能抑制中樞神經系統(tǒng)，有明顯的抗炎作用，并能減低血漿中膽固醇和甘油三酯的水平。七葉皂苷具有明顯的抗?jié)B出、抗炎、抗瘀血作用，能恢復毛細血管的正常的滲透性，提高毛細血管張力，控制炎癥，改善循環(huán)，對腦外傷及心血管病有較好的治療作用。

第二節(jié)結構與分類

按存在形式、結構、性質分：三萜皂苷苷元其它三萜類（樹脂、苦味素、三萜醇、三萜生物堿）按碳環(huán)的有無和數(shù)目分

四環(huán)三萜*五環(huán)三萜*（較多）鏈狀單環(huán)雙環(huán)三環(huán)三萜四環(huán)三萜*（較多）羊毛脂甾烷型茯苓酸大戟烷型大戟醇達瑪烷型酸棗仁皂苷人參皂苷葫蘆素烷型雪膽甲素及乙素原萜烷型澤瀉萜醇A、B

楝烷型川楝素環(huán)菠蘿蜜烷型環(huán)黃芪醇

五環(huán)三萜*（較多）齊墩果烷型齊墩果酸烏蘇烷型烏蘇酸羽扇豆烷型白樺脂醇白樺脂酸

木栓烷型雷公藤酮羊齒烷型和異羊齒烷型何帕烷型和異何帕烷型其他類型

一、鏈狀三萜：多為鯊烯類化合物，主要存在于魚肝油中。

2，3-環(huán)氧角鯊烯是角鯊烯轉變?yōu)槿h(huán)、四環(huán)和五環(huán)三萜的重要生源中間體

2，3-環(huán)氧角鯊烯羊毛脂醇

環(huán)化酶鯊烯

二、單環(huán)三萜：

從菊科蓍屬植物(Achilleaodorta)中分離得到的蓍醇A是一個具有新單環(huán)骨架的三萜類化合物。蓍醇A

三、雙環(huán)三萜：

從海洋生物Asteropussp．中分離得到的pouosideA-E是一類具有雙環(huán)骨架的三萜半乳糖苷類化合物，分子中含有多個乙酰基。其中pouosideA具有細胞毒作用。

四、三環(huán)三萜：

從蕨類植物伏石蕨新鮮全草中分離到兩個油狀三環(huán)三萜類碳氫化合物13βH-malabaricatriene和13αH-malabaricatriene(1和2)，從生源上可看作是由α-polypodatetraenes和γ-polypodatetraenes環(huán)合而成。malabaricatriene1C13-βHmalabaricatriene2C13-αH

α-polypodatetraenesγ-polypodatetraenes

五、四環(huán)三萜：以環(huán)戊烷駢多氫菲為基本母核17位上有一個由8個碳原子組成的側鏈5個甲基：4位有偕二甲基

與甾體皂苷區(qū)別

10位和14位各有一甲基、另一甲基常連在

13或8位上

R2829

1、羊毛脂甾烷型羊毛脂甾烷型三萜結構結構特點：全反式：A/B,B/C,C/D皆為反式稠合側鏈結構類型：10β、13β、14α、17β。C20為R型R28291、羊毛脂甾烷型

羊毛脂甾烷型三萜的皂苷廣泛分布于植物界及海洋生物中。

如：靈芝為多孔菌科真菌赤芝的子實體，是補中益氣、扶正固本、延年益壽的名貴中藥。由其中分離出四環(huán)三萜化合物達100多個，是羊毛甾烷高度氧化的衍生物。根據(jù)分子中所含碳原子數(shù)目的多少可分為C30、C27、C24三種基本骨架。后兩種為第一種三萜的降解產物。

C30三萜1、羊毛脂甾烷型

從靈芝中分離出一個三萜化合物，具有扶正固本之功。它的結構與羊毛甾烷相比，多了3C=O，11C=O，15C=O，23C=O，26-COOH，是羊毛甾烷的高度氧化化合物。28291、羊毛脂甾烷型從中藥－靈芝中分離得到的四環(huán)三萜化合物C27、

C24三萜LucidenicacidALucidoneA1、羊毛脂甾烷型茯苓酸R=COCH3塊苓酸R=H

茯苓酸和塊苓酸等是具有利尿、滲濕、健脾、安神功效的中藥茯苓的主要成分。這類化合物的特征是多數(shù)在C24上有一個額外的碳原子，即屬于含31個碳原子的三萜酸。2、大戟烷型

