第八章神經系統(tǒng)的組織再生

第八章

神經的發(fā)育與再生西北師范大學生命科學院神經科學是20世紀60年代末形成的一門邊緣科學。它融合了神經生理學、生物化學、神經解剖學、組織胚胎學、藥理學、精神病學，甚至信息科學來研究人和動物神經系統(tǒng)的結構和功能，其目的是揭示人腦的奧秘，防治神經和精神疾患，發(fā)展模擬人腦部分功能的神經計算機。在當代的生命科學中，腦科學的發(fā)展已令人矚目。曾有人預測，21世紀將是腦科學時代。這種預測并非無稽的臆斷。人類智慧對自然的征服．在20世紀已達到登使造極的地步，但對于做為產生智慧源泉的人腦的認識，還遠未完結。迄今為止，對于人腦產生的很多行為，還不能從機能學和形態(tài)學上加以全面解釋；對于人類智慧的集中表現——人的思想的產生過程和機制，也都還是“未解之迷”。因此，今后相當長的一個時期，人類對自身腦的研究始終是處于科學前沿的地位。腦科學研究進展的三大里程碑：1.神經元學說2.神經元興奮過程中的離子通道理論3.腦成像技術腦科學研究進展的十大進展：1.電生理學2.神經遞質與受體3.神經營養(yǎng)因子的發(fā)現4.信號轉導系統(tǒng)5.神經系統(tǒng)發(fā)育基因調控6.神經系統(tǒng)疾病基因的定位7.視覺生理學8.學習與記憶9.腦超微結構的研究10.神經網絡理論1.神經系統(tǒng)的組織發(fā)生

第一節(jié)神經胚的發(fā)育第二節(jié)神經管的形成和分化第三節(jié)神經嵴及其衍生物第四節(jié)外胚層板第五節(jié)在神經系統(tǒng)發(fā)育中的細胞調亡神經系統(tǒng)高度復雜的功能決定了其結構的復雜性和精確性。神經系統(tǒng)的發(fā)育經歷極其復雜的構筑過程。首先是神經細胞的發(fā)生和增殖；然后是神經細胞的遷移及其過程中神經細胞的決定和分化；最后神經系統(tǒng)功能的實現依賴于神經元之間和神經元與非神經元之間形成精密的連接。另外，神經系統(tǒng)也會受到外傷和疾病的損傷，這些涉及神經系統(tǒng)的修復和再生。右圖示哺乳動物胚胎中發(fā)育中神經系統(tǒng)的細胞對用報告基因標記的信號分子視黃酸起反應第一節(jié)神經胚的發(fā)育一.神經胚的發(fā)育二.神經誘導一.神經胚的發(fā)育神經胚形成:受精卵分裂經囊胚到原腸胚(見圖)；原腸形成的一個關鍵產物是由中胚層形成脊索；脊索誘導上方覆蓋的外胚層(50%細胞)增厚形成神經板；此后神經板兩側邊緣向上隆起形成神經褶，中間的凹陷為神經溝，最后神經褶在背部中央愈合形成中空的神經管(見圖)l（將來發(fā)育為腦和脊髓）；位于脊索上方的預定神經外胚層形成神經管的過程(見圖)

。神經胚：經歷上述變化的胚胎(見圖)

。二.神經誘導(一)神經誘導的普遍性(二)神經誘導的分子基礎(一一)神神經經誘誘導導的的普普遍遍性性初級級胚胚胎胎誘誘導導實實驗驗：Spemann和和Mangold用用含含深深色色素素的的Triturustaeniatus胚胚胎胎作作受受體體,用用無無色色素素的的Trituruscristatus胚胚胎胎作作供供體體,將將T.cristatus早早期期原原腸腸胚胚的的胚孔孔背背唇唇切切下下移移植植到到T.taeniatus原原腸腸胚胚腹腹部部預預定定形形成成表皮皮的的區(qū)區(qū)域域,結結果果供供體體的的背背唇唇并并不不形形成成表表皮皮,而而是是內內陷陷形成成次次級級胚胚孔孔,最最后后形形成成一一個個與與受受體體面面對對面面的的次級級胚胚胎胎(見見圖圖)。