螺旋體教學(xué)講解課件

第二十一章螺旋體

(spirochete)

第一節(jié)鉤端螺旋體屬第二節(jié)密螺旋體屬第三節(jié)疏螺旋體屬第二十一章螺旋體

(spirochete)

第一節(jié)鉤端螺旋體(spirochete)是一類細(xì)長(zhǎng)、柔軟、螺旋狀、運(yùn)動(dòng)活潑的原核細(xì)胞型微生物；基本結(jié)構(gòu)與細(xì)菌相似，有細(xì)胞壁、原始核質(zhì)，以二分裂方式繁殖和對(duì)抗生素等藥物敏感等。

螺旋體(spirochete)是一類細(xì)長(zhǎng)、柔軟、螺旋狀、運(yùn)動(dòng)第21章螺旋體課件Syphilis-TreponemapallidumLeptospirosis-Leptospirainterrogans

Relapsingfever-BorreliarecurrentisLymedisease-BorreliaburgdorferiSpirochetediseasesofhumansSyphilis-TreponemapallidumS螺旋體致病性種類所致疾病傳播方式或媒介螺旋體科密螺旋體屬(Treponema)蒼白密螺旋體蒼白亞種梅毒性傳播蒼白密螺旋體地方亞種地方梅毒黏膜損傷蒼白密螺旋體極細(xì)亞種雅斯病皮膚損傷品他螺旋體品他病皮膚損傷疏螺旋體屬(Borrelia)伯氏疏螺旋體萊姆病硬蜱回歸熱疏螺旋體流行性回歸熱體虱赫姆疏螺旋體地方性回歸熱軟蜱奮森疏螺旋體多種口腔感染條件致病鉤端螺旋體科鉤端螺旋體屬(Leptospira)問號(hào)鉤端螺旋體鉤端螺旋體病接觸疫水螺旋體目致病性螺旋體的種類螺旋體致病性種類所致疾病傳播方式或媒介螺旋SpirochetestructureproteinfattyacidsSpirochetestructureproteinfat第21章螺旋體課件

Borreliaburgdorferi

TreponemapallidumLeptospiraBorreliaburgdorferiTreponem病原性螺旋體的特性特性鉤端螺旋體(Leptospira)密螺旋體(Treponema)疏螺旋體(Borrelia)外形螺旋細(xì)密兩端呈鉤狀螺旋細(xì)密，兩端尖直螺旋稀疏，旋幅不一，呈波浪狀軸絲數(shù)21～815～20常用染色法鍍銀法鍍銀法瑞氏或姬姆薩氏法體外培養(yǎng)28～30℃，pH6.8～7.5，3～4天不佳不佳需氣特性需氧厭氧微需氧抵抗力中性水中能活20天以上酸性水土中很快死亡自然環(huán)境下不能存活血內(nèi)室溫下存洗60天以上0℃下至少活100天抗原特性穩(wěn)定、有型、群、屬特異性，群及屬抗原間有交叉較穩(wěn)定、有種屬特異性、屬內(nèi)抗原有交叉易變，屬內(nèi)抗原有交叉，型、株的抗原特異性高已知種型1種、20群、200型101種，3種致病42種，18種致病儲(chǔ)存宿主野生鼠類、豬、牛、家畜、人人虱、蜱、人、動(dòng)物所致疾病鉤端螺旋體病梅毒、雅司病等回歸熱、咽炎等病原性螺旋體的特性特性鉤端螺旋體(Leptospira)密螺第一節(jié)鉤端螺旋體屬

(Leptospira)

問號(hào)狀鉤端螺旋體(L.interrogans)

雙曲鉤端螺旋體(L.biflexa)第一節(jié)鉤端螺旋體屬

(Leptospira)問號(hào)狀鉤端螺旋細(xì)密、規(guī)則，形似細(xì)小珍珠排列的細(xì)鏈。一端或兩端呈鉤狀。菌體常呈C、S或8字型革蘭染色陰性，不易著染Fontana鍍銀染色法→染成棕褐色運(yùn)動(dòng)活潑形態(tài)與染色一、生物學(xué)性狀螺旋細(xì)密、規(guī)則，形似細(xì)小珍珠排列的細(xì)鏈。一端或兩端呈鉤狀。菌營養(yǎng)要求較高，常用含10％兔血清的Korthof培養(yǎng)基適宜生長(zhǎng)溫度為28－30℃，最適pH7.2－7.6鉤端螺旋體在人工培養(yǎng)基中生長(zhǎng)緩慢。在液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一周左右，呈現(xiàn)為半透明云霧狀生長(zhǎng)需氧或微需氧培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求較高，常用含10％兔血清的Korthof培養(yǎng)基培養(yǎng)特Korthof培養(yǎng)基成分蛋白胨400mg，氯化鈉700mg，碳酸氫鈉10mg，氯化鉀20mg，氯化鈣20mg，磷酸二氫鉀120mg，磷酸氫二鈉44Omg，蒸餾水500ml，無菌兔血清（滅活）8-10ml。

將各成分溶于蒸餾水內(nèi)煮沸20min，以濾紙濾，調(diào)至pH為7.2，分裝燒瓶?jī)?nèi)每瓶100ml，121℃滅菌20min;無菌采取兔心血分離血清，置56℃水浴箱中30min以破壞補(bǔ)體；上述蛋白胨鹽溶液每100ml中加入無菌兔血清8-10ml；混合后，用無菌分裝中號(hào)試管中，每管5ml；置56℃水浴箱30min;37℃溫箱中孵育2天，剔去污染者。

Korthof培養(yǎng)基成分蛋白胨400mg，氯化鈉700mg抵抗力:弱熱抵抗力弱，60℃1min即死亡0.2%來蘇、1:2000升汞、1%石炭酸經(jīng)10~30min被殺滅對(duì)青霉素敏感在濕土或水中可存活數(shù)月抵抗力:弱熱抵抗力弱，60℃1min即死亡抗原性屬特異性蛋白抗原(genus-specificproteinantigen)糖蛋白或脂蛋白群特異性抗原(serogroup-specificantigen)脂多糖復(fù)合物型特異性抗原(serovar-specificantigen)菌體表面多糖顯微鏡凝集試驗(yàn)

