維生素類藥物分析

第十四章維生素類藥物的分析

Chapter14AnalysisofVitamins學(xué)習(xí)要求掌握VitA的鑒別和含量測定；VitC的鑒別、檢查和含量測定。熟悉VitB1的鑒別和含量測定；VitE的鑒別、檢查和含量測定。了解VitD的鑒別、檢查和含量測定。概述一、概念維生素1〕維持人體正常生理功能所必需的一類微量的生物活性物質(zhì)。2〕大多數(shù)人體內(nèi)不能自行合成,必須從食物中攝取。

VitA缺乏—夜盲癥

VitB1缺乏—腳氣病VitC缺乏—壞血病VitD缺乏—＊如果人體缺少某種維生素，就會(huì)引起維生素缺乏癥，而影響人體的正常生理機(jī)能。水溶性：VitA、D、E、K等VitB族（B1、B2、B6

、B12等）VitC

、煙酸、葉酸、煙酰胺、泛酸等脂溶性：二、分類－按溶解度結(jié)構(gòu)性質(zhì)VitA、D、E、B1、C鑒別試驗(yàn)雜質(zhì)檢查含量測定VitA1：視黃醇，生物活性最高VitA2：去氫維生素，活性是VA1的30-40%VitA3：去水維生素，活性是VA1的0.4%第一節(jié)維生素A的分析

AnalysisofvitaminA

VitA故通常所說的維生素A是指維生素A1。人工合成的VA醋酸酯結(jié)晶加精制植物油制成的油溶液，還有VA膠丸、VAD膠丸和VAD滴丸藥典收錄情況環(huán)己烯共軛多烯側(cè)鏈存在多種立體異構(gòu)化合物具有UV吸收1．化學(xué)結(jié)構(gòu)一．結(jié)構(gòu)與性質(zhì)CH2OR6543219'8'7'6'5'4'3'2'1'R=HVitA

醇VA1retinolR=—COCH3VitA

醋酸酯vitaminAacetateR=—COC15H31

VitA

棕櫚酸酯vitaminApalmitateCH2OR去氫VitA（A2，dehydroretinol）CH2去水VitA（A3，anhydroretinol）6個(gè)共軛雙鍵〔1〕環(huán)己烯+共軛多烯側(cè)鏈；5個(gè)雙鍵〔2〕存在多種立體異構(gòu)體，具有UV吸收天然VitA側(cè)鏈為全反式；〔3〕通常所說的維生素A是指維生素A1〔4〕天然來源為魚肝油，主要為醋酸酯和棕櫚酸酯。目前多為人工合成產(chǎn)物結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：〔二〕性質(zhì)Properties1溶解性2不穩(wěn)定性

3紫外吸收特性4與三氯化銻呈色＊不溶于水＊溶于乙醚，氯仿，異丙醇，環(huán)己烷，脂肪和油。1溶解性VA光、熱、氧化劑、氧氧化產(chǎn)物（無活性）2不穩(wěn)定性＊共軛多烯側(cè)鏈—性質(zhì)不穩(wěn)定.臨床用其醋酸酯或棕櫚酸酯的油溶液密封、涼暗處保存，充氮?dú)饣騾⒓涌寡鮿艟S生素A的氧化產(chǎn)物：無生物活性▲ⅰ．環(huán)氧化物▲

ⅱ．維生素A醛▲

ⅲ．維生素A酸CH2OHOCOOHCHOCH2OHO＊具有共軛多烯側(cè)鏈—紫外吸收。＊λmax=325～328nm，隨VA存在狀態(tài)以及所用的溶劑，最大吸收波長的位置有所不同鑒別、含量測定3紫外吸收特性★鑒別★含量測定4與SbCl3呈色—Carr-PriceVA藍(lán)色SbCl3CHCl3～紫紅色λmax

=620nm

a.

溶解性b.不穩(wěn)定性

c.紫外吸收特性

d.與SbCl3作用小結(jié).

