病原體在肥達(dá)實驗與外斐試驗、臨床應(yīng)用、檢測標(biāo)本培養(yǎng)及臨床意義

病原體在肥達(dá)實驗與外斐試驗、臨床應(yīng)用、檢測標(biāo)本培養(yǎng)及臨床意義肥達(dá)實驗1、病原體——傷寒桿菌（1）沙門菌屬，G-桿菌，有鞭毛；釋放內(nèi)毒素致?。?）三種抗原：菌體抗原“O”和鞭毛抗原“H”——抗原性較強(qiáng)，可刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體，有助于診斷表面抗原“Vi”——抗原性不強(qiáng)，但有助于發(fā)現(xiàn)帶菌者2、病原體——副傷寒桿菌3種病原體：副傷寒甲桿菌、副傷寒乙桿菌、副傷寒丙桿菌每種副傷寒桿菌均有“O”和“H”抗原3、肥達(dá)反應(yīng)

（1）傷寒桿菌凝集試驗，Widalreaction（WR）（2）傷寒、副傷寒診斷的參考（3）一種血清凝集反應(yīng)，用已知的傷寒桿菌O、H抗原和甲、乙、丙型副傷寒桿菌H抗原，測定患者血清中相應(yīng)抗體（4）“O”抗原為傷寒、副傷寒甲、乙桿菌的共同抗原，三者的鞭毛抗原（“H”、“A”、“B”）不同4、結(jié)果判定：“有病無病先看O，是什么菌看H”（1）感染后1周左右出現(xiàn)抗體，3～4周陽性率可達(dá)70-80%（2）陽性結(jié)果：“O”抗體≥1:80，或有4倍增高者更有意義“H”或其他鞭毛抗體≥1:160，或有4倍增高者更有意義“O”抗體(IgM)-出現(xiàn)早，消失快；“H”抗體(IgG)-出現(xiàn)遲，維持時間長（3）臨床意義：（4）其他：假陰性：早期應(yīng)用抗生素；營養(yǎng)不良者；抗體免疫功能缺陷者；免疫功能尚未完善的幼兒假陽性：其他疾病，如血吸蟲，敗血癥，結(jié)核，傳染性肝炎，結(jié)締組織病，腫瘤，潰瘍性結(jié)腸炎等

5、傷寒確診不能只靠肥達(dá)（1）臨床：發(fā)熱+體征+血RT/肥達(dá)傷寒臨床六大特征：持續(xù)發(fā)熱、相對緩脈、全身中毒癥狀、玫瑰疹、肝脾腫大、白細(xì)胞減少（2）確診：發(fā)熱+特異性抗體/病原學(xué)，病原學(xué)為診斷金標(biāo)準(zhǔn)外斐試驗1、病原體——立克次氏體大小介于細(xì)菌與病毒之間，呈多形球桿狀，Gram染色陰性，Giemsa染色紫色，寄生于真核細(xì)胞內(nèi)，生物特性接近細(xì)菌，胞壁的脂多糖層有內(nèi)毒素樣作用2、病原體——變形桿菌（1）G-桿菌，無莢膜，有鞭毛（2）三個菌株：X19，X2，XK（3）三種抗原：菌體抗原“O”，鞭毛抗原“H”，抗原“K”3、外斐反應(yīng)（1）變形桿菌O抗原凝集反應(yīng)，Weil-Felixreaction（WFR）（2）變形桿菌用與立克次體有共同菌體抗原，進(jìn)行非特異性凝集反應(yīng)，檢測病人血清中有無立克次體抗體4、結(jié)果判定（1）感染后5～12天出現(xiàn)抗體，至數(shù)月后基本消失（2）陽性結(jié)果：普氏立克次體：OX19凝集價≥1:160或病程中上升4倍以上，陽性率70-80%莫氏立克次體：OX19凝集價低滴度升高，陽性率70-85%（進(jìn)一步診斷依賴于補體結(jié)合試驗和立克次體凝集試驗）恙蟲?。篛XK凝集價≥1:160或早晚期雙份血清效價上升4倍以上，最早第4天出現(xiàn)陽性，3-4周達(dá)峰5、臨床意義其他立克次體?。郝迳即壈唿c熱、立克次體痘、戰(zhàn)壕熱、Q熱：（—）北亞蜱媒立克次體病：OX19、OX2（+），OXK（—）6、其他假陽性：變形桿菌性泌尿系感染；傷寒；鉤端螺旋體病回歸熱；瘧疾；布氏桿菌??；嚴(yán)重肝病；妊娠（輕度升高）肥達(dá)試驗widaltest

