三體綜合征產(chǎn)前診斷滿分

21，三體綜合征產(chǎn)前診斷

瀘州醫(yī)學(xué)院第三組滿分PPT案例張某，女，31歲，商場收銀員，懷孕15周，擔(dān)心所孕胎兒不正常，前來進(jìn)行遺傳咨詢。經(jīng)詢問得知，張某的一表姐曾生育一智力低下兒子，經(jīng)某醫(yī)院診斷為先天愚型，但具體核型不詳。張某孕前檢查各項(xiàng)優(yōu)生指標(biāo)均正常，孕前無感冒服藥史，無有毒有害物質(zhì)接觸史。張某的丈夫，32歲，司機(jī)，有煙酒嗜好，在妻子懷孕前半年已戒酒，減少吸煙量。兩人核型檢查均正常，家族中其他特殊疾病患者。根據(jù)張某的情況，作中孕期唐氏篩查，結(jié)果張某血清的AFP,hCG和uE3檢查結(jié)果陽性，再進(jìn)行B超檢查胎兒情況，證實(shí)胎兒胎齡正確，發(fā)育正常。根據(jù)上述資料，張某所孕胎兒具有21三體綜合癥的高風(fēng)險(xiǎn)，建議進(jìn)行產(chǎn)前診斷。

孕婦就診

常規(guī)篩查綜合分析風(fēng)險(xiǎn)值孕期檢查進(jìn)一步確診羊膜穿刺產(chǎn)前診斷定義對象方法產(chǎn)前診斷產(chǎn)前診斷是在遺傳咨詢的基礎(chǔ)上，主要通過遺傳學(xué)檢測和影像學(xué)檢查，對高風(fēng)險(xiǎn)胎兒進(jìn)行明確診斷，通過對患胎的選擇性流產(chǎn)達(dá)到胎兒選擇的目的，從而降低出生缺陷率，提高優(yōu)生質(zhì)量和人口素質(zhì)。產(chǎn)前診斷又稱宮內(nèi)診斷。它是為了了解胎兒在子宮內(nèi)的健康情況，有無先天性畸形或遺傳病，用某些特殊檢查方法在子宮內(nèi)對胎兒進(jìn)行診斷，以便及早采取措施避免殘疾兒的出生，提高出生人口的素質(zhì)，是有生學(xué)的重要組成部分。產(chǎn)前診斷定義對象方法案例張某，女，31歲，商場收銀員，懷孕15周，擔(dān)心所孕胎兒不正常，前來進(jìn)行遺傳咨詢。經(jīng)詢問得知，張某的一表姐曾生育一智力低下兒子，經(jīng)某醫(yī)院診斷為先天愚型，但具體核型不詳。張某孕前檢查各項(xiàng)優(yōu)生指標(biāo)均正常，孕前無感冒服藥史，無有毒有害物質(zhì)接觸史。張某的丈夫，32歲，司機(jī)，有煙酒嗜好，在妻子懷孕前半年已戒酒，減少吸煙量。兩人核型檢查均正常，家族中其他特殊疾病患者。根據(jù)張某的情況，作中孕期唐氏篩查，結(jié)果張某血清的AFP,hCG和uE3檢查結(jié)果陽性，再進(jìn)行B超檢查胎兒情況，證實(shí)胎兒胎齡正確，發(fā)育正常。根據(jù)上述資料，張某所孕胎兒具有21三體綜合癥的高風(fēng)險(xiǎn)，建議進(jìn)行產(chǎn)前診斷。產(chǎn)前診斷定義對象方法產(chǎn)前診斷方法1.X線檢查2.超聲波檢查3.胎兒鏡4.羊膜穿刺術(shù)5.絨毛吸取術(shù)6.臍帶穿刺術(shù)7.孕婦外周血分離胎兒細(xì)胞8.植入前診斷產(chǎn)前診斷定義對象方法一、實(shí)實(shí)驗(yàn)?zāi)磕康恼莆者z遺傳病病的產(chǎn)產(chǎn)前診診斷過過程，，通過過對21三三體綜綜合征征的診診斷設(shè)設(shè)計(jì)，，培養(yǎng)養(yǎng)運(yùn)用用遺傳傳學(xué)現(xiàn)現(xiàn)代技技術(shù)解解決醫(yī)醫(yī)學(xué)實(shí)實(shí)際問問題的的能力力。二、實(shí)實(shí)驗(yàn)原原理1.羊羊水中中有一一定數(shù)數(shù)量胎胎兒脫脫落細(xì)細(xì)胞，，通過過羊膜膜穿刺刺獲取取羊水水中的的胎兒兒細(xì)胞胞，經(jīng)經(jīng)體外外培養(yǎng)養(yǎng)后通通過G顯帶帶實(shí)驗(yàn)驗(yàn)進(jìn)行行核型型分析析，判判斷染染色體體是否否畸形形，診診斷是是否患患有21三三體綜綜合征征。2.G顯帶帶是指指以Giemsa染染料染染色后后，使使染色色體顯顯帶的的技術(shù)術(shù)。