醫(yī)院制劑質(zhì)量檢驗(yàn)

藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程一、醫(yī)院制劑化學(xué)檢驗(yàn)操作規(guī)程為保證檢驗(yàn)的質(zhì)量，依據(jù)所制定的物料、中間品和成品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，特編寫檢驗(yàn)操作規(guī)程。中間品檢驗(yàn)，按性狀、鑒別、檢查和含量測(cè)定進(jìn)展檢驗(yàn)。成品檢驗(yàn)做全項(xiàng)檢測(cè)或重點(diǎn)工程檢測(cè)[性狀、鑒別、含量測(cè)定、檢查〔包括微生物限度或無(wú)菌檢查。原輔料應(yīng)依據(jù)制劑質(zhì)量要求，參照相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)展檢驗(yàn)。藥檢室收到送檢單，打印相應(yīng)檢品的原始記錄單，針對(duì)要檢驗(yàn)的工程內(nèi)容，預(yù)備檢驗(yàn)用試劑、器皿和所用的儀器〔開機(jī)預(yù)熱等。藥檢室收到檢品，先檢查性狀，然后進(jìn)展鑒別、一般檢查、含量測(cè)定等，化學(xué)檢驗(yàn)合格的成品，分裝后進(jìn)展微生物限度檢查或無(wú)菌檢查。含量測(cè)定時(shí)周密稱量供試品：①稱量取樣：用島津AUY220分析天平周密稱定，記錄稱量值，并填寫設(shè)備使用登記，簽字。②容量取樣：用相應(yīng)體積的移液管，正確吸取供試液。然后依據(jù)制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)含量測(cè)定項(xiàng)下內(nèi)容進(jìn)展操作。讀取測(cè)定值，記錄數(shù)值，推斷是否在含量限量范圍內(nèi)，并進(jìn)展計(jì)算，記錄計(jì)算結(jié)果〔。含量測(cè)定結(jié)果符合要求的中間品或半成品，馬上通知制劑室，以便連續(xù)生產(chǎn)；含量測(cè)全部檢測(cè)合格后，填寫并出具檢驗(yàn)合格報(bào)告。檢查結(jié)果不合格的成品，按不合格制劑處理程序處理。檢驗(yàn)報(bào)告留意事項(xiàng)：必需有檢驗(yàn)人員、復(fù)核人員簽名或蓋章，必要時(shí)由檢驗(yàn)單位蓋章?！惨弧吃加涗洠和暾⒄鎸?shí)、具體、清楚1、供試品狀況〔名稱、批號(hào)、規(guī)格、數(shù)量、來(lái)源、外觀、包裝等〕2、日期〔取樣、檢驗(yàn)、報(bào)告等〕3、檢驗(yàn)狀況〔依據(jù)、工程、操作步驟、數(shù)據(jù)、計(jì)算結(jié)果、結(jié)論等〕4、假設(shè)需涂改，只可劃線，重寫后要簽名5、記錄完成后，需復(fù)核。復(fù)核后的記錄，屬內(nèi)容和計(jì)算錯(cuò)誤的，由復(fù)核人負(fù)責(zé)；屬檢驗(yàn)操作錯(cuò)誤的，由檢驗(yàn)人負(fù)責(zé)。〔二〕檢驗(yàn)報(bào)告書1、要求：完整、簡(jiǎn)潔、結(jié)論明確。2、除無(wú)操作步驟外其它內(nèi)容同原始記錄二、無(wú)菌檢查操作規(guī)程查的規(guī)定。檢驗(yàn)依據(jù)《中國(guó)藥典2023年版〕無(wú)菌檢查法〔附錄XI。環(huán)境儀器、設(shè)備10000100級(jí)的水平層流超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)展操作嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止外源性污染。儀器、設(shè)備電熱枯燥箱、恒溫培育箱、霉菌培育箱、壓力蒸汽滅菌器、集菌儀〔器、電子天平、PH計(jì)、冰箱、恒溫水浴鍋、酒精燈、三角燒瓶，接種環(huán)、無(wú)菌棉簽、鑷子，試管架，大試管假設(shè)干等。無(wú)菌檢驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)同時(shí)檢查超凈工作臺(tái)單向流空氣中的菌落數(shù)：每次操作時(shí)在層流空330min30～3548小時(shí)，菌落數(shù)1CFU/平板。