大戟烷結構特點：大戟烷是羊毛脂甾烷的立體異構體。全反式：A/B,B/C,C/D皆為反式稠合側鏈結構類型：10β、13α、14β、17α

C20為R型2、大戟烷型

大戟醇

乳香二烯酮酸△7（8）異乳香二烯酮酸△8（9）

大戟醇存在于許多大戟屬植物乳液中，在甘遂、狼毒和千金子中均有大量存在。乳香中含有的乳香二烯酮酸和異乳香二烯酮酸也屬大戟烷衍生物。dammaranes結構特點：3、達瑪烷型

全反式：A/B,B/C,C/D皆為反式稠合側鏈結構類型：8、10位有β-構型角甲基，13位連β-H，17β

C20為R或S型達瑪烷型：8β—CH3，13β—H；羊毛脂甾烷型：8β—H，13β—CH328293、達瑪烷型

達瑪烷型三萜及其皂苷在自然界存在非常廣泛，僅次于齊墩果烷型三萜。五加科植物人參（Panaxginseng）為名貴的滋補強壯藥，國內外對人參屬植物研究十分活躍，分離鑒定了40多個皂苷（人參皂苷，ginsenosides）。大多屬于達瑪烷型四環(huán)三萜及其苷，少數(shù)為齊墩果烷型三萜皂苷。

特點：3和12位均有羥基取代，C-20位也有OH取代，且為S構型。分類：根據(jù)6位是否有-OH取代可分為兩類，人參二醇型和人參三醇型皂苷。

3、達瑪烷型

3-OH雙糖鏈

20-OH20S-原人參二醇皂苷：RRa1-glc6ara(p)4xylRa2-glc6ara(f)2xylRb1-glc6glcRb2-glc6ara(p)Rc-glc6ara(f)Rd-glc3、達瑪烷型

達瑪烷型的人參皂苷在HCl溶液中加熱煮沸水解，會發(fā)生差向異構化只能得到人參二醇和人參三醇，得不到原生皂苷元原人參二醇和原人參三醇。人參三醇人參二醇若要得到原人參皂苷元，必須在緩和的條件下水解3、達瑪烷型

由達瑪烷衍生的人參皂苷，在生物活性上有顯著差異。20(S)-原人參三醇衍生的皂苷有溶血性質，而由

20(S)-原人參二醇衍生的皂苷則具對抗溶血的作用，因此人參總皂苷不能表現(xiàn)出溶血的現(xiàn)象。人參皂苷Rg1有輕度中樞神經興奮作用及抗疲勞作用。人參皂苷Rb1則有中樞神經抑制作用和安定作用。人參皂苷Rb1有增強核糖核酸聚合酶的活性，人參皂苷Rc則有抑制核糖核酸聚合酶的活性。

4、葫蘆烷型結構特點：基本骨架中，A/B環(huán)上的取代與羊毛脂烷不同，5-H、8-H

、10-H，9位有

-CH3；其余與羊毛脂烷相同。282928294、葫蘆素烷型

葫蘆科的很多中藥，如甜瓜蒂、絲瓜子、苦瓜、噴瓜等均含此類成分，總稱葫蘆素類。葫蘆素類有抑制腫瘤、抗菌、消炎、催吐、致瀉等廣泛生物活性。從雪膽屬植物小蛇蓮根中分出雪膽甲素和乙素，臨床上治療急性痢疾、肺結核、慢性氣管炎等效果較好。雪膽甲素R=Ac雪膽乙素R=H5、原萜烷型

結構特點：C10位和C14位上有β-CH3，C8上有α-CH3，C20為S構型。與羊毛脂甾烷的不同：13β-CH3變?yōu)?α-CH3，C20為S構型。（原萜烷型）羊毛脂甾烷型澤瀉萜醇A

澤瀉萜醇A和澤瀉萜醇B等是從利尿滲濕中藥澤瀉中得到的主要成分，可降低血清總膽固醇，用于治療高血脂癥。6、楝烷型

楝烷型三萜的結構

結構特點：骨架由26個碳原子組成；8、10位有-構型角甲基；13位有-構型角甲基；4位有兩個甲基；17位有

-側鏈；2223212013410

楝烷型三萜大量存在于楝科楝屬植物中，具有苦味及昆蟲拒食作用。苦楝果實提取物已用作昆蟲拒食劑。從楝科川楝的果實、根皮、樹皮中分離到的川楝素用作驅蛔蟲藥，效果較好。6、楝烷型

