天然藥物提取方法課件

基本操作技術(shù)與應(yīng)用2010年2月23日-3月9日1精選PPT基本操作技術(shù)與應(yīng)用2010年2月23日-3月9日1精選PPT基本操作技術(shù)與應(yīng)用天然藥物活性成分的研究（了解內(nèi)容）天然產(chǎn)物的提取方法（掌握內(nèi)容）天然產(chǎn)物的分離方法（掌握內(nèi)容）色譜分離法（掌握內(nèi)容）天然產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)測(cè)定（熟悉內(nèi)容）2精選PPT基本操作技術(shù)與應(yīng)用天然藥物活性成分的研究（了解內(nèi)容）2精選P研究途徑臨床調(diào)查收集原料成分提取分離成分預(yù)試驗(yàn)活性篩選文獻(xiàn)資料調(diào)研結(jié)構(gòu)確定動(dòng)物試驗(yàn)臨床試驗(yàn)3精選PPT研究途徑臨床調(diào)查收集原料成分提取分離成分預(yù)試驗(yàn)活性篩選文獻(xiàn)資提取的基本知識(shí)什么是提??？提取的思路（已知成分、未知成分）提取前預(yù)處理（一般過(guò)2號(hào)篩為宜，同時(shí)注意酶的影響）基本原理—相似相溶影響因素（溶劑的選擇、方法選擇、時(shí)間、溫度、粉碎度等）極性4精選PPT提取的基本知識(shí)什么是提?。?精選PPT極性常用溶劑極性排列順序：石油醚<苯<無(wú)水乙醚<氯仿<乙酸乙酯<正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<水官能團(tuán)的極性排列順序：烷烴<鹵代烴<醚<酯<酮<醛<酰胺<胺<醇<水<酚<羧酸5精選PPT極性常用溶劑極性排列順序：5精選PPT溶劑分類(lèi)與特點(diǎn)（一）水：價(jià)廉，安全，對(duì)細(xì)胞的穿透能力強(qiáng)。適用于無(wú)機(jī)鹽、糖類(lèi)、鞣質(zhì)、氨基酸與蛋白質(zhì)、有機(jī)酸鹽、生物堿鹽、苷類(lèi)化合物的提取。親水性有機(jī)溶劑：甲醇、乙醇、丙酮等。特點(diǎn)：可與水任意比混溶，毒性低、價(jià)廉、回收方便，對(duì)細(xì)胞的穿透能力強(qiáng)。適用于多種成分的提取，其中，乙醇又稱(chēng)為“萬(wàn)能溶劑”。6精選PPT溶劑分類(lèi)與特點(diǎn)（一）水：價(jià)廉，安全，對(duì)細(xì)胞的穿透能力強(qiáng)。6精溶劑分類(lèi)與特點(diǎn)（二）親脂性有機(jī)溶劑：石油醚、乙醚、苯、氯仿、乙酸乙酯等。特點(diǎn)：選擇性強(qiáng)、回收方便、但易燃、有毒、價(jià)貴。適用于揮發(fā)油、油脂、葉綠素、樹(shù)脂、游離生物堿、苷元等成分的提取。7精選PPT溶劑分類(lèi)與特點(diǎn)（二）親脂性有機(jī)溶劑：石油醚、乙醚、苯、氯仿、提取技術(shù)與方法（一）溶劑法：僅限于低分子量、含量高的成分的提取。根據(jù)“相似相溶”的原則進(jìn)行提取。（二）其他方法根據(jù)化合物的特殊性質(zhì)選擇特殊的提取方法。水蒸氣蒸餾法升華法共9種方法8精選PPT提取技術(shù)與方法（一）溶劑法：共9種方法8精選PPT溶劑提取法浸漬法滲漉法煎煮法回流法連續(xù)回流法超聲提取法超臨界流體萃取法9精選PPT溶劑提取法浸漬法9精選PPT浸漬法分為冷浸法（室溫）和溫浸法（40~60℃）。常用溶劑：水、酸水、堿水、稀醇等。適用于遇熱易被破壞的成分或含大量淀粉、粘液質(zhì)、果膠、樹(shù)膠等多糖類(lèi)成分的提取。缺點(diǎn)：提取時(shí)間長(zhǎng)、溶劑用量大、提取效率低、用水作溶劑時(shí)易發(fā)霉。10精選PPT浸漬法分為冷浸法（室溫）和溫浸法（40~60℃）。10精選P滲漉法適用范圍與提取溶劑同浸漬法。步驟：浸潤(rùn)、裝筒、排氣、浸漬、滲漉。優(yōu)點(diǎn)：提取效率較高。缺點(diǎn)：提取時(shí)間長(zhǎng)、溶劑用量大。11精選PPT滲漉法適用范圍與提取溶劑同浸漬法。11精選PPT煎煮法藥房及家庭中最為常用的中藥提取方法。常用溶劑：水適用于對(duì)熱穩(wěn)定的成分的提取。含多糖類(lèi)成分量大的藥材因煎煮后呈糊狀，不宜用本法。12精選PPT煎煮法藥房及家庭中最為常用的中藥提取方法。12精選PPT回流法最常用的提取方法。對(duì)熱不穩(wěn)定的成分不適用。提取效率較高。選擇什么試劑？適用于什么成分？13精選PPT回流法最常用的提取方法。13精選PPT連續(xù)回流法浸漬法和回流法的特點(diǎn)兼有。對(duì)熱不穩(wěn)定的成分慎用。提取時(shí)間長(zhǎng)。14精選PPT連續(xù)回流法浸漬法和回流法的特點(diǎn)兼有。14精選PPT超聲提取法利用超聲波振動(dòng)產(chǎn)生的能量在提取液中產(chǎn)生“空化現(xiàn)象”提取有效成分。優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便，幾乎適用于各種溶劑的提取，提取時(shí)間短，效率高。15精選PPT超聲提取法利用超聲波振動(dòng)產(chǎn)生的能量在提取液中產(chǎn)生“空化現(xiàn)象”超臨界流體萃取法超臨界流體（supercriticalfluid，SF）：當(dāng)某物質(zhì)處于臨界溫度和臨界壓力以上時(shí)可形成一種既非液體又非氣體的單一相態(tài)，將這一狀態(tài)的物質(zhì)稱(chēng)為超臨界流體。目前最常用的是CO2-SFE技術(shù)。16精選PPT超臨界流體萃取法超臨界流體（supercriticalfl水蒸氣蒸餾法適用于具有揮發(fā)性，可與水蒸氣一起蒸餾出來(lái)，與水不反應(yīng)，又難溶于水的化合物的提取。17精選PPT水蒸氣蒸餾法適用于具有揮發(fā)性，可與水蒸氣一起蒸餾出來(lái)，與水不升華法適用于有升華性，升華溫度適當(dāng)，遇熱較穩(wěn)定的化合物的提取。可分為常壓升華和減壓升華兩種。18精選PPT升華法適用于有升華性，升華溫度適當(dāng)，遇熱較穩(wěn)定的化合物的提取關(guān)于提取問(wèn)題小結(jié)極性（溶劑的極性、化合物的極性）提取溶劑的分類(lèi)與特點(diǎn)提取的原理提取的方法與適用范圍19精選PPT關(guān)于提取問(wèn)題小結(jié)極性（溶劑的極性、化合物的極性）19精選PP分離方法（一）分離前處理（二）結(jié)晶與重結(jié)晶（三）分離方法系統(tǒng)溶劑分離法兩相溶劑萃取法沉淀法