結論論:次級級胚胚胎胎的的脊脊索索中中胚胚層層由由無無色色素素的的供供體體細細胞胞組組成成,神經經管管是是由由深深色色素素的的受受體和受體二者細胞共同組成。實驗驗證證明明：：在在文文昌昌魚魚、、圓圓口口類類、、兩兩棲棲類類、、鳥鳥類類和和哺哺乳乳類類動動物物中中都都有有神神經經誘誘導導現現象象。。將原原腸腸頂頂脊脊索索中中胚胚層層由由前前向向后后不不同同部部位位移移植植到到早早期期原原腸腸胚胚的的囊囊胚胚腔腔中中,可可以以誘誘導導出出從從頭頭部部到到尾尾部部的的不不同同結結構構。。此此為為神神經經誘誘導導的的區(qū)區(qū)域域專專一一性性。。異異源源誘誘導導者者的的實實驗驗證證明明,豚豚鼠鼠脊脊髓髓只只誘誘導導中中胚胚層層結結構構,而而其其肝肝臟臟誘誘導導前前腦腦的的結結構構；；若若將將二二者者混混合合植植入入早早期期原原腸腸胚胚的的囊囊胚胚腔腔則則誘誘導導出出前前腦腦、、后后腦腦、、脊脊髓髓和和中中胚胚層層結結構構，，表表明明神神經經誘誘導導的的區(qū)區(qū)域域性性可可能能受受雙雙重重梯梯度度的的支支配配（（見圖圖）。。(二二)神神經經誘誘導導的的分分子子基基礎礎參與與神神經經誘誘導導兩兩套套信信號號（如圖圖）:①由由脊脊索索中中胚胚層層釋釋放放垂垂直直到到其其上上方方外外胚胚層層的的；；②由由胚胚孔孔背背唇唇由由前前向向后后水水平平傳傳遞遞。?？扇苋芊址肿幼?①noggin蛋蛋白白；；②activin蛋蛋白白；；③蛋蛋白白激激酶酶和和cAMP；；④inhibin和和follibtain。。第二二節(jié)節(jié)神神經經管管的的形形成成和和分分化化神經經管管和和神神經經嵴嵴在在形形態(tài)態(tài)發(fā)發(fā)生生中中是是一一個個過過程程的的兩兩個個產產物物（形形成成模模式式圖圖））神經經管管形形成成機機制制神經經管管細細胞胞的的增增殖殖、、遷遷移移和和分分化化神經經管管的的分分化化皮層層和和核核團團的的形形成成神經經管管形形成成機機制制：：隨外外胚胚層層細細胞胞內內微管管由由隨隨機機排排列列到到平平行行于于細細胞胞長長軸軸排排列列，外外胚胚層層細細胞胞伸伸長長(若若用用秋秋水水仙仙素素處處理理將將阻阻斷斷神神經經管管形形成成)，，預預定定神神經經外外胚胚層層細細胞胞形形狀狀的的第第二二個個變變化化是柱柱狀狀細細胞胞頂頂端端收收縮縮變變?yōu)闉樾ㄐㄐ涡渭毤毎?而而周周圍細細胞胞不不.預預定定神神經經外外胚胚層層細細胞胞的的變變形形是是由由于于圍圍繞繞在在細胞胞頂頂端端的的一一圈圈微微絲絲收收縮縮產產生生““口口袋袋效效應應””的結結果果（（若若用用細細胞胞松松弛弛素素處處理理,細細胞胞頂頂端端不不能能收收縮縮形形成成神神經經褶褶)(見圖圖）。。皮層層牽牽引引(corticaltractoring)假假說說：：如圖圖神經經板板上皮皮細細胞胞的的皮皮質質處處于于不不斷斷運運動動中中,從從而而攜攜帶帶一一些些粘粘連連分分子子從從細細胞胞底底部部向向上上流流動動，，并并終終止止于于細細胞胞頂頂部部(A)。如如果果流流動動的的速速度度在在每每個個細細胞胞中中相相等等,則則上上皮皮細細胞胞彼彼此此緊緊密密相相連連,不不發(fā)發(fā)生生細細胞胞變變形形。。然然而而如如果果這這種種流流動動““牽牽引引””的的速速度度在在鄰鄰近近細細胞胞中中不不同同,流流動動較較快快的的細細胞胞將將開開始始向向基基部部方方向向爬爬行行,移移到到上上皮皮細細胞胞之之外外。。因因為為細細胞胞的的頂頂部部仍仍連連在在一一起起,基基部部的的爬爬行行與與頂頂端端連連接接和和收收縮縮結結合合起起來來產產生生一一種種運運動動,使使這這些些細細胞胞升升到到神神經經板板表表面面之之上上,并并向向內內卷卷曲曲形形成成神神經經褶褶(B)。