臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的采集和轉(zhuǎn)運(yùn)共識(shí)

臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的采集和轉(zhuǎn)運(yùn)共識(shí)范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了臨床微生物學(xué)（病毒學(xué)、細(xì)菌學(xué)和真菌學(xué)）檢驗(yàn)標(biāo)本采集和轉(zhuǎn)運(yùn)的技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于開展臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)的各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)及其臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室。規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。WS/T348尿液標(biāo)本的收集及處理指南WS/T499下呼吸道感染細(xì)菌培養(yǎng)操作指南WS/T442臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全指南WS/T503臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。ClinicalMicrobiologicalSpecimen本文件微生物學(xué)標(biāo)本指臨床病毒學(xué)、細(xì)菌學(xué)和真菌學(xué)檢驗(yàn)（包括涂片鏡檢、培養(yǎng)、抗原、抗體和分子技術(shù)等）所用的標(biāo)本。STAT因疾病可能危及患者生命而需要立即處理的標(biāo)本。Samplingswab用于采集含病原微生物標(biāo)本的拭子，由兩部分組成：①涂抹棒：柄部常為塑料或鋁桿，柄部的一端是具有吸附作用的采樣頭，采樣頭材質(zhì)包括脫脂棉、合成聚酯纖維、聚酰胺纖維、人造絲和泡沫聚氨酯等；②手柄：位于柄部的另一端，也可作為轉(zhuǎn)運(yùn)裝置（容器或管）的帽。轉(zhuǎn)運(yùn)Transport標(biāo)本由采樣地點(diǎn)運(yùn)送到檢驗(yàn)地點(diǎn)的過(guò)程，分為內(nèi)部轉(zhuǎn)運(yùn)（如使用人工或氣動(dòng)傳輸?shù)葍?nèi)部送樣方式）和外部轉(zhuǎn)運(yùn)（如使用汽車、飛機(jī)或火車等外部送樣方式）。Transportcontainer用于盛放轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基和送檢標(biāo)本的容器。該容器應(yīng)無(wú)菌、無(wú)消毒劑及防腐劑、無(wú)污染、密封性好及透明以便于從外部觀察。當(dāng)采樣裝置具備密閉功能，且能有效保護(hù)樣本不被污染時(shí)，可作為轉(zhuǎn)運(yùn)容器運(yùn)送標(biāo)本。轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基Transportmedium液體或半固體的培養(yǎng)基，用于保護(hù)和維持標(biāo)本在轉(zhuǎn)運(yùn)期間（從標(biāo)本采集后到實(shí)驗(yàn)室處理這段時(shí)間）的完整性。轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基一般不促進(jìn)微生物增殖，但保證它們存活。對(duì)于苛養(yǎng)菌，可以采用分離培養(yǎng)用的培養(yǎng)基作為轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基（如羊血瓊脂或巧克力瓊脂等）。一套血培養(yǎng)Asetofbloodculture從一個(gè)穿刺部位抽取血液，分別注入需氧和厭氧血培養(yǎng)瓶分別進(jìn)行需氧和厭氧培養(yǎng)。