食品整治辦(2009)29號(hào)

食品整治辦[2009]29號(hào)關(guān)于印發(fā)全國打擊違法添加非食用物質(zhì)和濫用食品添加劑專項(xiàng)整治抽檢工作指導(dǎo)原則和方案的通知各省、自治區(qū)、直轄市及新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)打擊違法添加非食用物質(zhì)和濫用食品添加劑專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)小組：根據(jù)《全國打擊違法添加非食用物質(zhì)和濫用食品添加劑專項(xiàng)整治方案》（衛(wèi)監(jiān)督發(fā)[2008]60號(hào)）規(guī)定和《全國打擊違法添加非食用物質(zhì)和濫用食品添加劑專項(xiàng)整治近期工作重點(diǎn)及要求》（衛(wèi)監(jiān)督發(fā)[2009]21號(hào)），全國專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)小組組織制定了專項(xiàng)整治抽檢工作指導(dǎo)原則和專項(xiàng)整治國家專項(xiàng)抽檢工作方案，經(jīng)專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)小組各成員部門同意，現(xiàn)印發(fā)給你們，請(qǐng)認(rèn)真組織實(shí)施。有關(guān)要求如下：一、各?。ㄊ?、區(qū)）專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)小組要根據(jù)抽檢工作指導(dǎo)原則的要求，結(jié)合本地區(qū)的實(shí)際情況，制定具體的抽檢計(jì)劃并組織實(shí)施。請(qǐng)各地專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)小組負(fù)責(zé)，務(wù)必于4月15日前將抽檢結(jié)果及分析評(píng)估報(bào)告報(bào)送全國專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)小組辦公室。二、承擔(dān)專項(xiàng)整治國家專項(xiàng)抽檢方案工作任務(wù)的各部門和檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)要加強(qiáng)協(xié)調(diào)配合，按要求采樣并將樣品送至指定檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢驗(yàn)。檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)要按時(shí)限完成樣品檢驗(yàn)工作并將檢驗(yàn)結(jié)果通報(bào)監(jiān)督抽樣單位。三、對(duì)抽檢中發(fā)現(xiàn)的違法食品生產(chǎn)經(jīng)營行為，各地要依法予以查處，并將處理情況及時(shí)向社會(huì)公布。抽檢中發(fā)現(xiàn)的問題，請(qǐng)及時(shí)函報(bào)我辦。聯(lián)系人：李業(yè)鵬聯(lián)系電話真件：1.全國打擊違法添加非食用物質(zhì)和濫用食品添加劑專項(xiàng)整治抽檢工作指導(dǎo)原則2.全國打擊違法添加非食用物質(zhì)和濫用食品添加劑專項(xiàng)整治國家專項(xiàng)抽檢工作方案3.抽檢檢驗(yàn)方法全國打擊違法添加非食用物質(zhì)和濫用食品添加劑專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)小組（代章） 二○○九年三月二十三日（信息公開形式：主動(dòng)公開）

