GB 15193.6-2003哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗

CS07.100C53中華人民共和國國家機標準GB：15193.6—2003代替GB15193.6-1994哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗Mammalianbonemarrowcellchromosomeaberrationtest2003-09-24發(fā)布2004-05-01實施中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布中國國家標準化管理委員會

GB15193.6—2003前本標準全文強制，本標準代替GB15193.6—1994《骨髓細胞染色體畸變試驗》.本標準與GB15193.6—1994相比的主要修改如下-將標準名稱"骨髓細胞染色體畸變試驗”改為“哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗”；在“范圍"中增加了受試物的具體內(nèi)容：食品生產(chǎn)、加工、保藏、運輸和銷售過程中所涉及的可能對健康造成危害的化學、生物和物理因素,檢驗對象包括食品添加劑（含營養(yǎng)強化劑)食品新資源及其成分、新資源食品、輻照食品、食品容器與包裝材料、食品工具、設備、洗滌劑、消毒劑.農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、食品工業(yè)用微生物等;增加不適用范圍；-將原操作步驃中"5,1動物處理"標題下的有關內(nèi)容分列為.試驗動物""劑量及分組"和“操作步驛”三章；-增加章題“試驗動物”,將“取健康成年大、小鼠”改為“常用健康年輕的成年大鼠或小鼠”；:增加章題"劑量及分組”,并將高劑量組的設計方法增加一條“急性毒性試驗給予受試物最大劑量(最大使用濃度和最大灌胃容量)求不出LD.ao時,高劑量組則按以下順序:a）10g/kg體重;b）人的可能攝入量的100倍;或）一次最大灌胃劑量進行設計”;增加參考陽性對照物“絲裂霉素C(1.5mg/kg體重～2.0mg/kg體重),或環(huán)磷酰胺(40mg/kg體重)";-將原"5.1.2”劑量設計以外的內(nèi)容放在增加的“操作步驃”標題下.并在此標題下增加"受試物配制”的有關內(nèi)容；增加“結果判定”內(nèi)容。白本標準實施之日起,GB15193.6—1994同時廢止。本標準由中華人民共和國衛(wèi)生部提出并歸口。本標準起草單位：中國疾病預防控制中心營養(yǎng)與食品安全所、哈爾濱醫(yī)科大學、杭州市衛(wèi)生防疫本標準主要起草人：韓馳、唐玲光、袁振華本標準于1994年首次發(fā)布，本次為第一次修訂

GB15193.6—2003哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗范圍本標準規(guī)定了哺乳動物骨髓染色體畸變試驗的基本技術要求本標準適用于評價食品生產(chǎn)、加工、保藏、運輸和銷售過程中所涉及的可能對健康造成危害的化學生物和物理因素對大、小鼠骨髓細胞的遺傳毒性，檢驗對象包括食品添加劑（含營養(yǎng)強化劑)、食品新資源及其成分、新資源食品、輻照食品、食品容器與包裝材料、食品工具、設備、洗滌劑、消毒劑、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、食品工業(yè)用微生物等。本標準不適用于有證據(jù)表明受試物或反應代謝產(chǎn)物達不到靶組織(targettissue)-髓的情況、原理染色體是細胞核中具有特殊結構和遺傳功能的小體,當化學物質(zhì)作用于細胞周期G1期和S期時誘發(fā)染色體型畸變，而作用于G2期時則誘發(fā)染色體單體型畸變。給試驗的大、小鼠腹腔注入秋水仙素,抑制細胞分裂時紡錘體的形成，以便增加中期分裂相細胞的比例,并使染色體絲縮短、分散,輪廊清晰。在顯微鏡下觀察染色體數(shù)目和形態(tài)。儀器與試劑全部試劑除注明外均為分析純，試驗用水為蒸留水.3.110.1%秋水仙素：置于棕色瓶中，冰箱保存。3.22.2%檸檬酸鈉。3.3H7.4磷酸鹽緩沖液3.3.11/15mol/L磷酸氫二鈉溶液;磷酸氫二鈉(NaHPO,)9.47g溶于1000mL蒸留水中3.3.21/15mol/L磷酸二氫鉀溶液;磷酸二氫鉀(KH.PO,)49.07g溶于1000mL蒸水中。3.3.3將磷酸氫二鈉溶液80mL與磷酸二氫鉀溶液20mL混合,用pH計測定并調(diào)節(jié)pH至7.4。3.40.075mol/L氯化鉀溶液。3.5甲醇(分析純):冰乙酸(分析純)以3：1混合，臨用時現(xiàn)配.3.6Giemsa溶液。3.6.1Giemsa儲備液;取Giemsa染料3.8g.置瑪瑙乳缽中，加少量甲醇研磨,逐漸加甲醇至375mL溶解后再加125mL純甘油,于37℃溫箱保溫48h,在此期間搖動數(shù)次，放置1周～2周過濾備用。3.6.2Giemsa應用液：取1mL儲備液加入10mLpH7.4磷酸緩沖液。3.7儀器與設備：實驗室常用設備、恒溫水浴鍋(37℃±5C)、離心機、生物顯微鏡實實驗動物常用健康年輕的成年大鼠或小鼠。每組用兩種性別的動物至少各5只。2動物購買后適應環(huán)境至少3天5劑量及分組受試物應設三個劑量組,最高劑量組原則上為動物出現(xiàn)嚴重中毒表現(xiàn)和/或個別動物出現(xiàn)死亡的