無菌檢驗操作規(guī)程

醫(yī)療器械產(chǎn)品無菌檢驗操作規(guī)程目的通過無菌檢驗，確保滅菌后產(chǎn)品能夠到達無菌的要求。適用范圍適用于滅菌后醫(yī)療器械產(chǎn)品的無菌檢驗。檢驗依據(jù)〔2023年版〕GB14233.2-2023醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗方法其次局部：生物試驗方法GB15980-1995一次性使用醫(yī)療用品衛(wèi)生標準儀器、設備菌儀〔器、電子天平、PH計、冰箱、恒溫水浴鍋、酒精燈、三角燒瓶，接種環(huán)、無菌棉簽、鑷子，試管架，大試管假設干等。無菌檢驗室的環(huán)境要求無菌檢驗應在環(huán)境干凈度10000級下的局部百級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進展。緩沖區(qū)與外界環(huán)境、無菌檢驗室與緩沖區(qū)之間空氣應保持正壓，陽性比照室與緩沖區(qū)之間空氣應保持負壓。無菌檢驗室與室外大氣之間靜壓差應大于10Pa。無18～26℃，相對濕度：45～65%?！矃^(qū)〕懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現(xiàn)行國家標準進展懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的監(jiān)測。每年至少檢測一次。330min30～35℃培育1CFU/平板。無菌檢驗前的預備器具滅菌、消毒滅菌：試驗過程中與供試品接觸的全部器具必需承受牢靠方法滅菌?？山?jīng)160212130分鐘后使用〔依據(jù)滅菌效果驗證打算滅菌參數(shù)。全部的滅菌物品不應超過2周即用畢，否則應重滅菌。消毒劑浸泡或擦拭。消毒劑應每月更換，以防止產(chǎn)生耐藥菌株。效期。人員、物料進入無菌檢驗室開啟紫外線燈或臭氧發(fā)生器進展空間滅菌處理，消毒時間不得少于30min。物料進入無菌檢驗室流程脫包：進入無菌檢驗室的物品假設有雙重包裝的，需將外包裝在傳遞窗/緩沖間撤除后，傳入試驗室。法進展消毒處理，以避開將外包裝污染的微生物帶入無菌檢驗室。期內(nèi)。符合要求的經(jīng)傳遞窗傳入無菌檢驗室。人員進入無菌檢驗室流程般區(qū)工作服。20秒，洗凈泡沫。等，要求褲子掖在上衣里，口罩掩住口鼻，帽子包裹全部頭發(fā)。手消毒：用消毒液浸泡雙手5毒液可用洗必泰、潔爾滅、碘伏、75%酒精等。人員進入：經(jīng)緩沖間進入無菌檢驗室。7無菌檢驗操作要求全過程必需嚴格執(zhí)行無菌操作，防止微生物污染。使用玻璃器皿應輕取輕放，避開破損，以防培育物集中。中的塵埃微粒。使用金屬接種器具時，用前、用后均需灼燒滅菌。在接種培育物時，動作應輕、準，防止培育物濺出，產(chǎn)生汽溶膠，造成污染。隨用隨時放入消毒液缸內(nèi)浸泡或消毒桶內(nèi)，或在檢驗完成后經(jīng)傳遞窗傳至一般區(qū)，12130分鐘。培育基制備需氣菌、厭氣菌培育基〔硫乙醇酸鹽流體培育基〕的制備所用試劑酸0.3ml〕5.0g2.5g0.11.0ml0.75g1000ml制備除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微溫溶解，調(diào)整pH為弱堿性，煮pH7.1±0.2。20分鐘〕快速冷卻，只限加熱一次，并應防止被污染。霉菌培育基〔改進馬丁培育基〕的制備所用試劑5.0g2.0g20.0g1.0g0.5g1000ml制備pH6.8，煮沸，加葡萄pH6.4±0.2。還可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培育基，依據(jù)使用說明書配制。