caspase家族及在細(xì)胞凋亡中的作用

caspase家族及在細(xì)胞凋亡中的作用admin注:本文僅是基礎(chǔ)知識(shí)，目前這方面進(jìn)展十分快，需要更新更多的知識(shí)。如caspase家族目前發(fā)現(xiàn)至少14種。這里僅介紹幾種常見(jiàn)的成員。目的是讓大家了解到caspase家族的概況，以及在細(xì)胞凋亡中的作用。一caspase家族蛋白酶的組成未活化的caspase家族蛋白酶是以酶原形式存在的，酶原的氨基端有一段被稱為“原結(jié)構(gòu)域”(pro-domain)的序列。酶原活化時(shí)不但要將原結(jié)構(gòu)域切除，并且要將剩余部分剪切成一大一小兩個(gè)亞基，分別稱為P20和P10，活性酶就是由這兩種亞基以(P20/P10)2的形式組成的。這種活化反應(yīng)也是Asp特異的，剪切發(fā)生在酶原中保守序列的Asp與其后的氨基酸殘基之間，一般是先切下羧基端的小亞基，然后再?gòu)拇髞喕陌被饲腥ピY(jié)構(gòu)域。這種剪切可以是酶原及中間活性酶自我催化，也可以是其它ICE家族蛋白酶的作用，還有其它酶類如顆粒酶B參與。表5.caspase家族蛋白酶的識(shí)別序列及作用底物蛋白酶名稱別名識(shí)別序列底物caspase1ICEYVADpro-IL-1b,pro-caspase3,pro-caspase4caspase4TX,ICH-2,ICErel-IIpro-caspase1caspase5ICErel-III,TYmICH3mICH4caspase2ICH-1PARPcaspase9ICE-LAP6,Mch6PARPcaspase3CPP32,Yama,apopainDEVDPARP,DNA-PK,SRE/BP,rho-GDI,KCqcaspase6Mch2VEIDlaminAcaspase7Mch3,ICE-LAP3,CMH-1DEVDPARP,pro-caspase6caspase8MACH,FLICE,Mch5DEVDpro-caspase3,4,7,9,10caspase10Mch4YVADcaspase11ICH3,FLICE2CED-3已命名的caspase家族成員均已克隆成功，它們不但在氨基酸序列上具有同源性，而且在空間結(jié)構(gòu)上也很相似。目前已經(jīng)獲得了caspase-1(ICE)和caspase-3(CPP32)的X線結(jié)晶圖像，結(jié)果顯示它們具有相似的空間結(jié)構(gòu)，在P20的C端和P10的N端有200多個(gè)氨基酸殘基的序列尤為保守，在空間結(jié)構(gòu)上組成相似的b折疊中心和相鄰的a螺旋，保守的、對(duì)蛋白酶活性有特殊意義的氨基酸殘基均位于這一段，并形成特定的結(jié)構(gòu)。不同源的序列主要存在于P20的N端和P20與P10交界處，這兩個(gè)部位的氨基酸殘基在蛋白酶活化過(guò)程中一般被全部或部分切除。所有的成員都保守性地包含有與底物P1Asp作用的氨基酸殘基，如在ICE中，它們是催化中心的Cys285，與酶/抑制劑復(fù)合物的巰基半縮醛以氫鍵結(jié)合的His237，以及可以穩(wěn)定反應(yīng)中間物氧陰離子的Gly238。另外，Arg179、Arg341、Gln383和Ser347形成容納P1Asp的“口袋”，Ser339靠近Cys285的巰基，以氫鍵結(jié)合P1位的酰胺。與P2~P4作用的氨基酸殘基則變異比較大，這可能是各個(gè)成員識(shí)別不同底物的特異性之所在。在活性Cys周圍的氨基酸序列也很保守，一般都有Gln-Ala-Cys-Arg-Gly(QACRG)五肽序列，在caspase-8、caspase-10中為QACQG，在caspase-9中是QACGG，這三個(gè)成員都有一個(gè)氨基酸殘基的變異，但這種變異不影響蛋白酶的剪切活性和特異性。二caspase家族蛋白酶的結(jié)構(gòu)與功能按照結(jié)構(gòu)同源性的大小，可以將caspase蛋白酶分為三個(gè)組，分別以caspase-1、caspase-2和caspase-3為代表。其中最重要的是caspase-1、caspase-3和caspase-8。(一)caspase-1(ICE)(二)caspase-3(三)caspase-8(四)其它c(diǎn)aspase蛋白酶(一)caspase-1(ICE)1.ICE的結(jié)構(gòu)與生物學(xué)作用ICE即IL-1b轉(zhuǎn)化酶(IL-1bconvertingenzyme)，是單核細(xì)胞合成的一種蛋白酶，可以將34kD的IL-1b前體(pro-IL-1b)剪切為17kD的成熟IL-1b，這種剪切對(duì)于IL-1b活性的發(fā)揮是必須的。不表達(dá)ICE的細(xì)胞系轉(zhuǎn)化IL-1b基因后可以產(chǎn)生pro-IL-1b，但不能分泌有活性的成熟IL-1b；ICE特異性抑制劑可以阻斷金黃色葡萄球菌刺激引起的IL-1b的分泌。ICE屬于半胱氨酸蛋白酶，活性中心有高活性的巰基，對(duì)氧化劑很敏感，但對(duì)絲氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶或天冬氨酸蛋白酶的抑制劑不敏感。(1)ICE活化時(shí)的剪切過(guò)程：ICE基因定位于11q13-23，編碼的ICE前體(pro-ICE)全長(zhǎng)404aa，約45kD，蛋白酶活性中心是位于283~287位置的Gln-Ala-Cys-Arg-Gly(QACRG)五肽序列，其中Cys285是發(fā)揮酶切活性的關(guān)鍵殘基。在活化過(guò)程中pro-ICE在4個(gè)位點(diǎn)Asp103~Ser104、Asp119~Asn120、Asp297~Ser298和Asp316~Ala317進(jìn)行自我催化剪切形成兩個(gè)片段P20和P10，P20和P10首先形成異源二聚體，然后兩個(gè)P20/P10異源二聚體再通過(guò)P10小亞基多聚化形成同源二聚體，所以ICE的活性形式是(P20/P10)2。pro-ICE活化過(guò)程中的剪切并不是在四個(gè)酶切位點(diǎn)同時(shí)進(jìn)行的，最先被剪切的是第三個(gè)位點(diǎn)(Asp297~Ser298)，形成P35和P12兩個(gè)片段，P35的酶切活性比pro-ICE要高，它既可以進(jìn)一步在第三個(gè)酶切位點(diǎn)剪切其它pro-ICE，還可以剪切其它三個(gè)酶切位點(diǎn)，形成P20和P10兩個(gè)片段，再由P20和P10形成四聚體。