(microscopicagglutinationtest,MAT)凝集吸收試驗(yàn)(agglutinationabsorptiontest,AAT)抗原性屬特異性蛋白抗原(genus-specificpro分型全世界已發(fā)現(xiàn)及確定有25群和273血清型國內(nèi)已發(fā)現(xiàn)19群和74個(gè)血清型，是世界上發(fā)現(xiàn)血清型最多的國家，主要菌群：波摩那群(pomona)黃疸出血群(icterohaemorrhagiae)犬群(canicola)流感傷寒群(grippotyphosa)七日熱群(hebdomadis)分型全世界已發(fā)現(xiàn)及確定有25群和273血清型Leptospirosisisawidelyspreaddiseaseofglobalconcern.Infectioncausesflu-likeepisodeswithfrequentsevererenalandhepaticdamage,suchashaemorrhageandjaundice.Inmoreseverecases,massivepulmonaryhaemorrhages,includingfatalsuddenhaemoptysis,canoccur.Herewereportthecompletegenomicsequenceofarepresentativevirulentserovartypestrain(Lai)ofLeptospirainterrogansserogroupIcterohaemorrhagiaeconsistingofa4.33-megabaselargechromosomeanda359-kilobasesmallchromosome,withatotalof4,768predictedgenes.Intermsofthegeneticdeterminantsofphysiologicalcharacteristics,thefacultativelyparasiticL.interrogansdiffersextensivelyfromtwootherstrictlyparasiticpathogenicspirochaetes,TreponemapallidumandBorreliaburgdorferi,althoughsimilaritiesexistinthegenesthatgoverntheiruniquemorphologicalfeatures.AcomprehensiveanalysisoftheL.interrogansgenesforchemotaxis/motilityandlipopolysaccharidesynthesisprovidesabasisforin-depthstudiesofvirulenceandpathogenesis.Thediscoveryofaseriesofgenespossiblyrelatedtoadhesion,invasionandthehaematologicalchangesthatcharacterizeleptospirosishasprovidedcluesabouthowanenvironmentalorganismmightevolveintoanimportanthumanpathogen.

RenSX,FuG,JiangXG,ZengR,MiaoYG,XuH,ZhangYX,XiongH,LuG,LuLF,JiangHQ,JiaJ,TuYF,JiangJX,GuWY,ZhangYQ,CaiZ,ShengHH,YinHF,ZhangY,ZhuGF,WanM,HuangHL,QianZ,WangSY,MaW,YaoZJ,ShenY,QiangBQ,XiaQC,GuoXK,DanchinA,SaintGironsI,SomervilleRL,WenYM,ShiMH,ChenZ,XuJG,ZhaoGP.

UniquephysiologicalandpathogenicfeaturesofLeptospirainterrogansrevealedbywhole-genomesequencing.

Nature.2003Apr24;422(6934):888-93.

Leptospirosisisawidelyspre流行環(huán)節(jié)傳染源：多種動(dòng)物，在感染動(dòng)物腎臟內(nèi)長(zhǎng)期存在，隨尿排出傳播途徑：直接接觸傳播，帶菌尿污染環(huán)境，人可通過收割水稻、接觸雨水、洪水或其他機(jī)會(huì)，通過皮膚粘膜細(xì)微破損處感染母嬰傳播人群易感性：人群普遍易感，隱性感染率高流行環(huán)節(jié)傳染源：流行特征流行地區(qū)：遍及全世界，以熱帶及亞熱帶地區(qū)多見。國內(nèi)26個(gè)省市自治區(qū)均有本病發(fā)生或流行，以長(zhǎng)江流域及其以南、東南沿海及西南各省市自治區(qū)較嚴(yán)重,近年來發(fā)病率有所下降，但在部分地區(qū)仍有流行發(fā)病季節(jié)：多在雨季夏秋季(6~9月)，8、9月為高峰青壯年、農(nóng)民、漁民及下水道工人等高發(fā)流行特征流行地區(qū)：遍及全世界，以熱帶及亞熱帶地區(qū)多見。國內(nèi)2第21章螺旋體課件致病性與免疫性致病物質(zhì)---類似細(xì)菌內(nèi)毒素與外毒素

內(nèi)毒素樣物質(zhì)(ELS)或稱脂多糖樣物質(zhì)(LLS)

溶血素:破壞紅細(xì)胞膜細(xì)胞毒性因子(CTF)

致細(xì)胞病變作用(CPE)物質(zhì)致病性與免疫性致病物質(zhì)---類似細(xì)菌內(nèi)毒素與外毒素內(nèi)毒素樣所致疾病:鉤端螺旋體病(leptospirosis):

一種人畜共患傳染病。

傳染源傳播途徑鼠和豬粘膜或破損皮膚胎盤垂直傳播臨床表現(xiàn)進(jìn)入損傷全身毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及肝、腎、肺心及中樞神經(jīng)可出現(xiàn)休克、DIC、黃疸、出血、心腎功能不全、腦膜炎等

先形成鉤體血癥疾病特點(diǎn)起病急、高熱、乏力、全身酸痛、眼結(jié)膜充血、腓腸肌壓痛、表淺淋巴結(jié)腫大所致疾病:鉤端螺旋體病(leptospirosis):一種Pathogenesis

Leptospiraentersthehostthroughmucosaandbrokenskin,resultinginbacteremia.Thespirochetesmultiplyinorgans,mostcommonlythecentralnervoussystem,kidneys,andliver.Theyareclearedbytheimmuneresponsefromthebloodandmosttissuesbutpersistandmultiplyforsometimeinthekidneytubules.Infectivebacteriaareshedintheurine.Themechanismoftissuedamageisnotknown.Pathogenesis發(fā)病機(jī)理

鉤端螺旋體

↓皮膚或黏膜

（血流）→

全身毛細(xì)血管的中毒性損（早期）↙↓（中期）↘（恢復(fù)期）

感染中毒期器官損害期單純敗血癥(leptospitemia)↓遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)