附件1全國打擊違法添加非食用物質(zhì)和濫用食品添加劑專項(xiàng)整治抽檢工作指導(dǎo)原則為做好全國打擊違法添加非食用物質(zhì)和濫用食品添加劑專項(xiàng)整治（以下簡(jiǎn)稱專項(xiàng)整治）抽檢工作，特制定本指導(dǎo)原則。一、職責(zé)分工各省專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)小組負(fù)責(zé)組織各有關(guān)部門制定具體的抽檢計(jì)劃，落實(shí)各項(xiàng)工作任務(wù)，按時(shí)報(bào)送抽檢計(jì)劃和抽檢工作總結(jié)報(bào)告。各部門要加強(qiáng)對(duì)各地本系統(tǒng)抽檢工作的督導(dǎo)檢查和指導(dǎo)，及時(shí)組織培訓(xùn)和質(zhì)量控制。二、重點(diǎn)食品乳及乳制品、米面制品、淀粉制品、豆谷制品、肉與肉制品、酒類、水產(chǎn)品、調(diào)味品。三、抽檢要求（一）重點(diǎn)抽檢項(xiàng)目。重點(diǎn)抽檢項(xiàng)目為衛(wèi)生部等九部門公布的違法添加到食品中的非食用物質(zhì)及易濫用的食品添加劑的名單（第一、二批）或在食品安全監(jiān)督、監(jiān)測(cè)和舉報(bào)投訴等渠道發(fā)現(xiàn)的非法食品添加物和濫用食品添加劑。（二）樣品采集的要求。1、樣品采集原則為樣品應(yīng)具有代表性。應(yīng)采集不同生產(chǎn)廠家的樣品，達(dá)不到要求數(shù)量的，可以采集同一廠家但不同品牌的產(chǎn)品，仍達(dá)不到的可以選擇不同口味的產(chǎn)品。2、如在銷售領(lǐng)域采集則本地生產(chǎn)的樣品數(shù)量不少于80%。3、采集的樣品應(yīng)在保質(zhì)期內(nèi)，并考慮檢驗(yàn)時(shí)樣品在保質(zhì)期內(nèi)。4、樣品采集地點(diǎn)應(yīng)考慮“添加劑”可能用在的重點(diǎn)環(huán)節(jié)，即該類食品添加劑可能出現(xiàn)的各個(gè)監(jiān)管環(huán)節(jié)如食品原料、生產(chǎn)加工、銷售流通、餐飲等。5、樣品的代表性還表現(xiàn)在樣品來源于大、中、小企業(yè)。因此在不同監(jiān)管領(lǐng)域樣品采集時(shí)應(yīng)考慮大中小三個(gè)層次（如大中小農(nóng)場(chǎng)；大中小食品生產(chǎn)企業(yè)；大中小商場(chǎng)超市或集貿(mào)市場(chǎng)；大中小餐飲業(yè)等），每個(gè)層次至少采集10個(gè)樣品，少于10個(gè)樣品的，全部采集。（三）依法進(jìn)行樣品的采集和檢驗(yàn)。包括采集程序、采集方法、封存、儲(chǔ)存、傳遞、檢驗(yàn)等工作按照國家或地方各監(jiān)管部門頒布的監(jiān)督檢查規(guī)范、抽檢管理規(guī)定或辦法執(zhí)行。四、檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)項(xiàng)目按附件指定的檢驗(yàn)方法和有關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法執(zhí)行。附件2全國打擊違法添加非食用物質(zhì)和濫用食品添加劑專項(xiàng)整治國家專項(xiàng)抽檢工作方案為加強(qiáng)對(duì)重點(diǎn)食品的抽檢工作，全國專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)小組決定組織部分省份相關(guān)部門和檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)開展國家專項(xiàng)抽檢工作，制定本工作方案。一、職責(zé)分工（一）全國專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)小組辦公室負(fù)責(zé)監(jiān)督抽檢方案的組織實(shí)施及結(jié)果匯總。（二）各有關(guān)部門對(duì)國家專項(xiàng)抽檢工作進(jìn)行督導(dǎo)檢查和指導(dǎo)。（三）各地專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)小組負(fù)責(zé)抽檢工作組織協(xié)調(diào)及結(jié)果上報(bào)。（四）具體承擔(dān)抽檢任務(wù)的單位見附表1。二．樣品采集要求1.樣品采集地點(diǎn)見附表1。2.樣品采集的要求。（1）樣品采集原則為樣品應(yīng)具有代表性。應(yīng)采集不同生產(chǎn)廠家的樣品，達(dá)不到要求數(shù)量的，可以采集同一廠家但不同品牌的產(chǎn)品，仍達(dá)不到的可以選擇不同口味的產(chǎn)品。采樣地點(diǎn)覆蓋省市縣且不少于3家。水發(fā)水產(chǎn)品不少于5家。（2）在銷售流通領(lǐng)域采集樣品，本地生產(chǎn)的樣品數(shù)量不少于80%。（3）采集的樣品應(yīng)在保質(zhì)期內(nèi)，并考慮檢驗(yàn)時(shí)樣品在保質(zhì)期內(nèi)。（4）樣品采集量：每個(gè)食品樣品應(yīng)采集2份，每份至少500g。其中一份送檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)用于檢驗(yàn)，一份留存采樣機(jī)構(gòu)用于復(fù)檢（檢驗(yàn)有異議時(shí)）。水發(fā)水產(chǎn)品中甲醛檢驗(yàn)不復(fù)檢，可以不留樣。（5）樣品保存：原料奶散裝樣品應(yīng)混勻后用滅菌容器分裝。水發(fā)產(chǎn)品用化學(xué)分析用容器分裝。取樣后在0-4℃條件下運(yùn)輸，并于18h內(nèi)送到試驗(yàn)室,如果無冷藏條件應(yīng)于采樣后4h內(nèi)檢驗(yàn)。樣品保存在-20（三）樣品傳遞：采樣機(jī)構(gòu)應(yīng)派專人于4月1日前將樣品送到指定的檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)，并按照檢驗(yàn)規(guī)定完成樣品的接收程序。（四）依法進(jìn)行樣品的采集和檢驗(yàn)，包括采集程序、采集方法、封存、儲(chǔ)存、傳遞、檢驗(yàn)等工作按照國家或地方各監(jiān)管部門頒布的監(jiān)督檢查規(guī)范、抽檢管理規(guī)定或辦法執(zhí)行。（五）全國專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)小組提供抽檢經(jīng)費(fèi)。三、結(jié)果報(bào)送和判定（一）各地專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)小組于2009年4月15日前將抽檢結(jié)果（不包括結(jié)果判定）報(bào)送全國專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)小組辦公室。抽檢數(shù)據(jù)匯總表（格式）見附表2。（二）結(jié)果判定各地專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)小組對(duì)于具有國家限量標(biāo)準(zhǔn)的檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行判定，并對(duì)違法產(chǎn)品進(jìn)行查處。對(duì)于沒有國家限量標(biāo)準(zhǔn)的項(xiàng)目，由全國專項(xiàng)整治領(lǐng)導(dǎo)小組專家委員會(huì)對(duì)結(jié)果進(jìn)行判定。附表1：專項(xiàng)整治國家專項(xiàng)抽檢工作方案具體項(xiàng)目附表2：抽檢信息匯總表（格式）附表1：專項(xiàng)整治國家專項(xiàng)抽檢工作方案具體項(xiàng)目序號(hào)產(chǎn)品類別采樣地點(diǎn)每省數(shù)量抽檢項(xiàng)目檢驗(yàn)依據(jù)采樣省份省級(jí)采樣單位檢測(cè)單位備注1.原料奶奶站10個(gè)β-內(nèi)酰胺酶本文件附3方法天津、河北、內(nèi)蒙、黑龍江、遼寧、山東、河南、陜西農(nóng)業(yè)（牧業(yè)、畜牧）廳局省級(jí)農(nóng)業(yè)（牧業(yè)、畜牧）廳局檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)三聚氰胺GB/T22388-20082.紅葡萄酒集貿(mào)市場(chǎng)10個(gè)環(huán)己基氨基磺酸鈉（甜蜜素）GB/T5009.97-2003河南、山東、吉林、河北、黑龍江、天津、北京、福建質(zhì)監(jiān)局省級(jí)質(zhì)監(jiān)部門檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)糖精鈉GB/T5009.28-2003胭脂紅、日落黃、莧菜紅、赤蘚紅GB/T5009.35-20033.面粉餐飲單位10個(gè)溴酸鉀GB/T20188-2006河南、山東、黑龍江、江蘇、河北、安徽、四川、陜西衛(wèi)生廳局省級(jí)CDC過氧化苯甲酰GB/T22325-2004.水發(fā)水產(chǎn)品集貿(mào)市場(chǎng)20個(gè)甲醛SC/T3025-2006福建、江西、浙江、廣東、重慶、山東工商局省級(jí)CDC5.熟肉制品大、中、小生產(chǎn)企業(yè)各5個(gè)氟苯尼考參考GB/T20756-2006北京、遼寧、河北、安徽、湖南質(zhì)監(jiān)局農(nóng)業(yè)部中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所聯(lián)系電/p>