標(biāo)本采集、轉(zhuǎn)運(yùn)及處理的總原則標(biāo)本采集手冊(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定所在機(jī)構(gòu)的臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本采集手冊(cè)，該手冊(cè)提供的信息包括（但不限于）下列內(nèi)容：a)檢驗(yàn)項(xiàng)目；b)檢驗(yàn)方法；c)適應(yīng)證；d)標(biāo)本采集部位；e)標(biāo)本類型；f)標(biāo)本采集、轉(zhuǎn)運(yùn)所需要的裝置/容器和轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基；g)標(biāo)本采集方法；h)標(biāo)本的體積或質(zhì)量；i)轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)限、貯存條件；j)標(biāo)本的標(biāo)識(shí)方法；k)重復(fù)檢驗(yàn)頻率；l)生物安全防護(hù)信息；m)需要獲得的臨床資料。檢驗(yàn)的申請(qǐng)驗(yàn)的申請(qǐng)程序。檢驗(yàn)申請(qǐng)單提供的信息包括（但不限于）下列內(nèi)容：a)患者姓名；b)患者性別；c)患者年齡或出生日期；d)患者唯一性標(biāo)識(shí)，如病歷號(hào)；e)就診病區(qū)和病房；f)檢驗(yàn)申請(qǐng)者姓名；g)檢驗(yàn)申請(qǐng)者科室；h)標(biāo)本類型；i)標(biāo)本采集部位；j)檢驗(yàn)項(xiàng)目；k)標(biāo)本采集日期和時(shí)間；l)采集標(biāo)本所用的特殊方法（適用時(shí)）；m)臨床診斷)特殊培養(yǎng)要求或可疑病原體（適用時(shí))患者p)患者和檢驗(yàn)申請(qǐng)者的聯(lián)系電話細(xì)菌學(xué)和真菌學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目的選擇：無(wú)菌體液標(biāo)本、組織標(biāo)本、痰標(biāo)本、支氣管肺泡灌洗液(Bronchoalveolarlavagefluid，BALF）、尿液標(biāo)本和膿液標(biāo)本等宜同時(shí)選擇標(biāo)本直接涂片染色鏡檢和培養(yǎng)；莢膜多糖抗原檢驗(yàn)和隱球菌培養(yǎng)；養(yǎng)和分枝桿菌核酸檢驗(yàn)；能排除需氧菌時(shí)，宜同時(shí)做需氧培養(yǎng)；培養(yǎng)；懷疑侵襲性真菌感染的標(biāo)本：宜同時(shí)選擇10%KOH壓片、真菌培養(yǎng)和真菌抗原檢驗(yàn)。另可進(jìn)行乳酸酚棉蘭染色或熒光染色等。說(shuō)明，以保證醫(yī)護(hù)人員對(duì)采集的標(biāo)本進(jìn)行明確標(biāo)識(shí)，檢驗(yàn)申請(qǐng)單中特殊培養(yǎng)要求包括（但不限于）下列內(nèi)容：西斯菌等引起的感染，呼吸道標(biāo)本懷疑諾卡菌引起的感染等；的分枝桿菌培養(yǎng)瓶；特殊的氣體和溫度環(huán)境要求。例如：腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌等需要CO22537℃兩個(gè)溫度進(jìn)行培養(yǎng)。腹腔感染和糖尿病足感染等。厭氧菌感染的特征性表現(xiàn)包括：①局部有氣體產(chǎn)生為重要指征之一；②發(fā)生在黏膜附近的感染；③深部外傷，如槍傷、人或動(dòng)物咬傷后的繼發(fā)感染；④分泌物有惡臭或暗紅血色或在紫外光下發(fā)出紅色熒光，或膿汁中有硫磺顆粒等。標(biāo)本的選擇實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本采集手冊(cè)應(yīng)詳細(xì)描述感染性疾病病原體檢驗(yàn)的標(biāo)本類型和臨床適應(yīng)證，病原體應(yīng)包括（但不限于）重程度及接受有創(chuàng)檢查的風(fēng)險(xiǎn)、流行病學(xué)、可疑病原體的特性和播散能力和受累的器官及感染部位等多方面因素。適于進(jìn)行普通細(xì)菌、厭氧菌檢驗(yàn)的標(biāo)本類型見表1～2。標(biāo)本的采集時(shí)機(jī)、部位、方法治療中為評(píng)估治療效果或治療后為評(píng)估結(jié)局可以進(jìn)行相采樣。應(yīng)當(dāng)盡快在疾病初發(fā)時(shí)采集首份標(biāo)本。的污染。病原菌，并防止非致病定植菌群的污染。檢驗(yàn)呼吸道病毒宜采用植絨拭子采集鼻咽標(biāo)本。普通拭子標(biāo)本不宜用于厭氧菌培養(yǎng)。蘭染色（糞便艱難梭菌培養(yǎng)除外）。無(wú)菌體液（例如胸水、滑膜液、心包液和腦脊液）宜放入無(wú)菌管或含抗凝劑（則需告知臨床其中的影響）的無(wú)菌管送檢，也可注入一定量（最好10mL）的樣品到血培養(yǎng)瓶中進(jìn)行增菌培養(yǎng)；懷疑細(xì)菌或真菌感染時(shí)，除了血液標(biāo)本之外，所有無(wú)菌體液標(biāo)本均宜進(jìn)行革蘭染色鏡檢。