6.透析法

9.色譜法吸附法（補(bǔ)充）7.分餾法鹽析法（補(bǔ)充）8.升華法20精選PPT分離方法（一）分離前處理20精選PPT分離前處理提取液一般體積較大，目標(biāo)成份濃度低，需要先濃縮提高濃度，然后再進(jìn)行分離工作。濃縮的方法常壓蒸餾減壓蒸餾薄膜蒸發(fā)21精選PPT分離前處理提取液一般體積較大，目標(biāo)成份濃度低，需要先濃縮提高常壓蒸餾適用于有效成分受熱不易分解，低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑（氯仿、乙醚、石油醚等）的提取液的濃縮。22精選PPT常壓蒸餾適用于有效成分受熱不易分解，低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑（氯仿、乙減壓蒸餾適用于溶劑沸點(diǎn)高，有效成分受熱易分解的提取液的濃縮。23精選PPT減壓蒸餾適用于溶劑沸點(diǎn)高，有效成分受熱易分解的提取液的濃縮。薄膜蒸發(fā)濃縮效率高，受熱時(shí)間短，特別適用于濃縮水或稀醇為溶劑的提取液。24精選PPT薄膜蒸發(fā)濃縮效率高，受熱時(shí)間短，特別適用于濃縮水或稀醇為溶劑結(jié)晶與重結(jié)晶（一）結(jié)晶的條件（掌握)（二）結(jié)晶溶劑的選擇

(熟悉）（三）制備結(jié)晶的方法

1.晶核的形成

2.晶鏈的延長(zhǎng)（四）結(jié)晶純度的判斷(重點(diǎn)掌握）25精選PPT結(jié)晶與重結(jié)晶（一）結(jié)晶的條件（掌握)25精選PPT結(jié)晶的條件被分離化合物純度高；呈過(guò)飽和狀態(tài)；最適結(jié)晶溫度：5~10℃；充分放置。26精選PPT結(jié)晶的條件被分離化合物純度高；26精選PPT結(jié)晶溶劑的選擇（理想溶劑）一不與結(jié)晶物質(zhì)起化學(xué)反應(yīng)；雜質(zhì)與結(jié)晶物質(zhì)在溶劑中的溶解度相差大；目的物在溶劑中的溶解度隨溫度不同有顯著差別；溶劑沸點(diǎn)不宜太高或太低（可在60℃）；溶劑沸點(diǎn)低于化合物的熔點(diǎn)；溶劑沸點(diǎn)低于結(jié)晶溫度；能給出較好的晶形，無(wú)劇毒。27精選PPT結(jié)晶溶劑的選擇（理想溶劑）一不與結(jié)晶物質(zhì)起化學(xué)反應(yīng)；27精選結(jié)晶溶劑的選擇二常用溶劑：甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯等。其他不常用溶劑：二甲基亞砜、乙腈、甲酰胺、二甲基甲酰胺、冰醋酸等。混合溶劑？如何選擇與使用水--乙醇；乙醇—乙醚；石油醚—苯；水—丙酮；乙醚—乙酸乙酯—乙醇等。28精選PPT結(jié)晶溶劑的選擇二常用溶劑：甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙結(jié)晶純度的判斷一定的晶形、均勻的色澤；有固定的熔點(diǎn)，熔距較?。籘LC：經(jīng)過(guò)三種以上展開(kāi)劑展開(kāi)得均一圓形的斑點(diǎn)。29精選PPT結(jié)晶純度的判斷一定的晶形、均勻的色澤；29精選PPT系統(tǒng)溶劑分離法目前是研究成分不明的天然產(chǎn)物的最常用方法。選擇3~4種不同極性的溶劑，由低極性到高極性分步對(duì)粗提物進(jìn)行分離。手續(xù)復(fù)雜、對(duì)化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，容易引起分解、異構(gòu)化的產(chǎn)物應(yīng)特別注意。30精選PPT系統(tǒng)溶劑分離法目前是研究成分不明的天然產(chǎn)物的最常用方法。30兩相溶劑萃取法（一）基礎(chǔ)知識(shí)原理分配系數(shù)與分離因子（二）萃取方法31精選PPT兩相溶劑萃取法（一）基礎(chǔ)知識(shí)31精選PPT基礎(chǔ)知識(shí)一、原理利用混合物中各成分在兩種互不混溶的溶劑中分配系數(shù)不同而達(dá)到分離的目的。二、分配系數(shù)與分離因子分配系數(shù)（K）K=C有機(jī)相/C水相分離因子（β）β=KA/KB32精選PPT基礎(chǔ)知識(shí)一、原理32精選PPT假設(shè)KA=10，KB=0.1，則β=100當(dāng)β≥100時(shí)，一次簡(jiǎn)單的萃取就可以完成分離；當(dāng)10<β≤100，需萃取10~12次；當(dāng)β≤2時(shí)，需要完成100次以上的萃取；當(dāng)β≈1時(shí)，理論上無(wú)法完成萃取分離的目的。33精選PPT假設(shè)KA=10，KB=0.1，則β=10033精選PPT萃取方法簡(jiǎn)單萃取法（掌握）pH梯度萃取法（重點(diǎn)掌握）（補(bǔ)充）逆流連續(xù)萃取法（了解）逆流分溶法（countercurrentdistributionCCD)（了解）液滴逆流分配法（dropletcountercurrentchromatogrophyDCCC）（了解）34精選PPT萃取方法簡(jiǎn)單萃取法（掌握）34精選PPT簡(jiǎn)單萃取法適用于分離因子較大的情況的分離。提取液的密度最好在1.1~1.2?！暗攘慷啻巍痹瓌t（掌握）乳化現(xiàn)象（熟悉）35精選PPT簡(jiǎn)單萃取法適用于分離因子較大的情況的分離。35精選PPT等量多次原則證明設(shè)Vml水中含有Wg溶質(zhì)，用Sml有機(jī)溶劑萃取后，在水中尚有W1g溶質(zhì)沒(méi)有被萃取出來(lái)，則分配系數(shù)KD為：整理得36精選PPT等量多次原則證明設(shè)Vml水中含有Wg溶質(zhì)，用Sml有機(jī)溶劑萃第2次再用Sml有機(jī)溶劑萃取水中的溶質(zhì)后仍有W2g沒(méi)有被萃取出來(lái)，則因此，若每次用Sml有機(jī)溶劑萃取，最后剩在Vml水中的溶質(zhì)Wn為若一次用nSml有機(jī)溶劑萃取，剩余在水中的溶質(zhì)37精選PPT第2次再用Sml有機(jī)溶劑萃取水中的溶質(zhì)后仍有W2g沒(méi)有被萃取結(jié)論用總量相同的溶劑，分多次萃取的效率要比1次萃取的效率高。38精選PPT結(jié)論用總量相同的溶劑，分多次萃取的效率要比1次萃取的效率高。乳化現(xiàn)象產(chǎn)生原因天然產(chǎn)物中含有皂苷、蛋白質(zhì)、植物膠質(zhì)、鞣質(zhì)等表面活性物質(zhì)；兩相互不相溶的溶劑；振搖；少量輕質(zhì)的沉淀等。39精選PPT乳化現(xiàn)象產(chǎn)生原因39精選PPT解決方案較長(zhǎng)時(shí)間靜置；2.將乳狀液分出，再換新溶劑萃?。?.將乳狀液加溫或冷凍；4.將乳狀液抽濾；5.加入少量電解質(zhì)（如NaCl等）；6.加入少量低級(jí)醇（如乙醇、戊醇等）。40精選PPT解決方案40精選PPTpH梯度萃取法是分離酸性、堿性、兩性有機(jī)化合物常用的手段。原理：由于溶劑系統(tǒng)PH的改變，改變了化合物的存在狀態(tài)（游離型或解離型），從而改變了化合物在溶劑系統(tǒng)中的分配系數(shù)。酸性化合物：pH=pka-2游離；