↗肺出血后發(fā)熱內(nèi)臟損害→肝炎反應(yīng)性腦膜炎↘間質(zhì)性腎炎眼部炎癥↘腦膜腦炎閉塞性腦動(dòng)脈炎發(fā)病機(jī)理鉤端螺旋體臨床表現(xiàn)潛伏期2~20日，一般7~13日。臨床分型1.單純型：發(fā)熱、肌肉疼痛（以腓腸肌和腰背肌明顯）、結(jié)膜充血、腓腸肌壓痛、淺表淋巴結(jié)腫大及壓痛。其它：肝腫大、咽痛、紅腫。2.肺出血型：病程3~4天，輕度肺出血---咳嗽、咳血，肺部少許濕羅音，胸片可見散在點(diǎn)狀或小片陰影。肺彌漫性出血：發(fā)熱及中毒癥狀加重；氣緊、心慌、窒息，胸片雙肺廣泛點(diǎn)片狀陰影或大片狀融合；神志恍惚或昏迷、發(fā)紺、呼吸不規(guī)律，大量咳血，窒息死亡。臨床表現(xiàn)潛伏期2~20日，一般7~13日。

輕度中度重度消化道癥狀較明顯重出血無重度重度凝血功能基本正常異常明顯異常尿蛋白陰性陽性（++）以上管型可見較多預(yù)后良好可逐漸恢復(fù)較差3.黃疸出血型：病程4~8天輕度4.腎功能衰竭型:常與黃疸出血型合并出現(xiàn)，主要表現(xiàn)為蛋白尿及少量細(xì)胞和管型；嚴(yán)重可出現(xiàn)尿毒癥、急性腎衰的表現(xiàn)。5.腦膜腦炎型:發(fā)熱3~4天后出現(xiàn)腦膜腦炎的臨床表現(xiàn)。死亡率：腎衰70%肝功能衰竭20%嚴(yán)重出血10%4.腎功能衰竭型:常與黃疸出血型合并出現(xiàn)，主要表現(xiàn)為蛋白

后發(fā)癥后發(fā)熱：經(jīng)治療或自愈后再度發(fā)熱，1-3天可自退，不需治療反應(yīng)性腦膜炎：在后發(fā)熱時(shí)或稍后出現(xiàn)，鉤體培養(yǎng)陰性，預(yù)后良好眼的后發(fā)癥：退熱1W~1M，虹膜睫狀體炎、脈絡(luò)炎或葡萄膜炎等閉塞性腦動(dòng)脈炎：波摩那型鉤體病流行后2-5月，變態(tài)反應(yīng)所致。腦基底部多發(fā)動(dòng)脈炎導(dǎo)致腦缺血，引起偏癱、失語等，大多可恢復(fù)后發(fā)癥后發(fā)熱：經(jīng)治療或自愈后再度發(fā)熱，第21章螺旋體課件

免疫性:特異性體液免疫為主,感染后及病后僅獲同型免疫力,故可二次感染發(fā)病免疫性:特異性體液免疫為微生物學(xué)檢查法

發(fā)病10天內(nèi)取血液,2周后取尿液,有腦膜刺激者取腦脊液

直接鏡檢

分離與鑒定接種至Korthof培養(yǎng)基，置28℃孵育陽性標(biāo)本:在2周內(nèi)可見培養(yǎng)液呈輕度混濁→暗視野顯微鏡檢查→有→則用已知診斷血清鑒定其血清群和血清型。陰性標(biāo)本:分離培養(yǎng)應(yīng)連續(xù)觀察4個(gè)月，仍無生長(zhǎng)者動(dòng)物接種幼齡豚鼠或金地鼠腹腔接種

DNA探針雜交及PCR法檢測(cè)鉤體DNA

微生物學(xué)檢查法發(fā)病10天內(nèi)取血液,2周后取尿液,有腦膜刺血清學(xué)診斷病初和發(fā)病后第3~4周各采血清一次。有腦膜刺激癥狀者采取腦脊液方法:

顯微鏡凝集試驗(yàn)(MAT)

間接凝集試驗(yàn)

以乳膠(聚苯乙烯)或活性炭微粒為載體，吸附鉤端螺旋體可溶性抗原作為指示物血清學(xué)診斷病初和發(fā)病后第3~4周各采血清一次。有腦膜刺激防治原則消滅傳染源：大力滅鼠，加強(qiáng)病畜管理切斷傳播途徑：保護(hù)好水源，避免或減少與疫水接觸提高易感人群免疫力：對(duì)流行區(qū)的居民、礦工、飼養(yǎng)員及外來易感人員進(jìn)行多價(jià)鉤體死疫苗接種治療：鉤體對(duì)多種抗生素敏感，但以青霉素效果最好，對(duì)過敏者可用慶大霉素或金霉素防治原則第二節(jié)密螺旋體屬

(Treponema)人類致病的密螺旋體有四種:梅毒螺旋體(T.pallidum):梅毒(syphilis)雅司螺旋體(T.pertenue):雅司病(yaws)地方性螺旋體(T.endemicum):地方性梅毒(endemicsyphilis)品他螺旋體(T.carateum):品他(pinta)第二節(jié)密螺旋體屬(Treponema)人類致病的密螺旋體生物學(xué)性狀

8~14個(gè)致密而規(guī)則的小螺旋，兩端尖直運(yùn)動(dòng)活潑革蘭染色陰性，不易著染

Fontana鍍銀染色法→染成棕褐色形態(tài)與染色生物學(xué)性狀8~14個(gè)致密而規(guī)則的小螺旋，兩端尖直形態(tài)與染色OM,outermembraneEf(endoflagellaorperiplasmicflagella)LP1,2,lipoproteinspg,peptidoglycanCM,cytoplasmicmembraneBF,bodyfibrilsWM,cellwallmembraneOM,outermembrane不能在無活細(xì)胞的人工培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖在家兔上皮細(xì)胞培養(yǎng)中能有限生長(zhǎng)，繁殖慢培養(yǎng)抵抗力－極弱對(duì)溫度和干燥特別敏感對(duì)常用化學(xué)消毒劑敏感，1%~2%石炭酸數(shù)分鐘死亡對(duì)青霉素、四環(huán)素、紅霉素或砷劑均敏感不能在無活細(xì)胞的人工培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖培養(yǎng)抵抗力－極弱對(duì)溫度和第21章螺旋體課件致病性與免疫性致病物質(zhì)