Giemsa染染料是是由噻噻嗪和和曙紅紅組成成的，，著色色時(shí)DNA先于于2個(gè)個(gè)噻嗪嗪分子子結(jié)合合，然然后再再與一一個(gè)曙曙紅分分子結(jié)結(jié)合，，形成成沉淀淀物，，而DNA的某某些部部位對對染料料不敏敏感，，由此此形成成明暗暗相間間的條條帶。。三、實(shí)實(shí)驗(yàn)材材料、、試劑劑及器器材（1））器材材：離離心管管，離離心機(jī)機(jī)，天天平，，37℃溫溫箱，，載玻玻片，，蓋玻玻片，，恒溫溫水浴浴鍋，，光學(xué)學(xué)顯微微鏡，，標(biāo)本本板，，玻璃璃鉛筆筆，定定時(shí)鐘鐘，染染色缸缸，直直柄虹虹膜鑷鑷，滴滴管。。（2））藥品品：pH6.8PBS，Giemsa，，0.025%胰蛋蛋白酶酶（取取0.9%氯化化鈉100ml，加加0.25%胰胰蛋白白酶1ml）。。四、實(shí)實(shí)驗(yàn)步步驟取材↓體外細(xì)細(xì)胞培培養(yǎng)↓制片↓顯帶↓核型分分析取材1、腹腹部備備皮，，排光光膀胱胱，平平臥位位常規(guī)規(guī)消毒毒后鋪鋪無菌菌洞巾巾。2、麻麻醉，，一般般不必必需要要，精精神緊緊張者者或可可用普普魯卡卡因或或利多多卡因因麻醉醉。取材3、選選擇穿穿刺部部位，，經(jīng)B超胎胎盤定定位后后避開開胎盤盤。中期妊妊娠時(shí)時(shí)，一一般選選擇在在恥骨骨聯(lián)合合上3橫指指相當(dāng)當(dāng)于子子宮下下段處處，于于腹中中線或或其左左右側(cè)側(cè)旁，，捫及及囊樣樣感的的部位位做穿穿刺；；也可可于宮宮底與與恥骨骨聯(lián)合合連線線中點(diǎn)點(diǎn)或左左右任任何一一側(cè)穿穿刺。。晚期妊妊娠時(shí)時(shí)，先先捫清清胎先先露，，然后后上推推先露露部，，在先先露部部下方方穿刺刺；也也可在在胎兒兒頸背背部空空隙處處或胎胎兒肢肢體側(cè)側(cè)空隙隙處穿穿刺。。取材4、確確定穿穿刺部部位后后，以以20～21號號腰椎椎穿刺刺針垂垂直刺刺入腹腹壁，，通過過腹壁壁及宮宮壁兩兩次阻阻力，，當(dāng)有有落空空感時(shí)時(shí)即進(jìn)進(jìn)入羊羊膜腔腔，抽抽出芯芯針，，見羊羊水溢溢出，，接上上注射射器，，順利利抽得得清亮亮羊水水，再再次證證實(shí)在在羊膜膜腔內(nèi)內(nèi)后，，可注注射藥藥物。。如欲欲做羊羊水檢檢查，，則抽抽取羊羊水20ml立立即送送檢。。5、穿穿刺完完畢后后拔出出穿刺刺針，，局部部壓迫迫5分分鐘，，穿刺刺部位位敷以以無菌菌紗布布，膠膠布固固定。。四、實(shí)實(shí)驗(yàn)步步驟取材↓體外細(xì)細(xì)胞培培養(yǎng)↓制片↓顯帶↓核型分分析細(xì)胞體體外培培養(yǎng)無菌超超凈臺(tái)臺(tái)上將將羊水水注入入50ml無菌菌離心心管內(nèi)內(nèi)，1500r/min常溫溫離心心10min，，移去去上清清，留留約0.5ml上清清液，，槍尖尖混勻勻，分分裝吸吸取至至3個(gè)個(gè)60mm培養(yǎng)養(yǎng)皿（（falcon），，每皿皿添加加4ml羊羊水完完全培培養(yǎng)基基，37℃℃5%CO2培養(yǎng)養(yǎng)箱中中培養(yǎng)養(yǎng)6-7d。四、實(shí)實(shí)驗(yàn)步步驟取材↓體外細(xì)細(xì)胞培培養(yǎng)↓制片↓顯帶↓核型分分析制片培養(yǎng)6-7d后后，倒倒置顯顯微鏡鏡下觀觀察細(xì)細(xì)胞生生長情情況，，有若若干梭梭形型型細(xì)胞胞克隆隆生長長，每每個(gè)克克隆細(xì)細(xì)胞狀狀態(tài)較較好且且形成成細(xì)胞胞島，，更換換新鮮鮮培養(yǎng)養(yǎng)液，，每天天觀察察，2-3d后后，每每個(gè)細(xì)細(xì)胞島島已長長成一一個(gè)個(gè)個(gè)較大大克隆隆且細(xì)細(xì)胞融融合度度達(dá)70%-80%，并并出現(xiàn)現(xiàn)數(shù)目目不等等的較較多圓圓形，，類圓圓形透透亮細(xì)細(xì)胞時(shí)時(shí)，可可進(jìn)行行細(xì)胞胞收獲獲，收收獲前前一天天或當(dāng)當(dāng)天更更換培培養(yǎng)液液，加加入秋秋水仙仙素，，終濃濃度為為0.1微微克每每毫升升，作作用4-4.5h,鏡下下觀察察有大大量““魚眼眼樣””透明明細(xì)胞胞出現(xiàn)現(xiàn)時(shí)，，即可可收獲獲。