川楝素異川楝素毒性：﹤

楝烷型三萜化合物氧化程度很高，結構復雜，有時需利用單晶X-ray確定其結構。

結構特點：基本骨架與羊毛脂甾烷很相似，差別僅在于環(huán)菠蘿蜜烷19位甲基與9位碳脫氫形成三元環(huán)。R7、環(huán)菠蘿蜜烷型

此類化合物中雖有5個碳環(huán)，但其基本碳架與羊毛脂甾烷很相似，C9，C10，C19成環(huán)，但水解易裂解。7.環(huán)菠蘿蜜烷型

如中藥黃芪有補氣強壯之功效。從黃芪中分離鑒定的皂苷近20個，多數(shù)為環(huán)菠蘿蜜型三萜皂苷，多數(shù)皂苷的苷元為環(huán)黃芪醇（cycloastragenol）.在黃芪中環(huán)黃芪醇與糖結合以皂苷存在。環(huán)黃芪醇cycloastragenol(20R,24S)-3,6,16,25-tetrahydroxy-20,24-epoxy-9,19-cyclolanostane24207.環(huán)菠蘿蜜烷型

環(huán)黃芪醇皂苷在酸性條件下水解時，除得到皂苷元環(huán)黃芪醇，同時也得到黃芪醇。因環(huán)黃芪醇結構中的環(huán)丙烷在酸性條件下水解開環(huán)而生成黃芪醇次生結構，黃芪醇不是原皂苷元。若要得到原皂苷元，須采用兩相酸水解或酶水解，避免開環(huán)。黃芪醇astragenol

五環(huán)三萜（PentacyclicTriterpenoids)1、齊墩果烷型(Oleananes）

2、烏蘇烷型（Ursanes）

3、羽扇豆烷型（Lupanes）

4、木栓烷型（Friedelanes）

5.羊齒烷型和異羊齒烷型

6.何帕烷型和異何帕烷型

7.其他類型六、五環(huán)三萜1、齊墩果烷型Oleanane/-amyrane齊墩果烷/

-香樹脂烷結構特點：基本碳架：多氫蒎的五環(huán)母核。A/B環(huán)、B/C環(huán)、C/D環(huán)均為反式，D/E環(huán)為順式八個甲基，8個甲基連在季碳上3位多-OH，11位多羰基

1、齊墩果烷型C28常有-COOH；C3常有羥基，有時也在C4位；C12、C13位往往連有不飽和雙鍵。

取代基1、齊墩果烷型典型的齊墩果烷型三萜是齊墩果酸（oleanoicacid）

齊墩果烷型三萜的皂苷，糖鏈可以連接在3-C位，也可以連接在28-COOH上形成酯苷。

游離的齊墩果酸首先從木樨科植物油橄欖（齊墩果，Oleaeuropaea）中分到，女貞果實中也有，廣泛分布于自然界。具有降轉氨酶作用，臨床上用于治療急性黃疸性肝炎。含齊墩果酸的植物很多，但含量超過10%的很少，從刺五加(Acanthopanaxsenticosus)、龍牙蔥木(Araliamandshurica)中提取齊墩果酸，得率都超過10%，純度在95%以上，是很好的植物資源。1、齊墩果烷型1、齊墩果烷型

甘草（Glycyrrhizauralensis）為豆科甘草屬植物。具有緩急、解毒、調和諸藥的作用。其中存在的甘草酸（glycyrrhizicacid）及其苷元甘草次酸（18-H，glycyrrhetinicacid），為齊墩果烷型三萜，具有促腎上腺皮質激素（ACTH）樣生物活性，臨床用作抗炎藥。但所含的烏拉爾甘草次酸（即甘草次酸的18-H異構體）無此種生物活性。中藥柴胡、商陸、遠志、合歡、牛膝等植物中存在大量以齊墩果烷型三萜為苷元的三萜皂苷。烏蘇烷型（ursane）-香樹脂烷（-amyrane）結構特點：與齊墩果烷相似。不同之處，6個甲基連在季碳上；29-CH3和30-CH3分別連接在19、20位,連接在叔碳上。2、烏蘇烷型

從女貞子葉中分離得到的烏蘇酸（ursonicacid），也稱熊果酸。廣泛分布于熊果葉、梔子果實、女貞葉、車前葉、白花蛇舌草中。具有鎮(zhèn)靜、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗?jié)儭⒔档脱堑榷喾N生物學效應。