維生素A結(jié)構(gòu)性質(zhì)CH2OR6543219'8'7'6'5'4'3'2'1'二、鑒別試驗(yàn)Carr-PriceUVTLCVitA(10～20IU/ml)藍(lán)色SbCl3/CHCl3～紫紅色無水/無醇〔一〕三氯化銻反響Carr-Price反應(yīng)機(jī)理：VA與三氯化銻(SbCl3)中存在的SbCl5作用形成不穩(wěn)定的藍(lán)色正碳離子。本卷須知：反響需在無水、無醇條件下進(jìn)行。溶劑：無水三氯化銻的無醇氯仿溶液乙醇可與正碳離子作用，使正電荷消失水可使SbCl3水解成SbOClVitA：5個(gè)共軛雙鍵，無水乙醇液λmax=326nmVitA2、A3：6個(gè)共軛雙鍵，紅移.〔二〕紫外分光光度法UV▲例：VA和其標(biāo)準(zhǔn)品用環(huán)己烷溶解展開劑：環(huán)己烷—乙醚〔8：2〕薄層板：硅膠G顯色劑：SbCl3T.S.現(xiàn)象：藍(lán)色斑點(diǎn)Rf：VA醇VA醋酸酯VA棕櫚酸酯目的：鑒別醇或酯，是醋酸酯或其他酸酯〔三〕薄層色譜法TLC三、含量測定1紫外-可見分光光度法2比色法3高效液相色譜法〔一〕紫外-可見分光光度法2005利用共軛多烯結(jié)構(gòu)，在325～328nm處有選擇性吸收峰（1）原因（2）原理（3）波長的選擇（4）測定方法方法：三點(diǎn)校正法——三波長測定法〔1〕原因?yàn)榱讼s質(zhì)〔相關(guān)物質(zhì)〕吸收所引起的誤差＊相關(guān)物質(zhì)—結(jié)構(gòu)相似,維生素A最大吸收波長附近也有吸收，對測定有影響。＊Morton和Stubbs等人在1946年提出了三點(diǎn)校正法。相關(guān)物質(zhì)的吸收＊d.

鯨醇：維生素A醇的二聚體，無生物活性＊a.

維生素A的衍生物（A2、A3）＊b.

維生素A的氧化產(chǎn)物＊c.

合成時(shí)的中間體＊e.

維生素A異構(gòu)體＊f.

稀釋用油〔2〕原理：假定、根據(jù)a:雜質(zhì)吸收在310nm～340nm范圍近似呈一條直線，隨λ↑,A↓b:物質(zhì)對光的吸收具有加和性A樣品=A維生素A+A相關(guān)物質(zhì)〔3〕波長的選擇2、3：分別在1兩側(cè)1：VitA的max?。炔ㄩL差法：ⅱ．等吸收比法：ⅰ．等波長差法：測VitA醋酸酯1=328nm;2=316nm;3=340nmii．等吸收比法：測VitA醇1=325nm;2=310nm;3=334nm*波長的選擇VA醋酸酯1=328nm2=316nm3=340nmⅰ．等波長差法：ⅱ．等吸收比法：

2、3：分別在1兩側(cè)1：VitA的maxVA醇1=325nm2=310nm3=334nm〔4〕測定方法收載有2種方法第一法（直接測定法）

測定對象

VA醋酸酯

等波長差法300、316、328、340、360nm325330波長：300、316、328、340、360nm測定：A0、A1、A2、A3、A4找到：λmax=328nm〔326～329〕在326~329nm，第一法測定。不在326~329nm，第二法測定。計(jì)算比值：A0/A2、A1/A2、A2/A2、A3/A2、A4/A2比較：①算吸光度比值差測定波長吸光度吸光度比值吸光度比值差計(jì)算值規(guī)定值300

0.555

316

0.907

(325)

328

1.000

(330)

340

0.811

360

0.299

②判斷最大吸收波長是否在326～329之間是否計(jì)算吸收度比值之差是否超過±0.02第二法（皂化）是否A328

-15%-3%03%

皂化

A328（校正）A328皂化1IU的VitA的維生素A醇的維生素A醋酸酯a:效價(jià)的定義：每g供試品中含有VitA的國際單位數(shù)。單位IU/g③計(jì)算1g維生素A醋酸酯=1g維生素A醇=換算因子（維生素A醋酸酯）=2907000/1530=1900換算因子（維生素A醇）=3330000/1820=1830b:換算因子的定義：單位數(shù)值所相當(dāng)?shù)男r(jià)C:求