吸吸取培培養(yǎng)上上清至至一新新離心心管，，加入入0.25%胰胰酶，，37℃消消化2min，，1000r/min離離心10min，棄棄上清清，加加入0.075mol/LKCl低低滲液液，37℃℃12-13min，用用3:1甲甲醇/冰醋醋酸預(yù)預(yù)固定定和固固定后后，滴滴片，，常規(guī)規(guī)G顯顯帶。。四、實(shí)實(shí)驗(yàn)步步驟取材↓體外細(xì)細(xì)胞培培養(yǎng)↓制片↓顯帶↓核型分分析顯帶1、將將制好好的染染色體體標(biāo)本本，置置72℃～～75℃烤烤箱中中烤片片3h。2、放放入預(yù)預(yù)溫至至37℃的的0.025%胰酶酶溶液液中（（pH=7.2～7.4）消消化1min左左右，，每次次的作作用時(shí)時(shí)間并并不完完全相相同，，可先先試一一張片片子，，再根根據(jù)顯顯帶效效果調(diào)調(diào)整胰胰酶作作用時(shí)時(shí)間。。顯帶3、在Giemsa染液中中染色10min，，自來水沖沖洗干凈，，晾干后，，即可閱片片。4、鏡檢：：在顯微鏡鏡高倍目鏡鏡下檢查顯顯帶標(biāo)本，，在染色體體上若出現(xiàn)現(xiàn)清晰的深深淺相間的的帶型，即即為可取標(biāo)標(biāo)本，可供供攝像分析析四、實(shí)驗(yàn)步步驟取材↓體外細(xì)胞培培養(yǎng)↓制片↓顯帶↓核型分析結(jié)果判斷純合型嵌合型易位型結(jié)果判斷(1)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)型占患者總數(shù)數(shù)的92.5%，患患兒體細(xì)胞胞染色體有有47條，，有一條額額外的21號染色體體，核型為為47，XX（或XY）+21。其發(fā)發(fā)生機(jī)制為為親代（多多為母親））的生殖細(xì)細(xì)胞在減數(shù)數(shù)分裂時(shí)染染色體不分分離所致。。核型分析純合型結(jié)果判斷純合型嵌合型易位型結(jié)果判斷(2)嵌合合型僅占21-三體綜合合征的2.5%-5%，是指指受精卵在在有絲分裂裂期間染色色體不分離離而導(dǎo)致的的，因此只只是部分而而不是所有有的細(xì)胞存存在缺陷。。患兒體內(nèi)內(nèi)含有正常常和21-三體細(xì)胞胞二種細(xì)胞胞株，形成成嵌合體，，核型為46，XX（或XY）/47，XX（（或XY））+21，，其臨床表表現(xiàn)隨正常常細(xì)胞所占占百分比而而定。嵌合合型的患兒兒的智商較較其它兩型型高，臨床床并發(fā)癥的的發(fā)生率也也相對較少少。結(jié)果判斷純合型嵌合型易位型核型分析易位型結(jié)果判斷(3)易位位型約占全部病病例的2.5%～5%，多為為羅伯遜易易位，即著著絲粒融合合，其額外外的21號號染色體長長臂易位到到另一近端端著絲粒染染色體上。。最常見為為D/G易易位，D組組中以14號染色體體為主，核核型為46，XX（或XY）-14，+t（14q;21q），少數(shù)為15號染色體體。另一種種為G/G易位，是是由于G組組中兩個(gè)個(gè)21號染染色體發(fā)生生著絲粒融融合，形成成等臂染色色體，核型型為46，XX（或XY）-21，+t（21q；21q）。易位型先天天愚型五、注意事事項(xiàng)（1）胰蛋蛋白酶濃度度和處理時(shí)時(shí)間隨氣溫溫高低有所所不同。一一般規(guī)律是是標(biāo)本存放放時(shí)間越長長，在胰蛋蛋白酶當(dāng)中中處理時(shí)間間越長。太太新鮮的標(biāo)標(biāo)本，染色色體會(huì)出現(xiàn)現(xiàn)毛茸現(xiàn)象象。