2、烏蘇烷型

中藥地榆(Sanguisorbaofficinalis)具有涼血止血的功效，其中含有地榆皂苷B,E(sanguisorbinBandE)，是烏蘇酸的酯苷。

3、羽扇豆烷型結構特點：C21與C19連成五元環(huán)E環(huán)在E環(huán)19位有異丙基以-構型取代，有△20（29）雙鍵，其余甲基取代同齊墩果烷和烏蘇烷；A/B、B/C、C/D、D/E均為反式稠合。注意甲基：6個連接在季碳上的甲基；兩個連接在叔碳上3、羽扇豆烷型

羽扇豆（lupinusluteus）種子中存在的羽扇豆醇（lupeol)，酸棗仁中的白樺脂醇（betulin）和白樺酸（betulinicacid）都是羽扇豆烷型三萜。羽扇豆醇R=CH3白樺脂醇R=CH2OH白樺脂酸R=COOH

毛茛科白頭翁屬植物白頭翁（Plusatillachinensis）含有多種羽扇豆烷型三萜皂苷，其皂苷元為23-羥基白樺酸。23-羥基白樺酸3、羽扇豆烷型白頭翁皂苷：C-3或C-28成苷雙糖鏈苷單糖鏈苷4、木栓烷型結構特點：A/B、B/C、C/D環(huán)均為反式，D/E環(huán)為順式，稠合方式同齊墩果烷C4、C5、C9、C14位各有一個β-CH3取代C17多β-CH3(有時為-CHO、-COOH或-CH2OH）取代C13-CH3為α-型C2、C3位常有羰基取代。4、木栓烷型friedelin（木栓酮）friedelinol（木栓醇）:3-OH

epi-friedelinol（表木栓醇):3α-OH

4、木栓烷型

從雷公藤（tripterygiumwilfordii）中分離得到的雷公藤酮。骨架有29個碳，為一降碳三萜。25-去甲基（降）木栓烷衍生物，雷公藤酮3-hydroxy-25-nor-friedel-3,1(10)-dien-2-one-30-oicacid.5、羊齒烷型和異羊齒烷型

為羽扇豆烷型的異構體

E環(huán)上的取代基在C22位上

C8位上的角甲基轉到C13位上白茅素羊齒烯醇異羊齒烷型：C13甲基β-構型，C14甲基α-構型羊齒烷型：C13甲基α-構型，C14甲基β-構型。6、何帕烷型和異何帕烷型

羊齒烷的異構體

C14和C18位均有角甲基的里白烯羥基何帕酮

6、其他類型C環(huán)為七元環(huán)的三萜類化合物石松素石松醇第3節(jié)理化性質一、物理性質1．性狀

游離多有完好的結晶

皂苷多為無色或白色無定形粉末，少晶體因極性較大，具有吸濕性多苦味和辛辣味對人體粘膜有強烈刺激性，產生反射性粘液腺分泌，故可用于祛痰止咳

甘草皂苷有顯著的甜味對粘膜刺激性亦弱2．熔點與旋光性游離有固定的熔點有羧基者熔點較高齊墩果酸的熔點是308℃～310℃

烏蘇酸的熔點是285℃～291℃

皂苷熔點都較高有的常在熔融前即被分解一般測得的大多是分解點多在200℃～350℃之間。旋光性萜類化合物均有旋光性3.溶解度游離能溶于石油醚、乙醚、氯仿、甲醇乙醇等有機溶劑不溶于水

皂苷易溶于熱水，稀醇、熱甲醇和熱乙醇可溶于含水丁醇或戊醇（提取分離溶劑）幾不溶或難溶于丙酮、乙醚、石油醚次級苷在水中的溶解度降低易溶于低級醇、丙酮、乙酸乙酯皂苷有助溶性4．發(fā)泡性皂苷水溶液振搖持久性泡沫泡沫不因加熱而消失因皂苷能降低水溶液的表面張力（表面活性），故用作清潔劑、乳化劑。皂苷的表面活性與其分子內親水性和親脂性結構的比例有關，比例適當，才能發(fā)揮。甘草皂苷的起泡性很弱。

1、顏色反應

三萜類化合物（苷元和苷）在無水條件下，與強酸、中強酸（三氯乙酸）或Lewis酸（ZnCl2、AlCl3、SbCl3）作用，產生顏色變化或熒光。原理可能是使分子中的羥基脫水，增加雙鍵，再經雙鍵移位、雙分子縮合等反應生成共軛雙烯系統(tǒng)，繼續(xù)在酸作用下形成陽碳離子鹽而呈色。全飽和、且3位又無羥基或羰基的化合物呈陰性反應；有共軛雙鍵的化合物呈色很快，孤立雙鍵的呈色較慢。二、化學性質