附表2：抽檢信息匯總表（格式）產(chǎn)品類別： 行業(yè)類型：行業(yè)層次：上報(bào)單位（簽章）： ：依據(jù)檢驗(yàn)方法鉛GB/T5009.12-2003,甜蜜素GB/T5009.97-2003……填報(bào)日期 年月日判定依據(jù)及判定標(biāo)準(zhǔn)GB2760甜蜜素：0.06mg/kg填表人：序號(hào)產(chǎn)品名稱商標(biāo)規(guī)格生產(chǎn)日期或批號(hào)標(biāo)示生產(chǎn)單位及屬地（縣級(jí)以上）被采樣單位檢驗(yàn)值（或檢查情況）不合格項(xiàng)目是否確認(rèn)備注鋁（mg/kg）甜蜜素（mg/kg）注：1.“檢驗(yàn)項(xiàng)目及檢測(cè)值”欄目下的相應(yīng)的列數(shù)設(shè)定及其欄目標(biāo)題，應(yīng)根據(jù)計(jì)劃中不同食品要求的檢驗(yàn)項(xiàng)目而定（上表中相應(yīng)標(biāo)題僅是舉例）。2．行業(yè)類型：原料奶、生產(chǎn)企業(yè)、商場(chǎng)、集貿(mào)市場(chǎng)、餐飲單位。行業(yè)層次：大、中、小。3.明確填報(bào)信息，不能有空格，如無信息即填“無”。附件3.抽檢檢驗(yàn)方法1、國家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法序號(hào)檢測(cè)項(xiàng)目檢驗(yàn)方法1.