神經經管管細細胞胞的的增增殖殖神經經管管細細胞胞的的遷遷移移神經經細細胞胞的的分分化化神經管細胞胞的增殖神經上皮：隨著神經管管的形成，，由柱狀上皮皮演變而成成的假復層層上皮，也稱稱增殖上皮皮。神經管細胞胞的增殖過過程：如圖，這個個過程一直直持續(xù)到細細胞停止分分裂開始遷遷移為止,隨著發(fā)育育進行細胞胞分裂速度度逐漸減慢慢(用3H-腺苷酸酸標記的放放射自顯影影研究發(fā)現現)。神經管細胞胞的遷移輻射纖維：在神經系系統(tǒng)的層狀狀結構中神神經細胞沿沿著神經膠膠質細胞伸伸出的輻射射狀排列的的突起(見圖)。神經細胞遷遷移前在神神經管內壁壁附近聚集集形成外套層，此時增殖殖上皮稱為為室管膜；由于停止止有絲分裂裂后細胞不不斷加入外外套層增厚厚，在外套套層與神經經管外壁之之間為邊緣層，起初它僅僅含有神經經細胞基部部的一些突突起，后來來外套層神神經細胞突突起及神經經系統(tǒng)其它它部分的突突起也侵入入此層；外外套層的神神經細胞分分化產生樹突和軸突突，一些細胞又又外遷形成成一個中間間層；當神神經管分化化為脊髓時，因為外外套層含有有較多的細細胞體，組組織學染色色較深，稱稱為灰質，，而邊緣層層含有樹突突和軸突，，不易著色色,稱為為白質。神經管形成成模式(圖圖)：①產生神經經管所需的的所有力量量來自神經經管上皮細細胞本身;②神經胚形形成起源于于神經上皮皮細胞形狀狀的變化;③引起細胞胞形狀變化化的力量來來自細胞骨骨架成分;④另外兩個個因素,即即集中的的伸展和細細胞分裂。。新形成神經經管的掃描描電鏡照片片，示神經經管中細胞胞處于細胞胞周期的不不同時期。。神經細胞的的分化當神經元開開始遷移時時，它們喪喪失細胞分分裂的能力力，而神經經膠質細胞胞終身保留留細胞分裂裂能力。例如：運用用一種神經經膠質細胞胞特異的標標記物—神神經膠質原原纖維酸性性蛋白(GFAP)抗體進行行免疫細胞胞化學研究究表明，在在室管膜中中的某些細細胞表達GFAP，，而另外的的細胞不表表達，推測測前者為神神經膠質細細胞。這一一結果提示示：在室管管膜中的神神經膠質細細胞在神經經元遷移前前就已決定定了。神經管的分分化神經管分化化為中樞神神經系統(tǒng)不不同區(qū)域(三個水平平)同時進進行:①在大體解解剖水平神神經管及其其腔產生膨膨大和收縮縮形成腦和和脊髓的室室;②在組織水水平神經管管壁內的細細胞群以不不同方式重重排形成腦腦和脊髓不不同的功能能區(qū);③在細胞水水平神經上上皮細胞分分化為體內內不同類型型的神經元元和神經膠膠質細胞。。腦早期發(fā)育育中的區(qū)域域特化(見見圖)腦的分化(見圖)腦早期發(fā)育育中的區(qū)域域特化28天36天48天前部的神經管前腦中腦端腦視泡間腦后腦末腦大腦半球嗅腦海馬嗅覺松果體丘腦小腦腦橋延髓中腦導水管后腦腦的分化大腦皮層的的組織發(fā)生生:大腦皮層的的細胞產生生類似于神經管室層層,由于細細胞增殖產產生類似神經經管三層的的結構(見圖)。皮層和核團團的形成大腦皮層的的組織發(fā)生生小腦皮層的的組織發(fā)生生非層狀結構構的組織發(fā)發(fā)生最早完成分分裂向外遷遷移的成神神經細胞到到達邊緣層層下面形成成皮層板,將來來發(fā)育為新皮層。該層最后分分化為含細細胞體的6層,由外向向內分別是是:Ⅰ分子子層,ⅡⅡ外顆粒層層,Ⅲ錐錐體細胞層層,Ⅳ內內顆粒層,Ⅴ神經經節(jié)細胞層層和Ⅵ多形形細胞層。。