強酸、中等強酸、Lewis酸

三萜顏色變化或熒光

無水條件

1）Liebermann-Burchard反應（醋酐-濃硫酸反應）

濃硫酸-乙酸酐(1:20)

樣品/乙酸酐黃→紅→紫→藍等，數(shù)滴最后褪色

2）Kahlenberg反應（五氯化銻反應）樣品/氯仿或醇

噴

20％SbCl5的氯仿溶液

濾紙上干燥

或SbCl3飽和的氯仿溶液

藍色、灰藍色、灰紫色等

60℃～70℃加熱（3）Rosen-Heimer反應（三氯醋酸反應）

樣品溶液噴

25％三氯乙酸乙醇溶液濾紙上紅色漸變?yōu)樽仙?/p>

加熱100℃

（4）Salkowski反應（氯仿-濃硫酸反應）

濃硫酸

氯仿層綠色熒光樣品/氯仿硫酸層呈現(xiàn)紅色或藍色

（5）Tschugaeff反應（冰醋酸-乙酰氯反應）

乙酰氯數(shù)滴樣品/冰乙酸呈現(xiàn)淡紅色或紫紅色

氯化鋅結晶數(shù)粒稍加熱2．沉淀反應(金屬鹽類如鉛鹽、鋇鹽、銅鹽等)

硫酸銨、乙酸鉛等中性鹽類酸性皂苷/水溶液沉淀

堿式乙酸鉛、氫氧化鋇等堿性鹽類中性皂苷/水溶液沉淀（甾體皂苷）

此法現(xiàn)已不用以前曾利用這一性質進行皂苷的提取和初步分離3．皂苷的水解(1)酸水解水解速度與苷元和糖的結構有關，苷元和糖的結構不同對酸的穩(wěn)定性不同，水解速度不同，可通過改變水解條件得到不同的次級皂苷。

注意有些三萜皂苷在酸水解時，易引起皂苷元發(fā)生脫水、環(huán)合、雙鍵轉位、取代基移位、構型轉化等，得不到原始皂苷元.

如欲獲得真正皂苷元，應采用兩相酸水解、酶水解或Smith降解等方法。(2)乙酰解化合物的全乙?；镌贐F3催化下用乙酸酐使苷鍵裂解，得全乙酰化寡糖和全乙?；赵?3)Smith降解條件溫和在酸水解中不穩(wěn)定的皂苷元可以用此法獲得真正的皂苷元(4)酶水解（條件溫和）

對酸堿均不穩(wěn)定的皂苷，可采用酶水解。(5)糖醛酸苷鍵的裂解：

難水解：溫和條件無法水解劇烈條件破壞苷元特殊方法：光解法，四乙酸鉛-乙酸酐法，微生物轉化法等。(6)酯苷鍵的水解：酯苷鍵對堿不穩(wěn)定，用堿水解法。

NaOH/H2O中回流水解、但水解后的糖伴有分解反應

5mol/L的氨水回流水解

LiI在2，6-二甲基吡啶/甲醇溶液中與皂苷回流水解三、溶血作用

多數(shù)皂苷的水溶液能破壞紅細胞而有溶血作用靜脈注射溶血作用肌肉注射組織壞死口服則無溶血作用

溶血指數(shù)在一定條件(等滲、緩沖及恒溫)下能使同一動物來源的血液中紅細胞完全溶血的最低濃度。如甘草皂苷的溶血指數(shù)為1：4000

薯蕷皂苷的溶血指數(shù)為1：400000

溶血機理

多數(shù)皂苷能與膽甾醇結合生成不溶性的分子復合物。皂苷水溶液與紅細胞壁上的膽甾醇接觸生成復合物沉淀，破壞了血紅細胞的正常滲透性，使細胞內滲透壓增加而崩解，導致溶血。膽甾醇可解皂苷的溶血毒性。

注意：有的皂苷則有抗溶血作用。

其他成分也有溶血作用，如某些植物的樹脂、脂肪酸、揮發(fā)油等亦能產生溶血作用。（鞣質則能凝集血紅細胞而抑制溶血。）因此，要判斷是否是由皂苷引起溶血除提純后再進行溶血試驗外，還可結合膽甾醇沉淀法，若沉淀后的濾液無溶血現(xiàn)象，而沉淀分解后有溶血活性，才表示是由皂苷引起的。一、提取1.醇類溶劑提取法：思路：先泛提再系統(tǒng)溶劑萃取，可得到游離三萜類化合物和總皂苷。

