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文檔簡介
一、酶細胞化學技術(shù)通過酶的特異細胞化學反應來顯示酶在細胞內(nèi)的分布及酶活性強弱的一種技術(shù)。二、免疫細胞化學技術(shù)(Immunocytochemistry)利用抗原和抗體的結(jié)合具有高敏感性和特異性的特點,用已知的經(jīng)過標記的抗體檢測組織與細胞中相應抗原的方法。常用的標記方法:1)熒光標記:異硫氰酸熒光素(FITC)、羅丹明2)酶標記:辣根過氧化物酶(HRP)3)鐵蛋白標記:鐵蛋白是含鐵離子的蛋白質(zhì),在電鏡下鐵離子可顯黑色4)膠體金標記:即金的水溶液,具有一般溶液的特性,用它與抗體標記后,經(jīng)抗原抗體反應可定位抗原的存在。免疫鐵蛋白電鏡技術(shù)免疫膠體金電鏡技術(shù)
免疫熒光顯微鏡技術(shù)(Immunofluorescencemicroscopy)熒光素標記抗體的方法:直接法:熒光素直接和第一抗體相偶聯(lián)優(yōu)點:簡單方便,易于操作,省時省力缺點:敏感度不夠,特異性不強,標記抗體需自己制備間接法:熒光素先和第二抗體(抗第一抗體的抗體)偶聯(lián),再與第一抗體作用
優(yōu)點:敏感度高,特異性強,可購買不同的標記二抗缺點:操作比直接法復雜三、放射自顯影術(shù)(autoradiography)
放射性核素在蛻變過程中發(fā)出帶電粒子可使感光材料感光。利用這樣的特性,用放射性化合物脈沖標記活細胞,經(jīng)固定、切片后在暗處把感光乳膠覆蓋于切片上,在此期間,由于放射性同位素衰變使乳膠曝光,
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