流感病毒RT-PCR檢測方法培訓課件

呼吸道標本采集、運送及保存

北京市CDC傳地所石偉先

2009年9月21日呼吸道標本采集、運送及保存北京市CDC傳地所1標本采集采集時間----何時采采集種類----采什么采集方法----怎么采標本采集采集時間----何時采2標本的種類首選標本上呼吸道標本咽后壁拭子

鼻咽拭子

下呼吸道標本:氣管吸取液或肺泡灌洗液

血樣:血清(急性期和恢復期血清)。標本的種類首選標本3標本的采集時限

癥狀出現后盡早采集盡量在抗病毒藥物使用前采集即使癥狀出現1周后也要采集可能的情況下多天多次采集

標本的采集時限4標本的采集方法1.準備采集物品包2.如何采集標本標本的采集方法5采集物品包裝好VTM的樣品采集管聚酯纖維拭子痰或粘液吸取管壓舌板采樣杯或平皿吸管其它樣品管冰袋PPE防水的Marker筆,用于標本的標記采集物品包裝好VTM的樣品采集管其它樣品管6病毒運輸液(VTM)用于咽拭和鼻拭的VTM:MEM、EMEM、DMEMPH7.4-7.6Hank’s慶大霉素(終濃度為1mg/ml)兩性霉素B(終濃度為2μg/ml)在無菌的帶螺旋塑料管分裝2-3mlVTM。最好儲存在:–20℃,4℃可放48–96h,室溫1–2天。病毒運輸液(VTM)用于咽拭和鼻拭的VTM:7個人防護設備（PPE）口罩(N-95orN/P/R-100)手套帽子鞋套防護服(gownorapron)個人防護設備（PPE）口罩(N-95orN/P/R-18如何采集樣本如何采集樣本91.咽拭子容易操作請病人盡量把嘴張開當拭子觸及咽后壁時病人不要往后躲，應該抵住1.咽拭子容易操作10病毒采樣盒咽拭子器具病毒采樣盒咽拭子器具11咽拭子咽拭子12標本采集方法—咽拭子干采用2根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子同時擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，將拭子頭浸入含3ml采樣液的螺口管中，尾部棄去，旋緊管蓋。標本采集方法—咽拭子干采13例子correctwrong例子correctwrong14標本采集方法—鼻拭子將1根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子輕輕插入鼻道內鼻腭處，停留片刻后緩慢轉動退出。取另一根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子以同樣的方法采集另一側鼻孔。上述兩根拭子浸入同一含3ml采樣液的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。標本采集方法—鼻拭子將1根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子輕輕插入鼻153.鼻咽吸取液的收集

1.將吸液管與真空泵相連2.將軟管與上腭平行插入鼻孔3.使用真空泵4.緩慢的移出同時輕輕旋轉5.使用同一個管子采集另一鼻孔的液體6.收集的液體用3mlVTM沖洗出，放入采樣管中3.鼻咽吸取液的收集 1.將吸液管與真空泵相連16標記樣品被采樣者的信息樣品采集的日期樣品采集的部位樣本編號采集單位標記樣品17如何保存樣品VTM中保存的樣品盡快運到實驗室48小時內可以檢測的可以保存在4℃，超過48小時-70℃凍存。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存應在-70℃溫度以下，不要凍存于-20℃，會降低流感病毒的檢出率。避免反復凍融冰上一周也比凍融一次要好如何保存樣品VTM中保存的樣品18標本的包裝和運輸標本的包裝和運輸19

疑似人感染甲型H1N1流感感染病例列為A類，用UN2814包裝運輸—《甲型H1N1流感監(jiān)測方案》附錄3《甲型H1N1流感病毒實驗室檢測技術方案》2009年5月11日疑似人感染甲型H1N1流感感染病例列為A類，用UN2820IATA對感染性物質的運輸分類A類指人感染后發(fā)病的可能性大，傳染性強，對人群危害性大的烈性感染性物質。高度懷疑具有嚴重危害性的感染性物質也屬于A類。A類感染性物質感染性物質[聯合國編號UN2814和UN2900(只導致動物致病)]采用PI602包裝要求。A類之外，僅具有一般危險性，引起感染的機會較少的感染性物質為B類(聯合國編號UN3373),采用PI650包裝要求。IATA對感染性物質的運輸分類A類指人感染后發(fā)病的可能性大，21感染性物質運輸的包裝系統(tǒng)三層包裝系統(tǒng)：內層容器，中層包裝外層包裝。

感染性物質運輸的包裝系統(tǒng)22基本包裝內層容器(裝有樣本)中層包裝(含吸水性材料)外層包裝基本包裝內層容器(裝有樣本)23內層容器標記合適的材料封口防漏防滲裹以軟墊或分隔多個內層容器，防止碰撞破碎內層容器標記24中層包裝包含裹有軟墊的內層容器吸水性材料防漏防滲中層包裝包含25外層包裝放入中層容器內容物名細單封箱外層包裝放入中層容器26標識標識27CategoryAINFECTIOUSSUBSTANCEIncaseofdamageorleakageImmediatelynotifyPublicHealthauthorityCategoryAINFECTIOUSSUBSTANCE28流感病毒RT-PCR檢測方法培訓課件29流感樣品的運輸采集的標本若不能在24小時內送達，則應盡快在－70℃以下保存。無－70℃條件的需在－20℃冰箱短時間暫存，并盡快聯系遞送標本。標本需由專人運送，不得郵寄，最好使用專車。流感樣品的運輸采集的標本若不能在24小時內送達，則30謝謝!謝謝!31演講完畢，謝謝觀看！演講完畢，謝謝觀看！32呼吸道標本采集、運送及保存