第四節(jié)提取分離

藥材粗粉

甲醇或乙醇提取提取液

回收溶劑濃縮液

加水

分別用石油醚、氯仿或乙醚及水飽和正丁醇萃取

石油醚液氯仿或乙醚液正丁醇液水液

(親脂性雜質)(游離三萜類)(水溶性雜質)

回收溶劑，蒸干

總皂苷

第六節(jié)提取分離2.酸水解有機溶劑萃取法：得到的是皂苷元。

3.堿水提取法：多數(shù)三萜皂苷含-COOH,可溶于堿水，故可用堿溶酸沉法提取

植物原料

加酸性水溶液加熱水解過濾藥渣

水洗、干燥有機溶劑提取

皂苷元藥渣

植物原料

加醇類溶劑醇提取液（皂苷）

加酸水解過濾

水解物水液

有機溶劑皂苷元二、三萜類化合物的分離1．分段沉淀法

粗皂苷

少量甲醇或乙醇溶解逐滴加入乙醚、丙酮或乙醚:丙酮(1:1)的混合溶劑邊加邊搖勻析出物（皂苷）溶液

逐漸降低溶劑極性極性不同的皂苷就分批沉出2．膽甾醇沉淀法：皂苷可與膽甾醇生成難溶性的分子復合物，用于分離

三萜皂苷與膽甾醇生成復合物不穩(wěn)定甾體皂苷與膽甾醇生成復合物穩(wěn)定

粗皂苷

溶于少量乙醇加膽甾醇的飽和乙醇溶液(需稍加熱)，過濾

沉淀溶液

水、醇、乙醚順次洗滌（以除去糖類、色素、油脂和游離的膽甾醇）干燥

乙醚回流乙醚殘留物（膽甾醇）（較純的皂苷）3．色譜分離法：

吸附柱色譜（正相、反相、制備薄層色譜）分配柱色譜高效液相色譜（反相）凝膠色譜大孔樹脂柱色譜*

裝柱：95%乙醇→

由高到低洗（70%、50%、30%乙醇）

→水洗脫：先水洗，再用由低到高濃度的甲/乙醇梯度洗脫

常采用多種色譜法相組合的方法。（先過硅膠柱，再結合低壓或中壓柱、制備薄層、高效液相或凝膠色譜等方法進一步的分離。）對皂苷的分離，還可過硅膠柱之前，先用大孔樹脂柱進行精制或初步分離。一、理化檢識

1．泡沫試驗：皂苷水溶液經強烈振搖能產生持久性的泡沫，此性質可用于皂苷的鑒別

中藥粉末1g

加水10ml，煮沸10min后過濾水液藥渣

振搖持久性泡沫(15min以上，則為陽性)

有的皂苷沒有產生泡沫的性質（假陰性）蛋白質的水溶液等亦有發(fā)泡性（假陽性），但加熱泡沫明顯減少或消失。第5節(jié)檢識

泡沫試驗可用于區(qū)別三萜皂苷和甾體皂苷：

0.1molHCl5d滴加樣品水溶液振搖

0.1molNaOH5d滴加樣品水溶液振搖若兩管泡沫持久程度相同，則為三萜皂苷；若堿管持久程度大于酸管，則為甾體皂苷。

2．顯色反應：通過Liebermann-Burchard等顏色反應和Molish反應，可初步推測化合物是否為三萜或三萜皂苷類化合物。試劑檢識皂苷雖靈敏，但專屬性較差。

3．溶血試驗（既可定性又可定量）

供試液1ml

水浴蒸干

0.9％的生理鹽水溶解幾滴2％的紅細泡懸浮液溶液

由混濁變?yōu)槌蚊鳎ㄈ苎F(xiàn)象）

此性質可推算樣品中所含皂苷的粗略含量。如某藥材浸出液測得的溶血指數(shù)為1:1M，所用對照標準皂苷的溶血指數(shù)為1:100M，則藥材中皂苷的含量約為1％。

二、色譜檢識1．薄層色譜：

吸附劑：硅膠展開劑：游離三萜：親脂性展開劑（環(huán)己烷-乙酸乙酯(1:1)等）苷：多用含水展開劑（氯仿-甲醇-水（65：35：10，下層）顯色劑：10％硫酸溶液、三氯乙酸試劑、五氯化銻試劑香草醛-硫酸試劑等。也可用反相薄層色譜分離酸性皂苷時，為克服皂苷-COOH帶來的拖尾現(xiàn)象，可在展開劑中加入少量甲酸或乙酸。