用放射自自顯影研究究發(fā)現,除除分子子層是由最最早到達皮皮層板的Cajal-Retzius細胞形成成外,其其余5層組組織發(fā)生的的特點是神經元遷移移由內至外外的裝配模模式,即最早早(妊娠16天)停停止分裂開開始遷移的的細胞形成成較深皮層層(Ⅵ),晚期停止止分裂的細細胞逐漸向向外遷移,依次形形成Ⅴ(17),ⅣⅣ(18),ⅢⅢ(19),Ⅱ(21)。。小腦皮層的的組織發(fā)生生小腦皮層組組織發(fā)生與與大腦皮層層稍微不同同:早期期分化基本本一樣。在在第四腦室室頂部首先先產生浦肯野細胞胞；然后依次次向外遷移移形成其它它中間神經經元，它們們在邊緣層層內形成小腦板；此后一些些仍具分裂裂能力的細細胞遷移到到位于軟膜膜下形成外顆粒層，它們在那那里繼續(xù)分分裂一段時時間，完成成最后一次次分裂后，，外顆粒層細細胞又向內內遷移穿過過細胞層到到達內顆粒粒層最終位位置；當外顆粒粒細胞通過過分子層向向內遷移時時，在不同同時間呈現現不同的分分化形態(tài)(見圖)。小腦最后分分化為三層層：由外向向內分別是是分子層、、浦頃野細細胞層和顆顆粒層。非層狀結構構的組織發(fā)發(fā)生在靠近腦室室較深的層層中，成神神經細胞聚聚集成團，稱為核核團(nucleus)，每每個核團是是一個功能能單位。其組織織發(fā)生表現現出一種““外-內””的“包裹裹”的模式，即即后形成的的細胞并不不通過先形形成的細胞胞遷移，遷移路路線不同形形成不同核核團。第三節(jié)神神經嵴及其其衍生物神經嵴與神經嵴細細胞的衍生物神經嵴細胞胞的遷移影響神經嵴嵴細胞多能能性的因素神經嵴細胞胞遷移的機制神經嵴神經嵴細胞胞神經嵴細胞胞的衍生物物(見表)在神經管的的迷走區(qū)軀軀干部之間間異位的移移植實驗(見圖)神經嵴：位于神經經管背部兩兩側的具有有可塑性的的細胞群。。神經嵴細胞胞：是具有多潛潛能的細胞胞，它能產產生各種不不同類型的的細胞，包包括神經元元、神經膠膠質細胞和和一些非神神經細胞神經嵴與神神經嵴細胞胞的衍生物物A:鵪鶉胚胎迷迷走區(qū)的一一片神經管管在神經嵴嵴細胞將要要遷移前切切除，并移移植到18－24體體節(jié)的軀干干部。B:與A相反的的移植實驗驗證實，神神經嵴細胞胞的表現型型取決于它它們遷移所所經過的環(huán)環(huán)境。神經嵴細胞胞的遷移軀干部神經經嵴細胞的的遷移途徑徑(見圖)頭部神經嵴嵴細胞遷移移的途徑線路1：：(腹側途徑徑)細胞通過體體節(jié)前部向向腹側遷移移：相鄰體體節(jié)后半部部的細胞沿沿神經管背背側向相鄰鄰體節(jié)的前前半部集中中，與那里里的細胞一一起向腹側側遷移，這些神經嵴嵴細胞產生生交感和副副交感的神神經節(jié)、背背根神經節(jié)節(jié)和腎上腺腺髓質細胞胞。線路2：背側途徑:一些細胞在在外胚層的的下面采取取背側的線線路，它們分化為為色素細胞胞①從r2菱腦腦節(jié)起源的的神經嵴細細胞遷移到到第一咽(下頜)囊囊形成三叉叉神經的神神經節(jié);②r4起源的的細胞遷移移到第二咽咽囊形成膝膝狀神經和和聽前庭神神經的神經經節(jié);③r6起源的的神經嵴細細胞遷移到到第三和第第四咽囊,形成胸胸腺、甲狀狀腺和甲狀狀旁腺,也也形成迷迷走神經和和舌咽神經經的神經節(jié)節(jié)哺乳動物頭頭部神經嵴嵴細胞的遷遷移路線小鼠頭部的的神經嵴細細胞從r4~r6菱菱腦節(jié)的遷遷移路線。。其中大部部分細胞遷遷入咽弓，，小部分遷遷移形成腦腦神經節(jié)。。影響神經嵴嵴細胞多能能性的因素素①在胚胎內的的位置；②生長因子；；③細胞外基質質；④激素。