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全血細胞分析WBC散點圖檢測辦法、檢測原理及常見常見異常散點圖全血細胞分析儀都帶有WBC散點圖,散點圖可以提供很多信息。WBC散點圖運用流式細胞計數(shù)法和其它生物粒子的物理和化學性質(zhì)進行檢測。血液標本經(jīng)吸取稀釋后,進行化學染色,血細胞在鞘流內(nèi)的試劑包裹下排成一行通過檢測小孔,并有半導體激光束照射到血細胞上。當血細胞經(jīng)過激光通路時,光束在每個血細胞的不同方向上產(chǎn)生光散射,通過檢測散射光,將光信號轉(zhuǎn)化為電脈沖,可以得到有關細胞體積大小和材質(zhì)的信息,進而描畫出二維的散點圖。

WBC散點圖怎么看當一束激光照射到血細胞顆粒上時,產(chǎn)生光散射,散射光的強度取決于諸如顆粒直徑和觀察角度等因素。儀器對前向散射光(FSC)進行檢測,提供有關血液細胞體積大小的信息;同時對側(cè)向散射光(SCC)進行檢測,提供細胞內(nèi)部(如細胞核、顆粒)的信息。當光照射到經(jīng)過熒光染色的血細胞等的熒光材料上時,就會產(chǎn)生比入射光波長更長的光。隨著染液濃度的增加,熒光強度也隨之增長。通過測量熒光強度,可以得到有關血細胞染色程度的信息。熒光向所有方向散射,本儀器檢測側(cè)向熒光(SFL)。

圖1.白細胞散點圖橫坐標:SSC軸,代表側(cè)向散射光的信號強度

縱坐標:SFL軸,代表側(cè)向熒光的信號強度

散點圖中,利用側(cè)向散射光SSC和熒光SFL將白細胞分成五類:中性粒細胞、單核細胞、淋巴細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞。

側(cè)向散射光SSC通常反映細胞內(nèi)部顆粒結(jié)構(gòu)的復雜程度。例如,嗜酸性粒細胞由于內(nèi)部顆粒特征明顯,其側(cè)向散射光(SSC)信號最強,落在散點圖的最右方。

熒光染料通常和細胞中的DNA/RNA核酸結(jié)合,所以側(cè)向熒光信號SFL通常反映核酸含量多少,反映細胞發(fā)育的成熟程度。占白細胞最大比例的粒細胞完整的生長要歷經(jīng)原粒細胞、早幼粒細胞、中幼粒細胞、晚幼粒細胞進而分化為成熟的桿狀核和分葉核粒細胞。在粒細胞的成熟過程中,其細胞中的核酸含量逐步減少。由于嗜堿性粒細胞的比例很小,而且通常和中性粒細胞混在一起,很難區(qū)分。通常采用另外一個專用的通道(WNR通道)進行檢測。所以五分類通道(WDF通道)通常提供白細胞的四種分類(中性、單核、淋巴、嗜酸)。

圖2.嗜堿性粒細胞散點圖

常見異常散點圖

疑似異常淋巴細胞增多(WDF通道)

在單核細胞散點圖(綠色)的上方出現(xiàn)異常均勻分布的呈長橢圓形或近似長方形的散點圖(圖中所圈位置),可能是由于病原體對淋巴細胞刺激下,核酸與染液結(jié)合加強,側(cè)向熒光(SFL)染色強度增加,側(cè)向熒光(SFL)加強,而出現(xiàn)在散點圖上方,需進行血涂片復檢。

圖3.疑似淋巴細胞增多(WDF通道)疑似有核紅細胞增多(WNR檢測通道)出現(xiàn)于嗜堿細胞散點圖(藍色)左上方,顆粒增多,區(qū)域擴大(圖中所圈位置),需進行血涂片復檢。

圖4.疑似有核紅細胞增多(WNR檢測通道)

疑似嗜堿粒細胞增多(WNR通道)

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