A:A328校正

A328d:求效價(jià)e:求標(biāo)示量%小結(jié)：第一法〔直接測定法〕--VA醋酸酯①②判斷A328,A328校正④求效價(jià)⑤求③求：平均膠丸重為維生素A的標(biāo)示量為10000IU/丸取樣：→100ml，從中取出2ml→25ml.練習(xí)題：維生素A醋酸酯膠丸的含量測定求：維生素A醋酸酯的標(biāo)示百分含量。首先計(jì)算吸收度比值和吸收度比值差。由結(jié)果知，需計(jì)算校正吸收度。由此可知，應(yīng)該用測得的A328計(jì)算。第二法(皂化法)

測定對象VitA醇

等吸收比法300、310、325、334nm△皂化EtOH+KOH乙醚提取**樣品一定量水浴濃縮異丙醇溶介9～15IU/ml波長：300、310、325、334nm測定：A0、A1、A2、A3找到：λmax=325nm〔323~327〕在323~327nm，皂化法測定。不在323~327nm，色譜法純化。計(jì)算比值：A0/A2----A300/A325①算吸光度比值②判斷吸光度比值是否≤A325校正=6.815A325－2.555A310－4.260A334最大吸收波長是否在323～327之間是否A300/A325是否≤色譜法純化是否A325校正32531033403%－3%A325校正A325校正A325③求效價(jià)④⑤小結(jié)：測定方法第一法VA醋酸酯第二法VA醇λ323～327nm

A300/A325λ326～329nm之間

超否A328±3%之間：A328-15%～-3%：A328校正<-15%或>+3%:皂化法±3%之間：A325<-3%或>+3%:A325校正色譜法A328校正〔2A328－A316－A340〕A325校正325310334③求①判斷A②④小結(jié):VitA紫外分光光度法2005方法：三點(diǎn)校正法——三波長測定法2、3：在1兩側(cè)ⅰ．等波長差法：ⅱ．等吸收比法：

1：VitA的max〔1〕原因：消除雜質(zhì)吸收所引起的誤差a:雜質(zhì)吸收在310nm-340nm范圍近似呈一條直線，隨λ↑,A↓b:物質(zhì)對光的吸收具有加和性〔2〕原理〔3〕波長的選擇〔4〕測定方法〔二〕三氯化銻比色法〔三〕高效液相色譜法思考題1、三點(diǎn)校正紫外分光光度法測定維生素A含量的依據(jù)〔原理〕是什么？2、三點(diǎn)校正紫外分光光度法測定維生素A醋酸酯含量時(shí)，換算因子是多少？寫出測定其膠丸含量時(shí)標(biāo)示量%的計(jì)算式。3、將維生素A溶于無水乙醇-鹽酸溶液中，測定紫外吸收光譜，在326nm波長處有一吸收峰，而將此液置水浴上加熱，冷卻后，在300-400nm范圍內(nèi)出現(xiàn)3個(gè)吸收峰，這是為什么？小結(jié)：VitA的分析

a.

紫外吸收特性b.溶解性

c.不穩(wěn)定性d.與SbCl3作用結(jié)構(gòu)性質(zhì)鑒別試驗(yàn)含量測定CH2OR6543219'8'7'6'5'4'3'2'1'Carr-Price、UV、TLC紫外-可見分光光度法三氯化銻比色法高效液相色譜法維生素A含量用生物效價(jià)表示，其效價(jià)單位是