2．紙色譜分離親水性強的皂苷，紙色譜可用水為固定相，移動相的親水性也相應增大。以水為固定相的紙色譜法雖方便易行，但色斑不集中。分離皂苷元和親脂性皂苷，多以甲酰胺為固定相，用甲酰胺飽和的氯仿溶液為移動相。顯色劑：三氯乙酸、五氯化銻試劑等。

不可用含濃硫酸的顯色劑第7節(jié)含皂苷的中藥研究實例一、人參

[來源]人參為五加科植物人參的干燥根，傳統(tǒng)名貴中藥。栽培者稱為“園參”，野生者稱為“山參”。

[功效]大補元氣、復脈固脫、補脾益肺、生津、安神等。

[炮制品]生曬參、糖參、紅參和凍干參（活性參）等。

人參

[成分]皂苷、多糖、聚炔醇、揮發(fā)油、蛋白質、多肽、氨基酸、有機酸、維生素、微量元素等，其中人參皂苷為主要有效成分，它具有人參的主要生理活性。1．結構分類

人參：根中總皂苷的含量約5％

根須中人參皂苷的含量比主根高

含等30多種人參皂苷Ro、Ral、Ra2、Rbl、Rb2、

Rb3、

Rc、Rd、Re、Rf、

Rgl、

Rg2、Rg3、Rhl及Rh2、Rh3等。皂苷元的結構可分為A、B、C三種類型

人參

(1)人參二醇型－A型（達瑪烷型四環(huán)三萜

皂苷）

R1R220(S)-原人參二醇HH人參皂苷Ra1glc(2→1)glcglc(6→1)ara(p)(4→1)xyl人參皂苷Ra2glc(2→1)glcglc(6→1)ara(f)(4→1)xyl人參皂苷Rb1glc(2→1)glcglc(6→1)glc人參皂苷Rb2glc(2→1)glcglc(6→1)ara(p)人參皂苷Rcglc(2→1)glcglc(6→1)ara(f)人參皂苷Rdglc(2→1)glcglc人參皂苷Rg3glc(2→1)glcH人參皂苷Rh2glcH(2)人參三醇型－B型（達瑪烷型四環(huán)三萜皂苷）

R1R220(S)-原人參三醇HH人參皂苷Reglc(2→1)rhaglc人參皂苷Rfglc(2→1)glcH人參皂苷Rg1glcglc人參皂苷Rg2glc(2→1)glcglc人參皂苷Rh1glcH(3)齊墩果酸型－C型（齊墩果烷型五環(huán)三萜皂苷）

人參皂苷RoR=glcA(2→1)glc(4)酰基取代的皂苷

A型和B型皂苷生理活性差異顯著

A型皂苷則具有抗溶血作用

B型皂苷有溶血作用

人參總皂苷沒有表現(xiàn)出溶血的現(xiàn)象。

Rg1有輕度中樞神經興奮作用及抗疲勞作用。

Rb1則有中樞神經抑制作用和安定作用。

Rb1有增強核糖核酸聚合酶的活性。

Rc則有抑制核糖核酸聚合酶的活性。

2．水解反應：酸水解不能得到真正皂苷元，需用溫和的水解方法如酶水解或Smiths降解法等。3．人參皂苷的提取分離*4.測定藥材：高效液相檢測波長：203nm

對照品：Rg2Re

制劑：多用薄層色譜：10%硫酸顯色后薄層檢測

人參根粗粉

甲醇提取甲醇提取液

回收甲醇，加水，以水飽和正丁醇萃取

正丁醇提取液水液

減壓回收正丁醇人參總皂苷

硅膠柱色譜溶劑系統(tǒng)A

組分ⅠⅡⅢⅣⅤ

硅膠柱色譜硅膠柱色譜硅膠柱色譜硅膠柱色譜硅膠柱色譜溶劑系統(tǒng)A溶劑系統(tǒng)B溶劑系統(tǒng)B溶劑系統(tǒng)C溶劑系統(tǒng)CRoRb1Rb2RcRdReRfRg1Rg2

溶劑系統(tǒng)A：氯仿-甲醇-水(65:35:10下層)

溶劑系統(tǒng)B：正丁醇-乙酸乙酯-水(4:1:2上層)

溶劑系統(tǒng)C：氯仿-甲醇-乙酸乙酯-水(2：2：4：1下層)