四聚體形式的ICE酶切活性非常強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)證明即使在單核細(xì)胞大量分泌IL-1b時(shí)，細(xì)胞漿中活性形式的ICE也僅占很小的比例。從pro-ICE上剪切下來(lái)的原結(jié)構(gòu)域可以抑制ICE的進(jìn)一步剪切，這可能是一種反饋機(jī)制。(2)ICE識(shí)別的剪切位點(diǎn)和特異性抑制劑：ICE識(shí)別的剪切位點(diǎn)是一個(gè)四肽序列，除了在P1位置的Asp外，還要求在P4位置的氨基酸殘基具有一個(gè)較大的疏水性集團(tuán)，P2和P3位置上的氨基酸的變異則較大，P1’位置上一般是一個(gè)較小的疏水性氨基酸。根據(jù)這一研究結(jié)果，人們合成了ICE的人工特異性四肽底物YVAD，醛化的YVAD(Ac-YVAD-CHO)是ICE的特異可逆抑制劑，醯酮化YVAD(Ac-YVAD-CMK)是特異性不可逆抑制劑。YVAD抑制劑可以抑制單核細(xì)胞中成熟IL-1b的釋放，而對(duì)其它細(xì)胞因子的釋放沒(méi)有作用，在體的實(shí)驗(yàn)也有同樣的結(jié)果，說(shuō)明這些特異性抑制可能具有一定的臨床實(shí)用前景。牛痘病毒產(chǎn)生的一種38kD的蛋白質(zhì)CrmA(cytokineresponsemodifierA)與絲氨酸蛋白酶抑制劑(serpin)很相似，但它并不抑制絲氨酸蛋白酶的活性，反而抑制ICE的活性。研究發(fā)現(xiàn)這是因?yàn)镃rmA的氨基酸序列中有LVAD四肽結(jié)構(gòu)，與ICE的特異性抑制劑YVAD很相似，可以作為假底物結(jié)合ICE，阻斷ICE對(duì)pro-IL-1b的剪切，從而降低IL-1b的分泌。所以CrmA在病毒感染時(shí)可以干擾宿主的炎癥反應(yīng)，促進(jìn)病毒在體內(nèi)的復(fù)制。(3)ICE的空間構(gòu)型：利用不可逆的抑制劑Ac-YVAD-CMK，Walker等于1994年獲得了活性ICE的X線結(jié)晶圖像。分析發(fā)現(xiàn)，ICE是首先由P20/P10構(gòu)成一個(gè)完整的結(jié)構(gòu)域，然后兩個(gè)相同的結(jié)構(gòu)域再通過(guò)P10結(jié)合成一個(gè)蛋白酶。在P20/P10異源二聚體中，中心位置是由6個(gè)b折疊股組成，其中4個(gè)來(lái)自于P20呈平行排列，另兩個(gè)來(lái)自P10，其中一個(gè)與P20的4個(gè)折疊股平行排列，另一個(gè)則呈反平行排列。b折疊股形成的核心周圍是由分別來(lái)自P20和P10的a螺旋所包圍。兩個(gè)P20/P10異源二聚體以反平行方式通過(guò)P10結(jié)合在一起，在外表形成一個(gè)可以容納底物P1Asp側(cè)鏈羧基基團(tuán)的“口袋”。這個(gè)“口袋”由P20的Arg179、Gln283和P10的Arg341、Ser347組成，Gly238和His237也參與這種構(gòu)型的維持，活性中心的Cys285通過(guò)氫鍵與底物結(jié)合。對(duì)ICE/CED-3家族其它成員的研究發(fā)現(xiàn)，在ICE中形成活性中心的氨基酸序列和形成容納底物的“口袋”的四個(gè)氨基酸都很保守，提示它們可能具有相似的空間結(jié)構(gòu)。2.ICE在細(xì)胞凋亡中的作用Yuan等于1993年將CED-3基因克隆出來(lái)，發(fā)現(xiàn)它所編碼的蛋白質(zhì)的與人ICE很相似，在一級(jí)結(jié)構(gòu)上有28%的同源性。CED-3包含503個(gè)氨基酸殘基，有100aa富含絲氨酸，與ICE的同源性主要表現(xiàn)在非富含絲氨酸的區(qū)域，尤其是羧基端的115aa，與ICE同源性高達(dá)43%，其中也包含活性中心QACRG(361~365)。CED-3可能象ICE一樣，也是一種半胱氨酸蛋白酶，通過(guò)剪切底物蛋白來(lái)參與細(xì)胞凋亡。ICE是人體中CED-3的同源物，可以發(fā)揮與CED-3相似的作用，參與人體細(xì)胞的凋亡過(guò)程。用ATP或過(guò)量?jī)?nèi)素毒素刺激單核細(xì)胞，可以通過(guò)活化ICE增加IL-1b的分泌，這些刺激同時(shí)也可以促進(jìn)細(xì)胞凋亡。將ICEcDNA轉(zhuǎn)染入大鼠成纖維細(xì)胞系中過(guò)量表達(dá)ICE可以引起細(xì)胞凋亡，這種凋亡可以被牛痘病毒蛋白CrmA或細(xì)胞凋亡拮抗蛋白BCL-2所抑制；如果在轉(zhuǎn)染前將ICE基因中編碼酶切活性中心的氨基酸殘基(Cys285、Gly287)突變，則不能誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡；將CrmA導(dǎo)入雞背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞可以阻斷撤除神經(jīng)生長(zhǎng)因子而引起的神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡過(guò)程。但是有些研究與上述結(jié)果不相吻合：穩(wěn)定高表達(dá)IL-1b的細(xì)胞系并不自動(dòng)發(fā)生凋亡；ICE基因剔除的小鼠雖然不能分泌成熟IL-b，但其發(fā)育并不受影響，也不發(fā)生自身免疫性疾病，這些小鼠的胸腺細(xì)胞和巨噬細(xì)胞在受到特定信號(hào)刺激后仍能發(fā)生凋亡；在具有ICE活性的細(xì)胞中用YVAD抑制ICE活性后，細(xì)胞凋亡過(guò)程也不受影響；凋亡的雞細(xì)胞DU249的細(xì)胞提取液不具有剪切pro-IL-1b的能力，但凋亡的DU249細(xì)胞提取液的另一種成分prICE(proteolyticresemblingICE)則可以將不能作為ICE底物的PARP剪切成典型的凋亡片段。這些結(jié)果說(shuō)明ICE本身可能不是人體細(xì)胞凋亡的真正效應(yīng)劑，至少不是最主要的因素，在人體中可能有其它更重要的ICE樣的蛋白酶參與細(xì)胞凋亡過(guò)程。