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枯草芽孢桿菌的分離篩選微生物設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)第六組1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?實(shí)驗(yàn)原理配方:牛肉膏1.0g蛋白胨2.0g氯化鈉1.0g可溶性淀粉2.0g瓊脂4.0g蒸餾水200ml調(diào)整PH值至7.23.1選擇培養(yǎng)基本次實(shí)驗(yàn)進(jìn)行產(chǎn)淀粉酶的枯草芽孢桿菌的篩選,所以應(yīng)選淀粉培養(yǎng)基。配置時(shí)應(yīng)先把淀粉用少量蒸餾水調(diào)成糊狀,再加入到融化好的培養(yǎng)基中。
3實(shí)驗(yàn)材料3.2溶液或試劑牛肉膏蛋白胨氯化鈉可溶性淀粉瓊脂碘
碘原液碘化鉀可溶性淀粉磷酸氫二鈉檸檬酸氯化鈷重酪酸鉀0.01NHCL3.3儀器或設(shè)備平板培養(yǎng)皿試管三角瓶燒杯稱量紙高壓蒸汽滅菌鍋干燥箱無菌吸管無菌培養(yǎng)皿酒精燈接種鉤滴管
4實(shí)驗(yàn)步驟1制備土壤稀釋液選好采樣點(diǎn),去土表面5cm,去5-15cm處,用無菌器具規(guī)范采樣幾十克。記錄采樣時(shí)間,地點(diǎn)環(huán)境等,以備考證。采樣后應(yīng)盡快分離。使土樣與水分充分混合,將細(xì)胞分散,放入99ml無菌水三角瓶中,80度水浴處理1小時(shí)候取出。用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,然后從該試管中吸取1ml加入另一盛有9ml無菌水試管中,以此類推。制成五分不同稀釋度的土壤溶液。2涂布
將上述每種培養(yǎng)基的三個(gè)平板底面分別用記號(hào)筆寫上3、4、5、三個(gè)稀釋度,然后分別由3、4、5三管土壤稀釋液中各吸取0.2ml,小心的滴在對(duì)應(yīng)的平板培養(yǎng)基表面中央位置。用無菌涂布器涂布,均勻分布,在室溫下靜置5—10分鐘,使菌液浸入培養(yǎng)基。3培養(yǎng)
將淀粉培養(yǎng)基平板倒置于30攝氏度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)1-3d4初篩
觀察菌落表面粗糙不透明,呈污白色或微黃色,將這樣的菌種單個(gè)菌落分別挑取少許細(xì)胞接種到培養(yǎng)基上,置于30度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),若發(fā)現(xiàn)有雜菌,需要再進(jìn)行分離純化。(若果不能用肉眼更好的觀察,可以對(duì)其進(jìn)行革蘭氏染色,在顯微鏡下觀察,與標(biāo)準(zhǔn)菌種比較)5復(fù)篩測(cè)定淀粉酶活2方法步驟7結(jié)果分
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