用于特殊情況。檢驗(yàn)的標(biāo)本。血標(biāo)本采集時(shí)機(jī)見WS/T503，痰標(biāo)本采集時(shí)機(jī)見WS/T499WS/T。不宜送檢或接收導(dǎo)尿管的管尖進(jìn)行培養(yǎng)。真菌培養(yǎng)宜采集深部標(biāo)本或組織標(biāo)本。做病毒血清學(xué)檢驗(yàn)時(shí)，宜根據(jù)不同病毒選擇不同的采集時(shí)間和抗體類型；發(fā)病早期通常檢驗(yàn)病毒特異的IgM抗體；而對(duì)恢復(fù)期患者，在疾病急性發(fā)作和發(fā)作后間隔2周～4周采集雙份血清，檢驗(yàn)IgG特殊情況下（如懷疑厭氧菌感染時(shí)）可以考慮床旁采樣。標(biāo)本采集須符合生物安全規(guī)定。標(biāo)本采集量采集足夠量的標(biāo)本用于常規(guī)細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)，至少送檢0.5mL或者0.5g（除外特殊標(biāo)本）。當(dāng)送檢標(biāo)本體積不足時(shí)，與臨床溝通，并根據(jù)醫(yī)囑選擇優(yōu)先檢驗(yàn)項(xiàng)目。腦脊液標(biāo)本通常10mL；BALF10mL～20mL（≥5mL）；膿液2mL～5mL；羊水、膽汁、關(guān)節(jié)穿刺液、心包液、胸水、滑膜液大于1mL；腹透液0.1mL1mL。采集足夠量的標(biāo)本用于病毒學(xué)檢驗(yàn)，特別是液體標(biāo)本（脊液和血液），并嚴(yán)格遵照臨床標(biāo)準(zhǔn)的流程操作。腦脊液標(biāo)本通常2mL～5mL3mL～5mL；宜采集大體積量的標(biāo)本用于常規(guī)真菌學(xué)檢驗(yàn)。標(biāo)本標(biāo)識(shí)標(biāo)簽宜由放入冰箱后仍能粘牢的材料制成。標(biāo)簽貼在容器上,而非容器蓋上。標(biāo)簽上提供的信息至少包括（但不限于）下列內(nèi)容：a)患者姓名、患者唯一性標(biāo)識(shí)；b)標(biāo)本采集日期和時(shí)間；c)檢驗(yàn)項(xiàng)目；d)標(biāo)本類型；e)急查標(biāo)本相應(yīng)的標(biāo)識(shí)（適用時(shí)）。標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)以保證醫(yī)護(hù)人員、標(biāo)本運(yùn)送人員在標(biāo)本采集之前能獲得有關(guān)標(biāo)本采集和轉(zhuǎn)運(yùn)的準(zhǔn)確信息。并盡可能縮短轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間。用于細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)本：用于普通細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)本：宜在2h內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室。如果轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間超過(guò)2h，宜使用轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基或在冷藏條件下轉(zhuǎn)運(yùn)；一般而言，用于細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本室溫下保存不能超過(guò)24h；血培養(yǎng)標(biāo)本不可以冷藏轉(zhuǎn)運(yùn)；僅用于分子診斷的標(biāo)本，宜冷藏或冷凍保存（-70標(biāo)本量較少的體液標(biāo)本（＜1mL）或組織標(biāo)本（＜1cm3）：宜在30min24h。周圍環(huán)境敏感的細(xì)菌如百日咳鮑特菌、志賀菌屬、淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和厭氧菌。液、生殖道、眼部、中耳及呼吸道標(biāo)本。對(duì)低溫敏感的細(xì)菌如淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌。用于厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本：在常溫下轉(zhuǎn)運(yùn)，標(biāo)本量較少的標(biāo)本宜在采集后30min用于病毒學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)本：用于病毒核酸檢驗(yàn)的標(biāo)本：采集后在2h～4h內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室血液標(biāo)本室溫運(yùn)送，其他標(biāo)本在 2℃～8℃下轉(zhuǎn)運(yùn)；若運(yùn)送時(shí)間超過(guò)24h，標(biāo)本宜-70℃或更低的溫度下保存和轉(zhuǎn)運(yùn)。的病毒轉(zhuǎn)運(yùn)液或其他相應(yīng)的緩沖液中。液體標(biāo)本：如羊水、血液、腦脊液、尿液和BALF等可直接送VTM用于真菌培養(yǎng)的標(biāo)本（除頭發(fā)、皮膚和指甲宜干燥送檢外宜濕潤(rùn)條件下送檢。桿菌和真菌等，分別采樣或?qū)?biāo)本分裝至合適的轉(zhuǎn)運(yùn)液或容器中。細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)常用的轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基：Regan-Lowe轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基：適用于百日咳鮑特菌和副百日咳鮑特菌的培養(yǎng)。Amies或Stuart轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基：適用于分離腦膜炎奈瑟菌和白喉棒桿菌等。Cary-Blair轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基：適用于腸道病原菌的檢驗(yàn)。病毒學(xué)檢驗(yàn)常用的轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基：病毒轉(zhuǎn)運(yùn)液可以由實(shí)驗(yàn)室自行配制或購(gòu)買?；A(chǔ)成分包括：Hank平衡鹽溶液、牛血清白蛋白、L-谷氨酸、HEPES緩沖液（pH7.3）、酚紅、兩性霉素B及抗微生物藥物等。對(duì)標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn)液或相應(yīng)運(yùn)送體系說(shuō)明進(jìn)行操作。標(biāo)本采集常用的拭子：病毒學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的采集。病毒學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的采集不宜使用柄部為木質(zhì)的拭子。不宜用于細(xì)菌（特別是苛養(yǎng)菌）、衣原體檢驗(yàn)標(biāo)本的采集。滌綸拭子和尼龍拭子：宜用于病毒和細(xì)菌標(biāo)本的采樣。病毒采樣和真菌培養(yǎng)標(biāo)本的采樣。但不宜用于脂質(zhì)包膜病毒及細(xì)胞培養(yǎng)的采樣，不宜用于淋病奈瑟菌及解脲脲原體的采樣。包裝標(biāo)本，運(yùn)送過(guò)程符合生物安全規(guī)范的要求。運(yùn)送者應(yīng)接受培訓(xùn)，經(jīng)考核合格后方可上崗，運(yùn)送期間配備必要的保護(hù)屏障。對(duì)于檢驗(yàn)高致病性病原微生物標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)應(yīng)當(dāng)按照《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定》中的相關(guān)要求進(jìn)行。標(biāo)本接收標(biāo)本到達(dá)實(shí)驗(yàn)室后記錄接收時(shí)間和處理時(shí)間。接收標(biāo)本時(shí)仔細(xì)核對(duì)標(biāo)本和檢驗(yàn)申請(qǐng)單。如果信息不全，實(shí)驗(yàn)室聯(lián)系標(biāo)本采集部門以獲得缺失的信息。能重新采集時(shí)，才允許對(duì)標(biāo)記錯(cuò)誤的標(biāo)本進(jìn)行重新標(biāo)記；如果是重新標(biāo)記的標(biāo)本，在檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告中明確標(biāo)出；如果是歸屬錯(cuò)誤，則不能重新標(biāo)記。及時(shí)處理送檢標(biāo)本，并盡快將所出現(xiàn)的問題通知相關(guān)科室。