1、正常效價。傷寒沙門菌O抗體<1:80，H抗體<1:160；副傷寒沙門菌H抗體<1:802、動態(tài)觀察。2份血清，第二次效價增長4倍以上有意義3、O、H抗體的診斷意義O-Ab-IgM（出現(xiàn)早，持續(xù)短，難重現(xiàn)）；H-Ab-IgG（出現(xiàn)晚，持續(xù)長，易重現(xiàn)）O高H高——很可能是腸熱癥；O不高H不高——很可能不是腸熱癥；O不高H高—預(yù)防接種或者非特異性免疫反應(yīng)；O高H不高——感染早期或與其他傷寒沙門菌O抗原有交叉反應(yīng)的其他沙門菌感染。肥達(dá)氏反應(yīng)是一種凝集反應(yīng)，1896年由法國醫(yī)師肥達(dá)（Widal）建立并用于臨床，故名。用已知的傷寒沙門菌鞭毛（H）、菌體（O）抗原和甲、乙、丙型副傷寒沙門菌H抗原，與待測血清作試管或微孔板凝集試驗，以測定血清中有無相應(yīng)抗體存在，用于輔助診斷傷寒和副傷寒。機(jī)體感染傷寒、副傷寒沙門菌后會產(chǎn)生相應(yīng)抗體，正常人因隱性感染或預(yù)防接種，血清中可含有一定量的抗體。一般當(dāng)H≥1∶160，O≥1∶80，副傷寒凝集價≥1∶80時，才有診斷意義。肥達(dá)反應(yīng)必須動態(tài)觀察，病程中應(yīng)每周復(fù)查一次，如病人H與O的凝集價均高于參考值或較原凝集價升高4倍以上，則患傷寒的可能性很大。若H凝集價高而O低于正常值，則可能是以往預(yù)防接種疫苗的結(jié)果或非特異性回憶反應(yīng)所致。肥達(dá)氏試驗受影響因素較多，存在一定比例假陰性和假陽性。故對結(jié)果的判斷要綜合分析，肥達(dá)試驗陰性，亦不能排除患傷寒或副傷寒的可能。肥達(dá)氏反應(yīng)主要是診斷傷寒桿菌的一種方法，其準(zhǔn)確性較低，假陽性略高，但其操作方便。替代方法較多：血培養(yǎng)，準(zhǔn)確性高，根據(jù)報導(dǎo)在病人發(fā)病7~10日可達(dá)90%的陽性率；酶聯(lián)免疫、熒光免疫；糞便標(biāo)本的培養(yǎng)；PCR檢測等。傷寒的實驗室診斷最經(jīng)典的方法是肥達(dá)反應(yīng)，已有100多年歷史,始終伴隨著爭議。以往由于條件所限，肥達(dá)反應(yīng)是疑似病例診斷為傷寒的唯一的實驗室手段。但肥達(dá)反應(yīng)存在諸多問題，在診斷上不敏感不特異，已表現(xiàn)出顯著的局限性，需要改用其他檢測方法以克服肥達(dá)反應(yīng)在檢測特異性和靈敏度、以及檢測時限上存在的問題。比如ELISA方法可以代替肥達(dá)反應(yīng)來監(jiān)測血清中抗原或抗體，是一種相對既靈敏又特異的診斷方法；還有其他一些商品化的IgM抗體檢測試劑盒，包括Tubextest、Typhidot/Typhidot-M、IgMDipstick等，其敏感性和特異性均優(yōu)于肥達(dá)反應(yīng)。分離培養(yǎng)法是最基本也是診斷傷寒病例的金標(biāo)準(zhǔn)。培養(yǎng)所用的標(biāo)本可有骨髓、血液、糞便和尿液。由于培養(yǎng)方法受標(biāo)本采集時機(jī)和抗生素應(yīng)用的影響，陽性率會大大降低，而且培養(yǎng)所需時間較長，因此該方法存在明顯不足，但可為預(yù)防控制，預(yù)測傷寒的流行趨勢，菌株的進(jìn)化關(guān)系等提供基礎(chǔ)資料。PCR檢測標(biāo)本中的傷寒沙門菌核酸，是最為敏感和特異的診斷方法。但PCR方法容易受污染影響，另外傷寒和甲型副傷寒沙門菌是胞內(nèi)寄生菌，抗生素的濫用加