121℃滅菌30分鐘。制備好的培育基應在2～25℃保存，在3周內(nèi)使用?！部膳c產(chǎn)品無菌檢驗同步進展。檢查時，每批培育基隨機取不少于5支〔瓶〕培育14天，應無菌生長。稀釋液、沖洗液的制備1.0g1000ml，微溫溶解，濾清，分裝后304℃保存?zhèn)溆谩?分裝后置入壓力121304℃保存?zhèn)溆?.56g7.23g、氯化1000ml。微溫溶解，濾清，分裝后置入壓力蒸汽滅菌121304℃保存?zhèn)溆?。浸提介質(zhì)：9g/L無菌氯化鈉溶液，可直接從有證單位選購大輸液。10比照菌液制備無菌檢驗所用的菌株傳代次數(shù)不得超過5代。30～18～24h0.9%69.0ml0.9%12130min備用。將已配好1:10的菌液；1.0ml1:100的菌液，同法1:106〔ml含菌量≤100CFU〕即可。承受平皿計數(shù)法測定活菌數(shù)。無菌檢驗培育溫度30～35℃培育。23～28℃培育。無菌檢驗12.1項下各項。量菌片，滅菌后對菌片進展無菌檢驗。菌片貯存滅菌前、后菌片應按菌片說明書規(guī)定條件保存。醇酸鹽流體培育基和未接種的改進馬丁培育基作為陰性比照。培育30～3548～72小時。30～357天。23～287天。菌、厭氣菌和霉菌生長的為合格。如產(chǎn)品注冊標準中明確產(chǎn)品應進展無菌檢驗，則執(zhí)行12.2.1～12.2.5。抽樣3～11個單位供試品。供試液預備試品不適宜直接投放，可按以下方法制備供試液，應使浸提介質(zhì)充分洗供給試品的2小時內(nèi)使用。依據(jù)供試品具體特性選擇以下方法：管類器具：按管內(nèi)外表積每10cm2流過管內(nèi)腔1ml浸提介質(zhì)，流量約為10ml/min，收集到無菌的容器內(nèi)。10cm21ml的比例，振搖數(shù)集上述沖洗液或浸提介質(zhì)于無菌容器中。接種〔集菌器膜過濾器。濾膜孔經(jīng)不大于0.45μｍ。濾器和濾膜使用前應承受適宜的方法滅菌，或直接承受無菌集菌器。120ml改進馬丁培育基，120ml硫乙醇酸鹽培育基〔其中一只做陽性比照，內(nèi)加金黃色葡萄1ml120ml通過集菌儀過濾〔50ml120ml，另一只加改進馬丁培育120ml分別作陰性比照。3等份，分別置50ml硫乙醇酸鹽流體培育基及改進馬丁培育基的容器中，其中兩份作檢驗，一份作陽性比照。〔包括輸液器、輸血器、注射器配套使用注射針。120mg1cm×3cm的供試品，接種于各管足以浸沒供試品的適量培育基中。b15ml以上硫乙醇酸鹽流體培育基及改進馬丁培育基的容器中。c、一次性使用的材料：拆散或切成小碎斷，接種于各管足以浸沒供試品的適量培育基中。供試品按規(guī)定量分別接種至各含硫乙醇酸鹽流體培育基及改進馬丁培育基的容器中，其中一份作陽性比照。每個容器中培育基的用量應符合：接種的供試品體積不得大于培育基體積的10%，或培育基的裝量足以浸沒供試品。每管培育基的最低用量——硫乙醇酸鹽流體培育基每管裝量不少于15ml，改進10ml.培育、觀看48～7214天。培育期間應逐日觀看并記錄是否有菌生長。如在參加供試品后、或在培育過程中，培育基消滅渾濁，培育14天后，不能從外觀上推斷有無微生物生產(chǎn)，可取該培育液適量轉(zhuǎn)種至同種穎培育基中或劃線接種于斜面培育基上，細菌培育2天，真菌培育3天，觀看是否再消滅渾濁或斜面有無菌生長；或取培育液涂片，染色，鏡檢，推斷是否有菌。結(jié)果推斷全部供試品管均澄清，或雖顯渾濁但經(jīng)確證無菌生長，判供試品符合規(guī)定。假設供試品管中任何1管顯渾濁并確證有菌生長判供試品不符合規(guī)定。以一次檢出為準，不得復試。當符合以下至少一個條件時，可判試驗結(jié)果無效