標(biāo)本拒收拒收標(biāo)本標(biāo)記錯(cuò)誤或無(wú)患者姓名的標(biāo)本。拒收標(biāo)本類型和申請(qǐng)檢驗(yàn)項(xiàng)目不符的標(biāo)本。使用不符合專業(yè)規(guī)范容器采集的標(biāo)本。判斷方法，如：痰（除用于軍團(tuán)菌和分枝桿菌檢查的標(biāo)本外）：鱗狀低倍視野。標(biāo)本。表3根據(jù)標(biāo)本采集、轉(zhuǎn)運(yùn)條件和轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間，列出了可接受的標(biāo)準(zhǔn)。采集合格標(biāo)本。特殊處理過(guò)程中哪些步驟需要核實(shí)和記錄，規(guī)定能進(jìn)行特殊處理的負(fù)責(zé)人。經(jīng)特殊處理的不合格標(biāo)本的檢驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)在檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告中明確標(biāo)出（不合格因素、可能對(duì)結(jié)果造成的影響等）。標(biāo)本拒收程序?qū)嵤┣埃瑢?shí)驗(yàn)室與臨床共同審閱通過(guò)。標(biāo)本優(yōu)先處理原則檢驗(yàn)項(xiàng)目、標(biāo)本檢驗(yàn)順序。在2h內(nèi)反饋給臨床。緊急檢查標(biāo)本包括（但不限于）下列標(biāo)本：腦脊液標(biāo)本（30min）；血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本（1h）；來(lái)自手術(shù)室、重癥監(jiān)護(hù)室、急診室的無(wú)菌部位標(biāo)本；其他臨床認(rèn)為有必要緊急檢查的標(biāo)本。標(biāo)本的前處理與保存一些標(biāo)本在檢查前，須進(jìn)行前處理。前處理方法包括（限于）：混勻：尿液標(biāo)本和全血標(biāo)本等，檢查前充分混勻恢復(fù)均相。離心：如全血標(biāo)本及時(shí)離心分離血清、血漿或細(xì)胞層。來(lái)。例如咳痰標(biāo)本培養(yǎng)前宜先消化釋放菌體。組織標(biāo)本宜采用機(jī)械研磨釋放菌體。導(dǎo)管和假體等標(biāo)本宜通過(guò)超聲和機(jī)械振蕩等方式釋放菌體。拭子標(biāo)本宜采取振蕩等方式，將菌體從纖維絲上釋放出來(lái)。前，采用酸、堿或其他適宜的方法進(jìn)行處理。體液標(biāo)本（除外尿液和血液）：宜使用細(xì)胞離心機(jī)濃縮后制備涂片。如無(wú)細(xì)胞離心機(jī)，可使用普通離心機(jī)，大于1.0mL的標(biāo)本1500g～2500g離心10min后，用移液管吸出上清，剩余0.1mL～0.5mL類似于血液薄膜片。組織、骨和假體標(biāo)本：用于細(xì)菌培養(yǎng)的組織、骨或假體標(biāo)本宜在研磨器里研磨或超聲處理，組織標(biāo)本可以使用手工研磨器或自動(dòng)勻漿器/液制備涂片，并接種合適的培養(yǎng)基；點(diǎn)種一小塊完整的組織到每塊瓊脂培養(yǎng)基里面。懷疑接合菌感染時(shí)，標(biāo)本不宜研磨，宜剪成小塊。蘭染色。一些拭子標(biāo)本，如診斷細(xì)菌性陰道病的拭子標(biāo)本宜做革蘭染色。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定程序保留標(biāo)本，即使標(biāo)本已用完，也要保留空容器。標(biāo)本保存在冰箱或者是超低溫冰箱，無(wú)菌標(biāo)本建議至少要保存5天。WS/T。臨床常見標(biāo)本的采集和轉(zhuǎn)運(yùn)血培養(yǎng)標(biāo)本血培養(yǎng)采集指征、檢驗(yàn)申請(qǐng)、采集時(shí)間、采集套數(shù)和采集血量、血培養(yǎng)標(biāo)本的轉(zhuǎn)運(yùn)等參照WS/T503。血培養(yǎng)適應(yīng)證及采集套數(shù)推薦的采集血液體積5。分枝桿菌培養(yǎng)：成人患者建議采集3次，每次或按說(shuō)明書要求體積）血液直接注入分枝桿菌專用血培養(yǎng)瓶，室溫下盡快送抵實(shí)驗(yàn)室。酵母菌培養(yǎng)：成人患者采集2～4套血培養(yǎng)，每套血培養(yǎng)采集20mL～40mL血液，宜接種2個(gè)需氧培養(yǎng)瓶，室溫下盡快送抵實(shí)驗(yàn)室。用于病毒學(xué)檢驗(yàn)的血液標(biāo)本方法血液標(biāo)本采集方法參照WS/T503。