(二)caspase-31994年Fernandez-Alnemri等在BenBank表達(dá)序列標(biāo)記(expressionsequencetag,EST)數(shù)據(jù)庫(kù)中找到一段ICE/CED-3活性中心同源的序列，用它合成探針后，篩選人JurkatT淋巴細(xì)胞cDNA文庫(kù)，從中克隆到一種新基因，因其編碼分子量為32kD的半胱氨酸蛋白酶而稱之為CPP32(cysteineproteaseprotein,32kD)。隨后，其它學(xué)者獨(dú)立地將這一蛋白基因克隆出來(lái)，并分別命名為prICE、apopain(凋亡素)和Yama(印度傳說(shuō)中的死亡之神)。1996年這種蛋白酶被命名為caspase-3。現(xiàn)在一般認(rèn)為caspase-3是細(xì)胞凋亡過(guò)程中最主要的終末剪切酶，也是CTL細(xì)胞殺傷機(jī)制的重要組成部分。1.caspase-3的結(jié)構(gòu)pro-caspase-3含有277個(gè)氨基酸殘基，分子量約32kD，與ICE有30%同源性，與CED-3有35%同源，是caspase家族中與CED-3同源性最高的，不論從結(jié)構(gòu)同源性還是從底物特異性來(lái)看都與CED-3很相似，所以有人認(rèn)為它是CED-3在哺乳動(dòng)物中的同源蛋白。caspase-3的原結(jié)構(gòu)域明顯短于ICE只有28個(gè)氨基酸殘基，但蛋白酶活性中心和與結(jié)合底物有關(guān)的保守的氨基酸均與ICE一致。pro-caspase-3在活化過(guò)程中從Asp28~Ser29和Asp175~Ser176兩處被剪切，形成P17(29~175)和P10(182~277)兩個(gè)片段，相當(dāng)于ICE的P20和P10，兩種亞基再組成活性形式的-caspase-3本身并沒(méi)有催化活性，在活化時(shí)首先由顆粒酶B(GrzB)或caspase-10在D175剪切下小片段后它才被部分活化，隨后則可進(jìn)行下一步的自我催化。在剪切原結(jié)構(gòu)域時(shí)可能還有其它c(diǎn)aspase如ICE的參與。2.caspase-3的活化和參與細(xì)胞凋亡caspase-3在細(xì)胞凋亡中起著不可替代的作用，caspase-3基因轉(zhuǎn)染昆蟲(chóng)Sf9細(xì)胞后引起細(xì)胞凋亡，這個(gè)過(guò)程可以被BCL-2阻斷；在發(fā)生凋亡的細(xì)胞提取液中去除caspase-3后，這些提取液就失去了誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的能力；再加入純化的caspase-3它就又恢復(fù)了致凋亡的功能。caspase-3可以被多種因素活化，在CTL細(xì)胞的殺傷作用中，它既可被Fas/FasL途徑活化，也可以通過(guò)顆粒酶B途徑活化。顆粒酶B是CTL細(xì)胞顆粒中的一種絲氨酸酯酶，是哺乳動(dòng)物中caspase蛋白酶外唯一的在Asp后剪切的蛋白酶，它可以特異性剪切ICE家族蛋白酶催化亞單位C端的IxxD序列，并活化caspase2、3、6、7、8、9、10。ICE也可以被顆粒酶剪切，但剪切后并不被活化。3.caspase-3引起細(xì)胞凋亡的機(jī)制caspase-3最主要的底物是多聚(ADP-核糖)聚合酶PARP(poly(ADP-ribose)polymerase)，該酶與DNA修復(fù)、基因完整性監(jiān)護(hù)有關(guān)。在細(xì)胞凋亡啟動(dòng)時(shí)，116kD的PARP在Asp216-Gly217之間被caspase-3剪切成31kD和85kD兩個(gè)片段，使PARP中與DNA結(jié)合的兩個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)與羧基端的催化區(qū)域分離，不能發(fā)揮正常功能。結(jié)果使受PARP負(fù)調(diào)控影響的Ca2+/Mg2+依賴性核酸內(nèi)切酶的活性增高，裂解核小體間的DNA，引起細(xì)胞凋亡。這種裂解過(guò)程可被caspase-3的特異性抑制劑Ac-DEVD-CHO所抑制，但不能被CrmA抑制。caspase3還可以剪切U1-70K、DNA-PK、PKCd和PKCq。PKCd和PKCq都屬于新型PKC(novelPKC,nPKC)，當(dāng)被caspase3剪切后，可以切除調(diào)節(jié)區(qū)域，而成為活性形式的PKC，另外實(shí)驗(yàn)還證明，過(guò)量表達(dá)PKCd和PKCq均可以引起細(xì)胞凋亡，說(shuō)明它們都參與了細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)。(三)caspase-8在caspase-8發(fā)現(xiàn)之前，人們雖然知道多種細(xì)胞膜外的因素可以引起細(xì)胞凋亡，而且知道caspase家族蛋白是這種細(xì)胞凋亡過(guò)程中的效應(yīng)物質(zhì)，但對(duì)凋亡信號(hào)如何由細(xì)胞膜外轉(zhuǎn)遞到細(xì)胞漿，并如何引起caspase蛋白酶活化的過(guò)程卻知之甚少。含有死亡結(jié)構(gòu)域的胞漿信號(hào)蛋白的發(fā)現(xiàn)，證明死亡信號(hào)是通過(guò)這些蛋白質(zhì)向胞漿內(nèi)部傳遞，并最終引起caspase蛋白酶的活化的。1995年Enari等證明CrmA可以阻斷Fas與TNFRI引起的細(xì)胞凋亡，并且發(fā)現(xiàn)在Fas和TNFRI活化時(shí)有caspase-3和caspase-7的活化，而CrmA在阻斷細(xì)胞凋亡的同時(shí)也抑制了caspase-3和caspase-7的活化，這說(shuō)明caspase-3、caspase-7等ICE家族蛋白酶參與了Fas和TNFRI引起的細(xì)胞凋亡過(guò)程，并且提示CrmA可以通過(guò)抑制caspase-3、caspase-7的上游ICE樣蛋白酶來(lái)阻斷凋亡過(guò)程。之后Kischkel等發(fā)現(xiàn)Fas活化時(shí)可以與至少4種蛋白相連，分別稱為CAP1(cytotoxicity-dependentAPO-1-associatedproteins1)、CAP2、CAP3和CAP4，這4種蛋白與活化的Fas受體一起被稱為死亡誘導(dǎo)信號(hào)復(fù)合物(death-inducingsignalingcomplex,DISC)。隨后的研究證實(shí)CAP1和CAP2是不同形式絲氨酸磷酸化的FADD蛋白，CAP3和CAP4則被證明是一種新蛋白的兩種不同剪接形式，這個(gè)蛋白被命名為FLICE(FADD-likeICE)。