①神經嵴細胞胞的遷移遵遵循精確的的路線進行行;②神經嵴細胞胞受神經管管引導定向向遷移；③神經嵴細胞胞可能是受受它們遷移移路線下面面的基質控控制的；④野生型的神神經嵴細胞胞不能在突突變體內遷遷移，而突突變體的神神經嵴細胞胞能在野生生型的胚胎胎內遷移；；⑤在神經嵴細細胞開始遷遷移前其表表面的神經細胞粘粘連蛋白數量減少，，在遷移過過程中神經經嵴細胞表表面沒有神神經細胞粘粘連蛋白，，當神經嵴嵴細胞到達達定居點開開始聚集時時，又重新新表達這種種粘連蛋白白。(見圖)神經嵴細胞胞遷移的機機制第四節(jié)外外胚層板外胚層板:當神經管管開始愈合合時，在胚胚胎頭部神神經管下方方外胚層增增厚形成的的特定區(qū)域域(見圖)。外胚層板包包括：①嗅基板②聽基板①嗅基板嗅基板將產產生嗅覺感感受器的嗅嗅上皮，其其神經元分分化為雙極極神經元，，其周圍樹樹突特化為為檢測與其其上方嗅黏黏膜接觸的的空氣分子子，中央軸軸突向內伸伸入嗅球。。②聽基板聽基板將產產生內耳的的感覺上皮皮和聽神經經節(jié)或螺旋旋神經節(jié)及前庭神神經節(jié)的神神經元。這這些神經細細胞最后也也變成雙極神經元，，具有一個個終止于毛毛細胞的周周圍樹突和和一個投射到腦干的的中央軸突突。另外，一系系列小的基基板(如鰓鰓上基板、、中間基板板等)，象聽基板一一樣產生感感覺神經節(jié)節(jié)中的一些些神經元。。且三叉神經節(jié)、舌舌咽神經節(jié)節(jié)和迷走神神經節(jié)中的的一些神經經元起源于外胚層板板(見圖)。第五節(jié)在在神經經系統(tǒng)發(fā)發(fā)育中中的細胞胞凋亡靶組織神經生長長因子和和神經營營養(yǎng)因子子傳入神經經的調節(jié)節(jié)功能活動動的影響響一.靶組組織(targettissue)Hamburger等等(1938-1980)在在發(fā)育的的雞胚中中進行的的精細的的定量研研究發(fā)現現：在許多神神經組織織中存在在著起初初細胞的的過度增增殖和后后來的細細胞凋亡亡；被控制的的不是細細胞的增增殖，而而是細胞胞凋亡。細胞凋亡亡可能涉涉及對靶靶組織的的競爭。。減少靶組組織，則則增加細細胞凋亡亡；反之，，增加靶靶組織，，則減少少細胞凋凋亡。例如：切除雞胚胚的附肢肢引起與與之相連連的脊髓髓運動神經元的的數目極極度減少少，支配配到附肢肢的感覺覺神經節(jié)節(jié)的體積也也減少。。相反，，如果移移植一個個額外的的附肢到到發(fā)育中胚胚胎的軀軀干部，，提供附附加的靶靶組織，，結果與之對應應的脊髓髓中存活活的神經經元數目目增加，，感覺神經節(jié)的的體積增增大(見圖)。例如：側運動柱柱的寬度起初初在整個個脊髓上是一致致的，但但隨著發(fā)育的進進行在與附肢相連的節(jié)中(即除臂節(jié)和腰節(jié)之外的節(jié))，柱的寬度變窄。在側運動柱中神經元的數目減少約40%

(見圖)

。二.神經經生長因因子和神神經營養(yǎng)養(yǎng)因子神經生長長因子神經生長長因子(NGF)：能誘導交交感和感感覺神經經節(jié)明顯顯增大和和神經纖纖維生長長的可擴擴散物質質。相對分子子量：1.3××105，含α、β和γ三種亞單單位，其其比率率為2α:1β:2γγ，其中β亞單位具具有神經經生長因因子活性性.NGF功功能：NGF是是由對其其敏感神神經元的的靶組織織產生的的，它主主要對哺哺乳類和和鳥類的的交感神神經節(jié)和和背根神神經節(jié)的的神經元元的存活活起作用用。它可調節(jié)節(jié)神經元元在到達達靶組織織后發(fā)生生的細胞胞凋亡。。