注釋血漿核酸檢驗(yàn)標(biāo)本選擇抗凝真空采血管，首選的抗凝劑是血清核酸檢驗(yàn)標(biāo)本選擇不含抗凝劑真空采血管；病毒分離培養(yǎng)時(shí)，取EDTA5mL～10mL，室溫下運(yùn)送8h腦脊液標(biāo)本方法患者去枕側(cè)臥位，背部與檢查臺(tái)垂直呈90°，低頭曲頸，使膝部盡量貼近腹部，脊柱前屈，使椎間隙張開便于進(jìn)針；確定穿刺點(diǎn)，選擇腰3～腰4椎間隙，穿刺點(diǎn)相當(dāng)于雙髂后上嵴最高點(diǎn)連線與脊柱中線相交處；嚴(yán)格無(wú)菌操作，佩戴無(wú)菌手套，使用皮膚消毒劑對(duì)腰椎穿刺點(diǎn)及其周圍15cm區(qū)域的皮膚消毒，待消毒劑干燥后（約1min）75%的酒精擦拭兩遍；覆蓋無(wú)菌孔巾，待消毒劑徹底揮發(fā)后，用穿刺點(diǎn)行皮內(nèi)、皮下浸潤(rùn)麻醉，然后垂直緩慢進(jìn)針椎間棘突間隙，邊回吸邊注藥，回吸注意無(wú)回血，充分麻醉后拔針；左手固定麻醉點(diǎn)，右手進(jìn)針，對(duì)準(zhǔn)脊椎間隙刺入皮下，針尖斜向與脊柱平行，穿刺針穿過(guò)皮膚、皮下組織、棘上韌帶、棘間韌帶、黃韌帶、硬脊膜，有落空感進(jìn)入蛛網(wǎng)膜下腔，采集腦脊液分別放入個(gè)無(wú)菌螺帽管中，做好標(biāo)本標(biāo)記；最小標(biāo)本量要求：細(xì)菌≥1mL，真菌≥2mL，分枝桿菌病毒≥2mL；腰椎穿刺采集的第一管腦脊液用于生化學(xué)檢驗(yàn)，第二管用于微生物學(xué)檢驗(yàn)，第三管可以用于細(xì)胞學(xué)、分子核酸檢驗(yàn)等。分別放入個(gè)無(wú)菌螺帽管中，做好標(biāo)本標(biāo)記和標(biāo)清順序。注釋注明患者年齡，可為病原體診斷提供線索；嬰幼兒：可選擇腰4～腰5或腰骶1椎間隙穿刺進(jìn)針，以免損傷脊髓。腹腔標(biāo)本腹水依患者狀況和腹水量，酌情取平臥、側(cè)臥或半臥坐位；確定皮膚穿刺部位或切口的位置；常規(guī)消毒穿刺點(diǎn)及其周圍15cm無(wú)菌手套，覆蓋消毒孔巾；并敷以無(wú)菌紗布；10mL腹膜透析液50mL同時(shí)床旁接種5mL～10mL腹透液，分別打入接種于需氧和厭氧血培養(yǎng)瓶，室溫下立即送檢；37℃條件下孵育。胸水可取半臥位，患側(cè)前臂置于枕部；15cm區(qū)域的皮膚，解開穿刺包，戴無(wú)菌手套，覆蓋消毒孔巾；2%利多卡因麻醉穿刺部位；后乳膠管內(nèi)空氣，然后用止血鉗夾閉。當(dāng)針穿過(guò)壁層胸膜時(shí)，胸水即被吸入穿刺針后的乳膠管，連接50mL注射器，放開止血鉗即可抽液；抽液完畢，拔除穿刺針并敷以無(wú)菌紗布；10mL組織標(biāo)本外科手術(shù)采集的組織標(biāo)本謹(jǐn)慎處理組織標(biāo)本，因其很重要、很難獲取。采集足夠量的組織標(biāo)本，微生物學(xué)檢驗(yàn)所需的標(biāo)本量≥1cm3宜。選擇合適的采樣方法以區(qū)別污染和真正的感染。例如：骨科人工關(guān)節(jié)修復(fù)手術(shù)，在同一個(gè)手術(shù)部位不同的區(qū)域采集5塊分開的組織，分別放置于五個(gè)容器并分別做5塊或更多的組織生長(zhǎng)相同的菌，那么該菌可能是關(guān)節(jié)的病原菌而非污染菌。選擇無(wú)菌保濕容器運(yùn)輸組織，小塊組織宜用2mL無(wú)菌水或生理鹽水保濕；特別小塊的組織標(biāo)本宜放在一個(gè)方形潤(rùn)濕的無(wú)菌紗布里送檢。組織標(biāo)本可直接用于厭氧培養(yǎng)。經(jīng)支氣管鏡肺活檢的組織標(biāo)本患者平臥位，局部麻醉；入所選擇的亞段支氣管內(nèi)，穿過(guò)支氣管壁至病變區(qū)；緩?fù)顺?；將取出的組織放入2mL室。CTCT針的型號(hào)和長(zhǎng)度；保留針頭再次局部掃描確認(rèn)進(jìn)針深度和角度；達(dá)到預(yù)定位置后切割取材；切割獲得的（1.0～2.0）cm×0.1cm大小的組織標(biāo)本，放入2mL生理鹽水無(wú)菌容器內(nèi)送微生物實(shí)驗(yàn)室。放入10%甲醛固定液內(nèi)送病理科,甲醛處理后的標(biāo)本不能進(jìn)行微生物學(xué)檢查。心律植入裝置感染標(biāo)本（囊袋組織、贅生物、起搏器）取樣前不要應(yīng)用抗微生物藥物對(duì)囊袋內(nèi)進(jìn)行清創(chuàng)消毒。囊袋組織：打開囊袋后，用新更換的無(wú)菌工具取囊袋內(nèi)組織塊約2c㎡旋緊螺帽立即送檢。送培養(yǎng)。將術(shù)中拔除的起搏器和導(dǎo)線立即放入螺帽無(wú)菌容器中，送至實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。