無(wú)菌檢驗(yàn)前的預(yù)備器具滅菌、消毒滅菌：試驗(yàn)過(guò)程中與供試品接觸的全部器具必需承受牢靠方法滅菌?？山?jīng)電熱枯燥箱1602小時(shí)，或置壓力蒸汽滅菌器內(nèi)12130分鐘后使用〔依據(jù)滅菌效果驗(yàn)證打算滅菌參數(shù)2周即用畢，否則應(yīng)重滅菌。消毒：凡檢驗(yàn)中使用的器材無(wú)法滅菌處理的，使用前必需經(jīng)消毒處理。如無(wú)菌檢驗(yàn)室的試管架、電子天平、工作臺(tái)面、工作人員的手、橡膠吸頭等?？沙惺芟緞┙莼虿潦谩Ｏ緞?yīng)每月更換，以防止產(chǎn)生耐藥菌株。標(biāo)識(shí)：器具的滅菌、消毒后必需做好標(biāo)識(shí)，標(biāo)明滅菌、消毒時(shí)間和使用有效期。人員、物料進(jìn)入無(wú)菌檢驗(yàn)室無(wú)菌操作環(huán)節(jié)接種室應(yīng)保持清潔，用煤粉酚皂液擦洗臺(tái)面及墻壁，定期用乳酸或甲醛熏蒸。每次使用前，均應(yīng)用紫外燈滅菌。定期對(duì)接種室作無(wú)菌程度的檢查。進(jìn)入接種室前，應(yīng)先做好個(gè)人衛(wèi)生工作，在緩沖間內(nèi)要更換工作鞋帽、工作衣、戴口罩。工作衣、工作鞋、口罩只準(zhǔn)在接種室內(nèi)使用。不準(zhǔn)穿到其它地方去，并要定期更換、消毒。接種的試管、三角并瓶等應(yīng)做好標(biāo)記，注明培育基、菌種的名稱、日期。移入接種70%酒精擦試干凈。接種前，雙手用70%酒精或潔爾消毒，操作過(guò)程不離開酒精燈火焰；棉塞不亂放；接種工具使用前后均需火焰滅菌。培育箱應(yīng)常常清潔消毒。6.接種直接接種法供試品預(yù)備供試品如為注射液、供角膜穿通傷及手術(shù)用的滴眼劑或滅菌溶液，按表1或表2無(wú)菌粉末原料，按規(guī)定量取供試品，參加無(wú)菌水或0.9％無(wú)菌氯化鈉溶液，或該藥品項(xiàng)下規(guī)定的溶劑用量制成肯定濃度的供試品溶液。供試品如為外科敷料，取供試品4個(gè)包裝，以無(wú)100mg1cm×3cm11511如為滅菌醫(yī)用器具，依樣品大小、外形的不同，取供試品11個(gè)，接種于足以浸沒供試品的適量培育基中?；蛴?.9％無(wú)菌氯化鈉溶液各40ml，分別沖洗內(nèi)壁〔輸血、輸液袋〕收集各沖洗液，混合，按薄膜過(guò)濾法檢查。供試品如為青霉素類藥品，按規(guī)定量取供試品，分別參加足夠使青霉素滅活的無(wú)菌青霉素酶溶液適量，搖勻，混合。亦可按薄膜過(guò)濾法檢查。供試品如為放射性藥品，取供試品1〔支〕，接種于裝量為7.5ml0.2ml。操作取上述備妥的供試品，以無(wú)菌操作將該供試品分別接種于需氣菌、厭氣菌培育基611ml5輕輕搖動(dòng)，使供試品與培育基混合。需氣菌、厭氣菌培育基管置30～35℃、真菌培育基管20～25℃7247天后，不能從外觀上推斷有無(wú)23213供試品，按該藥品項(xiàng)下規(guī)定的方法處理后，參加0.9％無(wú)菌氯化鈉溶液或其他適宜的溶劑至100ml0.45μm0.9％無(wú)菌氯化培育基用陽(yáng)性比照管用培育基分別加至薄膜過(guò)濾器內(nèi)〔封閉式過(guò)濾器〕，或取出濾膜分成3參加相應(yīng)比照菌液1ml(抗細(xì)菌藥物，以金黃色葡萄球菌為比照菌；抗厭氧菌藥物，以生孢梭菌為比照菌；抗真菌藥物，以白色念珠菌為比照菌)。陽(yáng)性比照管細(xì)菌應(yīng)在培育24～48小24～72結(jié)果推斷當(dāng)陽(yáng)性比照管顯渾濁并確有細(xì)菌生長(zhǎng)，陰性比照管呈陰性時(shí)，可依據(jù)觀看所得的結(jié)果判定：12倍量供試品，分別依法復(fù)試，除陽(yáng)性比照管外，其他各管均不得有菌生長(zhǎng)，否則應(yīng)判為供試品不合格。三、微生物限度檢查操作規(guī)程10000100級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)展。檢驗(yàn)全過(guò)程必需嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，〔區(qū)懸浮粒子、外表活性劑、中和劑或滅活劑，應(yīng)證明其有效性及對(duì)微生物無(wú)毒性。