同年，另兩組研究者分別用酵母雙雜交系統(tǒng)和根據(jù)蛋白的同源性也發(fā)現(xiàn)了這個(gè)蛋白，分別將其命名為MACH(MORT1-associatedCED-3homolog)和Mch5(mammalianCedhomolog5)，這個(gè)蛋白質(zhì)就是后來(lái)統(tǒng)一命名的caspase-8。1.caspase-8的結(jié)構(gòu)和分布Caspase-8前體共有479aa，分子量為55kD，其顯著的特點(diǎn)是在N端有2個(gè)70aa左右的結(jié)構(gòu)域，與FADD的N端的死亡效應(yīng)結(jié)構(gòu)域(deatheffectordomain,DED)同源，這種同源的結(jié)構(gòu)域可以發(fā)生相互聚合，提供了caspase-8與FADD相互結(jié)合的一個(gè)部位。caspase-8的C端與ICE結(jié)構(gòu)同源，它的活性中心與其它ICE家族蛋白酶活性中心有所不同，不是通常的QACRG，而是由QACQG五肽組成，但這樣的結(jié)構(gòu)不影響其蛋白酶活性的發(fā)揮。caspase-8一級(jí)結(jié)構(gòu)中其它與結(jié)合底物有關(guān)的氨基酸殘基都很保守。caspase-8分布于胎兒和成人的各種組織中，但在胎腦中沒(méi)有分布。在外周血白細(xì)胞中水平較高，可能與白細(xì)胞的凋亡有關(guān)。2.caspase-8的活化和參與細(xì)胞凋亡caspase-8可以自我活化，也可以在顆粒酶B的剪切下活化。caspase8特異性識(shí)別的序列是DEVD，活化的caspase-8不但可以剪切PARP，而且還參與其它ICE家族蛋白酶，如caspase-3和caspase-7的活化過(guò)程。用caspase-8基因轉(zhuǎn)染MCF-7乳腺癌細(xì)胞系，可以引起細(xì)胞凋亡，出現(xiàn)典型的形態(tài)變化。caspase-8引起的細(xì)胞凋亡可以被廣譜的ICE家族蛋白酶抑制z-VAD-fmk所阻斷，也可以被CrmA阻斷，提示它可能是CrmA的靶蛋白。3.caspase-8參與細(xì)胞凋亡的機(jī)制由于caspase-8具有FADD樣DED結(jié)構(gòu)域，并且能夠通過(guò)DED結(jié)構(gòu)域與FADD結(jié)合，所以caspase-8可以在凋亡過(guò)程中間接與細(xì)胞膜受體發(fā)生聯(lián)系，從而將細(xì)胞膜事件轉(zhuǎn)化為細(xì)胞漿事件。他們認(rèn)為，在非活化情況下caspase-8的兩個(gè)FADD樣DED結(jié)構(gòu)是互相結(jié)合在一起的。當(dāng)細(xì)胞膜表面的Fas與其配體FasL或相應(yīng)的單抗結(jié)合后，受體發(fā)生多聚化，引起FADD與受體胞漿區(qū)死亡結(jié)構(gòu)域互相結(jié)合。這種結(jié)合使FADD的DED結(jié)構(gòu)域發(fā)生變構(gòu)，變構(gòu)后的DED可以與胞漿中caspase-8的一個(gè)DED結(jié)構(gòu)域結(jié)合，使caspase-8的兩個(gè)DED結(jié)構(gòu)域分開(kāi)，同時(shí)使caspase-8的ICE同源區(qū)解放出來(lái)，恢復(fù)蛋白酶活性，通過(guò)自我催化生成活性形式的caspase-8蛋白酶，后者再作用于胞漿中其它ICE家族蛋白酶，使它們發(fā)生逐級(jí)活化。(四)其它c(diǎn)aspase蛋白酶1.caspase-2Kumar等首先在小鼠胚腦中發(fā)現(xiàn)了一種稱為Nedd-2(neuronally-expressed,developmentallydownregulated)的蛋白酶，這種蛋白酶隨著動(dòng)物的成熟其表達(dá)水平逐步下降，在成年鼠腦中找不到Nedd-2的表達(dá)。Wang等利用鼠Nedd-2作為探針，篩選人胚腦cDNA文庫(kù)，獲得兩條與鼠Nedd-2高度同源的cDNA序列，并命名為ICH-1(ICEandCED-3homolog1)。由于不同剪接，ICH-1可以編碼兩個(gè)基因產(chǎn)物：ICH-1L長(zhǎng)435aa，其中原結(jié)構(gòu)域長(zhǎng)123aa，301~305有以半胱氨酸為中心的活性位點(diǎn)QACRG，含有與ICE和CED-2相似的序列，分別有28%和27%同源性，高表達(dá)可引起哺乳動(dòng)物細(xì)胞凋亡；另一種基因產(chǎn)物ICH-1S長(zhǎng)312aa，高表達(dá)則能抑制細(xì)胞凋亡。ICH-1L促凋亡的作用可以被BCL-2所阻斷，但不被CrmA所阻斷。NorthernBlot和反轉(zhuǎn)錄-PCR證實(shí)，caspase-2的表達(dá)與組織的發(fā)育階段有關(guān)。ICH-1L和ICH-1S均表達(dá)于心臟、腎和腦，但I(xiàn)CH-1S在胚腦中表達(dá)最高，而ICH-1H在成年胸腺中表達(dá)最高。在細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，48kDa的caspase-2首先被一種caspase-3樣蛋白酶在Asp316剪切成p33和p14，然后再緩慢地在Asp152和Asp330處剪切為p18和p12組成的活性蛋白酶，后一過(guò)程要在2~3h后才能完成。caspase-2可能參與CTL細(xì)胞的殺傷作用，但它并不能被顆粒酶B直接活化，必須被一種caspase-3樣蛋白酶活化。2.caspase-4caspase-4是1995年Kamens等在松馳雜交(lowstringencyhybridization)的條件下用人ICE基因探針篩選人胸腺細(xì)胞cDNA文庫(kù)，找到的一個(gè)與ICE和CED-3同源的基因，當(dāng)時(shí)將它命名為ICH-2(ICEandCED-3homolog2)。同年另外兩組科學(xué)家也分別獨(dú)立地發(fā)現(xiàn)了這個(gè)基因，并分別命名為TX和ICErel-II。caspase-4基因定位于人染色體11q22.2-22.3，所編碼的蛋白包含377aa，分子量約43kD，一級(jí)結(jié)構(gòu)與ICE有53%的同源性，在切除104aa的原結(jié)構(gòu)域后同源性更高達(dá)60%，所有與酶活性中心(QACRG)和與結(jié)合底物有關(guān)的氨基酸殘基都得到了保留。