pH=pka+2

解離。堿性化合物相反。41精選PPTpH梯度萃取法是分離酸性、堿性、兩性有機(jī)化合物常用的手段。4以酸性化合物HA為例酸性化合物在水中電離：電離常數(shù)取負(fù)對(duì)數(shù)42精選PPT以酸性化合物HA為例酸性化合物在水中電離：電離常數(shù)取負(fù)對(duì)數(shù)4逆流連續(xù)萃取法操作簡(jiǎn)便；萃取完全，不易乳化；適合于兩相互不混溶的溶劑的密度相差較大的系統(tǒng)的分離。43精選PPT逆流連續(xù)萃取法操作簡(jiǎn)便；43精選PPT逆流分溶法（CCD)適用于性質(zhì)相似的異構(gòu)體或同系物的分離。特點(diǎn)：條件溫和，樣品易于回收。注意：溶質(zhì)濃度越低分離效果越好。44精選PPT逆流分溶法（CCD)適用于性質(zhì)相似的異構(gòu)體或同系物的分離。4液滴逆流分配法（DCCC）CCD的改進(jìn)方法，不易乳化。特別適用于皂苷類(lèi)化合物的分離。需要?jiǎng)恿Ρ谩?5精選PPT液滴逆流分配法（DCCC）CCD的改進(jìn)方法，不易乳化。45精沉淀法可以分為酸堿沉淀、試劑沉淀、鉛鹽沉淀。酸堿沉淀：適用于酸性、堿性物質(zhì)的分離。試劑沉淀沉淀試劑沉淀有機(jī)溶劑沉淀3.鉛鹽沉淀中性醋酸鉛堿性醋酸鉛46精選PPT沉淀法可以分為酸堿沉淀、試劑沉淀、鉛鹽沉淀。46精選PPT吸附法（補(bǔ)充）選擇適宜吸附劑（如硅膠、Al2O3、活性炭）去除雜質(zhì)或選擇性篩選目標(biāo)成分。如用活性炭去除在提取液中的葉綠素等脂溶性成分。47精選PPT吸附法（補(bǔ)充）選擇適宜吸附劑（如硅膠、Al2O3、活性炭）鹽析法（補(bǔ)充）在水提液中加入NaCl、MgCl2等無(wú)機(jī)鹽促進(jìn)極性稍大組分析出的方法。如鹽酸小檗堿易溶于熱水，在冷水中溶解度小，但在結(jié)晶冷卻過(guò)程中不易析出結(jié)晶，可通過(guò)加入NaCl固體的方法促進(jìn)析晶。48精選PPT鹽析法（補(bǔ)充）在水提液中加入NaCl、MgCl2等無(wú)機(jī)鹽促進(jìn)透析法49精選PPT透析法49精選PPT色譜法吸附色譜(adsorptionchromatography)分配色譜/液相色譜(patitionchr.)離子交換色譜(ionexchangechr.)大孔吸附樹(shù)脂法(macro-reticularresinemethod)凝膠色譜法(gelfiltrationchr.)氣相色譜法(gaschromatography)高效液相色譜（highperformanceliquidchromatography)50精選PPT色譜法吸附色譜(adsorptionchromatogra吸附色譜基本原理：利用混合物中不同組分分子、溶劑分子與吸附劑表面分子間的作用力不同，引起不同的吸附性能而進(jìn)行分離。吸附劑色譜結(jié)果操作方式51精選PPT吸附色譜基本原理：利用混合物中不同組分分子、溶劑分子與吸附劑

極性吸附劑：硅膠、氧化鋁吸附劑非極性吸附劑：活性炭聚酰胺硅膠：微酸性，不宜直接用于堿性物質(zhì)的分離。顆粒表面的硅醇基起吸附作用，需在105~110℃活化。氧化鋁：微堿性，不宜直接用于含醛基、羰基、酯基化合物的分離。活性炭：多用于水提液中脂溶性雜質(zhì)的分離。52精選PPT極性吸附劑：硅膠、4、聚酰胺：酰胺基可以與羥基、羧基、硝基等形成氫鍵。分離規(guī)律（P67）

：氫鍵越多，吸附越牢，Rf越小。如易形成分子內(nèi)氫鍵，Rf增大。芳香化程度越高，吸附越牢。各種溶劑的洗脫能力：水<甲醇<丙酮<NaOH水溶液<甲酰胺<二甲基甲酰胺<尿素水溶液53精選PPT4、聚酰胺：酰胺基可以與羥基、羧基、硝基等形成氫鍵。53精選操作方式薄層色譜（thinlayerchromatography,TLC)

操作步驟：制板點(diǎn)樣展開(kāi)定位柱色譜操作步驟：吸附劑與洗脫劑選擇裝柱上樣洗脫分離注意活化54精選PPT操作方式薄層色譜（thinlayerchromatogr分配色譜（一）基本原理：根據(jù)被分離物質(zhì)在兩相中的溶解性不同而進(jìn)行分離（CCD）。（二）正相色譜與反相色譜（掌握）（三）支持劑：硅藻土、纖維素粉、濾紙、含水17%的硅膠等。（四）操作方式

1.紙層析(PC)2.TLC3.柱層析55精選PPT分配色譜（一）基本原理：根據(jù)被分離物質(zhì)在兩相中的溶解性不同而正相色譜：固定相的極性大于流動(dòng)相的極性。固定相多為強(qiáng)極性溶劑，如水、緩沖液等。反相色譜：固定相的極性小于流動(dòng)相的極性。固定相多為親脂性溶劑。56精選PPT正相色譜：固定相的極性大于流動(dòng)相的極性。固定相多為強(qiáng)極性溶劑支持劑的要求無(wú)吸附作用；不溶于兩相溶劑中；不與被分離物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；并能吸著一定的固定相；可以使流動(dòng)相自由通過(guò)而不改變其組成。57精選PPT支持劑的要求無(wú)吸附作用；57精選PPT離子交換色譜（IEC）（一）分離原理：利用離子交換樹(shù)脂在水溶液中可以解離，并與溶液中其它離子產(chǎn)生可逆性的交換，達(dá)到分離離子型化合物的目的。（二）離子交換樹(shù)脂（熟悉）（三）分離結(jié)果（重點(diǎn)掌握）（四）離子交換樹(shù)脂的選擇（了解）（五）操作（了解）58精選PPT離子交換色譜（IEC）（一）分離原理：利用離子交換樹(shù)脂在水溶離子交換樹(shù)脂陽(yáng)離子交換樹(shù)脂：能與溶液中陽(yáng)離子進(jìn)行交換，按交換活性分為強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和弱酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂兩類(lèi)。如：RSO3H+NaClRSO3Na+HCl陰離子交換樹(shù)脂：能與溶液中陰離子進(jìn)行交換，按交換活性分為強(qiáng)堿型陰離子交換樹(shù)脂和弱堿型陰離子交換樹(shù)脂兩類(lèi)。如：RNOH+NaClRNCl+NaOH59精選PPT離子交換樹(shù)脂陽(yáng)離子交換樹(shù)脂：能與溶液中陽(yáng)離子進(jìn)行交換，按交換樣品強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂酸性及中性物質(zhì)強(qiáng)堿型陰離子交換樹(shù)脂稀NH4OH洗脫洗脫液（堿性及兩性）