莢膜樣物質(zhì)：菌體表面的黏多糖和唾液酸,免疫抑制透明質(zhì)酸酶：有利于擴(kuò)散

所致疾病---梅毒

人是梅毒的唯一傳染源

獲得性：性接觸傳播先天性：母體→胎盤→胎兒

免疫性感染性免疫細(xì)胞免疫比體液免疫重要致病性與免疫性致病物質(zhì)獲得性梅毒(syphilis)Ⅰ期（初期）梅毒：感染性極強(qiáng)，破壞性小感染后3周左右局部出現(xiàn)無痛性硬下疳，多見于外生殖器，一般4~8周后，常自愈Ⅱ期梅毒：感染性強(qiáng)，破壞性小發(fā)生于硬下疳出現(xiàn)后2~8周。蒼白亞種螺旋體血癥，全身皮膚、粘膜常有梅毒疹，全身淋巴結(jié)腫大，有時(shí)亦累及骨、關(guān)節(jié)、眼及其他臟器Ⅲ期(晚期)梅毒：感染性小，破壞性大發(fā)生于感染2年以后，亦可長(zhǎng)達(dá)10~15年的。病變可波及全身組織和器官?；緭p害為慢性肉芽腫，局部組織壞死。損害常進(jìn)展和消退交替出現(xiàn)。皮膚、肝、脾和骨骼常被累及?？晌＜吧@得性梅毒(syphilis)Ⅰ期（初期）梅毒：感染性極強(qiáng)Developmentoftheclinicalstagesofsyphilisovertime.

DevelopmentoftheclinicalstChancreofprimarysyphilisChancreofprimarysyphilisPrimarySyphilis-PenileChancreSource:CDC/NCHSTP/DivisionofSTDPrevention,STDClinicalSlidesPrimarySyphilis-PenileChancPrimarySyphilis–LabialChancreSource:CDC/NCHSTP/DivisionofSTDPrevention,STDClinicalSlidesPrimarySyphilis–LabialChanSecondarysyphilis:asampleofskinmanifestationsSecondarysyphilis:asampleoSecondarySyphilis:Palmar/PlantarRashSource:SeattleSTD/HIVPreventionTrainingCenterattheUniversityofWashington,UWHSCERSlideBankSource:CDC/NCHSTP/DivisionofSTDPrevention,STDClinicalSlidesSecondarySyphilis:Palmar/PlaSecondarySyphilis-PapulosquamousRashSource:CDC/NCHSTP/DivisionofSTDPrevention,STDClinicalSlidesSecondarySyphilis-PapulosquSecondarySyphilis:GeneralizedBodyRashSource:CincinnatiSTD/HIVPreventionTrainingCenterSource:CDC/NCHSTP/DivisionofSTDPrevention,STDClinicalSlidesSecondarySyphilis:GeneralizeSecondarySyphilis-CondylomatalataSource:CDC/NCHSTP/DivisionofSTDPrevention,STDClinicalSlidesSecondarySyphilis-CondylomaNeurosyphilis-SpirochetesinNeuralTissueSource:CDC/NCHSTP/DivisionofSTDPrevention,STDClinicalSlidesSilverstain,950xNeurosyphilis-SpirochetesinLateSyphilis-UlceratingGummaSource:CDC/NCHSTP/DivisionofSTDPrevention,STDClinicalSlidesLateSyphilis-UlceratingGum先天性梅毒（胎傳梅毒）多發(fā)生于妊娠4個(gè)月之后引起胎兒的全身性感染，導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)或死胎出生梅毒兒，呈現(xiàn)馬鞍鼻、鋸齒形牙、間質(zhì)性角膜炎、先天性耳聾等特殊體征先天性梅毒（胎傳梅毒）多發(fā)生于妊娠4個(gè)月之后SaddlebacknoseCongenitalsyphiliscanproducetell-talesignsininfectedpersons:asampleSaddlebacknoseCongenitalsyphCongenitalSyphilis-Hutchinson’sTeethSource:CDC/NCHSTP/DivisionofSTDPrevention,STDClinicalSlidesCongenitalSyphilis-HutchinsCongenitalSyphilis-MucousPatchesSource:CDC/NCHSTP/DivisionofSTDPrevention,STDClinicalSlidesCongenitalSyphilis-MucousPCongenitalSyphilis-PerforationofPalateSource:CDC/NCHSTP/DivisionofSTDPrevention,STDClinicalSlidesCongenitalSyphilis-Perforat

微生物學(xué)檢查法1.標(biāo)本Ⅰ期梅毒----硬下疳滲出液Ⅱ期梅毒----梅毒疹滲出液或局部淋巴結(jié)抽出液2.顯微鏡檢查3.血清學(xué)診斷

微生物學(xué)檢查法1.標(biāo)本

非特異性：非螺旋體抗原試驗(yàn)抗原(正常牛心肌的心脂質(zhì))→血清中的反應(yīng)素(抗脂質(zhì)抗體)

方法:USR(unheatedserumreagintest)

RPR(rapidplasmareagintest)。適用于大量過篩

特異性：密螺旋體抗原試驗(yàn)

抗原（Nichols株螺旋體）→螺旋體特異抗體優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，可用作梅毒證實(shí)試驗(yàn)常用方法：熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)(FTA-ABS)

梅毒螺旋體制動(dòng)試驗(yàn)(TPI)

梅毒螺旋體血凝試驗(yàn)(TPHA)

捕獲ELISA法非特異性：非螺旋體抗原試驗(yàn)

防治原則加強(qiáng)性衛(wèi)生教育和嚴(yán)格社會(huì)管理梅毒確診后，青霉素等及早予以徹底治療治療3個(gè)月至1年后血清學(xué)轉(zhuǎn)陰者為治愈防治原則加強(qiáng)性衛(wèi)生教育和嚴(yán)格社會(huì)管理第三節(jié)疏螺旋體伯氏疏螺旋體(B.burgdorferi)：萊姆病回歸熱疏螺旋體(