A、IUB、gC、mlD、IU/gE、IU/ml每單位維生素A相當(dāng)于維生素A醋酸酯g，其=1530，那么換算因數(shù)等于A、1820B、1830C、1900D、1920E、無法計(jì)算計(jì)算維生素A吸收度的校正公式為A328(校正后)=3.52(2A328-A316-A340)。如果校正后的吸收度與未校正的吸收度之差對未經(jīng)校正吸收度的百分比為-3.2%，那么應(yīng)A、用皂化法測定B、用校正后的吸收度計(jì)算含量C、用未校正的吸收度計(jì)算含量D、改用另一校正公式計(jì)算E、以上都不對維生素A的鑒別試驗(yàn)為A、三氯化鐵反響B(tài)、硫酸銻反響C、2,6-二氯靛酚反響D、三氯化銻反響E、間二硝基苯的堿性乙醇液反響維生素A具有易被紫外光裂解、易被空氣中氧或氧化劑氧化等性質(zhì)，是由于分子中含有〔〕A、環(huán)已烯基B、2,6,6-三甲基環(huán)已烯基C、伯醇基D、乙醇基E、共軛多烯醇側(cè)鏈E哪些描述適合VitA結(jié)構(gòu)及性質(zhì)

A、分子具有長二烯醇側(cè)鏈，易被氧化

B、具有較長的全反式共軛多烯結(jié)構(gòu)

C.含酯鍵，經(jīng)水解后產(chǎn)生苯并二氫吡喃衍生物，易被氧化

D.與三氯化銻的無醇氯仿液中呈不穩(wěn)定蘭色，很快轉(zhuǎn)變?yōu)樽霞t色

E、樣品用無水乙醇溶解后，加硝酸加后，呈橙紅色中國藥典〔2000年版〕規(guī)定維生素A的測定采用紫外分光光度〔三點(diǎn)校正法〕，此法又稱為A、等波長差法B、等吸收比法C、6/7A法D、差示分光光度法E、雙波長分光光度法用“三點(diǎn)校正法〞測定維生素A含量的依據(jù)是A、維生素A可見光區(qū)有最大吸收B、雜質(zhì)在310～340nm波長范圍內(nèi)呈線性吸收C、物質(zhì)對光吸收具加和性D、維生素A與三氯化銻的無水氯仿溶液作用，產(chǎn)生不穩(wěn)定藍(lán)色E、維生素A在堿性溶液中，可被鐵氰化鉀氧化生成具有藍(lán)色熒光的硫色素第二節(jié)維生素B1的分析

AnalysisofvitaminB1氨基嘧啶環(huán)噻唑環(huán)(季銨堿)一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)NNH3CNH2NSCH3CH2CH2OH+

H-

ClCl

·CH2還原性堿性酸性1、結(jié)構(gòu)(鹽酸硫胺)2、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)a.氨基嘧啶—亞甲基—噻唑環(huán)季銨化合物b.堿性基團(tuán)：嘧啶環(huán)上的氨基噻唑環(huán)上的季銨可與酸成鹽（一）、溶解性1、易溶于水2、水溶液呈酸性（二）、UVHCl(9→1000)λmax=246nm（三）、硫色素反應(yīng)硫色素OH-O藍(lán)色熒光VitB1正丁醇3、性質(zhì)（四）、沉淀反應(yīng)嘧啶環(huán)噻唑環(huán)生物堿沉淀劑沉淀〔五〕、具有兩個(gè)堿性基團(tuán)，可以和酸成鹽?！邕颦h(huán)上的季銨▲嘧啶環(huán)上的氨基（六）、氯化物特性呈氯化物的反應(yīng)，用于鑒別（七）、硫化物特性VitB1Pb2+OH-△PbS↓二、鑒別試驗(yàn)

（一）硫色素反應(yīng)Ch.P（2005）熒光消失正丁醇藍(lán)色熒光H+OH-硫色素鐵氰化鉀K3Fe(CN)6維生素????+-OH1BVB1專屬反響，用于鑒別和含量測定?！踩称渌错慡元素反響Cl-反響小結(jié)：VitB1鑒別試驗(yàn)O硫色素OH-藍(lán)色熒光VitB1正丁醇嘧啶環(huán)噻唑環(huán)生物堿沉淀劑沉淀Cl-反響NaOHPb(NO3)2△PbSS元素反響HNO3AgNO3AgCl↓〔一〕硫色素反響〔2005〕〔二〕沉淀反響〔三〕其他反響Cl2↑MnO2H+