甲醛次硫酸鈉（吊白塊）GB/T21126-2007小麥粉與大米粉及其制品中甲醛次硫酸氫鈉含量的測(cè)定；2.

溴酸鉀GB/T20188-2006小麥粉中溴酸鹽的測(cè)定離子色譜法3.

胭脂紅GB/T5009.35-20034.

檸檬黃GB/T5009.35-20035.

日落黃GB/T5009.35-20036.

莧菜紅GB/T5009.35-20037.

亮藍(lán)GB/T5009.35-20038.

赤蘚紅GB/T5009.35-20039.

新紅GB/T5009.35-200310.

誘惑紅GB/T5009.141-2003食品中誘惑紅的測(cè)定11.

山梨酸GB/T5009.29-2003食品中山梨酸、苯甲酸的測(cè)定12.

苯甲酸GB/T5009.29-2003食品中山梨酸、苯甲酸的測(cè)定13.

環(huán)己基氨基磺酸鈉（甜蜜素）GB/T5009.97-2003食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的測(cè)定14.

糖精鈉GB/T5009.28-2003食品中糖精鈉的測(cè)定15.

蔗糖脂肪酸酯GB10617-2005食品添加劑蔗糖脂肪酸酯（丙二醇法）16.

過氧化苯甲酰GB/T22325-2008小麥粉中過氧化苯甲酰的測(cè)定高效液相色譜法17.

硼酸GB/T21918-2008食品中硼酸的測(cè)定18.

硼砂GB/T21918-2008食品中硼酸的測(cè)定19.

鋁GB/T5009.182-2003面制食品中鋁的測(cè)定20.

二氧化鈦GB/21912-2008食品中二氧化鈦的測(cè)定21.

亞硝酸鹽GB/T5009.33-2003食品中亞硝酸鹽、硝酸鹽的測(cè)定22.

三聚氰胺GB/T22388-2008原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測(cè)方法GB/T22400-2008原料乳中三聚氰胺快速檢測(cè)液相色譜法23.

蘇丹紅ⅠGB/T19681-2005食品中蘇丹紅染料的檢測(cè)方法高效液相色譜法2、指定的檢驗(yàn)方法序號(hào)檢測(cè)項(xiàng)目檢驗(yàn)方法1硫氰酸鈉離子色譜法測(cè)定牛奶中硫氰酸根2富馬酸二甲酯食品中富馬酸二甲酯殘留量的測(cè)定3堿性橙ⅡBasicrangeⅡ辣椒粉中堿性橙、堿性玫瑰精、酸性橙Ⅱ及酸性黃的測(cè)定——液相色譜辣椒粉中堿性橙、堿性玫瑰精、酸性橙Ⅱ及酸性黃的測(cè)定——液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法4β-內(nèi)酰胺酶乳及乳制品中舒巴坦敏感β-內(nèi)酰胺酶類藥物檢驗(yàn)方法杯碟法5甲醛SC/T3025-2006水產(chǎn)品中甲醛的測(cè)定

指定檢驗(yàn)方法1.離子色譜法測(cè)定牛奶中硫氰酸根1原理液態(tài)奶樣品沉淀蛋白、去除脂肪后，用離子色譜分析，電導(dǎo)檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法定量。2實(shí)驗(yàn)部分2.1試劑與材料2.1.1試驗(yàn)用水均為超純水2.1.2乙腈（色譜純）2.1.3固相萃取小柱：OnGuardRP柱（2.5cc），或相當(dāng)者（如C18），使用前依次用5ml甲醇和10ml水活化。2.1.4硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)品：北京化工廠2.1.5硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液將硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)品于80度烘箱內(nèi)烘干2小時(shí)。準(zhǔn)確稱取干燥后的硫氰化鉀1.6732g于1000ml容量瓶中，定容，混勻。即得1000ppm硫氰根標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。2.1.6硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)中間液取硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液1mL，置于100mL容量瓶中，加水至刻度。此溶液含硫氰酸10mg/L。2.1.7硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)使用液移取0.1、0.2、0.5、1.0、2.0mL硫氰酸標(biāo)準(zhǔn)中間液，用水定容于10mL容量瓶中，濃度分別為0.1、0.2、0.5、1.0、2.0mg/L。2.2儀器2.2.1離子色譜儀：配備淋洗液發(fā)生器和電導(dǎo)檢測(cè)器；2.2.2離心機(jī)：冷凍離心機(jī)。2.3樣品處理取4mL液體奶樣品，加入5mL乙腈沉淀蛋白，取上清液稀釋10倍，過RP柱（或經(jīng)冷凍離心機(jī)）去除脂肪后上機(jī)。2.4離子色譜參考條件色譜柱：強(qiáng)親水性陰離子交換柱。IonPacAS16，4.0×250mm分析柱；IonPacAG16，4.0×50mm保護(hù)柱；或其他相當(dāng)者。流動(dòng)相：KOH溶液，梯度淋洗。淋洗液由淋洗液在線發(fā)生器在線產(chǎn)生。KOH梯度程序如下：時(shí)間（min）KOH濃度（mmol）045134513.170187018.1452345流速：1.0mL/min；抑制器：ASRS-300型抑制器，4mm；抑制器抑制模式：外接水模式，抑制電流175mA；柱溫：30℃；進(jìn)樣體積：100μL。3結(jié)果計(jì)算X=c*9*10/4…………（1）式中：X——液態(tài)奶中硫氰酸的含量，單位為微克每毫升（μg/mL）；c——由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到試樣溶液中硫氰酸的濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）；9——液態(tài)奶的體積與乙腈體積之和，單位為毫升（mL）；4——液態(tài)奶的體積，單位為毫升（mL）；10——稀釋倍數(shù)；計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。4精密度在重復(fù)性條件下，獲得的硫氰酸的兩次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差值不大于其算術(shù)平均值的5%。

