貼壁培養(yǎng)與懸浮培養(yǎng)的區(qū)別

貼壁細(xì)胞培養(yǎng)與懸浮細(xì)胞培養(yǎng)的區(qū)別蔓荊子2013.11.08

概念細(xì)胞類(lèi)型接種方式培養(yǎng)條件細(xì)胞形態(tài)生長(zhǎng)過(guò)程傳代培養(yǎng)貼壁細(xì)胞培養(yǎng)：細(xì)胞貼附在一定的固相表面進(jìn)行的培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞培養(yǎng)：細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴(lài)于支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)。1概念2細(xì)胞類(lèi)型適合貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞：包括原代細(xì)胞在內(nèi)的大多數(shù)細(xì)胞類(lèi)型。主要包括正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞，比如成纖維細(xì)胞，骨骼組織（骨及軟骨），心肌與平滑肌、肝、肺、腎、乳腺皮膚神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，內(nèi)分泌細(xì)胞，黑色素細(xì)胞及各種腫瘤細(xì)胞等適合懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞：適應(yīng)懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞及無(wú)粘附的細(xì)胞。一些取自血、脾或骨髓的培養(yǎng)細(xì)胞，尤其是血液白細(xì)胞，淋巴細(xì)胞。植物細(xì)胞。3接種方式貼壁培養(yǎng)

PBS沖洗血液，去掉脂肪組織，切成小塊，消化液消化，培養(yǎng)液培養(yǎng)。植物細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)