除另有規(guī)定外，本檢查法中細(xì)菌及掌握菌培育溫度為30℃～35℃；霉菌、酵母菌培育23℃～281g、1ml、10g、10ml、10c㎡為單位報(bào)告，特別品種可以最小包裝單位報(bào)告。檢驗(yàn)量檢驗(yàn)量即一次試驗(yàn)所用的供試品量〔g、ml或c〕。除另有規(guī)定外，一般供試品的檢10g或10ml100c20g或20ml〔10g用于陽(yáng)性比照試驗(yàn)244片。一般應(yīng)隨機(jī)抽取不少于檢驗(yàn)用量〔兩個(gè)以上最小包裝單位〕的3倍量供試品。供試液的制備451小時(shí)。除另有規(guī)定外，常用的供試液制備方法如下。液體供試品10mlpH7.0100ml1∶10的供試液。油劑可參加適量的無(wú)菌聚山梨酯80使供試品分散均勻。水溶性液體制劑也可用混合的供試品原液作為供試液。固體、半固體或黏稠性供試品10g，加pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，用勻漿儀或其他適宜的方法，1∶10的供試液。必要時(shí)加適量的無(wú)菌聚山梨酯80，并置水浴中適當(dāng)加溫使供試品分散均勻。需用特別供試液制備方法的供試品(1)非水溶性供試品15g〔5ml〕，加至含溶化的〔溫度不超過(guò)45℃〕5g80、3g單硬脂酸甘油酯、10g聚山梨酯80無(wú)菌混合物的燒杯中，用無(wú)菌玻棒攪拌成團(tuán)后，漸漸參加45℃的pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，邊加邊攪拌，使供試品充分乳化，作為1∶20的供試液。2取供試品10g20ml無(wú)菌十四烷酸異丙酯和無(wú)菌玻璃珠的適宜容器中，必要時(shí)可增加十四烷酸異丙酯的用量，充分振搖，使供試品溶解。然后參加45℃的pH7.0100ml5～10分鐘，萃取，靜置使油水明顯分層，取其水1∶10的供試液。膜劑供試品100c100ml的pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液〔必要時(shí)可增加稀釋液〕，1∶10的供試液。腸溶及結(jié)腸溶制劑供試品10g，加pH6.8無(wú)菌磷酸鹽緩沖液〔用于腸溶制劑〕或pH7.6無(wú)菌磷酸鹽緩沖液〔用于結(jié)腸溶制劑〕至100ml45℃水浴中，振搖，使溶解，作為1∶10的供試液。氣霧劑、噴霧劑供試品取規(guī)定量供試品，置冰凍室冷凍約1小時(shí)，取出，快速消毒供試品開啟部位，用無(wú)菌器吸出全部藥液，加至適量的pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液〔假設(shè)含非水溶性成分，加適80〕10g10ml1∶10的供試液。貼膏劑供試品〔如無(wú)菌紗布〔80或卵磷脂30分鐘，制成供試液。貼膏劑也可以其他適宜的方法制備成供試液。具抑菌活性的供試品檢查。常用的方法如下。①培育基稀釋法取規(guī)定量的供試液，至較大量的培育基中，使單位體積內(nèi)的供試品含量削減，至不含抑菌作用。測(cè)定細(xì)菌、霉菌及酵母菌的菌數(shù)時(shí)，取同稀釋級(jí)的供試液2ml，1ml1ml供試液所注的平皿中生長(zhǎng)的菌數(shù)之和即為1ml1ml供試液的平均菌落數(shù)，按平皿法計(jì)數(shù)規(guī)章報(bào)告菌數(shù)；掌握菌檢查時(shí)，可加大增菌培育基的用量。②離心沉淀法取肯定量的供試液，500轉(zhuǎn)/3分鐘，取全部上清液混合，用于細(xì)菌檢查。③薄膜過(guò)濾法見細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)項(xiàng)下的“薄膜過(guò)濾法”。④中和法凡含汞、砷或防腐劑等具有抑菌作用的供試品，可用適宜的中和劑或滅活劑消退其抑菌成分。中和劑或滅活劑可加在所用的稀釋液或培育基中。試驗(yàn)用菌種檢查。菌種試驗(yàn)用菌株的傳代次數(shù)不得超過(guò)5代〔從菌種保存中心獲得的冷凍枯燥菌種為0代〕。應(yīng)承受適宜的菌種保藏技術(shù)進(jìn)展保存，以保證試驗(yàn)菌株的生物學(xué)特性。