KI-淀粉

藍(lán)色

三、含量測定非水滴定法〔2005測原料藥〕紫外分光光度法〔2005測制劑〕硫色素?zé)晒夥ü桄u酸重量法〔一〕非水堿量法VitB1原料醋酸汞：可與氫鹵酸鹽生成鹵化汞，消除氫鹵酸鹽的干擾1、原理VitB12HClO4冰醋酸Hg(Ac)2

VitB1·ClO4·HClO4溶劑：冰醋酸指示劑：ChP以喹那啶紅-亞甲藍(lán)〔紫紅→天藍(lán)〕滴定劑：高氯酸(0.1mol/L)醋酸汞：消除氫鹵酸鹽的干擾需要做空白試驗(yàn)?zāi)柋龋?：22、方法3、計(jì)算要求：≥99.0%〔二〕UV法VitB1片劑、注射劑1、原理共軛體pH=2HCl(9→1000)

λmax=246nm2、計(jì)算VitB1片：90.0%～110.0%VitB1注射液：93.0%～107.0%〔三〕硫色素?zé)晒夥é薳x=365nm,λem=435nm〔四〕硅鎢酸重量法2VB1＋硅鎢酸白色沉淀＋4HCl1、原理2VB1的分子量為2×337.27沉淀的分子量為3479.222、計(jì)算換算因數(shù)=0.1939（含義：1g沉淀相當(dāng)于0.1939gVB1）鑒別試驗(yàn)：硫色素反響、沉淀反響、其他反響含量測定非水堿量法、UV法、硫色素?zé)晒夥ā⒐桄u酸重量法小結(jié)：VitB1的分析NNH3CNH2NSCH3CH2CH2OH+

H-

ClCl

·CH2能發(fā)生硫色素特征反響的藥物A、維生素AB、維生素B1C、維生素CD、維生素EE、煙酸以下藥物的堿性溶液，參加鐵氰化鉀后，再加正丁醇，顯藍(lán)色熒光是A、維生素AB、維生素B1C、維生素CD、維生素DE、維生素E烯二醇強(qiáng)還原性酸性L－抗壞血酸一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)第三節(jié)維生素C的分析

內(nèi)酯環(huán)水解手性CUV與糖類結(jié)構(gòu)相似Vc易溶于水，水溶液呈酸性；三氯甲烷中不溶〔一〕溶解性（二）烯二醇結(jié)構(gòu)－還原性、酸性強(qiáng)還原性酸性一元酸由于共軛效應(yīng)的影響C3－OHpKaC2－OHpKa可與NaHCO3生成鈉鹽〔三〕手性C〔C4、C5〕旋光性

比旋度0～0OOHHOO

COHHCH2OH123456**L(+)－抗壞血酸〔活性最高〕D(-)－異抗壞血酸〔5%〕L(+)－異抗壞血酸〔無活性〕D(-)－抗壞血酸〔無活性〕ＮaOH酮酸鹽〔四〕內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)水解性Ｎa2CO3單鈉鹽〔五〕與糖類結(jié)構(gòu)相似具有糖的性質(zhì)50℃（六）共軛雙鍵UV二、鑒別試驗(yàn)IdentifactionTests

（一）與氧化劑反應(yīng)（強(qiáng)還原性）1、與AgNO3反響2005VitC2,6—二氯靛酚玫瑰紅色～無色2、與2,6—二氯靛酚反應(yīng)

Ch.P20053、與其他氧化劑的反響碘或高錳酸鉀堿性酒石酸酮磷鉬酸→Cu2O↓磚紅色→鉬藍(lán)→試劑褪色〔二〕糖類的反響VitC三氯醋酸戊糖50℃

吡咯水解、脫羧脫水糠醛〔三〕UV〔BP〕VitCH+0.01mol/LHClλmax=243nm小結(jié)：VitC的鑒別試驗(yàn)〔一〕與氧化劑反響〔強(qiáng)復(fù)原性〕1、與AgNO3反響20052、與2,6—二氯靛酚反響20053、與其他氧化劑的反響〔二〕糖類的反響〔三〕UVHClλmax=243nm溶液的澄清度與顏色鐵、銅離子的檢查三、雜質(zhì)檢查1、溶液的澄清度與顏色：