B.recurrentis)：回歸熱奮森疏螺旋體(B.vincentii)：口腔感染第三節(jié)疏螺旋體伯氏疏螺旋體(B.burgdorferi)：形態(tài)：疏螺旋體，兩端稍尖，運(yùn)動(dòng)活潑生物學(xué)性狀致病性與免疫性萊姆病是一種自然疫源性傳染病。儲(chǔ)存宿主主要是野生和馴養(yǎng)的哺乳動(dòng)物。白足鼠，鹿主要傳播媒介是硬蜱致病物質(zhì)有粘附素等侵襲力和內(nèi)毒素。形態(tài)：疏螺旋體，兩端稍尖，運(yùn)動(dòng)活潑生物學(xué)性狀致病性與免疫性萊萊姆病

經(jīng)3~30d潛伏期，在叮咬部位可出現(xiàn)一個(gè)或數(shù)個(gè)慢性移行性紅斑(ECM)。晚期主要表現(xiàn)為慢性關(guān)節(jié)炎、慢性神經(jīng)系統(tǒng)或皮膚異常

萊姆病經(jīng)3~30d潛伏期，在叮咬部位可出現(xiàn)一個(gè)或數(shù)個(gè)慢性移回歸熱疏螺旋體

(B.recurrentis)回歸熱是由多種疏螺旋體引起的急性傳染病。其臨床特點(diǎn)為急起急退的高熱，全身肌肉酸痛，1次或多次復(fù)發(fā)，肝、脾腫大，重癥可出現(xiàn)黃疸和出血傾向回歸熱疏螺旋體引起虱傳回歸熱(流行性回歸熱)

回歸熱疏螺旋體

(B.recurrentis)回歸熱是由多奮森疏螺旋體

(B.vincentii)與梭形梭桿菌寄居于人類口腔牙齦部。當(dāng)機(jī)體免疫功能下降，則這兩種菌大量繁殖，協(xié)同引起奮森咽峽炎、牙齦炎、口腔壞疽等。奮森疏螺旋體

(B.vincentii)與梭形梭桿菌寄居于人1.鉤端螺旋體形態(tài)、染色、培養(yǎng)特性、所致疾病和防治原則2.密螺旋體梅毒螺旋體的形態(tài)、染色、所致疾病及其防治原則3.疏螺旋體伯氏疏螺旋體的形態(tài)、染色及所致疾病考綱要求1.鉤端螺旋體形態(tài)、染色、培養(yǎng)特性、所致疾病和防治原則2.密關(guān)鍵問題1．名詞解釋：spirochete(螺旋體)

2．簡(jiǎn)答題：（1）簡(jiǎn)述具有致病性的螺旋體種類。（2）簡(jiǎn)述鉤端螺旋體、梅毒螺旋體的形態(tài)染色特征。（3）簡(jiǎn)述鉤端螺旋體、梅毒螺旋體的流行環(huán)節(jié)。（4）簡(jiǎn)述鉤端螺旋體、梅毒螺旋體病的防治原則。關(guān)鍵問題1．名詞解釋：

第二十一章螺旋體

(spirochete)

第一節(jié)鉤端螺旋體屬第二節(jié)密螺旋體屬第三節(jié)疏螺旋體屬第二十一章螺旋體

(spirochete)

第一節(jié)鉤端螺旋體(spirochete)是一類細(xì)長(zhǎng)、柔軟、螺旋狀、運(yùn)動(dòng)活潑的原核細(xì)胞型微生物；基本結(jié)構(gòu)與細(xì)菌相似，有細(xì)胞壁、原始核質(zhì)，以二分裂方式繁殖和對(duì)抗生素等藥物敏感等。

螺旋體(spirochete)是一類細(xì)長(zhǎng)、柔軟、螺旋狀、運(yùn)動(dòng)第21章螺旋體課件Syphilis-TreponemapallidumLeptospirosis-Leptospirainterrogans

Relapsingfever-BorreliarecurrentisLymedisease-BorreliaburgdorferiSpirochetediseasesofhumansSyphilis-TreponemapallidumS螺旋體致病性種類所致疾病傳播方式或媒介螺旋體科密螺旋體屬(Treponema)蒼白密螺旋體蒼白亞種梅毒性傳播蒼白密螺旋體地方亞種地方梅毒黏膜損傷蒼白密螺旋體極細(xì)亞種雅斯病皮膚損傷品他螺旋體品他病皮膚損傷疏螺旋體屬(Borrelia)伯氏疏螺旋體萊姆病硬蜱回歸熱疏螺旋體流行性回歸熱體虱赫姆疏螺旋體地方性回歸熱軟蜱奮森疏螺旋體多種口腔感染條件致病鉤端螺旋體科鉤端螺旋體屬(Leptospira)問號(hào)鉤端螺旋體鉤端螺旋體病接觸疫水螺旋體目致病性螺旋體的種類螺旋體致病性種類所致疾病傳播方式或媒介螺旋SpirochetestructureproteinfattyacidsSpirochetestructureproteinfat第21章螺旋體課件

Borreliaburgdorferi

TreponemapallidumLeptospiraBorreliaburgdorferiTreponem病原性螺旋體的特性特性鉤端螺旋體(Leptospira)密螺旋體(Treponema)疏螺旋體(Borrelia)外形螺旋細(xì)密兩端呈鉤狀螺旋細(xì)密，兩端尖直螺旋稀疏，旋幅不一，呈波浪狀軸絲數(shù)21～815～20常用染色法鍍銀法鍍銀法瑞氏或姬姆薩氏法體外培養(yǎng)28～30℃，pH6.8～7.5，3～4天不佳不佳需氣特性需氧厭氧微需氧抵抗力中性水中能活20天以上酸性水土中很快死亡自然環(huán)境下不能存活血內(nèi)室溫下存洗60天以上0℃下至少活100天抗原特性穩(wěn)定、有型、群、屬特異性，群及屬抗原間有交叉較穩(wěn)定、有種屬特異性、屬內(nèi)抗原有交叉易變，屬內(nèi)抗原有交叉，型、株的抗原特異性高已知種型1種、20群、200型101種，3種致病42種，18種致病儲(chǔ)存宿主野生鼠類、豬、牛、家畜、人人虱、蜱、人、動(dòng)物所致疾病鉤端螺旋體病梅毒、雅司病等回歸熱、咽炎等病原性螺旋體的特性特性鉤端螺旋體(Leptospira)密螺第一節(jié)鉤端螺旋體屬