例如：移移植小鼠鼠腫瘤塊塊到雞胚胚尿囊絨絨毛膜上上培養(yǎng)時時,能能誘導雞雞胚中交交感和感感覺神經經節(jié)明顯顯增大和和神經纖纖維驚人人的異常常生長(見圖)。神經營養(yǎng)養(yǎng)因子神經營養(yǎng)養(yǎng)因子：：能促進交交感和感感覺神經經節(jié)明顯顯增大和和神經纖纖維生長長、調節(jié)節(jié)不同類類型神經經元的存存活，并并控制神神經系統(tǒng)統(tǒng)靶組織織細胞調調亡的可可擴散物物質。結構類似似于NGF。功能：①能控制靶靶組織中中神經細細胞的調調亡；②能調節(jié)不不同類型型神經元元的存活活；③能阻止運運動神經經元的退退化。三.傳入入神經的的調節(jié)神經元的的存活可可能受傳傳入神經經的神經經支配控控制。例如①聽覺系系統(tǒng)中耳耳內神經經支配的的消失導導致直接接接受第第Ⅷ對腦腦神經投投射的腦腦干核中中細胞凋凋亡增加加。②在孵化化后雞第第Ⅷ對腦腦神經被被破壞后后，細胞胞凋亡也也會發(fā)生生(見圖)。同時發(fā)現現在最初初的連接接形成之之前神經經細胞的的發(fā)育依依賴傳入入神經的的神經支支配,而而在發(fā)發(fā)育晚期期這些神神經元對對傳入神神經的神神經支配配不太敏敏感。(對此在活活體內的的調節(jié)的的確切機機制尚不不清楚)四.功能能活動的的影響在神經系系統(tǒng)正常常發(fā)育期期間，細細胞凋亡亡可能受受神經功功能活動動的影響響。例如：在在雞胚脊脊髓的側側運動柱柱中，當當神經－－肌肉連接的的傳遞活活動被箭箭毒長期期阻斷后后，神經經細胞的的凋亡被被推遲。。當神經經活動恢恢復后，，神經細細胞的凋凋亡又重重新開始始(見圖)。結束放映映9、靜夜四無無鄰，荒居居舊業(yè)貧。。。1月-231月-23Sunday,January1,202310、雨雨中中黃黃葉葉樹樹，，燈燈下下白白頭頭人人。。。。21:02:2121:02:2121:021/1/20239:02:21PM11、以我獨沈沈久，愧君君相見頻。。。1月-2321:02:2121:02Jan-2301-Jan-2312、故人人江海海別，，幾度度隔山山川。。。21:02:2121:02:2121:02Sunday,January1,202313、乍見見翻疑疑夢，，相悲悲各問問年。。。1月-231月-2321:02:2121:02:21January1,202314、他鄉(xiāng)鄉(xiāng)生白白發(fā)，，舊國國見青青山。。。01一一月月20239:02:21下下午21:02:211月-2315、比不了得得就不比，，得不到的的就不要。。。。一月239:02下下午1月-2321:02January1,202316、行動出出成果，，工作出出財富。。。2023/1/121:02:2121:02:2101January202317、做前，能能夠環(huán)視四四周；做時時，你只能能或者最好好沿著以腳腳為起點的的射線向前前。。9:02:21下下午9:02下下午21:02:211月-239、沒有失敗敗，只有暫暫時停止成成功！。1月-231月-23Sunday,January1,202310、很多事事情努力力了未必必有結果果，但是是不努力力卻什么么改變也也沒有。。。21:02:2121:02:2121:021/1/20239:02:21PM11、成功就是是日復一日日那一點點點小小努力力的積累。。。1月-2321:02:2121:02Jan-2301-Jan-2312、世間間成事事，不不求其其絕對對圓滿滿，留留一份份不足足，可可得無無限完完美。。。21:02:2121:02:2121:02Sunday,January