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檢驗(yàn)科血型的鑒定1ABO血型系統(tǒng)2ABO血型的鑒定3TableofContents內(nèi)容大綱RH血型系統(tǒng)45RH血型的鑒定常見疑難血型的鑒定血型鑒定在生活中的應(yīng)用6ABO血型系統(tǒng)O型血O型血是人類最古老的血型出現(xiàn)于4萬(wàn)-6萬(wàn)年前A型血A型血產(chǎn)生于農(nóng)耕時(shí)代出現(xiàn)于1.7萬(wàn)年-2.7萬(wàn)年前B型血B型血產(chǎn)生于游牧民族出現(xiàn)于公元前1.7萬(wàn)-1.2萬(wàn)年前AB型血AB型血出現(xiàn)不到1000年血型傳說ABO血型系統(tǒng)抗體凝集素(抗體):存在于血清中,與其同名凝集原會(huì)發(fā)生抗原抗體反應(yīng),導(dǎo)致紅細(xì)胞凝集。人血清中含有兩類凝集素:即抗A和抗B。屬于天然抗體,天然抗體多以IgM型為主,不能通過胎盤,而免疫性抗體多以IgG型為主,能通過胎盤。凝集素對(duì)血液中紅細(xì)胞的影響ABO血型系統(tǒng)抗A凝集素抗B凝集素同時(shí)含有抗A和抗B凝集素不含有抗A和抗B凝集素B血型的血清中A血型的血清中AB血型的血清中O血型的血清中ABO血型系統(tǒng)抗原——遺傳顯性基因:控制顯性性狀的基因。隱性基因:控制隱性性狀的基因。
ABO血型系統(tǒng)的基因位點(diǎn)在第9對(duì)染色體上。人的ABO血型受控于A、B、O三個(gè)基因。其中A、B為顯性基因,O為隱性基因。AB型ABO血型鑒定抗原——遺傳O型B型A型思考:A、B、AB以及O型血的基因型分別是什么?
ABBBAAAoBooo遺傳規(guī)律ABO血型的鑒定實(shí)驗(yàn)原理:血型抗原與相應(yīng)的抗體在反應(yīng)介質(zhì)中形成免疫復(fù)合物,出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。ABO血型的鑒定準(zhǔn)備載玻片1取一載玻片,左右兩側(cè)分別標(biāo)記字母AB。采血3采血針輕刺手指尖,輕輕擠壓傷口使血液流出,分別滴在載玻片的兩側(cè)。消毒常規(guī)消毒,用棉簽沾取75%的酒精,對(duì)采血部位進(jìn)行消毒。2滴標(biāo)準(zhǔn)血清在載玻片兩側(cè)相應(yīng)的滴加抗A(藍(lán)色)和抗B(橙色)血清后,用棉簽棍將兩側(cè)血液與血清混勻,注意一定要換不同的棉簽棍。4混勻觀察5混均后,靜置3-5分鐘后,觀察現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)過程:RH血型系統(tǒng)人類血型目前發(fā)現(xiàn)有30多種,除了ABO血型系統(tǒng)外,還有Rh血型系統(tǒng)等。Rh血型系統(tǒng)根據(jù)有無D抗原分為Rh陽(yáng)性和Rh陰性。RH血型系統(tǒng)抗原及抗體Rh血型系統(tǒng)抗原Rh血型系統(tǒng)能識(shí)別的抗原共43種,常見的抗原有五種,分別是D、C、E、c、e。以D抗原的抗原性最強(qiáng),故常以其存在與否定為Rh陽(yáng)性或陰性,即凡含D抗原者為Rh陽(yáng)性,不含D抗原者為Rh陰性。Rh血型系統(tǒng)抗體天然Rh抗體很少,絕大多數(shù)Rh抗體由輸血或妊娠刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的IgG型免疫性抗體。主要Rh血型系統(tǒng)抗體有抗D、抗E、抗C、抗c、抗e五種,其中抗D最為常見。在鹽水介質(zhì)試驗(yàn)系統(tǒng)中可檢測(cè)出某些Rh抗體,表明這些Rh抗體具有IgM的性質(zhì)可能來自免疫反應(yīng)抗體形成早期。Rh血型的鑒定方法及原理
酶介質(zhì)法
紅細(xì)胞表面的唾液酸帶負(fù)電荷,使用木瓜酶或菠蘿酶破壞紅細(xì)胞表面的唾液酸,降低紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷,減少細(xì)胞間的排斥力,促進(jìn)Rh抗原與相應(yīng)抗體間的結(jié)合從而產(chǎn)生紅細(xì)胞凝集。聚凝胺試驗(yàn)
聚凝胺是帶高價(jià)陽(yáng)離子的季銨鹽,溶解后產(chǎn)生的正電荷中和紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷,減少細(xì)胞間的排斥力,有利于紅細(xì)胞凝集。如果是由Rh抗體致敏的紅細(xì)胞產(chǎn)生的凝集,是特異的不可逆凝集。非抗體致敏紅細(xì)胞凝集則是可逆性凝集。鹽水介質(zhì)抗D試驗(yàn)
采用免疫球蛋白變性劑處理人源IgG類抗D血清,使小分子的IgG抗體分子增大成為具有大分子的“IgM”的性質(zhì),能在鹽水介質(zhì)中與相應(yīng)紅細(xì)胞發(fā)生凝集,可用于Rh血型的快速鑒定。Rh血型的鑒定方法及原理
抗球蛋白試驗(yàn)又稱Coombs試驗(yàn),是檢測(cè)紅細(xì)胞上不完全抗體的經(jīng)典方法。不完全抗體多與其相應(yīng)的紅細(xì)胞結(jié)合,在鹽水介質(zhì)中不出現(xiàn)凝集反應(yīng),Coombs試驗(yàn)利用抗球蛋白抗體作為第2抗體,通過連接致敏紅細(xì)胞表面的特異性Rh抗體,使致敏紅細(xì)胞出現(xiàn)特異性凝集。低離子強(qiáng)度試驗(yàn)紅細(xì)胞外圍的陰離子是紅細(xì)胞的穩(wěn)定因素之一,降低反應(yīng)介質(zhì)的離子強(qiáng)度可減少細(xì)胞外圍的陰離子,促進(jìn)帶正電荷的IgG型Rh抗體與紅細(xì)胞結(jié)合發(fā)生凝集反應(yīng),從而增加紅細(xì)胞的凝集強(qiáng)度。常見疑難血型定義:疑難血型是指一種血型難以鑒定或判定的現(xiàn)象。特點(diǎn):正定型凝集弱于2+或反定型弱于1+(正常凝集3+~4+)
正反定性不一致干擾因素:生理因素(年齡、ABO亞型、先天無抗體、冷凝集素)
臨床治療(大量輸液、近期輸過異性紅細(xì)胞或血漿)實(shí)驗(yàn)技術(shù)原因(標(biāo)本混淆、試劑質(zhì)量問題、靜脈輸液處采樣)分類:紅細(xì)胞抗原減弱或丟失(ABO亞型、白血病、輸異性血、急性大出血)紅細(xì)胞額外反應(yīng)(自身抗體、紅細(xì)胞未洗滌、紅細(xì)胞上粘附大量蛋白)混合凝集(近期輸異性血、造血干細(xì)胞移植)血型定型減弱或無反應(yīng)(年齡、先天性ABO抗體缺失)常見疑難血型的鑒定ABO亞型實(shí)驗(yàn)結(jié)果:正定型與反定型不一致、正定型被檢紅細(xì)胞凝集弱解決方法:加抗-AB、抗-H、
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