caspase-4分布較廣，除腦組織外在所有檢測(cè)的組織中都有表達(dá)。雖然caspase4與ICE高度同源，但它并不能催化pro-IL-1b為成熟分子，但可以活化ICE前體及其自身的前體。caspase4不能剪切DNA-PK，ICE敏感的抑制劑YVAD-CHO可以阻斷caspase4的活性，但其敏感性僅為ICE的1/20。caspase-4的活性形式也是由P20和P10兩種亞基組成。將caspase-4基因轉(zhuǎn)染Sf9昆蟲(chóng)細(xì)胞系可以引起典型的凋亡變化，提示caspase-4在細(xì)胞凋亡中起一定的作用。3.caspase-5caspase5是Munday等發(fā)現(xiàn)caspase4(ICErel-II)時(shí)同時(shí)發(fā)現(xiàn)的一種蛋白，當(dāng)時(shí)命名為ICErel-III，另外一組研究者則命名為TY。caspase-5包含418aa，分子量47.7kD，與ICE有51%的同源性，并具有保守的活性中心QACRG。但caspase-5不能剪切pro-IL-1b，在過(guò)量表達(dá)時(shí)可以誘導(dǎo)凋亡的發(fā)生。4.caspase-6caspase6是通過(guò)搜索有保守的QACRG活性中心和GSWFI保守的抑制劑結(jié)合位點(diǎn)的方法用PCR的手段找到的，命名為Mch2，與caspase-3有38%同源性，可以在昆蟲(chóng)細(xì)胞中引起細(xì)胞凋亡。隨后的研究證明，caspase6可以剪切層蛋白B，而且其活性對(duì)Zn2+敏感，這是唯一一個(gè)可以剪切層蛋白的caspase。caspase識(shí)別的序列也是VEID。它不能剪切U1-70K和DNA-PK，但可以部分剪切PARP，并可活化caspase3。5.caspase-7caspase7是通過(guò)PCR擴(kuò)增caspase保守序列得到的，稱為Mch3(mammalianCedhomolog3)，另外也被稱為ICE-LAP3(ICElikeapoptoticprotease3)和CMH1(CPP32/Mch2homolog1)。caspase-7包含304aa，分子量35kD，caspase-7是與caspase-3同源性最高的成員，有58%的同源性，與其它c(diǎn)aspase有35%的同源性。caspase-7與caspase-3的同源區(qū)主要在具有酶活性的亞單位區(qū)，它也保留了QACRG(184~188)五肽活性中心，與底物結(jié)合的氨基酸殘基也都存在。caspase-7可以分別在Asp23~Ala24、Asp198~Ser199和Asp206~Ala207之間被剪切，形成P20/P12形式的caspase-7。caspase-7分布很廣泛，在腦中也有少量存在。用抗caspase-7的單抗發(fā)現(xiàn)caspase-7在Jurkat細(xì)胞中主要分布于胞漿和近膜結(jié)構(gòu)中，細(xì)胞核中未見(jiàn)分布。用caspase-7基因轉(zhuǎn)染乳腺癌細(xì)胞系發(fā)現(xiàn)全長(zhǎng)蛋白不能引起細(xì)胞凋亡，但去除氨基端53aa(其中包括原結(jié)構(gòu)域)的caspase-7則可以引起細(xì)胞凋亡。進(jìn)一步研究證明去除原結(jié)構(gòu)域的caspase-7具有自催化作用，可以自動(dòng)催化成P10/P12形式。酶活性中心的半胱氨酸對(duì)caspase-7的這種作用十分重要，突變?yōu)锳la后就失去致凋亡作用。當(dāng)Fas和TNF引起的細(xì)胞凋亡時(shí)細(xì)胞內(nèi)caspase-7也被活化，CrmA可以阻斷caspase-7引起的細(xì)胞凋亡。caspase7不能剪切pro-IL-1b，但它可以剪切PARP和固醇調(diào)節(jié)元件，caspase-7對(duì)PARP的剪切可以被DEVD-CHO所阻斷，但不能被ICE敏感的YVAD-CHO所阻斷。caspase-7對(duì)DEVD-CHO抑制劑的敏感性只有caspase-3的1/3，對(duì)CrmA則很不敏感。6.caspase-9通過(guò)搜索人類基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中與caspase-7同源的序列，Duan等找到一個(gè)命名為ICE-LAP6的基因序列，編碼414aa，分子量46kD。序列分析表明它也屬于ICE/CED-3家族，在相當(dāng)于ICE活性部分的序列中，caspase-9與其它成員有30%左右的同源性，它的原結(jié)構(gòu)域很長(zhǎng)，與caspase-3相似。在caspase-9中與結(jié)合底物有關(guān)的6個(gè)氨基酸殘基都得到了保留，但它的酶活性中心的五肽序列與其它ICE/CED-3蛋白酶的QACRT不同，是QACGG，這是繼caspase-8的QACQG之后出現(xiàn)的另一種活性中心變異，這種變異也不影響蛋白酶的酶切活性。caspase-8的分布很廣泛，在許多胚胎和成人組織中都有分布。顆粒酶B可以活化caspase-8，活化后可以剪切PARP。乳腺癌細(xì)胞系MCF7轉(zhuǎn)染caspase-8基因后出現(xiàn)凋亡，這種作用可以被z-VADfmk所阻斷。當(dāng)活性中心的半胱氨酸被突變后，caspase-8失去促凋亡的作用。7.caspase-10Alnemri等于1996年通過(guò)在GenBank中尋找caspase-3的表達(dá)序列標(biāo)記，從人JurkatT淋巴細(xì)胞cDNA文庫(kù)中同時(shí)克隆出caspase-8和caspase-10，分別命名為Mch5和Mch4。caspase-10含有497aa，分子量55kD，與其它成員有30~50%的同源性。caspase-10分子結(jié)構(gòu)的顯著特點(diǎn)是其N端也有兩個(gè)FADD氨基端樣結(jié)構(gòu)域，所以它也可能與caspase-8一樣是將細(xì)胞膜事件轉(zhuǎn)化為細(xì)胞漿事件的一個(gè)環(huán)節(jié)。caspase-10的酶活性中心也與caspase-8一樣，是QACQG，而不是一般的QACRG五肽序列。caspase-10分布廣泛，基因定位于2p12，基因轉(zhuǎn)染昆蟲(chóng)細(xì)胞系Sf9中可以引起細(xì)胞凋亡，其活性可以被DEVD-CHO所抑制。