(Leptospira)

問號(hào)狀鉤端螺旋體(L.interrogans)

雙曲鉤端螺旋體(L.biflexa)第一節(jié)鉤端螺旋體屬

(Leptospira)問號(hào)狀鉤端螺旋細(xì)密、規(guī)則，形似細(xì)小珍珠排列的細(xì)鏈。一端或兩端呈鉤狀。菌體常呈C、S或8字型革蘭染色陰性，不易著染Fontana鍍銀染色法→染成棕褐色運(yùn)動(dòng)活潑形態(tài)與染色一、生物學(xué)性狀螺旋細(xì)密、規(guī)則，形似細(xì)小珍珠排列的細(xì)鏈。一端或兩端呈鉤狀。菌營養(yǎng)要求較高，常用含10％兔血清的Korthof培養(yǎng)基適宜生長(zhǎng)溫度為28－30℃，最適pH7.2－7.6鉤端螺旋體在人工培養(yǎng)基中生長(zhǎng)緩慢。在液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一周左右，呈現(xiàn)為半透明云霧狀生長(zhǎng)需氧或微需氧培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求較高，常用含10％兔血清的Korthof培養(yǎng)基培養(yǎng)特Korthof培養(yǎng)基成分蛋白胨400mg，氯化鈉700mg，碳酸氫鈉10mg，氯化鉀20mg，氯化鈣20mg，磷酸二氫鉀120mg，磷酸氫二鈉44Omg，蒸餾水500ml，無菌兔血清（滅活）8-10ml。

將各成分溶于蒸餾水內(nèi)煮沸20min，以濾紙濾，調(diào)至pH為7.2，分裝燒瓶?jī)?nèi)每瓶100ml，121℃滅菌20min;無菌采取兔心血分離血清，置56℃水浴箱中30min以破壞補(bǔ)體；上述蛋白胨鹽溶液每100ml中加入無菌兔血清8-10ml；混合后，用無菌分裝中號(hào)試管中，每管5ml；置56℃水浴箱30min;37℃溫箱中孵育2天，剔去污染者。

Korthof培養(yǎng)基成分蛋白胨400mg，氯化鈉700mg抵抗力:弱熱抵抗力弱，60℃1min即死亡0.2%來蘇、1:2000升汞、1%石炭酸經(jīng)10~30min被殺滅對(duì)青霉素敏感在濕土或水中可存活數(shù)月抵抗力:弱熱抵抗力弱，60℃1min即死亡抗原性屬特異性蛋白抗原(genus-specificproteinantigen)糖蛋白或脂蛋白群特異性抗原(serogroup-specificantigen)脂多糖復(fù)合物型特異性抗原(serovar-specificantigen)菌體表面多糖顯微鏡凝集試驗(yàn)

(microscopicagglutinationtest,MAT)凝集吸收試驗(yàn)(agglutinationabsorptiontest,AAT)抗原性屬特異性蛋白抗原(genus-specificpro分型全世界已發(fā)現(xiàn)及確定有25群和273血清型國內(nèi)已發(fā)現(xiàn)19群和74個(gè)血清型，是世界上發(fā)現(xiàn)血清型最多的國家，主要菌群：波摩那群(pomona)黃疸出血群(icterohaemorrhagiae)犬群(canicola)流感傷寒群(grippotyphosa)七日熱群(hebdomadis)分型全世界已發(fā)現(xiàn)及確定有25群和273血清型Leptospirosisisawidelyspreaddiseaseofglobalconcern.Infectioncausesflu-likeepisodeswithfrequentsevererenalandhepaticdamage,suchashaemorrhageandjaundice.Inmoreseverecases,massivepulmonaryhaemorrhages,includingfatalsuddenhaemoptysis,canoccur.Herewereportthecompletegenomicsequenceofarepresentativevirulentserovartypestrain(Lai)ofLeptospirainterrogansserogroupIcterohaemorrhagiaeconsistingofa4.33-megabaselargechromosomeanda359-kilobasesmallchromosome,withatotalof4,768predictedgenes.Intermsofthegeneticdeterminantsofphysiologicalcharacteristics,thefacultativelyparasiticL.interrogansdiffersextensivelyfromtwootherstrictlyparasiticpathogenicspirochaetes,TreponemapallidumandBorreliaburgdorferi,althoughsimilaritiesexistinthegenesthatgoverntheiruniquemorphologicalfeatures.AcomprehensiveanalysisoftheL.interrogansgenesforchemotaxis/motilityandlipopolysaccharidesynthesisprovidesabasisforin-depthstudiesofvirulenceandpathogenesis.Thediscoveryofaseriesofgenespossiblyrelatedtoadhesion,invasionandthehaematologicalchangesthatcharacterizeleptospirosishasprovidedcluesabouthowanenvironmentalorganismmightevolveintoanimportanthumanpathogen.

RenSX,FuG,JiangXG,ZengR,MiaoYG,XuH,ZhangYX,XiongH,LuG,LuLF,JiangHQ,JiaJ,TuYF,JiangJX,GuWY,ZhangYQ,CaiZ,ShengHH,YinHF,ZhangY,ZhuGF,WanM,HuangHL,QianZ,WangSY,MaW,YaoZJ,ShenY,QiangBQ,XiaQC,GuoXK,DanchinA,SaintGironsI,SomervilleRL,WenYM,ShiMH,ChenZ,XuJG,ZhaoGP.

UniquephysiologicalandpathogenicfeaturesofLeptospirainterrogansrevealedbywhole-genomesequencing.

Nature.2003Apr24;422(6934):888-93.