指定檢驗(yàn)方法2.食品中富馬酸二甲酯殘留量的測(cè)定1范圍本方法規(guī)定了食品中富馬酸二甲酯殘留量的GC測(cè)定方法。本方法適用于糧食、糕點(diǎn)、水果等食品中富馬酸二甲酯殘留量的測(cè)定。本方法的檢測(cè)限（LOD）為：25mg/kg。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法。3原理樣品中富馬酸二甲酯（DMF）經(jīng)提取凈化后，用附氫火焰離子檢測(cè)器的氣相色譜儀進(jìn)行分離測(cè)定，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。4試劑和材料4.1除非另有說明，所有試劑均為分析純，水：GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。4.2氯仿。4.3無水硫酸鈉。4.4中性氧化鋁（層析用60-80目）。4.5標(biāo)準(zhǔn)溶液貯備液：0.1g富馬酸二甲酯（含量99.9%），用少量氯仿溶解，轉(zhuǎn)移到100ml容量瓶中，用氯仿稀釋至刻度，該標(biāo)準(zhǔn)溶液含富馬酸二甲酯1mg/ml。4.6標(biāo)準(zhǔn)溶液使用液：分別吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液5、10、15、20、25、30ml于100ml容量瓶中，用氯仿稀釋至刻度，富馬酸二甲酯濃度分別為50、100、150、200、250、300ug/ml。5儀器與設(shè)備5.1氣相色譜儀，附氫火焰離子檢測(cè)器。5.2勻漿機(jī)。5.3粉碎機(jī)。6分析步驟6.1樣品制備。6.1.1糧食、糕點(diǎn)、及含水分少低脂類的固體食品。稱取5.0g或10.0g粉碎樣品，置于250ml具塞三角燒瓶中，加30ml氯仿，振搖30min，用定性濾紙過濾，取10ml濾液，吹入氮?dú)馐節(jié)饪s至1ml,備用。6.1.2含脂肪較多的樣品稱取粉碎樣品10.0g，加中性氧化鋁5－10g（視脂肪多少而定），以下按6.1.1"加30ml氯仿…"起，依法操作。6.1.3水果類將水果去皮，切成碎片，加等量蒸餾水于勻漿機(jī)中勻漿后，稱取20.0g勻漿液（相當(dāng)于10g樣品），加氯仿30ml，振搖30min，用定性濾紙過濾于125ml分液漏斗中，待分層后，用無水硫酸鈉過濾，取濾液10ml，吹入氮?dú)鉂饪s至1ml，待測(cè)。6.2測(cè)定6.2.1色譜參考條件a）色譜柱：玻璃柱（內(nèi)徑3mm，長(zhǎng)2m），內(nèi)裝涂以2％OV-101和6％OV-210混合固定液的60－80目ChromosorbW.AWDMCS(HP);b）氣流速度：氮?dú)?0ml/min；空氣500ml/min;氫氣35ml/min；。c）溫度：氣化室及檢測(cè)器200℃,柱溫155℃d)進(jìn)樣量：1μL。6.3.2測(cè)定注入1uL標(biāo)準(zhǔn)系列中各濃度標(biāo)準(zhǔn)使用液于氣相色譜儀中，測(cè)得不同濃度富馬酸二甲酯的峰高，以濃度為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的峰高值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。同時(shí)注射一定體積樣品溶液，測(cè)得峰高與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量。6.2.3陽性樣品的確證按照上述條件測(cè)定試樣和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，如果試樣中的質(zhì)量色譜峰保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液一致（變化范圍在±2.5%之內(nèi)）條件許可可以通過GC—MS定性6.2.4空白實(shí)驗(yàn)除不稱取樣品外，均按上述測(cè)定條件和步驟進(jìn)行。6.2.5允許差在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的20%。7.結(jié)果計(jì)算樣品中富馬酸二甲酯殘留量按照下式計(jì)算：X：樣品中富馬酸二甲酯殘留量，mg/kgA：測(cè)定樣品液中富馬酸二甲酯含量，ug/mlV1：濃縮用樣品提取液體積，mlV2：樣品氯仿提取液總體積，mlV3：樣品濃縮后的體積，mlV4：標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣體積，ulV5：樣品溶液進(jìn)樣體積，ulm：樣品重量，g8.相關(guān)技術(shù)參數(shù)方法最低檢出限：25mg/kg?；厥章试?8.9％～94.2%范圍內(nèi)，其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在4.32％～9.07％的范圍內(nèi)。