8.caspase-11Yuan等于1996年從小鼠胸腺細(xì)胞cDNA文庫(kù)中發(fā)現(xiàn)，命名為ICH-3。373aa，42kDa，與ICE有46%同源性，活性中心為QACRG，ICE中與催化活性有關(guān)的氨基酸殘基得到了保留，包括His206、Gly207和Cys254，與P1結(jié)合有關(guān)的氨基酸殘基也保守，包括Arg148、Gln252、Arg310和Ser316。caspase-11表達(dá)于許多組織，與ICE表達(dá)模式相似，并可以被LPS所誘導(dǎo)。在Rat-1細(xì)胞中過(guò)量表達(dá)caspase-11可以引起細(xì)胞凋亡，CrmA和BCL-2可以阻斷這種凋亡。caspase-11可以被顆粒酶B剪切并活化。caspase-11雖不能剪切IL-1b前體，但可以活化ICE，通過(guò)ICE再活化IL-1b。所以在細(xì)胞凋亡中，caspase-11可能作用于ICE上游，在受LPS刺激后首先活化，然后再通過(guò)活化ICE，一方面剪切IL-1b，引起炎癥反應(yīng)，另一方面還可以在有些細(xì)胞中引起細(xì)胞凋亡。9.mICH-3和mICH-4通過(guò)松馳雜交方法也發(fā)現(xiàn)了另兩種鼠的ICE同源蛋白，分別稱為mICH-3和mICH-4。MICH-3在靜止細(xì)胞表達(dá)水平很低，但LPS刺激后上調(diào)，基因剔除的小鼠可以抵抗LPS引起的致命的影響，所以推測(cè)它屯炎癥過(guò)程有關(guān)。MICH-3不能剪切pro-IL-1b，但過(guò)量表達(dá)時(shí)可以引起細(xì)胞凋亡。三caspase家族蛋白酶在細(xì)胞凋亡中的活化順序caspase蛋白酶在死亡受體介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中起著中心的作用。Fas與配體結(jié)合而活化后，首先引起YVAD和zVAD敏感的ICE家族蛋白酶活化，然后再活化DEVD敏感的蛋白酶。其中caspase-8是這一凋亡過(guò)程中首先被活化的ICE家族蛋白酶。Caspase-8活化后，一方面它可以剪切活化caspase-3、caspase-7、caspase-4、caspase-9和caspase-10，通過(guò)這些蛋白酶剪切底物使凋亡得以進(jìn)行；另一方面，它的活性可以被CrmA所抑制，籍此可作為細(xì)胞凋亡負(fù)調(diào)控因素作用的環(huán)節(jié)。caspase-8的活化可以是Fas與其配體結(jié)合引起的FADD蛋白與caspase-8結(jié)合的結(jié)果，也可能是顆粒酶B、ICE等作用的結(jié)果。所以其它能夠引起細(xì)胞凋亡的因素也可以通過(guò)激活顆粒酶B或ICE來(lái)激活凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。caspase-8活化后引起caspase-3和caspase-7活化，這兩種酶都可以剪切PARP，引起DNA的降解。另外caspase-3還可以活化caspase-6，后者可以降解層蛋白B。此外，U1核糖體蛋白的70kD亞基(U1-70K)、DNA依賴的蛋白(DNA-PK)的催化亞基、微絲相關(guān)蛋白Gas-2、b-actin、PKCd、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白、DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I和II等也都可能作為caspase-3和caspase-6的作用底物。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞的凋亡過(guò)程中caspase3、6、7是與CED-3最相似的蛋白酶，它們完成了大部分剪切底物的作用，發(fā)揮了CED-3在美麗線蟲(chóng)中發(fā)揮的作用。目前認(rèn)為，能夠?qū)⒓?xì)胞膜事件與細(xì)胞漿事件聯(lián)系起來(lái)的蛋白質(zhì)除了FADD/caspse-8通路外還有其它形式，新發(fā)現(xiàn)的胞漿蛋白CRADD可以將RIP與caspase-2聯(lián)系起來(lái)。另外，caspase-10和caspase-9都已被證明可以在凋亡信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程中先于其它蛋白酶活化，并通過(guò)其酶活性將信號(hào)傳給其它c(diǎn)aspase蛋白酶。其它ICE家族蛋白酶雖然也在不同程度上參與凋亡過(guò)程，但具體細(xì)節(jié)還不十分清楚，它們可能是在不同細(xì)胞和組織起作用，也有可能是作為后備機(jī)制輔助上述途徑的進(jìn)行內(nèi)容總結(jié)

（1）caspase家族及在細(xì)胞凋亡中的作用

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注:本文僅是基礎(chǔ)知識(shí)，目前這方面進(jìn)展十分快，需要更新更多的知識(shí)

（2）在活性Cys周圍的氨基酸序列也很保守，一般都有Gln-Ala-Cys-Arg-Gly(QACRG)五肽序列，在caspase-8、caspase-10中為QACQG，在caspase-9中是QACGG，這三個(gè)成員都有一個(gè)氨基酸殘基的變異，但這種變異不影響蛋白酶的剪切活性和特異性