大腸埃希菌〔Escherichiacoli〕〔CMCC〔B〕44102〕金黃色葡萄球菌〔Staphylococcusaureus〕〔CMCC〔B〕26003〕枯草芽孢桿菌〔Bacillussubtilis〕〔CMCC〔B〕63501〕白色念珠菌〔Candidaalbicans〕〔CMCC〔F〕98001〕黑曲霉〔Aspergillusniger〕〔CMCC〔F〕98003〕菌液制備養(yǎng)瓊脂培育基中，培育18～24小時(shí)；接種白色念珠菌的穎培育物至改進(jìn)馬丁培育基或改進(jìn)24～480.91ml含50～100cfu的菌懸液。接種黑曲霉的穎培育物至改進(jìn)馬丁瓊脂斜面培育基中，培育5～7天，參加3～5ml0.05%〔v/v〕聚山梨酯800.9%無(wú)菌氯化鈉溶液，將孢子洗0.05%〔v/v〕聚山梨酯80的0.9%1ml50～100cfu22～824小時(shí)內(nèi)使用。黑曲霉孢子懸液可保存在2～8℃，在驗(yàn)50～100cfu，分別注入無(wú)菌平皿中，馬上傾注養(yǎng)分瓊脂培育基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，30～3548小時(shí)，計(jì)數(shù)；取白色念珠菌、黑曲霉各50～100cfu，分別注入無(wú)菌平皿中，馬上傾注玫瑰紅鈉瓊脂培育基，每株試驗(yàn)菌平行制備223～287250～100cfu，注入無(wú)菌平皿中，馬上傾注酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培育基，平行制備2個(gè)平皿，混勻，凝固，置23～2872小時(shí)，計(jì)數(shù)。同時(shí)，用相應(yīng)的比照培育基替代被檢培育基進(jìn)展上述試驗(yàn)。結(jié)果判定被檢培育基上的菌落平均數(shù)與比照培育基上的菌落平均數(shù)的比值大于70%，且菌落形態(tài)3次獨(dú)立的平行試驗(yàn)，并分別計(jì)算各試驗(yàn)菌每次試驗(yàn)的回收率。1ml50～100cfu試2個(gè)平皿，按平皿法測(cè)定其菌數(shù)。薄膜過(guò)濾法計(jì)數(shù)時(shí)，取規(guī)定量試驗(yàn)可能用的最低稀釋級(jí)供試液，過(guò)濾，沖洗，在最終50～100cfu試驗(yàn)菌，過(guò)濾，按薄膜過(guò)濾法測(cè)定其菌數(shù)。菌液組測(cè)定所加的試驗(yàn)菌數(shù)。供試品比照組取規(guī)定量供試液，按菌落計(jì)數(shù)方法測(cè)定供試品本底菌數(shù)。稀釋劑比照組假設(shè)供試液制備需要分散、乳化、中和、離心或薄膜過(guò)濾等特別處理時(shí)，應(yīng)增加稀釋劑比照組，以考察供試液制備過(guò)程中微生物受影響的程度應(yīng)的稀釋液替代供試品，參加試驗(yàn)菌，使最終菌濃度為每1ml供試液含50～100cfu，按試3次獨(dú)立的平行試驗(yàn)中，〔稀釋劑比照組的平均菌落數(shù)占菌液組的平均菌落數(shù)的百分率應(yīng)均不低于70%。假設(shè)試驗(yàn)組的菌回收率〔試驗(yàn)組的平均菌落數(shù)減去供試品比照組的平均菌落數(shù)的值占菌液組的平均菌落數(shù)的百分率〕均不低于70%，照該供試液制備方法和計(jì)數(shù)法測(cè)定供試品的細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)；假設(shè)任一次試驗(yàn)中試驗(yàn)組的菌回收率低于70%，應(yīng)承受培育基性，并重進(jìn)展方法驗(yàn)證。表1常見干擾物的中和劑或滅活方法干擾物可選用的中和劑或滅活方法戊二醛亞硫酸氫納酚類、乙醇、吸附物稀釋法醛類稀釋法、甘氨酸、硫代硫酸鹽季銨類化合物〔QACs〕二胺四乙酸〔EDTA〕假設(shè)沒有適宜的方法消退供試品中的抑菌作用驗(yàn)。驗(yàn)證試驗(yàn)也可與供試品的細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)同時(shí)進(jìn)展。供試品檢查計(jì)數(shù)方法包括平皿法和薄膜過(guò)濾法。