有色雜質(zhì)：VitCPH、光線、空氣、溫度糠醛檢查方法分光光度法原料:溶液應(yīng)澄清無色

420nm，A<0.03注射劑：420nm，A<0.06片劑：440nm，A<0.072、鐵、銅離子的檢查方法：原子吸收分光光度法供試品+標(biāo)準(zhǔn)溶液a供試品b合格b＜

a-b標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸收Fe：Cu：〔一〕碘量法2005原料、片劑、注射液〔二〕2，6-二氯靛酚反響USPJP四、含量測定〔一〕碘量法〔原料、片劑、注射液〕1、原理指示劑淀粉指示液

(無色→藍(lán)色）反應(yīng)摩爾比1∶12、方法取本品約，精密稱定，加新沸過的冷水100ml與稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘〔〕滴定，至溶液顯藍(lán)色，在30秒內(nèi)不褪。每1ml碘液(0.05mol/L)相當(dāng)于的C6H8O6。3、討論C、立即滴定減少O2的干擾A、新沸冷水趕走水中O2B、酸性環(huán)境稀醋酸減慢VitC被O2氧化速度D、附加劑干擾的排除VitC注射液—消除抗氧劑的干擾VitC注射液測定前要加丙酮NaHSO3抗氧劑COCH3CH3COH33CHCHNaSO34、計(jì)算原料藥：≥99.0%

注射劑：90.0%～110.0%

片劑：93.0%～107.0%

鑒別試驗(yàn)：硫色素反響、沉淀反響、其他反響含量測定非水堿量法、UV法、硫色素?zé)晒夥?、硅鎢酸重量法小結(jié)：VitB1的分析NNH3CNH2NSCH3CH2CH2OH+

H-

ClCl

·CH2〔二〕2,6—二氯靛酚滴定法1、原理USPJP2,6-二氯靛酚VitC酚亞胺H+

2、方法樣品空白HPO3-HAc二氯靛酚液V樣V空白自身指示終點(diǎn)法：玫瑰紅色，持續(xù)5秒不褪〔1〕酸性環(huán)境HPO3-HAc穩(wěn)定VitC〔2〕快速滴定2min內(nèi)防止其他復(fù)原性物質(zhì)干擾〔3〕測定對象：VC制劑及食品分析3、討論discuss

〔4〕缺點(diǎn)2,6－二氯靛酚不穩(wěn)定需經(jīng)常標(biāo)定貯存≤一周干擾多氧化能力強(qiáng)小結(jié)：VitC的分析L－抗壞血酸溶解性強(qiáng)復(fù)原性酸性旋光性水解性糖的性質(zhì)UV與氧化劑反響糖類的反響UV溶液的澄清度與顏色鐵、銅離子的檢查碘量法2,6—二氯靛酚滴定法鑒別雜質(zhì)檢查含量測定維生素C的鑒別反響是A.與硝酸銀反響B(tài).與2，6-二氯靛酚反響C.與三氯化鐵反響D.與茚三酮反響E.與碘化汞鉀反響測定維生素C注射液的含量時(shí),在操作過程中要參加丙酮，這是為了A、保持維生素C的穩(wěn)定B、增加維生素C的溶解度C、使反響完全D、加快反響速度E、消除注射液中抗氧劑的干擾使用碘量法測定維生素C的含量，維生素C的分子量為，每1ml碘滴定液(0.05mol/L)，相當(dāng)于維生素C的量為

E.1.761mg碘量法測定維生素C含量，取本品，加新沸過的冷水100ml與稀醋酸10ml至溶液中，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液(0.05mol/L)滴定，使溶液顯藍(lán)色并在30s內(nèi)不退，消耗碘溶液。維生素C的分子量為，求維生素C含量98.1%B.98.9%C.98.5%D.50.8%E.88.1%可發(fā)生以下反響或現(xiàn)象的藥物為A、維生素B1(鹽酸硫胺)B、維生素CC、兩者均能D、兩者均不能121、與碘化汞鉀生成黃色沉淀122、麥芽酚反響123、在乙醚中不溶124、與2,6-二氯靛酚反響使顏色消失125、硫色素反響ADCBA第五節(jié)維生素E的分析