片齡很很長的標(biāo)本本往往會(huì)導(dǎo)導(dǎo)致斑點(diǎn)狀狀的染色體體。（2）胰蛋蛋白酶溫度度：溫度越越高，反應(yīng)應(yīng)的速度就就越快，一一般是室溫溫，但溫度度必須穩(wěn)定定至少20min。。（3）胰蛋蛋白酶處理理的時(shí)間：：如果細(xì)胞胞呈紫藍(lán)色色，說明胰胰蛋白酶的的作用時(shí)間間不夠，如如果細(xì)胞呈呈桃紅色，，說明作用用時(shí)間剛好好。綜上總結(jié)給給與遺傳建建議：若出現(xiàn)上述述情況則為為21三體體綜合癥。。就目前的的醫(yī)療水平平而言，21-三體體綜合征既既沒有方法法治愈也沒沒有方法預(yù)預(yù)防，建議議該孕婦不不宜生育該該患兒。如如果核型為為46，XX(XY)則沒沒有21三三體綜合癥癥，可以生下小小孩。thankyou9、靜夜四無鄰鄰，荒居舊業(yè)業(yè)貧。。1月-231月-23Sunday,January1,202310、雨中黃葉樹樹，燈下白頭頭人。。14:18:4614:18:4614:181/1/20232:18:46PM11、以我我獨(dú)沈沈久，，愧君君相見見頻。。。1月-2314:18:4614:18Jan-2301-Jan-2312、故人江海海別，幾度度隔山川。。。14:18:4614:18:4614:18Sunday,January1,202313、乍見翻疑夢夢，相悲各問問年。。1月-231月-2314:18:4614:18:46January1,202314、他鄉(xiāng)生白白發(fā)，舊國國見青山。。。01一月月20232:18:46下下午14:18:461月-2315、比不了了得就不不比，得得不到的的就不要要。。。。一月232:18下午午1月-2314:18January1,202316、行行動(dòng)動(dòng)出出成成果果，，工工作作出出財(cái)財(cái)富富。。。。2023/1/114:18:4614:18:4601January202317、做做前前，，能能夠夠環(huán)環(huán)視視四四周周；；做做時(shí)時(shí)，，你你只只能能或或者者最最好好沿沿著著以以腳腳為為起起點(diǎn)點(diǎn)的的射射線線向向前前。。。。2:18:46下下午午2:18下下午午14:18:461月月-239、沒有失敗，，只有暫時(shí)停停止成功！。。1月-231月-23Sunday,January1,202310、很多事事情努力力了未必必有結(jié)果果，但是是不努力力卻什么么改變也也沒有。。。14:18:4614:18:4614:181/1/20232:18:46PM11、成功就是是日復(fù)一日日那一點(diǎn)點(diǎn)點(diǎn)小小努力力的積累。。。1月-2314:18:4614:18Jan-2301-Jan-2312、世世間間成成事事，，不不求求其其絕絕對對圓圓滿滿，，留留一一份份不不足足，，可可得得無無限限完完美美。。。。14:18:4614:18:4614:18Sunday,January1,202313、不知知香積積寺，，數(shù)里里入云云峰。。。1月-231月-2314:18:4714:18:47January1,202314、意志堅(jiān)強(qiáng)強(qiáng)的人能把把世界放在在手中像泥泥塊一樣任任意揉捏。。01一月月20232:18:47下下午14:18:471月-2315、楚塞三湘湘接，荊門門九派通。。。。一月232:18下下午1月-2314:18January1,202316、少少年年十十五五二二十十時(shí)時(shí)，，步步行行奪奪得得胡胡馬馬騎騎。。。。2023/1/114:18:4714:18:4701January202317、空空山山新新雨雨后后，，天天氣氣晚晚來來秋秋。。。。2:18:47下下午午2:18下下午午14:18:471月月-239、楊柳散和和風(fēng)，青山山澹吾慮。。。1月-231月-23Sunday,January1,202310、閱讀一切切好書如同同和過去最最杰出的人人談話。14:18:4714:18:4714:181/