放入帶螺帽無(wú)菌容器中，加入可浸沒標(biāo)本的生理鹽水，旋緊螺帽立即送檢。中，全過(guò)程避免導(dǎo)線不慎觸到手術(shù)臺(tái)、患者皮膚等部位。關(guān)節(jié)假體周圍感染標(biāo)本（關(guān)節(jié)假體、關(guān)節(jié)液及假體周圍組織）關(guān)節(jié)液術(shù)前穿刺：患者仰臥于手術(shù)臺(tái)上，下肢半屈曲位。穿刺部位按或于髕骨下方，由髕韌帶旁向后穿刺達(dá)關(guān)節(jié)囊。術(shù)后用消毒紗布覆蓋穿刺部位，再用膠布固定。皮膚、皮下脂肪組織達(dá)關(guān)節(jié)囊，用注射器穿刺抽取關(guān)節(jié)液。假體術(shù)中穿刺抽取關(guān)節(jié)液后，取出假體，放置于塑料無(wú)菌容器中。假體周圍組織術(shù)中取假體后，更換手術(shù)刀采集4～5塊組織，分別置于不同的無(wú)菌小瓶中，并標(biāo)明每塊組織的部位或編號(hào)。注釋修術(shù)中同時(shí)送檢假體、假體周圍組織和關(guān)節(jié)液；術(shù)前普通關(guān)節(jié)液穿刺培養(yǎng)宜在停用抗微生物藥物2以提高培養(yǎng)陽(yáng)性率。尿液標(biāo)本導(dǎo)尿管尿液標(biāo)本采集直接導(dǎo)尿管尿液用肥皂水或清水清洗尿道口；無(wú)菌操作將導(dǎo)管通過(guò)尿道插入膀胱；棄去先流出的15mL酸轉(zhuǎn)運(yùn)管。采集留置導(dǎo)尿管尿液夾住導(dǎo)尿管10min～20min后，用75%酒精消毒導(dǎo)管采集部位；5mL～10mL將尿液轉(zhuǎn)入帶螺帽無(wú)菌容器或硼酸轉(zhuǎn)運(yùn)管。中段尿液用肥皂水或清水清洗外陰后，分開陰唇（女性），縮回包皮（男性），開始排尿；排出幾毫升后，不停止尿流，采集中段尿液。用于分子診斷的清晨首次尿液30mL基內(nèi)送檢。恥骨上膀胱穿刺尿液使用皮膚消毒劑消毒臍部至恥骨區(qū)域；待消毒劑徹底揮發(fā)后，麻醉穿刺部位（恥骨上2cm2）；20mL無(wú)菌操作將尿液轉(zhuǎn)入無(wú)菌容器內(nèi)送檢。嬰幼兒尿液的收集采樣人員用肥皂水或清水洗手；分開兒童雙腿；污染物；采用兒科尿液收集袋，移去膠條表面的隔離紙；膚上,固定收集袋于直腸與陰道之間的位置,避免來(lái)自肛門區(qū)域的污染；15min)；標(biāo)識(shí)等。若為穿刺尿液需注明是否進(jìn)行厭氧培養(yǎng)。類。注釋拒收導(dǎo)尿管和長(zhǎng)期留置導(dǎo)管的導(dǎo)管尿液；通常情況下，帶有留置管的患者48h～72h就會(huì)有定植菌，且常為多種細(xì)菌；中段尿液標(biāo)本不能進(jìn)行厭氧菌培養(yǎng)；僅在臨床申請(qǐng)時(shí)進(jìn)行厭氧培養(yǎng)；恥骨上穿刺尿液可避免尿液標(biāo)本被尿道或會(huì)陰部細(xì)菌污染。支氣管鏡標(biāo)本（方法2%利多卡因進(jìn)行局部麻醉?；颊呷フ硌雠P位，操作者站于患者頭側(cè)。用局部麻醉藥潤(rùn)滑患者兩個(gè)鼻孔及支氣管鏡，經(jīng)鼻或經(jīng)口（管插管或切開患者經(jīng)人工氣道）導(dǎo)入支氣管鏡。根據(jù)影像學(xué)或支氣管鏡下表現(xiàn)，選取病變段嚴(yán)重區(qū)域進(jìn)行灌洗或采樣。BALF末端連接無(wú)菌樣本采集杯和負(fù)壓吸引器。經(jīng)操作孔道分5次快速注入總量為60mL～100mL的37℃或室溫滅菌生理鹽水，每次灌入20mL～50mL（推薦小于-100mmHg10mLmL）到帶螺帽無(wú)菌容器中，立即送檢。注：每次回吸收量不低于灌入量的5%（總回收率以≥30%為宜）若每次的回收率均<5%，則要及時(shí)停止灌洗以免液體大量潴留于肺內(nèi)。兒科患者只能灌入（1ml～2=""ml）/kg，通常兒童的回收量不超過(guò)10=""ml，大于支氣管毛刷：將檢查用毛刷插入支氣管鏡，推進(jìn)毛刷直至推出護(hù)套，刷取標(biāo)本后將刷子抽回護(hù)套，取出整個(gè)毛刷，用無(wú)菌剪刀將刷子頭剪下，放入1mL泌物。操作結(jié)束后，迅速將支氣管鏡從氣道內(nèi)收回。注釋評(píng)估；支氣管毛刷標(biāo)本大概含有0.001mL到0.01mL的分泌物，為避1mLBALF麻醉劑可抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，也會(huì)影響標(biāo)本的質(zhì)量。痰咳痰向患者說(shuō)明痰和唾液的區(qū)別；帶假牙的患者摘掉假牙；請(qǐng)患者用清水漱口；指導(dǎo)患者用力咳出深部痰，勿將唾液和鼻后分泌物當(dāng)作痰送檢；立即蓋好蓋子并擰緊，立即送檢；最好選擇晨起漱口后，咳出的深部痰送檢。