北京市CDC傳地所石偉先

2009年9月21日呼吸道標本采集、運送及保存北京市CDC傳地所33標本采集采集時間----何時采采集種類----采什么采集方法----怎么采標本采集采集時間----何時采34標本的種類首選標本上呼吸道標本咽后壁拭子

鼻咽拭子

下呼吸道標本:氣管吸取液或肺泡灌洗液

血樣:血清(急性期和恢復期血清)。標本的種類首選標本35標本的采集時限

癥狀出現后盡早采集盡量在抗病毒藥物使用前采集即使癥狀出現1周后也要采集可能的情況下多天多次采集

標本的采集時限36標本的采集方法1.準備采集物品包2.如何采集標本標本的采集方法37采集物品包裝好VTM的樣品采集管聚酯纖維拭子痰或粘液吸取管壓舌板采樣杯或平皿吸管其它樣品管冰袋PPE防水的Marker筆,用于標本的標記采集物品包裝好VTM的樣品采集管其它樣品管38病毒運輸液(VTM)用于咽拭和鼻拭的VTM:MEM、EMEM、DMEMPH7.4-7.6Hank’s慶大霉素(終濃度為1mg/ml)兩性霉素B(終濃度為2μg/ml)在無菌的帶螺旋塑料管分裝2-3mlVTM。最好儲存在:–20℃,4℃可放48–96h,室溫1–2天。病毒運輸液(VTM)用于咽拭和鼻拭的VTM:39個人防護設備（PPE）口罩(N-95orN/P/R-100)手套帽子鞋套防護服(gownorapron)個人防護設備（PPE）口罩(N-95orN/P/R-140如何采集樣本如何采集樣本411.咽拭子容易操作請病人盡量把嘴張開當拭子觸及咽后壁時病人不要往后躲，應該抵住1.咽拭子容易操作42病毒采樣盒咽拭子器具病毒采樣盒咽拭子器具43咽拭子咽拭子44標本采集方法—咽拭子干采用2根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子同時擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，將拭子頭浸入含3ml采樣液的螺口管中，尾部棄去，旋緊管蓋。標本采集方法—咽拭子干采45例子correctwrong例子correctwrong46標本采集方法—鼻拭子將1根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子輕輕插入鼻道內鼻腭處，停留片刻后緩慢轉動退出。取另一根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子以同樣的方法采集另一側鼻孔。上述兩根拭子浸入同一含3ml采樣液的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。標本采集方法—鼻拭子將1根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子輕輕插入鼻473.鼻咽吸取液的收集

1.將吸液管與真空泵相連2.將軟管與上腭平行插入鼻孔3.使用真空泵4.緩慢的移出同時輕輕旋轉5.使用同一個管子采集另一鼻孔的液體6.收集的液體用3mlVTM沖洗出，放入采樣管中3.鼻咽吸取液的收集 1.將吸液管與真空泵相連48標記樣品被采樣者的信息樣品采集的日期樣品采集的部位樣本編號采集單位標記樣品49如何保存樣品VTM中保存的樣品盡快運到實驗室48小時內可以檢測的可以保存在4℃，超過48小時-70℃凍存。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存應在-70℃溫度以下，不要凍存于-20℃，會降低流感病毒的檢出率。避免反復凍融冰上一周也比凍融一次要好如何保存樣品VTM中保存的樣品50標本的包裝和運輸標本的包裝和運輸51

疑似人感染甲型H1N1流感感染病例列為A類，用UN2814包裝運輸—《甲型H1N1流感監(jiān)測方案》附錄3《甲型H1N1流感病毒實驗室檢測技術方案》2009年5月11日疑似人感染甲型H1N1流感感染病例列為A類，用UN2852IATA對感染性物質的運輸分類A類指人感染后發(fā)病的可能性大，傳染性強，對人群危害性大的烈性感染性物質。高度懷疑具有嚴重危害性的感染性物質也屬于A類。A類感染性物質感染性物質[聯合國編號UN2814和UN2900(只導致動物致病)]采用PI602包裝要求。A類之外，僅具有一般危險性，引起感染的機會較少的感染性物質為B類(聯合國編號UN3373),采用PI650包裝要求。IATA對感染性物質的運輸分類A類指人感染后發(fā)病的可能性大，53感染性物質運輸的包裝系統(tǒng)三層包裝系統(tǒng)：內層容器，中層包裝外層包裝。

感染性物質運輸的包裝系統(tǒng)54基本包裝內層容器(裝有樣本)中層包裝(含吸水性材料)外層包裝基本包裝內層容器(裝有樣本)55內層容器標記合適的材料封口防漏防滲裹以軟墊或分隔多個內層容器，防止碰撞破碎內層容器標記56中層包裝包含裹有軟墊的內層容器吸水性材料防漏防滲中層包裝包含57外層包裝放入中層容器內容物名細單封箱外層包裝放入中層容器58標識標識59CategoryAINFECTIOUSSUBSTANCEIncaseofdamageorleakageImmediatelynotify