中性物質(zhì)稀堿洗脫洗脫液（酸性物質(zhì)）強(qiáng)堿型陰離子交換樹(shù)脂堿性物質(zhì)稀酸洗脫洗脫液（兩性物質(zhì)）流出液流出液流出液60精選PPT樣品強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂酸性及中性物質(zhì)強(qiáng)堿型陰離子交換樹(shù)脂稀離子交換樹(shù)脂的選擇根據(jù)被分離物質(zhì)選擇樹(shù)脂，如分離生物堿選擇陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。根據(jù)被分離物質(zhì)的解離常數(shù)選擇，如堿性強(qiáng)選擇弱酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。根據(jù)化合物大小選擇，如分離大分子化合物可選擇交聯(lián)度3~6%的樹(shù)脂。61精選PPT離子交換樹(shù)脂的選擇根據(jù)被分離物質(zhì)選擇樹(shù)脂，如分離生物堿選擇陽(yáng)操作預(yù)處理：水浸泡（溶脹）酸堿處理（洗去雜質(zhì)）水洗至中性裝柱上樣與洗脫再生62精選PPT操作預(yù)處理：水浸泡（溶脹）酸堿處理（洗去雜質(zhì)）大孔吸附樹(shù)脂法

主要用于水溶性化合物的提取分離。大孔吸附樹(shù)脂（吸附性與范德華力、氫鍵有關(guān)）大孔吸附樹(shù)脂類(lèi)型影響因素：1.分子極性大小；2.分子體積大??；3.pH值的影響。預(yù)處理與再生63精選PPT大孔吸附樹(shù)脂法主要用于水溶性化合物的提取分離。63精選PP大孔吸附樹(shù)脂的特點(diǎn)吸附性和篩選性相結(jié)合的分離材料選擇性好吸附容量大機(jī)械強(qiáng)度高再生處理方便吸附速度快解吸容易不易受到無(wú)機(jī)鹽等離子或小分子化合物的影響64精選PPT大孔吸附樹(shù)脂的特點(diǎn)吸附性和篩選性相結(jié)合的分離材料64精選PP大孔吸附樹(shù)脂類(lèi)型非極性吸附樹(shù)脂（芳香族吸附劑）：以苯乙烯為單體，二乙基苯為交聯(lián)劑。中極性吸附樹(shù)脂（脂肪族吸附劑）：以甲基丙烯酸酯作為單體和交聯(lián)劑。極性吸附樹(shù)脂：結(jié)構(gòu)中含有硫氧、酰胺、氮氧等極性基團(tuán)。65精選PPT大孔吸附樹(shù)脂類(lèi)型非極性吸附樹(shù)脂（芳香族吸附劑）：以苯乙烯為單預(yù)處理與再生預(yù)處理：水洗、溶脹后用甲醇或95%的乙醇浸泡24小時(shí)，至洗滌液加水后不呈白色渾濁，最后用蒸餾水洗掉有機(jī)溶劑。再生：蒸餾水、甲醇、乙醇反復(fù)洗滌，必要時(shí)可用3%的鹽酸水溶液或3%的氫氧化鈉溶液再生。66精選PPT預(yù)處理與再生預(yù)處理：水洗、溶脹后用甲醇或95%的乙醇浸泡24凝膠色譜法（GFC）原理：“分子篩”凝膠的種類(lèi)1.葡聚糖凝膠（SephadexG）2.羥丙基葡聚糖凝膠（LH-20）67精選PPT凝膠色譜法（GFC）原理：“分子篩”67精選PPT氣相色譜法：適用于沸點(diǎn)低，易揮發(fā)，對(duì)熱穩(wěn)定的化合物的分離。HPLC電泳技術(shù)68精選PPT氣相色譜法：適用于沸點(diǎn)低，易揮發(fā)，對(duì)熱穩(wěn)定的化合物的分離。6結(jié)構(gòu)測(cè)定(一)鑒定天然產(chǎn)物化學(xué)成分的一般步驟1.化合物純度測(cè)定2.初步推測(cè)化合物類(lèi)型3.測(cè)定分子式、計(jì)算不飽和度4.確定官能團(tuán)或結(jié)構(gòu)片斷5.確定分子的平面結(jié)構(gòu)6.確定分子的立體結(jié)構(gòu)(二)結(jié)構(gòu)測(cè)定中波譜知識(shí)回顧69精選PPT結(jié)構(gòu)測(cè)定(一)鑒定天然產(chǎn)物化學(xué)成分的一般步驟69精選PPT純度測(cè)定方法1.結(jié)晶的性質(zhì)2.層析行為（PC、TLC）3.GC4.HPLC5.電泳……70精選PPT純度測(cè)定方法1.結(jié)晶的性質(zhì)70精選PPT分子式測(cè)定方法、不飽和度的計(jì)算分子式測(cè)定方法（MS）：1.元素定性分析2.高分辨質(zhì)譜法（HR-MS)不飽和度的計(jì)算