指定檢驗(yàn)方法3-1.辣椒粉中堿性橙、堿性玫瑰精、酸性橙Ⅱ及酸性黃的測(cè)定——液相色譜1原理試樣中的目標(biāo)化合物用乙腈-水（7－3）提取，用高效液相色譜C18柱分離，紫外檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法定量。2實(shí)驗(yàn)部分2.1儀器與試劑高效液相色譜儀，配備有Waters-Allains2695泵控及自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)，以及Waters-2996二極管陣列檢測(cè)器；離心機(jī)；超聲震蕩器。甲醇（色譜純，迪馬公司）乙腈（色譜純，迪馬公司）試驗(yàn)用水均為超純水乙酸銨（分析純）無水乙酸（分析純）標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的配制：準(zhǔn)確稱取0.0100g酸性黃、酸性橙Ⅱ、堿性橙、堿性玫瑰精標(biāo)準(zhǔn)品于10mL棕色容量瓶中，用甲醇醇溶解并定容至體積。標(biāo)準(zhǔn)使用液：分別吸取1.0mL酸性黃、酸性橙Ⅱ、堿性橙、堿性玫瑰精的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液到10mL容量瓶中用水定容至刻度為中間使用液，再分別取0.1、0.5、1.0、2.0、5.0mL中間使用液到1mL容量瓶中用水定容至刻度，四種組分的標(biāo)準(zhǔn)系列為：1、5、10、20、50μg/mL.提取液：乙腈/水=7/32.2液相色譜參考條件色譜柱：InertsilODS-34.6×250mm，5μm；流動(dòng)相：A:乙腈；B：10mM乙酸銨水溶液（乙酸0.12％）梯度洗脫：AB0min：307014min：821815min821816min3070波長(zhǎng)：酸性黃、酸性橙Ⅱ、堿性橙450nm；堿性玫瑰精550nm流速：1.0mL/min；柱溫：35℃；進(jìn)樣體積：20μ2.3樣品處理準(zhǔn)確稱取2～5g樣品于50mL塑料離心管中，加入10mL提取液，超聲提取20min后，以1000轉(zhuǎn)/h離心10min，取20μL液相色譜測(cè)定。3結(jié)果計(jì)算分別取標(biāo)準(zhǔn)和樣品各20μL進(jìn)樣，HPLC測(cè)定，外標(biāo)法定量。C：樣品中待測(cè)組分的含量，μg/g；c：樣品中待測(cè)組分的測(cè)定濃度，μg/mL；W：樣品重量，g。