附錄資料：不需要的可以自行刪除家庭用藥常識(shí)1.課程的目的和意義:隨著我們生活水平的提高，人們?nèi)找骊P(guān)注健康，海量信息和信息渠道的暢通更使人們?cè)诒＝『蜕罘绞椒矫嬗辛烁嗟倪x擇機(jī)會(huì)，社會(huì)，經(jīng)濟(jì)和政策上等因素使人們?cè)诒３肿陨斫】捣矫娉袚?dān)起更大的責(zé)任，使得自我發(fā)現(xiàn)，自我治療，明確怎樣正確服用藥物在公眾生活中的地位越來(lái)越重要。本課程理論性與實(shí)用性相結(jié)合，理論淺顯易懂，更加突出日常實(shí)用性，讓我充分了解人體常見(jiàn)病的發(fā)病原因與預(yù)防、治療方法，結(jié)合各種藥物的臨床做用做到合理用藥，通過(guò)健康用藥知識(shí)的普及，提高了我合理用藥的意識(shí)2.1）藥品:用于預(yù)防、治療、診斷人的疾病，有目的地調(diào)節(jié)人的生理機(jī)能并規(guī)定有適應(yīng)癥、用法、用量和注意事項(xiàng)的物質(zhì)(包括中藥材、中藥飲片、中成藥、化學(xué)原料藥及其制劑、抗生素、生化藥品、放射性藥品、血清疫苗血液制品和診斷藥品等)分為處方藥（Ethic）和柜臺(tái)藥（ＯＴＣ）兩種。以處方藥（Ethic）的銷售環(huán)節(jié)為例，從藥廠生產(chǎn)出廠——醫(yī)藥商業(yè)公司——醫(yī)院藥劑科——醫(yī)院藥房——醫(yī)生處方——患者購(gòu)買2）藥品的分類：處方藥和非處方藥處方藥必須經(jīng)醫(yī)生處方，在醫(yī)療專業(yè)人員指導(dǎo)下應(yīng)用的藥品具有一定的毒性及其他潛在的影響，用藥方法和時(shí)間都有特殊要求，必須在醫(yī)生指導(dǎo)下使用;國(guó)家嚴(yán)格規(guī)定處方藥不得對(duì)公眾做廣告宣傳，但允許其產(chǎn)品信息在醫(yī)學(xué)工業(yè)學(xué)術(shù)雜志上傳播非處方藥（OTC）不需要醫(yī)生處方，在藥店或藥房即可買到的根據(jù)患者對(duì)病情的自我判斷，或借助藥品說(shuō)明書，或醫(yī)師對(duì)消費(fèi)者所購(gòu)藥品的性能提供咨詢，自我進(jìn)行治療的藥品（同安堂維C、感康、川貝枇杷露）藥盒上帶綠色OTC標(biāo)識(shí)的藥物，即除可在藥店出售外，還可在超市、賓館、百貨商店等處銷售的乙類非處方藥；藥盒上帶紅色OTC標(biāo)識(shí)的藥物，即只能在獲得《藥品經(jīng)營(yíng)許可證》的零售藥店銷售的甲類非處方藥。綠色OTC標(biāo)志的乙類非處方藥的安全性更高。3.國(guó)藥準(zhǔn)字藥品生產(chǎn)單位在生產(chǎn)新藥前，經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局嚴(yán)格審批后，取得的藥品生產(chǎn)批準(zhǔn)文號(hào)，相當(dāng)于人的身份證。格式：國(guó)藥準(zhǔn)字+1位字母+8位數(shù)字；字母包括H、Z、S、B、T、F、J,分別代表藥品不同類別：H：化學(xué)藥品，Z：中成藥，S;生物制品，B:保健藥品，T:體外化學(xué)診斷試劑，F(xiàn):藥用輔料，J:進(jìn)口分包裝藥品。4.保健品具有一般食品的共性，能調(diào)節(jié)人體的機(jī)能，適用于特定人群食用，但不以治療疾病為目的一種食品衛(wèi)生部批準(zhǔn)文號(hào)格式：國(guó)產(chǎn)：衛(wèi)食健字（年份）第****號(hào)進(jìn)口：衛(wèi)進(jìn)食健字（年份）第****號(hào)藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)文號(hào)格式：國(guó)產(chǎn)：國(guó)食健字G200*****進(jìn)口：國(guó)食健字J200*****保健品不是營(yíng)養(yǎng)品，營(yíng)養(yǎng)品一般都富含人體需要的營(yíng)養(yǎng)素;保健食品是具有特定保健功能、只適宜特定人群的食品，它的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值并不一定很高5.衛(wèi)生消毒用品酒精（75%95%）、來(lái)蘇水（84消毒知識(shí)拓展：消字號(hào)的產(chǎn)品）6.化妝品：以涂抹、噴灑或者其他類似方法，散布于人體表面的任何部位，如皮膚、毛發(fā)、指趾甲、唇齒等，以達(dá)到清潔、保養(yǎng)、美容、修飾和改變外觀，或者修正人體氣味，保持良好狀態(tài)為目的的化學(xué)工業(yè)品或精細(xì)化工產(chǎn)品7.正確服用口服藥物目前，80%的藥物是通過(guò)口服的，包括片劑、膠囊、顆粒、糖漿、滴丸等。服用方法：1、洗凈雙手，倒一杯溫開(kāi)水；2、先喝口水，潤(rùn)濕喉嚨和食管；3、藥物放進(jìn)嘴里，抿一口水咽下藥物，接著多喝幾口水；4、服藥后不要馬上躺下，最好站立或走動(dòng)一分鐘，以便藥物進(jìn)去胃里。5、服藥后30-60min內(nèi)不能做劇烈運(yùn)動(dòng)。8.吸收：藥物由給藥部位進(jìn)入血液循環(huán)的過(guò)程。除靜脈注射和靜脈滴注給藥外、其它途徑給藥都存在吸收過(guò)程。9.給藥方式：口服（po）、肌內(nèi)注射（im）和皮下注射（sc）、舌下給藥和吸入給藥。口服給藥：通過(guò)胃腸道吸收，主要在小腸吸收。胃-腸道-門靜脈-肝臟-血液（體循環(huán)）。藥物劑型：片劑、膠囊、滴丸、口服液內(nèi)注射和皮下注射靜脈注射：肌內(nèi)注射法：將藥液注入肌肉組織；皮下注射法：將小量藥液注入皮下組織。通過(guò)毛細(xì)血管吸收，藥物吸收快且完全，且前者快于后者。而靜脈注射直接入血。10.分布：藥物吸收后隨血液循環(huán)被轉(zhuǎn)運(yùn)到個(gè)組織器官的過(guò)程。體內(nèi)屏障：機(jī)體中有些組織對(duì)藥物的通透性具有特殊的屏障作用，主要有血腦屏障、胎盤屏障（形同虛設(shè)）和血眼屏障。11.代謝：機(jī)體對(duì)藥物的化學(xué)處理過(guò)程。肝臟是最重要的代謝器官，此外還有胃腸道、皮膚、腎。12.排泄：藥物及其代謝物被排除體外的過(guò)程。主要排泄器官有腎臟、膽道、腸道、肺唾液、乳腺、汗腺等。13.說(shuō)明書1.藥名：通?？煞譃樯唐访蛲ㄓ妹⒒瘜W(xué)名。通用名和化學(xué)名世界通用，任何教科書或文章上出現(xiàn)的應(yīng)是同一名稱，一般以英文和譯文表示。商品名，每一家生產(chǎn)藥廠都可為其產(chǎn)品取一個(gè)商品名。因此，相同成分的藥品，或是化學(xué)名相同的藥品，可能有多個(gè)商品名。不同的商品名，意味不同廠家的產(chǎn)品及不同的品質(zhì)。2.主要成分：?jiǎn)我怀煞只驈?fù)方成分。成藥里復(fù)方產(chǎn)品居多，醫(yī)師處方藥則單方居多。說(shuō)明書中標(biāo)明的多為主要成分。（感冒清的主要成分為板藍(lán)根、山芝麻、穿心蓮等。）3、適應(yīng)癥:或稱作用與用途。即根據(jù)藥品的藥理作用及臨床應(yīng)用情況，將使用本品確有療效的疾病列入適應(yīng)癥范圍。在一些中成藥的說(shuō)明書中常用“功能與主治”表示。服藥一定要在適應(yīng)癥范圍內(nèi)，尤其是OTC（非處方藥）藥物，應(yīng)按照適應(yīng)癥服用，避免錯(cuò)服。