由完整的植物器官分離單細(xì)胞

機(jī)械法酶解法

由愈傷組織分離單細(xì)胞水曲柳懸浮細(xì)胞系的建立1丁小萌，閆俊崎，周博，齊鳳慧。水曲柳愈傷組織誘導(dǎo)及懸浮細(xì)胞系的建立。中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2013,29（25）:21-25香花槐愈傷組織及懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞1胡海英，趙亞美，閻曉磊，王華芳。香花槐愈傷組織及細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)。北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007,29（5）:26-304培養(yǎng)條件貼壁細(xì)胞培養(yǎng)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)容器需要使用經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)處理的容器使用未經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)處理的容器，但需攪拌或搖晃設(shè)備貼壁細(xì)胞培養(yǎng)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)溫度人和哺乳動(dòng)物細(xì)胞系：36-37℃昆蟲(chóng)細(xì)胞系：27℃禽類(lèi)細(xì)胞系：38.5℃冷血?jiǎng)游铮?5-26℃植物懸浮細(xì)胞系：23-27℃pH哺乳動(dòng)物系：7.0-7.4成纖維細(xì)胞系：7.4-7.7植物細(xì)胞：5.6-6.0培養(yǎng)基需血清懸浮培養(yǎng)基可不需血清5細(xì)胞形態(tài)貼壁培養(yǎng)細(xì)胞：成纖維細(xì)胞型上皮細(xì)胞型游走細(xì)胞型多型細(xì)胞型懸浮培養(yǎng)細(xì)胞：懸浮型成纖維細(xì)胞型名稱(chēng)：凡在培養(yǎng)中形態(tài)與成纖維細(xì)胞類(lèi)似的。來(lái)源：由中胚層間充質(zhì)組織起源的組織如：真正的成纖維細(xì)胞，心肌，平滑肌，成骨細(xì)胞，血管內(nèi)皮。形態(tài)：似體內(nèi)成纖維細(xì)胞的形態(tài)，胞體梭形或不規(guī)則三角形，胞質(zhì)向外伸出2—3個(gè)長(zhǎng)短不等的突起，中有卵圓形核。生長(zhǎng)特點(diǎn)：排列成放射狀，漩渦狀，并不緊靠連成片，細(xì)胞—細(xì)胞接觸易斷開(kāi)而單獨(dú)行動(dòng)，游離的單獨(dú)的成纖維樣細(xì)胞，常有幾個(gè)伸長(zhǎng)的細(xì)胞突起。人心肌細(xì)胞人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞上皮細(xì)胞型名稱(chēng)：僅形態(tài)上似體內(nèi)，實(shí)際上不完全相同。來(lái)源：來(lái)源于外胚層、內(nèi)胚層細(xì)胞,如：皮膚及其衍生物,消化道，乳腺，肺泡,上皮性腫瘤。形態(tài)：類(lèi)似體內(nèi)的上皮細(xì)胞扁平，不規(guī)則多角形，中有圓形核。生長(zhǎng)特點(diǎn)：易相連成片，相靠—緊密相連—成薄層—鋪石狀生長(zhǎng)時(shí)呈膜狀移動(dòng)，很少脫離細(xì)胞群而單個(gè)活動(dòng)。人大腸上皮粘膜癌細(xì)胞人小氣道上皮細(xì)胞游走細(xì)胞型生長(zhǎng)特點(diǎn)：呈散在生長(zhǎng)，一般不連成片，胞質(zhì)常突起，呈活躍游走或變形運(yùn)動(dòng)，方向不規(guī)則。此型細(xì)胞不穩(wěn)定，有時(shí)難以和其他細(xì)胞相區(qū)別。小鼠腹腔分離的單核巨噬細(xì)胞多型細(xì)胞型生長(zhǎng)特點(diǎn)：有一些細(xì)胞，如神經(jīng)細(xì)胞難以確定其規(guī)律和穩(wěn)定的形態(tài)，可統(tǒng)歸于此類(lèi)。大鼠皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞胎鼠神經(jīng)干細(xì)胞皮層神經(jīng)細(xì)胞人PBMC細(xì)胞懸浮培養(yǎng)細(xì)胞淋巴母細(xì)胞T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞岷江百合細(xì)胞繼代4次后的文冠果細(xì)胞懸浮培養(yǎng)初期的棉花細(xì)胞分裂旺盛的胡蘿卜細(xì)胞1姜新超，劉春。岷江百合懸浮細(xì)胞系的建立及植株再生。園藝學(xué)報(bào)，2011,38（2）:327-3342劉磊，顧玉紅。文冠果懸浮細(xì)胞系建立及細(xì)胞生長(zhǎng)特性。林業(yè)科學(xué)，2011,46（9）：79-836生長(zhǎng)過(guò)程潛伏期：懸浮,胞質(zhì)回縮,全部細(xì)胞變?yōu)閳A球形。貼附底物。有運(yùn)動(dòng)活動(dòng),基本無(wú)增殖,少見(jiàn)分裂相。指數(shù)增長(zhǎng)期：是細(xì)胞增生最活躍、活力最旺盛的階段培養(yǎng)物中細(xì)胞數(shù)量呈指數(shù)增長(zhǎng),細(xì)胞群體均一。停滯期：細(xì)胞數(shù)量達(dá)飽和密度后，細(xì)胞遂停止增殖，進(jìn)入停滯期。7傳代培養(yǎng)貼壁細(xì)胞酶消化法傳代：棄去培養(yǎng)液，加胰酶消化，加培養(yǎng)液終止胰酶作用，離心，去上清，吹打成懸液，分裝傳代。懸浮細(xì)胞離心法傳代：離心，棄上清液，加新鮮培養(yǎng)基，分裝傳代。直接傳代法：待細(xì)胞沉淀，傾去1/3-2/3培養(yǎng)液，用吸管吹打形成細(xì)胞懸液再傳代。貼壁培養(yǎng)懸浮培養(yǎng)適合包括原代細(xì)胞在內(nèi)的大多數(shù)細(xì)胞類(lèi)型適合已適應(yīng)懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞以及其他一些無(wú)粘附性的細(xì)胞需要定期傳代，但是易于通過(guò)倒置顯微鏡觀(guān)察。顯微鏡下觀(guān)察形態(tài)多種?；蝿?dòng)培養(yǎng)液時(shí)，細(xì)胞不動(dòng)較易傳代，但是需要每天進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和存活率測(cè)定。顯微鏡下觀(guān)察呈圓形。晃動(dòng)培養(yǎng)液時(shí)，細(xì)胞也隨著漂動(dòng)利用酶或機(jī)械方法解離細(xì)胞無(wú)需通過(guò)酶或機(jī)械方法解離細(xì)胞需要使用經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)處理的容器