指定檢驗(yàn)方法3-2.辣椒粉中堿性橙、堿性玫瑰精、酸性橙Ⅱ及酸性黃的測(cè)定——液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法1原理試樣中的目標(biāo)化合物用甲醇-乙酸銨溶液提取，經(jīng)弱陰離子交換固相萃取柱凈化后，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定，基質(zhì)加標(biāo)工作曲線外標(biāo)法定量。2試劑與材料除另有規(guī)定外，所有試劑均為分析純，實(shí)驗(yàn)用水為超純水。2.1甲醇：液相色譜純2.2乙酸銨2.3甲酸2.4氨水2.5提取溶液：稱取3.9克乙酸銨用水溶解，加入10.0mL甲酸，用水定容到500mL后，用甲醇定容到1000mL2.6固相萃取柱平衡溶液：稱取3.9克乙酸銨用水溶解，加10.0mL甲酸，用水定容到500mL。2.7淋洗溶液：稱取3.9克乙酸銨用水溶解，加10.0mL甲酸和25.0mL甲醇，用水定容到500mL2.8洗脫溶液：取5mL氨水用甲醇定容至100mL。2.9樣品稀釋液：稱取0.39克乙酸銨用水溶解，加0.50mL甲酸，用水定容到250mL后，用水定容到500mL2.10流動(dòng)相A：稱取0.39克乙酸銨用水溶解，加0.50mL甲酸，用水定容到500mL2.11流動(dòng)相B：乙腈，液相色譜純。2.12弱陰離子交換固相萃取柱：WAX，60mg/3mL，使用前依次用3mL甲醇、3mL水以及3mL固相萃取柱平衡溶液（2.5）活化。2.13標(biāo)準(zhǔn)品：堿性橙、堿性玫瑰精、酸性橙Ⅱ和酸性黃。2.14標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1.0mg/mL）：準(zhǔn)確稱取0.0100克堿性橙、玫瑰精、酸性橙Ⅱ和酸性黃標(biāo)準(zhǔn)品，用50%甲醇水溶液定容至10.0mL2.15標(biāo)準(zhǔn)系列：配制堿性橙、玫瑰精、酸性橙Ⅱ和酸性黃混合標(biāo)準(zhǔn)系列，堿性橙、酸性橙Ⅱ和酸性黃濃度為：0.4、0.8、2.0、3.2、4.0μg/mL；玫瑰精標(biāo)濃度為：10.0、20.0、50.0、80.0、100.0ng/mL。3儀器和設(shè)備3.1液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧（ESI）離子源。3.2離心機(jī)。3.3超聲波水浴。3.4固相萃取裝置。3.5氮吹儀。4樣品及基質(zhì)加標(biāo)工作曲線的制備4.1樣品的制備a）提取稱取1.0克試樣于50mL離心管中，加入10.0mL提取溶液，超聲提取30分鐘，10000r/min離心10分鐘，上清液轉(zhuǎn)移至另一50mL離心管中；殘?jiān)屑尤?0.0mLb）凈化取5.0mL樣品提取液，用固相萃取柱平衡溶液（2.5）稀釋定容至50.0mL，過已活化好的弱陰離子固相萃取柱，用2mL淋洗液、2mL水淋洗，5mL洗脫液洗脫，收集洗脫液，用氮?dú)獯抵两?，用樣品稀釋液定容?.0mL，過0.22μm濾膜后液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定。4.2基質(zhì)加標(biāo)工作曲線的制備稱取1.0克空白樣品基質(zhì)于50mL離心管中，稱取6份，分別加入標(biāo)準(zhǔn)系列溶液（2.15）100μL，按4.1進(jìn)行操作，制備基質(zhì)加標(biāo)工作曲線，堿性橙、酸性橙Ⅱ和酸性黃濃度為：10.0、20.0、50.0、80.0、100.0ng/mL；玫瑰精濃度為：0.25、0.5、1.25、2.0、2.5ng/mL。5測(cè)定5.1液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜參考條件色譜柱：BHT1.7μm×100mm流動(dòng)相：A:含0.1%甲酸的5mmol/L乙酸銨水溶液；B:乙腈。梯度洗脫TimeFlow（mL/min）A（%）B（%）00.3901050.3109060.310906.50.39010100.39010進(jìn)樣量：5μL。柱溫：40℃離子源：堿性橙、堿性玫瑰精，電噴霧ESI，正離子；酸性橙Ⅱ、酸性黃，電噴霧ESI，負(fù)離子。掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)MRM。監(jiān)測(cè)離子對(duì)：組分錐孔電壓（v）碰撞能量（ev）母離子（m/z）子離子（m/z）堿性橙3820212.876.5、120.6堿性玫瑰精7040433.2399.2、355.1酸性橙Ⅱ4040327.0155.9、79.8酸性黃5030352155.9、79.75.2定性測(cè)定各檢測(cè)目標(biāo)化合物以保留時(shí)間和兩對(duì)離子的（特征離子對(duì)/定量離子對(duì)）所對(duì)應(yīng)的LC-MS/MS色譜峰面積相對(duì)豐度進(jìn)行定性。要求被測(cè)試樣中目標(biāo)化合物的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)溶液中目標(biāo)化合物的保留時(shí)間一致（一致的條件是偏差小于20%），同時(shí)要求被測(cè)試樣中目標(biāo)化合物的兩對(duì)離子對(duì)應(yīng)LC-MS/MS色譜峰面積比與標(biāo)準(zhǔn)溶液中目標(biāo)化合物的面積比一致，相對(duì)豐度>50%、20-50%、10-20%、<10%時(shí)，容許偏差分別為20%、25%、30%和50%。5.3定量測(cè)定按照5.1液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜條件測(cè)定樣品及基質(zhì)加標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對(duì)定量離子峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，外標(biāo)法定量。6結(jié)果計(jì)算式中：C——樣品中目標(biāo)化合物含量，μg/kg;c——測(cè)定濃度，ng/mL；v——定容體積，mL；W——稱樣量，g。