U=(2+2n4+n3-n1)/271精選PPT分子式測(cè)定方法、不飽和度的計(jì)算分子式測(cè)定方法（MS）：71精例1：元素定性分析定量分析結(jié)果：C：79.35%，H：10.21%所以，O=100-79.35-10.21=10.44%三元素在結(jié)構(gòu)中所占比例為：C=79.35/12.01=6.6110.16H=10.21/1.008=10.1315.58O=10.44/16.00=0.651分子式為（C10H16O1）n如MS的分子離子峰為456，則n=372精選PPT例1：元素定性分析定量分析結(jié)果：C：79.35%，H：10.例2：高分辨質(zhì)譜法以12C=12.000000為基準(zhǔn)，1H=1.00782514N=14.00307，16O=15.99491故：C8H12N4164.1063C9H12N2O164.0950C10H12O2164.0837C10H16N2164.1315分子量均為164，但精確質(zhì)量不一樣，可用于區(qū)別化合物。73精選PPT例2：高分辨質(zhì)譜法以12C=12.000000為基準(zhǔn)，1H=常用波譜知識(shí)回顧紫外光譜(UV)紅外光譜(IR)核磁共振(NMR)質(zhì)譜(MS)練習(xí)74精選PPT常用波譜知識(shí)回顧紫外光譜(UV)74精選PPT紫外光譜用不同波長(zhǎng)的紫外光為光源（200~400nm），依次照射一定濃度的樣品溶液，分別測(cè)定其吸光度（A），并用波長(zhǎng)對(duì)吸光度（或摩爾吸光系數(shù)）作圖，得紫外吸收光譜圖。應(yīng)用：定性鑒別、純度檢查、單組分的定量分析以及結(jié)構(gòu)解析（輔助手段）。只能顯示分子中部分結(jié)構(gòu)的特征。75精選PPT紫外光譜用不同波長(zhǎng)的紫外光為光源（200~400nm），依次可鑒定的結(jié)構(gòu)片斷某種發(fā)色團(tuán)的存在；順?lè)串悩?gòu)體的鑒定；吸收帶R帶：雜原子的不飽和基團(tuán)，波長(zhǎng)>270nm,弱吸收；可隨溶劑極性的不同而移動(dòng)。K帶：共軛結(jié)構(gòu)，強(qiáng)吸收。B帶：芳香化合物，似掌狀，256nm左右，弱吸收。E帶：芳香化合物，強(qiáng)吸收，可分為E1（180nm)和E2(200nm)兩個(gè)峰。76精選PPT可鑒定的結(jié)構(gòu)片斷76精選PPT紅外光譜廣泛用來(lái)鑒定化合物的結(jié)構(gòu)，簡(jiǎn)單迅速，可靠。用波長(zhǎng)2.5-15um（4000-667cm-1）的光波為光源依次照射樣品，以波數(shù)（或波長(zhǎng)）為橫坐標(biāo)，百分透光度為縱坐標(biāo)繪制的譜圖。與紫外光譜的區(qū)別：IR為振動(dòng)-轉(zhuǎn)動(dòng)光譜適用范圍廣特征性強(qiáng)77精選PPT紅外光譜廣泛用來(lái)鑒定化合物的結(jié)構(gòu)，簡(jiǎn)單迅速，可靠。77精選PIR的九個(gè)重要區(qū)段：3750~3000cm-1:-OH,-NH3300~3000cm-1:≡CH,=CH,Ar-H3000~2700cm-1:飽和CH,-CHO2400~2100cm-1:-C≡C,-C≡N1900~1650cm-1:C=O1675~1500cm-1:C=C,C=N1475~1300cm-1:CH1300~1000cm-1:C-O(酚、醇、醚）1000~650cm-1：=CH78精選PPTIR的九個(gè)重要區(qū)段：78精選PPT影響峰位的因素誘導(dǎo)因素：如吸電子誘導(dǎo)效應(yīng)使峰向高頻方向移動(dòng)。共軛因素：使峰向低頻方向移動(dòng)。氫鍵：使峰向低頻方向移動(dòng)。79精選PPT影響峰位的因素誘導(dǎo)因素：如吸電子誘導(dǎo)效應(yīng)使峰向高頻方向移動(dòng)。核磁共振用60cm~300m波長(zhǎng)的無(wú)線電波照射樣品，只能引起原子核的自旋能級(jí)的躍遷。1H-NMR、13C-NMR、二維核磁共振譜（N+1)律峰位：烷基H~1ppm，ArH~7ppm等。80精選PPT核磁共振用60cm~300m波長(zhǎng)的無(wú)線電波照射樣品，只能引起質(zhì)譜主要特點(diǎn)：靈敏度高分析速度快測(cè)定對(duì)象廣主要用途：測(cè)定準(zhǔn)確的分子量鑒定化合物測(cè)定分子中Cl,Br等原子數(shù)81精選PPT質(zhì)譜主要特點(diǎn)：81精選PPT光譜解析練習(xí)一某未知化合物的分子式為C14H14,通過(guò)光譜解析推測(cè)結(jié)構(gòu)。82精選PPT光譜解析練習(xí)一某未知化合物的分子式為C14H14,通過(guò)光譜解光譜解析練習(xí)二化合物分子式如下，指出下列各峰歸屬。δ1.2CH2CH3δ2.0COCH3δ4.0OCH2CH3δ6.8~7.6C6H4δ9.8NH83精選PPT光譜解析練習(xí)二化合物分子式如下，指出下列各峰歸屬。δ1.2光譜解析練習(xí)三化合物分子式為C10H10Br2O，推測(cè)其結(jié)構(gòu)式。84精選PPT光譜解析練習(xí)三化合物分子式為C10H10Br2O，推測(cè)其結(jié)構(gòu)小結(jié)常用溶劑的分類(lèi)與極性比較。常用的提取、分離技術(shù)與選擇原則。濃縮方式。結(jié)晶純度的判斷。乳化現(xiàn)象的產(chǎn)生與消除。pH梯度萃取法。85精選PPT小結(jié)常用溶劑的分類(lèi)與極性比較。85精選PPT常用吸附劑與使用注意。吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜分離化合物的原理。化合物結(jié)構(gòu)測(cè)定的一般步驟。CCD、DCCC、HPLC、GC、IEC、GFC、UV、IR、NMR、MS的含義。86精選PPT常用吸附劑與使用注意。86精選PPT基本操作技術(shù)與應(yīng)用2010年2月23日-3月9日87精選PPT基本操作技術(shù)與應(yīng)用2010年2月23日-3月9日1精選PPT基本操作技術(shù)與應(yīng)用天然藥物活性成分的研究（了解內(nèi)容）天然產(chǎn)物的提取方法（掌握內(nèi)容）天然產(chǎn)物的分離方法（掌握內(nèi)容）色譜分離法（掌握內(nèi)容）天然產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)測(cè)定（熟悉內(nèi)容）88精選PPT基本操作技術(shù)與應(yīng)用天然藥物活性成分的研究（了解內(nèi)容）2精選P研究途徑臨床調(diào)查收集原料成分提取分離成分預(yù)試驗(yàn)活性篩選文獻(xiàn)資料調(diào)研結(jié)構(gòu)確定動(dòng)物試驗(yàn)臨床試驗(yàn)89精選PPT研究途徑臨床調(diào)查收集原料成分提取分離成分預(yù)試驗(yàn)活性篩選文獻(xiàn)資提取的基本知識(shí)什么是提??？提取的思路（已知成分、未知成分）提取前預(yù)處理（一般過(guò)2號(hào)篩為宜，同時(shí)注意酶的影響）基本原理—相似相溶影響因素（溶劑的選擇、方法選擇、時(shí)間、溫度、粉碎度等）極性90精選PPT提取的基本知識(shí)什么是提??？4精選PPT極性常用溶劑極性排列順序：石油醚<苯<無(wú)水乙醚<氯仿<乙酸乙酯<正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<水官能團(tuán)的極性排列順序：烷烴<鹵代烴<醚<酯<酮<醛<酰胺<胺<醇<水<酚<羧酸91精選PPT極性常用溶劑極性排列順序：5精選PPT溶劑分類(lèi)與特點(diǎn)（一）水：價(jià)廉，安全，對(duì)細(xì)胞的穿透能力強(qiáng)。適用于無(wú)機(jī)鹽、糖類(lèi)、鞣質(zhì)、氨基酸與蛋白質(zhì)、有機(jī)酸鹽、生物堿鹽、苷類(lèi)化合物的提取。親水性有機(jī)溶劑：甲醇、乙醇、丙酮等。特點(diǎn)：可與水任意比混溶，毒性低、價(jià)廉、回收方便，對(duì)細(xì)胞的穿透能力強(qiáng)。適用于多種成分的提取，其中，乙醇又稱(chēng)為“萬(wàn)能溶劑”。92精選PPT溶劑分類(lèi)與特點(diǎn)（一）水：價(jià)廉，安全，對(duì)細(xì)胞的穿透能力強(qiáng)。6精溶劑分類(lèi)與特點(diǎn)（二）親脂性有機(jī)溶劑：石油醚、乙醚、苯、氯仿、乙酸乙酯等。特點(diǎn)：選擇性強(qiáng)、回收方便、但易燃、有毒、價(jià)貴。適用于揮發(fā)油、油脂、葉綠素、樹(shù)脂、游離生物堿、苷元等成分的提取。93精選PPT溶劑分類(lèi)與特點(diǎn)（二）親脂性有機(jī)溶劑：石油醚、乙醚、苯、氯仿、提取技術(shù)與方法（一）溶劑法：僅限于低分子量、含量高的成分的提取。根據(jù)“相似相溶”的原則進(jìn)行提取。（二）其他方法根據(jù)化合物的特殊性質(zhì)選擇特殊的提取方法。水蒸氣蒸餾法升華法共9種方法94精選PPT提取技術(shù)與方法（一）溶劑法：共9種方法8精選PPT溶劑提取法浸漬法滲漉法煎煮法回流法連續(xù)回流法超聲提取法超臨界流體萃取法95精選PPT溶劑提取法浸漬法9精選PPT浸漬法分為冷浸法（室溫）和溫浸法（40~60℃）。常用溶劑：水、酸水、堿水、稀醇等。適用于遇熱易被破壞的成分或含大量淀粉、粘液質(zhì)、果膠、樹(shù)膠等多糖類(lèi)成分的提取。缺點(diǎn)：提取時(shí)間長(zhǎng)、溶劑用量大、提取效率低、用水作溶劑時(shí)易發(fā)霉。96精選PPT浸漬法分為冷浸法（室溫）和溫浸法（40~60℃）。10精選P滲漉法適用范圍與提取溶劑同浸漬法。步驟：浸潤(rùn)、裝筒、排氣、浸漬、滲漉。優(yōu)點(diǎn)：提取效率較高。缺點(diǎn)：提取時(shí)間長(zhǎng)、溶劑用量大。97精選PPT滲漉法適用范圍與提取溶劑同浸漬法。11精選PPT煎煮法藥房及家庭中最為常用的中藥提取方法。常用溶劑：水適用于對(duì)熱穩(wěn)定的成分的提取。含多糖類(lèi)成分量大的藥材因煎煮后呈糊狀，不宜用本法。98精選PPT煎煮法藥房及家庭中最為常用的中藥提取方法。12精選PPT回流法最常用的提取方法。對(duì)熱不穩(wěn)定的成分不適用。提取效率較高。選擇什么試劑？適用于什么成分？99精選PPT回流法最常用的提取方法。13精選PPT連續(xù)回流法浸漬法和回流法的特點(diǎn)兼有。對(duì)熱不穩(wěn)定的成分慎用。提取時(shí)間長(zhǎng)。100精選PPT連續(xù)回流法浸漬法和回流法的特點(diǎn)兼有。14精選PPT超聲提取法利用超聲波振動(dòng)產(chǎn)生的能量在提取液中產(chǎn)生“空化現(xiàn)象”提取有效成分。優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便，幾乎適用于各種溶劑的提取，提取時(shí)間短，效率高。101精選PPT超聲提取法利用超聲波振動(dòng)產(chǎn)生的能量在提取液中產(chǎn)生“空化現(xiàn)象”超臨界流體萃取法超臨界流體（supercriticalfluid，SF）：當(dāng)某物質(zhì)處于臨界溫度和臨界壓力以上時(shí)可形成一種既非液體又非氣體的單一相態(tài)，將這一狀態(tài)的物質(zhì)稱(chēng)為超臨界流體。目前最常用的是CO2-SFE技術(shù)。102精選PPT超臨界流體萃取法超臨界流體（supercriticalfl水蒸氣蒸餾法適用于具有揮發(fā)性，可與水蒸氣一起蒸餾出來(lái)，與水不反應(yīng)，又難溶于水的化合物的提取。103精選PPT水蒸氣蒸餾法適用于具有揮發(fā)性，可與水蒸氣一起蒸餾出來(lái)，與水不升華法適用于有升華性，升華溫度適當(dāng)，遇熱較穩(wěn)定的化合物的提取?？煞譃槌荷A和減壓升華兩種。104精選PPT升華法適用于有升華性，升華溫度適當(dāng)，遇熱較穩(wěn)定的化合物的提取關(guān)于提取問(wèn)題小結(jié)極性（溶劑的極性、化合物的極性）提取溶劑的分類(lèi)與特點(diǎn)提取的原理提取的方法與適用范圍105精選PPT關(guān)于提取問(wèn)題小結(jié)極性（溶劑的極性、化合物的極性）19精選PP分離方法（一）分離前處理（二）結(jié)晶與重結(jié)晶（三）分離方法系統(tǒng)溶劑分離法兩相溶劑萃取法沉淀法