誘導(dǎo)痰當(dāng)咳嗽無(wú)痰或少痰時(shí)，可采集誘導(dǎo)痰；患者先刷牙（口腔粘膜、舌頭和牙齦），勿用牙膏；再用無(wú)菌水或生理鹽水漱口；3%NaCl約3mL～5mL；NaCl用無(wú)菌螺帽寬口容器收集誘導(dǎo)痰標(biāo)本。氣管吸引物通過(guò)氣管內(nèi)導(dǎo)管收集標(biāo)本。注釋真菌和分枝桿菌診斷宜連續(xù)采集多份痰標(biāo)本；痰標(biāo)本不能進(jìn)行厭氧培養(yǎng)；痰涂片革蘭染色鏡檢對(duì)痰培養(yǎng)結(jié)果具有參考價(jià)值。鼻咽拭子方法請(qǐng)患者頭部保持不動(dòng)，去除鼻前孔中表面的分泌物；通過(guò)鼻腔輕輕、緩緩插入拭子至鼻咽部；當(dāng)遇到阻力后即到達(dá)后鼻咽，停留數(shù)秒吸取分泌物；輕輕旋轉(zhuǎn)取出拭子，置于轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基中；旋緊管蓋；用于細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的拭子，插回采樣裝置或適宜的轉(zhuǎn)運(yùn)裝置中。注釋特菌、腦膜炎奈瑟菌。若懷疑百日咳鮑特菌感染，需提前通知實(shí)驗(yàn)室，準(zhǔn)備特殊的轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基（Regan-Lowe）。條件許可時(shí)可提供接種培養(yǎng)基，直接床旁接種后轉(zhuǎn)運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室。鼻咽拭子不能用于檢驗(yàn)鼻竇炎的病原菌?？谘适米臃椒ㄕ?qǐng)患者坐下，頭后傾，張大嘴，去除鼻前孔中表面的分泌物；后壁及扁桃體隱窩、側(cè)壁等處；3～5輕輕取出拭子，避免觸及舌頭、懸垂體、口腔粘膜和唾液；拭子插回采樣裝置中或適宜的轉(zhuǎn)運(yùn)裝置中。注釋對(duì)化膿性咽炎，口咽拭子細(xì)菌培養(yǎng)主要用于篩查A群β球菌和溶血隱秘桿菌；當(dāng)檢驗(yàn)口咽拭子中的淋病奈瑟菌時(shí)，臨床需提前告知實(shí)驗(yàn)室；對(duì)于兒科患者，宜常規(guī)報(bào)告流感嗜血桿菌；鼻咽拭子或鼻咽吸取物聯(lián)合檢驗(yàn)以提高呼吸道感染的病原檢出率。糞便標(biāo)本送檢原則在感染急性期采集腹瀉糞便標(biāo)本；排除一些病原體的攜帶狀態(tài)，需要連續(xù)3348h。方法糞便標(biāo)本中不宜混入尿液及其它異物，采集過(guò)程盡量無(wú)菌操作；用無(wú)菌竹簽挑取標(biāo)本中異常部分（有粘液、膿液和血液的部分2mL～5mL糞便懸液或2g～5g糞便標(biāo)本置于無(wú)菌螺帽容器中，立即送檢。標(biāo)識(shí)申請(qǐng)單上建議標(biāo)注特殊病史。標(biāo)本拒收干燥的拭子、含鋇糞便、黃軟成形便、干便或明顯污染的糞便；一天內(nèi)重復(fù)送檢的標(biāo)本；未使用運(yùn)輸培養(yǎng)基，采集后室溫條件下超過(guò)2h未送檢的糞便；使用運(yùn)輸培養(yǎng)基，4℃條件下保存超過(guò)48h或35℃條件下保24h注釋糞便標(biāo)本常規(guī)不進(jìn)行厭氧培養(yǎng)；結(jié)腸造口術(shù)和回腸造口術(shù)標(biāo)本的運(yùn)輸方式與糞便標(biāo)本相同；腸炎和發(fā)熱病人宜同時(shí)送檢血培養(yǎng)；下列腹瀉患者宜連續(xù)3天送檢標(biāo)本：社區(qū)獲得性腹瀉（或72h內(nèi)出現(xiàn)癥狀）。醫(yī)院獲得性腹瀉（入院72h后出現(xiàn)癥狀），且至少有下列情況之一：大于65歲并伴有基礎(chǔ)疾病、HIV感染、粒細(xì)胞缺乏癥（中性粒細(xì)胞＜0.5×109/L）及疑似院內(nèi)暴發(fā)感染時(shí)。直腸拭子和肛拭子送檢原則本檢驗(yàn)腹瀉病原菌；肛拭子不宜用于腹瀉病原菌培養(yǎng)；屬。如果懷疑其他細(xì)菌感染，宜先咨詢實(shí)驗(yàn)室。方法無(wú)菌棉拭子用生理鹽水濕潤(rùn)，輕輕地插入肛門括約肌上方（約6cm～7污染；種。標(biāo)識(shí)在申請(qǐng)單上標(biāo)注檢査的病原菌,尤其是懷疑淋病奈瑟菌感染時(shí)。注釋如果懷疑患者感染大腸埃希菌O157:H7氣單胞菌屬或鄰單胞菌屬，宜通知實(shí)驗(yàn)室；不宜使用拭子檢驗(yàn)艱難梭菌毒素。子宮頸內(nèi)或?qū)m頸標(biāo)本用溫鹽水濕潤(rùn)陰道窺器；使用陰道