Leptospirosisisawidelyspre流行環(huán)節(jié)傳染源：多種動(dòng)物，在感染動(dòng)物腎臟內(nèi)長(zhǎng)期存在，隨尿排出傳播途徑：直接接觸傳播，帶菌尿污染環(huán)境，人可通過收割水稻、接觸雨水、洪水或其他機(jī)會(huì)，通過皮膚粘膜細(xì)微破損處感染母嬰傳播人群易感性：人群普遍易感，隱性感染率高流行環(huán)節(jié)傳染源：流行特征流行地區(qū)：遍及全世界，以熱帶及亞熱帶地區(qū)多見。國內(nèi)26個(gè)省市自治區(qū)均有本病發(fā)生或流行，以長(zhǎng)江流域及其以南、東南沿海及西南各省市自治區(qū)較嚴(yán)重,近年來發(fā)病率有所下降，但在部分地區(qū)仍有流行發(fā)病季節(jié)：多在雨季夏秋季(6~9月)，8、9月為高峰青壯年、農(nóng)民、漁民及下水道工人等高發(fā)流行特征流行地區(qū)：遍及全世界，以熱帶及亞熱帶地區(qū)多見。國內(nèi)2第21章螺旋體課件致病性與免疫性致病物質(zhì)---類似細(xì)菌內(nèi)毒素與外毒素

內(nèi)毒素樣物質(zhì)(ELS)或稱脂多糖樣物質(zhì)(LLS)

溶血素:破壞紅細(xì)胞膜細(xì)胞毒性因子(CTF)

致細(xì)胞病變作用(CPE)物質(zhì)致病性與免疫性致病物質(zhì)---類似細(xì)菌內(nèi)毒素與外毒素內(nèi)毒素樣所致疾病:鉤端螺旋體病(leptospirosis):

一種人畜共患傳染病。

傳染源傳播途徑鼠和豬粘膜或破損皮膚胎盤垂直傳播臨床表現(xiàn)進(jìn)入損傷全身毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及肝、腎、肺心及中樞神經(jīng)可出現(xiàn)休克、DIC、黃疸、出血、心腎功能不全、腦膜炎等

先形成鉤體血癥疾病特點(diǎn)起病急、高熱、乏力、全身酸痛、眼結(jié)膜充血、腓腸肌壓痛、表淺淋巴結(jié)腫大所致疾病:鉤端螺旋體病(leptospirosis):一種Pathogenesis

Leptospiraentersthehostthroughmucosaandbrokenskin,resultinginbacteremia.Thespirochetesmultiplyinorgans,mostcommonlythecentralnervoussystem,kidneys,andliver.Theyareclearedbytheimmuneresponsefromthebloodandmosttissuesbutpersistandmultiplyforsometimeinthekidneytubules.Infectivebacteriaareshedintheurine.Themechanismoftissuedamageisnotknown.Pathogenesis發(fā)病機(jī)理

鉤端螺旋體

↓皮膚或黏膜

（血流）→

全身毛細(xì)血管的中毒性損（早期）↙↓（中期）↘（恢復(fù)期）

感染中毒期器官損害期單純敗血癥(leptospitemia)↓遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)

↗肺出血后發(fā)熱內(nèi)臟損害→肝炎反應(yīng)性腦膜炎↘間質(zhì)性腎炎眼部炎癥↘腦膜腦炎閉塞性腦動(dòng)脈炎發(fā)病機(jī)理鉤端螺旋體臨床表現(xiàn)潛伏期2~20日，一般7~13日。臨床分型1.單純型：發(fā)熱、肌肉疼痛（以腓腸肌和腰背肌明顯）、結(jié)膜充血、腓腸肌壓痛、淺表淋巴結(jié)腫大及壓痛。其它：肝腫大、咽痛、紅腫。2.肺出血型：病程3~4天，輕度肺出血---咳嗽、咳血，肺部少許濕羅音，胸片可見散在點(diǎn)狀或小片陰影。肺彌漫性出血：發(fā)熱及中毒癥狀加重；氣緊、心慌、窒息，胸片雙肺廣泛點(diǎn)片狀陰影或大片狀融合；神志恍惚或昏迷、發(fā)紺、呼吸不規(guī)律，大量咳血，窒息死亡。臨床表現(xiàn)潛伏期2~20日，一般7~13日。

輕度中度重度消化道癥狀較明顯重出血無重度重度凝血功能基本正常異常明顯異常尿蛋白陰性陽性（++）以上管型可見較多預(yù)后良好可逐漸恢復(fù)較差3.黃疸出血型：病程4~8天輕度4.腎功能衰竭型:常與黃疸出血型合并出現(xiàn)，主要表現(xiàn)為蛋白尿及少量細(xì)胞和管型；嚴(yán)重可出現(xiàn)尿毒癥、急性腎衰的表現(xiàn)。5.腦膜腦炎型:發(fā)熱3~4天后出現(xiàn)腦膜腦炎的臨床表現(xiàn)。死亡率：腎衰70%肝功能衰竭20%嚴(yán)重出血10%4.腎功能衰竭型:常與黃疸出血型合并出現(xiàn)，主要表現(xiàn)為蛋白

后發(fā)癥后發(fā)熱：經(jīng)治療或自愈后再度發(fā)熱，1-3天可自退，不需治療反應(yīng)性腦膜炎：在后發(fā)熱時(shí)或稍后出現(xiàn)，鉤體培養(yǎng)陰性，預(yù)后良好眼的后發(fā)癥：退熱1W~1M，虹膜睫狀體炎、脈絡(luò)炎或葡萄膜炎等閉塞性腦動(dòng)脈炎：波摩那型鉤體病流行后2-5月，變態(tài)反應(yīng)所致。腦基底部多發(fā)動(dòng)脈炎導(dǎo)致腦缺血，引起偏癱、失語等，大多可恢復(fù)后發(fā)癥后發(fā)熱：經(jīng)治療或自愈后再度發(fā)熱，第21章螺旋體課件