6.透析法

9.色譜法吸附法（補(bǔ)充）7.分餾法鹽析法（補(bǔ)充）8.升華法106精選PPT分離方法（一）分離前處理20精選PPT分離前處理提取液一般體積較大，目標(biāo)成份濃度低，需要先濃縮提高濃度，然后再進(jìn)行分離工作。濃縮的方法常壓蒸餾減壓蒸餾薄膜蒸發(fā)107精選PPT分離前處理提取液一般體積較大，目標(biāo)成份濃度低，需要先濃縮提高常壓蒸餾適用于有效成分受熱不易分解，低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑（氯仿、乙醚、石油醚等）的提取液的濃縮。108精選PPT常壓蒸餾適用于有效成分受熱不易分解，低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑（氯仿、乙減壓蒸餾適用于溶劑沸點(diǎn)高，有效成分受熱易分解的提取液的濃縮。109精選PPT減壓蒸餾適用于溶劑沸點(diǎn)高，有效成分受熱易分解的提取液的濃縮。薄膜蒸發(fā)濃縮效率高，受熱時(shí)間短，特別適用于濃縮水或稀醇為溶劑的提取液。110精選PPT薄膜蒸發(fā)濃縮效率高，受熱時(shí)間短，特別適用于濃縮水或稀醇為溶劑結(jié)晶與重結(jié)晶（一）結(jié)晶的條件（掌握)（二）結(jié)晶溶劑的選擇

(熟悉）（三）制備結(jié)晶的方法

1.晶核的形成

2.晶鏈的延長(zhǎng)（四）結(jié)晶純度的判斷(重點(diǎn)掌握）111精選PPT結(jié)晶與重結(jié)晶（一）結(jié)晶的條件（掌握)25精選PPT結(jié)晶的條件被分離化合物純度高；呈過(guò)飽和狀態(tài)；最適結(jié)晶溫度：5~10℃；充分放置。112精選PPT結(jié)晶的條件被分離化合物純度高；26精選PPT結(jié)晶溶劑的選擇（理想溶劑）一不與結(jié)晶物質(zhì)起化學(xué)反應(yīng)；雜質(zhì)與結(jié)晶物質(zhì)在溶劑中的溶解度相差大；目的物在溶劑中的溶解度隨溫度不同有顯著差別；溶劑沸點(diǎn)不宜太高或太低（可在60℃）；溶劑沸點(diǎn)低于化合物的熔點(diǎn)；溶劑沸點(diǎn)低于結(jié)晶溫度；能給出較好的晶形，無(wú)劇毒。113精選PPT結(jié)晶溶劑的選擇（理想溶劑）一不與結(jié)晶物質(zhì)起化學(xué)反應(yīng)；27精選結(jié)晶溶劑的選擇二常用溶劑：甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯等。其他不常用溶劑：二甲基亞砜、乙腈、甲酰胺、二甲基甲酰胺、冰醋酸等?；旌先軇?？如何選擇與使用水--乙醇；乙醇—乙醚；石油醚—苯；水—丙酮；乙醚—乙酸乙酯—乙醇等。114精選PPT結(jié)晶溶劑的選擇二常用溶劑：甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙結(jié)晶純度的判斷一定的晶形、均勻的色澤；有固定的熔點(diǎn)，熔距較??；TLC：經(jīng)過(guò)三種以上展開(kāi)劑展開(kāi)得均一圓形的斑點(diǎn)。115精選PPT結(jié)晶純度的判斷一定的晶形、均勻的色澤；29精選PPT系統(tǒng)溶劑分離法目前是研究成分不明的天然產(chǎn)物的最常用方法。選擇3~4種不同極性的溶劑，由低極性到高極性分步對(duì)粗提物進(jìn)行分離。手續(xù)復(fù)雜、對(duì)化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，容易引起分解、異構(gòu)化的產(chǎn)物應(yīng)特別注意。116精選PPT系統(tǒng)溶劑分離法目前是研究成分不明的天然產(chǎn)物的最常用方法。30兩相溶劑萃取法（一）基礎(chǔ)知識(shí)原理分配系數(shù)與分離因子（二）萃取方法117精選PPT兩相溶劑萃取法（一）基礎(chǔ)知識(shí)31精選PPT基礎(chǔ)知識(shí)一、原理利用混合物中各成分在兩種互不混溶的溶劑中分配系數(shù)不同而達(dá)到分離的目的。二、分配系數(shù)與分離因子分配系數(shù)（K）K=C有機(jī)相/C水相分離因子（β）β=KA/KB118精選PPT基礎(chǔ)知識(shí)一、原理32精選PPT假設(shè)KA=10，KB=0.1，則β=100當(dāng)β≥100時(shí)，一次簡(jiǎn)單的萃取就可以完成分離；當(dāng)10<β≤100，需萃取10~12次；當(dāng)β≤2時(shí)，需要完成100次以上的萃取；當(dāng)β≈1時(shí)，理論上無(wú)法完成萃取分離的目的。119精選PPT假設(shè)KA=10，KB=0.1，則β=10033精選PPT萃取方法簡(jiǎn)單萃取法（掌握）pH梯度萃取法（重點(diǎn)掌握）（補(bǔ)充）逆流連續(xù)萃取法（了解）逆流分溶法（countercurrentdistributionCCD)（了解）液滴逆流分配法（dropletcountercurrentchromatogrophyDCCC）（了解）120精選PPT萃取方法簡(jiǎn)單萃取法（掌握）34精選PPT簡(jiǎn)單萃取法適用于分離因子較大的情況的分離。提取液的密度最好在1.1~1.2?！暗攘慷啻巍痹瓌t（掌握）乳化現(xiàn)象（熟悉）121精選PPT簡(jiǎn)單萃取法適用于分離因子較大的情況的分離。35精選PPT等量多次原則證明設(shè)Vml水中含有Wg溶質(zhì)，用Sml有機(jī)溶劑萃取后，在水中尚有W1g溶質(zhì)沒(méi)有被萃取出來(lái)，則分配系數(shù)KD為：整理得122精選PPT等量多次原則證明設(shè)Vml水中含有Wg溶質(zhì)，用Sml有機(jī)溶劑萃第2次再用Sml有機(jī)溶劑萃取水中的溶質(zhì)后仍有W2g沒(méi)有被萃取出來(lái)，則因此，若每次用Sml有機(jī)溶劑萃取，最后剩在Vml水中的溶質(zhì)Wn為若一次用nSml有機(jī)溶劑萃取，剩余在水中的溶質(zhì)123精選PPT第2次再用Sml有機(jī)溶劑萃取水中的溶質(zhì)后仍有W2g沒(méi)有被萃取結(jié)論用總量相同的溶劑，分多次萃取的效率要比1次萃取的效率高。124精選PPT結(jié)論用總量相同的溶劑，分多次萃取的效率要比1次萃取的效率高。乳化現(xiàn)象產(chǎn)生原因天然產(chǎn)物中含有皂苷、蛋白質(zhì)、植物膠質(zhì)、鞣質(zhì)等表面活性物質(zhì)；兩相互不相溶的溶劑；振搖；少量輕質(zhì)的沉淀等。125精選PPT乳化現(xiàn)象產(chǎn)生原因39精選PPT解決方案較長(zhǎng)時(shí)間靜置；2.將乳狀液分出，再換新溶劑萃??；3.將乳狀液加溫或冷凍；4.將乳狀液抽濾；5.加入少量電解質(zhì)（如NaCl等）；6.加入少量低級(jí)醇（如乙醇、戊醇等）。126精選PPT解決方案40精選PPTpH梯度萃取法是分離酸性、堿性、兩性有機(jī)化合物常用的手段。原理：由于溶劑系統(tǒng)PH的改變，改變了化合物的存在狀態(tài)（游離型或解離型），從而改變了化合物在溶劑系統(tǒng)中的分配系數(shù)。酸性化合物：pH=pka-2游離；