AnalysisofvitaminE苯并二氫吡喃醇〔一〕、結(jié)構(gòu)一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)名稱R1R2生物活性α-生育酚β-生育酚γ-生育酚δ-生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.00.50.20.1√1OCH3R2HORCH3CH3CH3CH3CH3維生素EOCH3R2OR1COCH3CH3CH3CH3CH3CH3母核：苯并二氫吡喃醇衍生物苯環(huán)上有一乙?；姆恿u基名稱：合成型dl—α—生育酚醋酸酯√天然型d—α—生育酚醋酸酯√側(cè)鏈：脂肪烷烴〔二〕、性質(zhì)1、溶解性—脂溶性2、UV—芳環(huán)3、水解性—乙?；姆恿u基H+orOH-△VitE生育酚[O]醌型化合物雜質(zhì)，需檢查二、鑒別試驗(yàn)1、硝酸反響(2005)橙紅色75℃15’生育紅生育酚?????????]O[HNO3VitE2.三氯化鐵－聯(lián)吡啶反響生育醌+Fe2+Fe3+聯(lián)吡啶血紅色生育酚（乙醚層）????KOHVitE3.UV法溶劑：無水乙醇濃度：0.01%

λmax

=284nm

λmin

=254nm4.TLC法薄層板硅膠G展開劑環(huán)己烷－乙醚〔4：1〕顯色劑硫酸〔105℃，5min〕VitERfα-生育酚Rfα-生育醌Rf小結(jié)：VitE的鑒別試驗(yàn)〔一〕硝酸反響

〔二〕三氯化鐵反響〔三〕UV〔四〕TLC75℃15’生育紅生育酚?????????]O[HNO3VitE聯(lián)吡啶血紅色生育醌+Fe2+Fe3+生育酚KOHVitE酸度游離生育酚三、雜質(zhì)檢查1、酸度---游離醋酸以NaOH滴定液〔〕體積控制；酚酞指示劑；樣品不得超過。2、游離生育酚的檢查生育酚

+2Ce4+

→2Ce3++對－生育醌原理：硫酸鈰滴定液(0.01mol/L)≤1.0ml指示劑：二苯胺（亮黃→灰紫）反應(yīng)摩爾比1:2例：取本品0.10g,加無水乙醇5ml溶解后，加二苯胺試液1滴，用硫酸鈰液(0.01mol/L)滴定，消耗硫酸鈰液不得過，求限量？四、含量測定〔Assay〕〔一〕GCChP(2005)(法定方法)1、特點(diǎn)選擇性好靈敏度高速度快別離效能好n≥500R≥2載氣：N2固定相：硅酮（OV—17）擔(dān)體：硅藻土或高分子多孔小球柱溫：265℃檢測器：氫火焰離子化檢測器（FID）內(nèi)標(biāo)物：正三十二烷2、色譜條件3、方法--內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)物是樣品中不存在的物質(zhì)與被測組分峰靠近能與各組分完全分離與被測組分的量接近內(nèi)標(biāo)法供試液：樣品+內(nèi)標(biāo)對照液：對照品+內(nèi)標(biāo)校正因子：〔二〕ＨＰＬＣｄｌ－生育酚外標(biāo)法此外，還有比色法、鈰量法、熒光法鑒別試驗(yàn)：硝酸反響、三氯化鐵－聯(lián)吡啶、UV法、TLC法雜質(zhì)檢查：酸度、游離生育酚含量測定：GC法、HPLC法小結(jié)：VitE的分析檢查維生素E中的游離酚時(shí)，采用方法應(yīng)為

A、對照法

B、靈敏度法

C、紫外分光法

D、滴定法

E、旋光法中國藥典采用氣相色譜法測定維生素E含量，內(nèi)標(biāo)物質(zhì)為

A、正二十二烷

B、正二十六烷

C、正三十烷

D、正三十二烷

E、正三十六烷用氣相色譜法測定維生素E的含量，中國藥典〔2005年版〕規(guī)定采用的檢測器為A.紫外檢測定器B.熒光檢測定器C.熱導(dǎo)檢測器D.氫火焰離子化檢測器維生素E的鑒別試驗(yàn)有A、硫色素反響B(tài)、硝酸氧化呈色反響C、硫酸-乙醇呈色反響D、堿性水解后加三氯化鐵乙醇液與2,2-聯(lián)吡啶乙醇液呈色反響E、Marquis反響維生素D是一類抗佝僂病維生素的總稱。目前的維生素D類物質(zhì)至少有十種之多，它們都是甾醇的衍生物。第四節(jié)維生素D的分析