人參總皂苷含7％HCl的50％的乙醇溶液，加熱回流水解4小時，放冷水解液加水稀釋至原體積的1.5倍，除去乙醇后用氯仿萃取，回收氯仿

總皂苷元

硅膠柱色譜，苯-乙酸乙酯（8：2）齊墩果酸人參二醇人參三醇甘草

[來源]甘草為豆科植物甘草(Glycyrrhizauralensis)、脹果甘草(G.inflata)或光果甘草(G.glabra)的干燥根及根莖。

[功效]補脾益氣、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛、調和諸藥。

1．化學成分

主要成分為甘草皂苷（又稱甘草酸、甘草甜素），含量據(jù)品種和產地而變，一般在5%-11%。甘草皂苷(冰乙酸中結晶)為無色柱狀結晶

mp約220℃(分解)，[α]+46.20

易溶于熱稀乙醇，幾乎不溶于無水乙醇或乙醚其水溶液有微弱的起泡性及溶血性植物中的存在形式鉀鹽或鈣鹽

其鹽易溶于水，在水液中加稀酸可析出游離甘草酸甘草酸極易溶于稀氨水.故可作為其的提制方法

其它成分：還有烏拉爾甘草皂苷A、B和甘草皂苷A3、B2、C2、D3、E2、F3、G2、H2、J2、K2及多種游離的三萜類化合物。此外，尚含較多黃酮類化合物，目前已分離出70余種，其中游離者50多個，黃酮苷類近20余種。

R甘草次酸H甘草酸-D-gluA-2--D-gluA

甘草皂苷與5％稀H2S04在加壓下，110℃～120℃進行水解，生成2分子葡萄糖醛酸及1分子的甘草次酸。甘草次酸是甘草酸的皂苷元。2提取和分離

（1）甘草酸銨鹽的制備

甘草粗粉

稀氨水潤濕水滲漉滲漉液

稀H2SO4酸化，析出沉淀，過濾

濾液沉淀

再溶于少量稀氨水蒸發(fā)干燥甘草酸銨鹽2．甘草酸單鉀鹽的制備

甘草酸不易精制，需先制成鉀鹽才能進一步精制甘草粗粉

加水煮沸，提取3次

殘渣水提取液

濃縮至原體積的1/3

濃縮液

攪拌下加濃H2SO4酸化至不再析出沉淀放置

酸水液棕色沉淀

水洗，60℃以下干燥，磨粉甘草酸粗品

甘草酸粗品

丙酮回流3次，濾去不溶雜質丙酮不溶物丙酮液

放冷攪拌下加20％KOH乙醇液至弱堿性放置，析晶，過濾

丙酮液結晶(甘草酸三鉀鹽)

室溫下干燥后磨粉甘草酸三鉀鹽粉末

加冰HAc熱溶放冷，析晶，過濾

冰HAc溶液甘草酸單鉀鹽

75％乙醇重結晶甘草酸單鉀鹽(純品)3．甘草次酸的提取

甘草酸單鉀鹽

加5％H2SO4，加熱10小時，抽濾，水洗到中性，干燥

濾液白色甘草次酸粗品

溶于熱氯仿中，趁熱過濾

氯仿不溶物氯仿液

放冷通過Al2O3柱，用氯仿洗脫甘草次酸粗品

乙醇重結晶甘草次酸結晶柴胡

[來源]傘形科植物柴胡(Bupleurumchinense)或狹葉柴胡

(B.scorzonerifolium)的干燥根。[功效]和解表里、疏肝、升陽1．化學成分迄今已從柴胡屬植物中分離出近100個三萜皂苷，均為齊墩果烷型柴胡總皂苷含量在1.6％～3.8％柴胡總皂苷具有鎮(zhèn)靜、止痛、解熱、鎮(zhèn)咳和抗炎等作用，是柴胡的主要有效成分其中柴胡皂苷a和d等是主要成分

R1R2R3

柴胡皂苷元FOHβ-OHH

柴胡皂苷aOHβ-OH–fuc(3→1)glc

柴胡皂苷元GOHα-OHH

柴胡皂苷dOHα-OH–fuc(3→1)glc

柴胡皂苷元EHβ-OHH

柴胡皂苷cHβ-OH–glc(6→1)glc(4→1)rha

柴胡皂苷eHβ-OH–fuc(3→1)glc柴胡皂苷uR=glc柴胡皂苷vR=H柴胡總皂苷的提取

柴胡細粉

5％吡啶的甲醇提取(吡啶可中和植物中酸，防止皂苷次生化)

甲醇提取液

回收甲醇濃縮物

加水水飽和的正丁醇回收正丁醇加乙醚使沉淀