檢查時(shí)，按已驗(yàn)證的計(jì)數(shù)方法進(jìn)展供試品的細(xì)菌、大腸埃希菌作為驗(yàn)證菌株。驗(yàn)證試驗(yàn)按供試液的制備和掌握菌檢查法的規(guī)定及以下要求進(jìn)驗(yàn)證方法10～100cfu試品的抑菌活性，并重進(jìn)展方法驗(yàn)證。驗(yàn)證試驗(yàn)也可與供試品的掌握菌檢查同時(shí)進(jìn)展。供試品檢查供試品的掌握菌檢查應(yīng)按已驗(yàn)證的方法進(jìn)展方法的驗(yàn)證。陽(yáng)性比照試驗(yàn)供試品進(jìn)展掌握菌檢查時(shí)，應(yīng)做陽(yáng)性比照試驗(yàn)。陽(yáng)性比照試驗(yàn)的加菌量為10～100cfu，方法同供試品的掌握菌檢查。陽(yáng)性比照試驗(yàn)應(yīng)檢出相應(yīng)的掌握菌。陰性比照試驗(yàn)取稀釋液10ml照相應(yīng)掌握菌檢查法檢查，作為陰性比照。陰性比照應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。四、純化水微生物限度檢查方法驗(yàn)證方一、培育基基、改進(jìn)馬丁培育基、4-甲基傘形酮葡糖苷酸培育基、曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培育基二、菌種金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)[CMCC(B)26003]枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)[CMCC(B)63501]大腸埃希菌〔Escherichiacoli〕[CMCC(B)44102]白色念珠菌(Candidaalbicans)[CMCC(F)98001]黑曲霉(Aspergillusniger)[CMCC(F)98003]脂培育基中，置30～35℃培育18～24小時(shí)；接種白色念珠菌的穎培育物至改進(jìn)馬丁培育23～2824～480.9%無(wú)菌氯1ml50～100cfu23～28℃5～73～5ml0.9%無(wú)菌氯化鈉溶液，將孢子洗〔用管口帶有薄的無(wú)菌棉花或紗布能過(guò)濾菌絲的無(wú)菌毛細(xì)吸管至無(wú)0.91ml50～100cfu2、菌液的計(jì)數(shù)①、分別取上述金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌10-5～10-71ml，4520ml，每株試驗(yàn)菌各平行測(cè)定兩平皿，30～35℃培育48小時(shí)，計(jì)數(shù)，應(yīng)約為50～100cfu/ml?！卜謩e取上述金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌10-5～10-71ml4520ml，每株試驗(yàn)菌各平行測(cè)定兩平皿，，30～35℃培育4810～100cfu/ml，作掌握菌檢查方法驗(yàn)證時(shí)使用。〕②、分別取上述白色念珠菌10-5～10-610-51ml，參加培育皿內(nèi)，傾注約4520ml，每株試驗(yàn)菌各平行測(cè)定兩平皿，23～28℃7250～100cfu/ml。三、菌液的制備與計(jì)數(shù)1、菌液的制備：四、細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證驗(yàn)證方法：驗(yàn)證試驗(yàn)至少應(yīng)進(jìn)展3次獨(dú)立的平行試驗(yàn)，并分別計(jì)算各試驗(yàn)菌每次試驗(yàn)的菌回收率。〔薄膜過(guò)濾法〕Ⅰ、試驗(yàn)組：分別取純化水1ml100ml無(wú)菌純化水中，再分別參加上述的金黃色葡〔50～100cfu/ml〕各1ml，用開放式薄膜過(guò)濾器過(guò)濾，濾干后取出濾膜，菌面朝上貼于制備好的瓊脂培育基上，每株試30～354823～28℃培育72小時(shí)，計(jì)數(shù)。Ⅱ、菌液組：分別取上述的金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、白色念珠菌、黑曲霉菌菌液〔50～100cfu/ml〕1ml，加至100ml器過(guò)濾，濾干后取出濾膜，菌面朝上貼于制備好的瓊脂