指定檢驗(yàn)方法4.乳及乳制品中舒巴坦敏感β-內(nèi)酰胺酶類藥物檢驗(yàn)方法杯碟法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了乳及乳制品中舒巴坦敏感β-內(nèi)酰胺酶類藥物的檢驗(yàn)方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于乳及乳制品中舒巴坦敏感β-內(nèi)酰胺酶類物質(zhì)的檢驗(yàn)。本方法的檢出限為4U/mL。2原理該方法采用對(duì)青霉素類藥物絕對(duì)敏感的標(biāo)準(zhǔn)菌株，利用舒巴坦特異性抑制β-內(nèi)酰胺酶的活性，并加入青霉素作為對(duì)照，通過比對(duì)加入β-內(nèi)酰胺酶抑制劑與未加入抑制劑的樣品所產(chǎn)生的抑制圈的大小來間接測(cè)定樣品是否含有β-內(nèi)酰胺酶類藥物。3設(shè)備和材料除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外，其他設(shè)備和材料如下：3.1抑菌圈測(cè)量?jī)x或測(cè)量尺。3.2恒溫培養(yǎng)箱：36℃±13.3高壓滅菌器。3.4無菌培養(yǎng)皿:內(nèi)徑90mm，底部平整光滑的玻璃皿，具陶瓦蓋。3.5無菌牛津杯：外徑(8.0士0.1)mm，內(nèi)徑(6.0士0.1)mm，高度(10.0士0.1)mm。3.6麥?zhǔn)媳葷醿x或標(biāo)準(zhǔn)比濁管。3.7pH計(jì)。3.8無菌吸管：1mL（0.01mL刻度值），10mL（0.1mL刻度值）。3.9加樣器:5μL～20μL，20μL-200μL及配套吸頭。4培養(yǎng)基和試劑除另有規(guī)定外，所用試劑均為分析純，水為GB/T6682中規(guī)定的三級(jí)水。4.1試驗(yàn)菌種：藤黃微球菌(Micrococcusluteus)CMCC(B)28001，傳代次數(shù)不得超過14次。4.2磷酸鹽緩沖溶液：按附錄A中A.1規(guī)定。4.3生理鹽水（8.5g/L）：按附錄A中A.2規(guī)定。4.4青霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液：按附錄A中A.3規(guī)定。4.5β-內(nèi)酰胺酶標(biāo)準(zhǔn)溶液：按附錄A中A.4規(guī)定。4.6舒巴坦標(biāo)準(zhǔn)溶液按附錄A中A.5規(guī)定。。4.7營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：按附錄A中A.6規(guī)定。4.8抗生素檢測(cè)用培養(yǎng)基Ⅱ：按附錄A中A.7規(guī)定。5.操作步驟5.1菌懸液的制備將藤黃微球菌接種于營養(yǎng)瓊脂斜面上，經(jīng)36士1℃培養(yǎng)18h-24h，用生理鹽水洗下菌苔即為菌懸液，測(cè)定菌懸液濃度，終濃度應(yīng)大于1×1010CFU/mL，5.2樣品的制備將待檢樣品充分混勻，取1mL待檢樣品于1.5mL離心管中共4管，分別標(biāo)為：A、B、C、D，每個(gè)樣品做三個(gè)平行，共12管，同時(shí)每次檢驗(yàn)應(yīng)取純水1mL加入到1.5mL離心管中作為對(duì)照。如樣品為乳粉，則將乳粉按1:10的比例稀釋。如樣品為酸性乳制品，應(yīng)調(diào)節(jié)pH值至6-7。5.3檢驗(yàn)用平板的制備取90mm滅菌玻璃培養(yǎng)皿，底層加10mL滅菌的抗生素檢測(cè)用培養(yǎng)基Ⅱ,凝固后上層加入5mL含有濃度為1×108CFU/mL藤黃微球菌的抗生素檢測(cè)用培養(yǎng)基Ⅱ,凝固后備用。5.4樣品的測(cè)定按照下列順序分別將青霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液、β-內(nèi)酰胺酶標(biāo)準(zhǔn)溶液、舒巴坦標(biāo)準(zhǔn)溶液加入到樣品及純水中：A青霉素5μL。B舒巴坦25μL、青霉素5μL。Cβ-內(nèi)酰胺酶25