維生素D2、D3原料藥維生素D2膠丸和注射劑維生素D3注射劑藥典收錄情況一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)VD2—骨化醇或麥角骨化醇VD3－膽骨化醇比VD2少一個(gè)雙鍵，C24上少一個(gè)CH31、溶解性－脂溶性2、開環(huán)的甾體－具有甾體的顯色反響3、手性C原子－具有旋光性VD2：6個(gè)手性碳，VD3：5個(gè)手性碳

4、多烯－不穩(wěn)定性具有紫外吸收二、鑒別試驗(yàn)

(IdentifactionTests)(一)顯色反響醋酐-濃硫酸反響2.三氯化銻反響3.其它D2：黃→紅→紫→綠D3：黃→紅→紫→藍(lán)綠→綠橙紅色～粉紅色D+三氯化鐵D+二氯丙醇和乙酰氯橙黃色綠色(二)比旋度測定本卷須知：應(yīng)于容器開啟30分鐘內(nèi)取樣在溶液配制后30分鐘內(nèi)測定(三)區(qū)分反響S+85%硫酸→D2顯紅色，λmax=570nmD3顯黃色，λmax=495nm(四)其他方法TLC、HPLC、制備衍生物測熔點(diǎn)三、雜質(zhì)檢查(一)麥角甾醇的檢查:

樣品溶液加洋地黃皂苷溶液，混合，放置18h不得發(fā)生混濁或沉淀。(二)前維生素D的光照產(chǎn)物四、含量測定方法〔Assay〕Ch.P(2005版)采用正相高效液相色譜法測定維生素D的含量，定量方法為內(nèi)標(biāo)法，內(nèi)標(biāo)物為鄰苯二甲酸二甲酯，該法分為三個(gè)方法。固定相：硅膠流動(dòng)相：正己烷－正戊醇〔997：3〕第一法：用于無VitA醇及其它雜質(zhì)干擾的情況第二法：用于有雜質(zhì)干擾的情況皂化提取→凈化處理→測定第三法：用于經(jīng)第二法處理后仍有雜質(zhì)干擾的情況供試品→按第二法凈化處理→水浴加熱用碘量法測維生素C含量時(shí)，加新煮沸放冷的蒸餾水目的是：〔〕A、使維生素C溶解B、除去水中微生物的影響C、使終點(diǎn)敏銳D、除去水中二氧化碳的影響E、消除水中溶解氧的影響維生素C能與硝酸銀試液反響生成去氫抗壞血酸和金屬銀黑色沉淀，是因?yàn)榉肿又泻小病矨、環(huán)已烯基B、伯醇基C、仲醇基D、二烯醇基E、環(huán)氧基維生素C一般表現(xiàn)為一元酸，是由于分子中〔〕A、C2上的羥基B、C3上的羥基C、C6上的羥基D、二烯醇基E、環(huán)氧基中國藥典測定維生素E含量的方法為A、氣相色譜法B、高效液相色譜法C、碘量法D、熒光分光光度法E、紫外分光光度法以下藥物的堿性溶液，參加鐵氰化鉀后，再加正丁醇，顯藍(lán)色熒光的是〔〕A、維生素AB、維生素B1C、維生素CD、維生素DE、維生素E－二氯靛酚法測定維生素C含量，終點(diǎn)時(shí)溶液〔〕A、由紅色→無色B、由藍(lán)色→無色C、由無色→紅色D、由無色→藍(lán)色E、由紅色→藍(lán)色需檢查特殊雜質(zhì)游離生育酚的藥物是A、維生素AB、維生素B1C、維生素CD、維生素EE、維生素D紫外法測定維生素A含量，測