pH=pka+2

解離。堿性化合物相反。127精選PPTpH梯度萃取法是分離酸性、堿性、兩性有機(jī)化合物常用的手段。4以酸性化合物HA為例酸性化合物在水中電離：電離常數(shù)取負(fù)對(duì)數(shù)128精選PPT以酸性化合物HA為例酸性化合物在水中電離：電離常數(shù)取負(fù)對(duì)數(shù)4逆流連續(xù)萃取法操作簡(jiǎn)便；萃取完全，不易乳化；適合于兩相互不混溶的溶劑的密度相差較大的系統(tǒng)的分離。129精選PPT逆流連續(xù)萃取法操作簡(jiǎn)便；43精選PPT逆流分溶法（CCD)適用于性質(zhì)相似的異構(gòu)體或同系物的分離。特點(diǎn)：條件溫和，樣品易于回收。注意：溶質(zhì)濃度越低分離效果越好。130精選PPT逆流分溶法（CCD)適用于性質(zhì)相似的異構(gòu)體或同系物的分離。4液滴逆流分配法（DCCC）CCD的改進(jìn)方法，不易乳化。特別適用于皂苷類(lèi)化合物的分離。需要?jiǎng)恿Ρ谩?31精選PPT液滴逆流分配法（DCCC）CCD的改進(jìn)方法，不易乳化。45精沉淀法可以分為酸堿沉淀、試劑沉淀、鉛鹽沉淀。酸堿沉淀：適用于酸性、堿性物質(zhì)的分離。試劑沉淀沉淀試劑沉淀有機(jī)溶劑沉淀3.鉛鹽沉淀中性醋酸鉛堿性醋酸鉛132精選PPT沉淀法可以分為酸堿沉淀、試劑沉淀、鉛鹽沉淀。46精選PPT吸附法（補(bǔ)充）選擇適宜吸附劑（如硅膠、Al2O3、活性炭）去除雜質(zhì)或選擇性篩選目標(biāo)成分。如用活性炭去除在提取液中的葉綠素等脂溶性成分。133精選PPT吸附法（補(bǔ)充）選擇適宜吸附劑（如硅膠、Al2O3、活性炭）鹽析法（補(bǔ)充）在水提液中加入NaCl、MgCl2等無(wú)機(jī)鹽促進(jìn)極性稍大組分析出的方法。如鹽酸小檗堿易溶于熱水，在冷水中溶解度小，但在結(jié)晶冷卻過(guò)程中不易析出結(jié)晶，可通過(guò)加入NaCl固體的方法促進(jìn)析晶。134精選PPT鹽析法（補(bǔ)充）在水提液中加入NaCl、MgCl2等無(wú)機(jī)鹽促進(jìn)透析法135精選PPT透析法49精選PPT色譜法吸附色譜(adsorptionchromatography)分配色譜/液相色譜(patitionchr.)離子交換色譜(ionexchangechr.)大孔吸附樹(shù)脂法(macro-reticularresinemethod)凝膠色譜法(gelfiltrationchr.)氣相色譜法(gaschromatography)高效液相色譜（highperformanceliquidchromatography)136精選PPT色譜法吸附色譜(adsorptionchromatogra吸附色譜基本原理：利用混合物中不同組分分子、溶劑分子與吸附劑表面分子間的作用力不同，引起不同的吸附性能而進(jìn)行分離。吸附劑色譜結(jié)果操作方式137精選PPT吸附色譜基本原理：利用混合物中不同組分分子、溶劑分子與吸附劑

極性吸附劑：硅膠、氧化鋁吸附劑非極性吸附劑：活性炭聚酰胺硅膠：微酸性，不宜直接用于堿性物質(zhì)的分離。顆粒表面的硅醇基起吸附作用，需在105~110℃活化。氧化鋁：微堿性，不宜直接用于含醛基、羰基、酯基化合物的分離?；钚蕴浚憾嘤糜谒嵋褐兄苄噪s質(zhì)的分離。138精選PPT極性吸附劑：硅膠、4、聚酰胺：酰胺基可以與羥基、羧基、硝基等形成氫鍵。分離規(guī)律（P67）

：氫鍵越多，吸附越牢，Rf越小。如易形成分子內(nèi)氫鍵，Rf增大。芳香化程度越高，吸附越牢。各種溶劑的洗脫能力：水<甲醇<丙酮<NaOH水溶液<甲酰胺<二甲基甲酰胺<尿素水溶液139精選PPT4、聚酰胺：酰胺基可以與羥基、羧基、硝基等形成氫鍵。53精選操作方式薄層色譜（thinlayerchromatography,TLC)