免疫性:特異性體液免疫為主,感染后及病后僅獲同型免疫力,故可二次感染發(fā)病免疫性:特異性體液免疫為微生物學(xué)檢查法

發(fā)病10天內(nèi)取血液,2周后取尿液,有腦膜刺激者取腦脊液

直接鏡檢

分離與鑒定接種至Korthof培養(yǎng)基，置28℃孵育陽性標(biāo)本:在2周內(nèi)可見培養(yǎng)液呈輕度混濁→暗視野顯微鏡檢查→有→則用已知診斷血清鑒定其血清群和血清型。陰性標(biāo)本:分離培養(yǎng)應(yīng)連續(xù)觀察4個(gè)月，仍無生長(zhǎng)者動(dòng)物接種幼齡豚鼠或金地鼠腹腔接種

DNA探針雜交及PCR法檢測(cè)鉤體DNA

微生物學(xué)檢查法發(fā)病10天內(nèi)取血液,2周后取尿液,有腦膜刺血清學(xué)診斷病初和發(fā)病后第3~4周各采血清一次。有腦膜刺激癥狀者采取腦脊液方法:

顯微鏡凝集試驗(yàn)(MAT)

間接凝集試驗(yàn)

以乳膠(聚苯乙烯)或活性炭微粒為載體，吸附鉤端螺旋體可溶性抗原作為指示物血清學(xué)診斷病初和發(fā)病后第3~4周各采血清一次。有腦膜刺激防治原則消滅傳染源：大力滅鼠，加強(qiáng)病畜管理切斷傳播途徑：保護(hù)好水源，避免或減少與疫水接觸提高易感人群免疫力：對(duì)流行區(qū)的居民、礦工、飼養(yǎng)員及外來易感人員進(jìn)行多價(jià)鉤體死疫苗接種治療：鉤體對(duì)多種抗生素敏感，但以青霉素效果最好，對(duì)過敏者可用慶大霉素或金霉素防治原則第二節(jié)密螺旋體屬

(Treponema)人類致病的密螺旋體有四種:梅毒螺旋體(T.pallidum):梅毒(syphilis)雅司螺旋體(T.pertenue):雅司病(yaws)地方性螺旋體(T.endemicum):地方性梅毒(endemicsyphilis)品他螺旋體(T.carateum):品他(pinta)第二節(jié)密螺旋體屬(Treponema)人類致病的密螺旋體生物學(xué)性狀

8~14個(gè)致密而規(guī)則的小螺旋，兩端尖直運(yùn)動(dòng)活潑革蘭染色陰性，不易著染

Fontana鍍銀染色法→染成棕褐色形態(tài)與染色生物學(xué)性狀8~14個(gè)致密而規(guī)則的小螺旋，兩端尖直形態(tài)與染色OM,outermembraneEf(endoflagellaorperiplasmicflagella)LP1,2,lipoproteinspg,peptidoglycanCM,cytoplasmicmembraneBF,bodyfibrilsWM,cellwallmembraneOM,outermembrane不能在無活細(xì)胞的人工培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖在家兔上皮細(xì)胞培養(yǎng)中能有限生長(zhǎng)，繁殖慢培養(yǎng)抵抗力－極弱對(duì)溫度和干燥特別敏感對(duì)常用化學(xué)消毒劑敏感，1%~2%石炭酸數(shù)分鐘死亡對(duì)青霉素、四環(huán)素、紅霉素或砷劑均敏感不能在無活細(xì)胞的人工培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖培養(yǎng)抵抗力－極弱對(duì)溫度和第21章螺旋體課件致病性與免疫性致病物質(zhì)

莢膜樣物質(zhì)：菌體表面的黏多糖和唾液酸,免疫抑制透明質(zhì)酸酶：有利于擴(kuò)散

所致疾病---梅毒

人是梅毒的唯一傳染源

獲得性：性接觸傳播先天性：母體→胎盤→胎兒

免疫性感染性免疫細(xì)胞免疫比體液免疫重要致病性與免疫性致病物質(zhì)獲得性梅毒(syphilis)Ⅰ期（初期）梅毒：感染性極強(qiáng)，破壞性小感染后3周左右局部出現(xiàn)無痛性硬下疳，多見于外生殖器，一般4~8周后，常自愈Ⅱ期梅毒：感染性強(qiáng)，破壞性小發(fā)生于硬下疳出現(xiàn)后2~8周。蒼白亞種螺旋體血癥，全身皮膚、粘膜常有梅毒疹，全身淋巴結(jié)腫大，有時(shí)亦累及骨、關(guān)節(jié)、眼及其他臟器Ⅲ期(晚期)梅毒：感染性小，破壞性大發(fā)生于感染2年以后，亦可長(zhǎng)達(dá)10~15年的。病變可波及全身組織和器官?；緭p害為慢性肉芽腫，局部組織壞死。損害常進(jìn)展和消退交替出現(xiàn)。皮膚、肝、脾和骨骼常被累及。可危及生命獲得性梅毒(syphilis)Ⅰ期（初期）梅毒：感染性極強(qiáng)Developmentoftheclinicalstagesofsyphilisovertime.

DevelopmentoftheclinicalstChancreofprimarysyphilisChancreofprimarysyphilisPrimarySyphilis-PenileChancreSource:CDC/NCHSTP/DivisionofSTDPrevention,STDClinicalSlidesPrimarySyphilis-PenileChancPrimarySyphilis–LabialChancreSource:CDC/NCHSTP/DivisionofSTDPrevention,STDClinicalSlidesPrimarySyphilis–LabialChanSecondarysyphilis:asampleofskinmanifestationsSecondarysyphilis:asampleoSecondarySyphilis:Palmar/PlantarRashSource:SeattleSTD/HIVPreventionTrainingCenterattheUniversityofWashington,UWHSCERSlideBankSource:CDC/NCHSTP/DivisionofSTDPrevention,STDClinicalSlidesSecondarySyphilis:Palmar/PlaSecondarySyphilis-PapulosquamousRashSource:CDC/NCHSTP/DivisionofSTDPrevention,STDClinicalSlidesSecondarySyphilis-PapulosquSecondarySyphilis:GeneralizedBodyRashSource:CincinnatiSTD/HIVPreventionTrainingCenterSource:CDC/NCHSTP/DivisionofSTDPrevention,STD