4.用法與用量：說(shuō)明書上的藥品量通常指成人劑量，兒童劑量則要根據(jù)年齡或體重計(jì)算。許多中西藥的重量用克（g）、毫克（mg）等表示，容量用毫升（ml）表示，并按1克＝1000毫克，1升＝1000毫升的比例換算。藥物用量常注明一日幾次，每次多少量；兒童常用每日每公斤體重多少量來(lái)表示。藥品的用法需根據(jù)該藥的劑型和特性，注明為口服、肌肉注射、靜脈用藥、外用及飯前服、飯后服、睡前服等。病人應(yīng)嚴(yán)格按照說(shuō)明書注明的方法用藥。5.不良反應(yīng)：許多藥物在使用過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)各種副作用，除藥物本身的特性外，還與用藥者的身體素質(zhì)、健康狀況有關(guān)。（有過(guò)敏體質(zhì)的人使用青霉素、鏈霉素容易發(fā)生過(guò)敏反應(yīng)。有些藥品口服后會(huì)刺激胃腸道引起惡心、嘔吐等反應(yīng)，有些藥物對(duì)肝腎有毒性等）6.注意事項(xiàng)：為了安全使用藥物，必須列出該藥的慎用、忌用和禁用對(duì)象。有禁忌癥的人，絕對(duì)不能使用相應(yīng)的藥物，慎用的藥物要在醫(yī)生指導(dǎo)下使用，密切監(jiān)測(cè)不良反應(yīng)。7.規(guī)格：指該藥每片或每支的含量。8.貯藏：此項(xiàng)為藥品保存中的一些要求，多數(shù)藥品均需避光，密閉并在陰涼干燥處保存。許多生物制品需冷藏或低溫保存。變質(zhì)的藥物絕對(duì)不能服用。9.有效期、保質(zhì)期或失效期：許多藥品均注明有效期，藥品超過(guò)有效期或達(dá)到失效期后則為過(guò)期失效，過(guò)期藥物絕對(duì)不能服用。10.批號(hào)：藥品批號(hào)一般表示該藥的生產(chǎn)日期。注意：一些歐洲國(guó)家進(jìn)口藥的年月日寫法按日、月、年排列。美國(guó)進(jìn)口藥大多按月、日、年排；日本進(jìn)口藥大多按年、月、日排列；俄羅斯等獨(dú)聯(lián)體國(guó)家，常用羅馬數(shù)字代表月份。14.藥品說(shuō)明書要看什么？一、看清“成分”避免重復(fù)用藥二、認(rèn)準(zhǔn)“批準(zhǔn)文號(hào)”防假藥三、看準(zhǔn)“批號(hào)”和“有效期”四、對(duì)不對(duì)癥看“適應(yīng)癥（功能主治)”五、對(duì)“不良反應(yīng)”要心中有數(shù)六、別拿“禁忌”不當(dāng)回事七、遵循“用法與用量”保證療效八、按“貯藏方法”存藥保證藥品質(zhì)量15.吃藥的注意事項(xiàng)錯(cuò)誤一：簡(jiǎn)單的隨一日三餐服藥“一日三次”:將一天24小時(shí)平均分為3段，每8小時(shí)服藥一次。按時(shí)服藥，保證體內(nèi)穩(wěn)定的血藥濃度，達(dá)到治療的效果。“飯前服用”則是指此藥需要空腹在餐前1小時(shí)或餐后2小時(shí)服用以利吸收?！帮埡蠓谩眲t是指餐后半小時(shí)服藥，利用食物減少藥物對(duì)胃腸的刺激或促進(jìn)胃腸對(duì)藥物的吸收。錯(cuò)誤二：躺著服藥躺著服藥，藥物容易粘附于食道壁。不僅影響療效還可能刺激食道，引起咳嗽或局部炎癥；嚴(yán)重的甚至損傷食道壁，埋下患食道癌的隱憂，最好取坐位或站姿服藥。錯(cuò)誤三：對(duì)著瓶口喝藥對(duì)著瓶口喝藥的情況多見(jiàn)于喝糖漿或合劑。一方面容易污染藥液，加速其變質(zhì)；另一方面不能準(zhǔn)確控制攝入的藥量。錯(cuò)誤四：多藥同服多藥同服，藥物之間的相互作用就很難避免，甚至還會(huì)引起一些你意想不到的麻煩。（如果你懷疑自己正在或即將服用的幾種藥物可能產(chǎn)生不良相互作用，一定要主動(dòng)向醫(yī)師或藥師咨詢，切記不可自行隨意停藥或換藥。）錯(cuò)誤五：喝水過(guò)多喝水過(guò)多會(huì)稀釋胃酸，不利于對(duì)藥物的溶解吸收。一般來(lái)說(shuō)送服固體藥物1小杯溫水就足夠了。糖漿這種特殊的制劑，特別是止咳糖漿，需要藥物覆蓋在發(fā)炎的咽部黏膜表面，形成保護(hù)性的薄膜，以減輕黏膜炎癥反應(yīng)、阻斷刺激、緩解咳嗽，所以，建議喝完糖漿5分鐘內(nèi)不要喝水。錯(cuò)誤六：服藥后馬上運(yùn)動(dòng)藥物服用后一般需要30~60分鐘才能被胃腸溶解吸收、發(fā)揮作用，其間需要足夠的血液參與循環(huán)。馬上運(yùn)動(dòng)會(huì)導(dǎo)致胃腸等臟器血液供應(yīng)不足，藥物的吸收效果自然大打折扣。16.大學(xué)生中常見(jiàn)疾病及防治：感冒、食物中毒、便秘和痢疾1）普通感冒：由多種病毒引起的呼吸道常見(jiàn)病。流行性感冒：有流感病毒引起的一種呼吸道急性傳染病。(病毒存在于病人的呼吸道中，在病人咳嗽、打噴嚏時(shí)經(jīng)飛沫傳染給別人，一般在冬春季流行的機(jī)會(huì)較多,病程約為7～10天)預(yù)防:1、勤洗手，用肥皂勤洗手2、打噴嚏或是咳嗽時(shí)勿用手遮擋，應(yīng)盡量向地面打噴嚏和咳嗽3、不要用手摸臉4、大量飲用干凈的水，保持室內(nèi)通風(fēng)、一定的濕度，用鼻呼吸，感冒季節(jié)少參加社會(huì)活動(dòng)5、放松心情，保持充足的睡眠6、打預(yù)防流感的預(yù)防針。非藥物防治感冒十二法：1、冷水洗面2、喝雞湯3、多食蘿卜4、糖姜茶合飲5、少吃食鹽6、沖服蜂蜜7、多吃佐料，增強(qiáng)人體的免疫功能8、食醋滴鼻、熏蒸9、搓手感冒期間的禁忌：感冒期間勿鍛煉，防止感冒演變?yōu)椴《拘孕募⊙住⒎窝?、風(fēng)濕?。徊豢呻S便使用藥物治療，盲目藥物治療會(huì)增強(qiáng)細(xì)菌抗藥性，損害人體免疫系統(tǒng)。不能不服藥，不能亂服藥。2）食物中毒：因進(jìn)食含有毒素的食物所致，以腹痛、嘔瀉等為主要表現(xiàn)的中毒類疾病癥狀：以上吐、下瀉、腹痛為主的急性胃腸炎癥狀，嚴(yán)重者可因脫水、休克、循環(huán)衰竭而危及生命。防治：1、補(bǔ)充液體、補(bǔ)充因上吐下瀉所流失的電解質(zhì)，如鉀、鈉及葡萄糖；飲食要清淡2、腹痛程度嚴(yán)重的病人可適量給予解紊劑，如顛茄合劑或顛茄片。注意事項(xiàng)：1、嘔吐與腹瀉是肌體防御功能起作用的一種表現(xiàn)，不應(yīng)立即用止瀉藥2、如無(wú)緩解跡象，甚至出現(xiàn)失水明顯，四肢寒冷，腹痛腹瀉加重，極