操作步驟：制板點(diǎn)樣展開(kāi)定位柱色譜操作步驟：吸附劑與洗脫劑選擇裝柱上樣洗脫分離注意活化140精選PPT操作方式薄層色譜（thinlayerchromatogr分配色譜（一）基本原理：根據(jù)被分離物質(zhì)在兩相中的溶解性不同而進(jìn)行分離（CCD）。（二）正相色譜與反相色譜（掌握）（三）支持劑：硅藻土、纖維素粉、濾紙、含水17%的硅膠等。（四）操作方式

1.紙層析(PC)2.TLC3.柱層析141精選PPT分配色譜（一）基本原理：根據(jù)被分離物質(zhì)在兩相中的溶解性不同而正相色譜：固定相的極性大于流動(dòng)相的極性。固定相多為強(qiáng)極性溶劑，如水、緩沖液等。反相色譜：固定相的極性小于流動(dòng)相的極性。固定相多為親脂性溶劑。142精選PPT正相色譜：固定相的極性大于流動(dòng)相的極性。固定相多為強(qiáng)極性溶劑支持劑的要求無(wú)吸附作用；不溶于兩相溶劑中；不與被分離物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；并能吸著一定的固定相；可以使流動(dòng)相自由通過(guò)而不改變其組成。143精選PPT支持劑的要求無(wú)吸附作用；57精選PPT離子交換色譜（IEC）（一）分離原理：利用離子交換樹(shù)脂在水溶液中可以解離，并與溶液中其它離子產(chǎn)生可逆性的交換，達(dá)到分離離子型化合物的目的。（二）離子交換樹(shù)脂（熟悉）（三）分離結(jié)果（重點(diǎn)掌握）（四）離子交換樹(shù)脂的選擇（了解）（五）操作（了解）144精選PPT離子交換色譜（IEC）（一）分離原理：利用離子交換樹(shù)脂在水溶離子交換樹(shù)脂陽(yáng)離子交換樹(shù)脂：能與溶液中陽(yáng)離子進(jìn)行交換，按交換活性分為強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂和弱酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂兩類(lèi)。如：RSO3H+NaClRSO3Na+HCl陰離子交換樹(shù)脂：能與溶液中陰離子進(jìn)行交換，按交換活性分為強(qiáng)堿型陰離子交換樹(shù)脂和弱堿型陰離子交換樹(shù)脂兩類(lèi)。如：RNOH+NaClRNCl+NaOH145精選PPT離子交換樹(shù)脂陽(yáng)離子交換樹(shù)脂：能與溶液中陽(yáng)離子進(jìn)行交換，按交換樣品強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂酸性及中性物質(zhì)強(qiáng)堿型陰離子交換樹(shù)脂稀NH4OH洗脫洗脫液（堿性及兩性）

中性物質(zhì)稀堿洗脫洗脫液（酸性物質(zhì)）強(qiáng)堿型陰離子交換樹(shù)脂堿性物質(zhì)稀酸洗脫洗脫液（兩性物質(zhì)）流出液流出液流出液146精選PPT樣品強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂酸性及中性物質(zhì)強(qiáng)堿型陰離子交換樹(shù)脂稀離子交換樹(shù)脂的選擇根據(jù)被分離物質(zhì)選擇樹(shù)脂，如分離生物堿選擇陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。根據(jù)被分離物質(zhì)的解離常數(shù)選擇，如堿性強(qiáng)選擇弱酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。根據(jù)化合物大小選擇，如分離大分子化合物可選擇交聯(lián)度3~6%的樹(shù)脂。147精選PPT離子交換樹(shù)脂的選擇根據(jù)被分離物質(zhì)選擇樹(shù)脂，如分離生物堿選擇陽(yáng)操作預(yù)處理：水浸泡（溶脹）酸堿處理（洗去雜質(zhì)）水洗至中性裝柱上樣與洗脫再生148精選PPT操作預(yù)處理：水浸泡（溶脹）酸堿處理（洗去雜質(zhì)）大孔吸附樹(shù)脂法

主要用于水溶性化合物的提取分離。大孔吸附樹(shù)脂（吸附性與范德華力、氫鍵有關(guān)）大孔吸附樹(shù)脂類(lèi)型影響因素：1.分子極性大??；2.分子體積大小；3.pH值的影響。預(yù)處理與再生149精選PPT大孔吸附樹(shù)脂法主要用于水溶性化合物的提取分離。63精選PP大孔吸附樹(shù)脂的特點(diǎn)吸附性和篩選性相結(jié)合的分離材料選擇性好吸附容量大機(jī)械強(qiáng)度高再生處理方便吸附速度快解吸容易不易受到無(wú)機(jī)鹽等離子或小分子化合物的影響150精選PPT大孔吸附樹(shù)脂的特點(diǎn)吸附性和篩選性相結(jié)合的分離材料64精選PP大孔吸附樹(shù)脂類(lèi)型非極性吸附樹(shù)脂（芳香族吸附劑）：以苯乙烯為單體，二乙基苯為交聯(lián)劑。中極性吸附樹(shù)脂（脂肪族吸附劑）：以甲基丙烯酸酯作為單體和交聯(lián)劑。極性吸附樹(shù)脂：結(jié)構(gòu)中含有硫氧、酰胺、氮氧等極性基團(tuán)。151精選PPT大孔吸附樹(shù)脂類(lèi)型非極性吸附樹(shù)脂（芳香族吸附劑）：以苯乙烯為單預(yù)處理與再生預(yù)處理：水洗、溶脹后用甲醇或95%的乙醇浸泡24小時(shí)，至洗滌液加水后不呈白色渾濁，最后用蒸餾水洗掉有機(jī)溶劑。再生：蒸餾水、甲醇、乙醇反復(fù)洗滌，必要時(shí)可用3%的鹽酸水溶液或3%的氫氧化鈉溶液再生。152精選PPT預(yù)處理與再生預(yù)處理：水洗、溶脹后用甲醇或95%的乙醇浸泡24凝膠色譜法（GFC）原理：“分子篩”凝膠的種類(lèi)1.葡聚糖凝膠（SephadexG）2.羥丙基葡聚糖凝膠（LH-20）153精選PPT凝膠色譜法（GFC）原理：“分子篩”67精選PPT氣相色譜法：適用于沸點(diǎn)低，易揮發(fā)，對(duì)熱穩(wěn)定的化合物的分離。HPLC電泳技術(shù)154精選PPT氣相色譜法：適用于沸點(diǎn)低，易揮發(fā)，對(duì)熱穩(wěn)定的化合物的分離。6結(jié)構(gòu)測(cè)定(一)鑒定天然產(chǎn)物化學(xué)成分的一般步驟1.化合物純度測(cè)定2.初步推測(cè)化合物類(lèi)型3.測(cè)定分子式、計(jì)算不飽和度4.確定官能團(tuán)或結(jié)構(gòu)片斷5.確定分子的平面結(jié)構(gòu)6.確定分子的立體結(jié)構(gòu)(二)結(jié)構(gòu)測(cè)定中波譜知識(shí)回顧155精選PPT結(jié)構(gòu)測(cè)定(一)鑒定天然產(chǎn)物化學(xué)成分的一般步驟69精選PPT純度測(cè)定方法1.結(jié)晶的性質(zhì)2.層析行為（PC、TLC）3.GC4.HPLC5.電泳……156精選PPT純度測(cè)定方法1.結(jié)晶的性質(zhì)70精選PPT分子式測(cè)定方法、不飽和度的計(jì)算分子式測(cè)定方法（MS）：1.元素定性分析2.高分辨質(zhì)譜法（HR-MS)不飽和度的計(jì)算

U=(2+2n4+n3-n1)/2157精選PPT分子式測(cè)定方法、不飽和度的計(jì)算分子式測(cè)定方法（MS）：71精例1：元素定性分析定量分析結(jié)果：C：79.35%，H：10.21%所以，O=100-79.35-10.21=10.44