雙歧桿菌和嗜酸乳桿菌二聯(lián)活菌微膠囊的研制(全文)

--PAGE9-雙歧桿菌和嗜酸乳桿菌二聯(lián)活菌微膠囊的研制(全文)AXX：1672979X(2021)07001106將固體、液體甚至是氣體的微小顆粒包裹在直徑從小于1m至5000的半透性或密封囊膜的微型膠囊內(nèi)存活率和常溫下的保存期。材料菌種(Bifitdobacteriumlongum，簡稱BLCICC6068)(Lactobacillusacidophils簡稱LACICC6005)ZG工業(yè)微生物菌種保藏中心。培養(yǎng)基長雙歧桿菌大豆蛋白胨0.5g胰蛋白胨0.5g酵母粉g葡萄糖1.0g低聚木糖0.5g無機(jī)鹽溶液4mL蒸餾水100mL，鹽酸半胱氨酸0.05g(培養(yǎng)基熱沸后加入調(diào)pH7.0，121℃滅菌15min。固體斜面加瓊脂1.5～2.0g。上述無機(jī)鹽溶液：CaCl20.2g，MgSO4 7H2O0.48g ，K2HPO41.0g ，KH2PO41.0g，CaCl2和MgSO4300mL500mL，邊攪拌邊緩慢加200mL混勻。嗜酸乳桿菌：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g，檸檬酸氫二銨2g，葡萄糖20g，吐溫801mL，CH3COONa3H2O5g，K2HPO4 3H2O2g，MgSO4 7H2O0.58gMnSO4 H2O0.25g1000mLpH6.215min15～18g試劑海藻糖：純度>99(HA)Mr=2.020210516(儀器YQXII冷凍Labconco公司)HITACHI恒公司)。方法凍干菌粉的制備374℃、5000r/min離心10min收集菌體，濕菌體與保護(hù)劑和雙歧桿菌增生促進(jìn)劑低聚木糖溶液混和均勻，得菌懸液，2和20101011131菌落計(jì)數(shù)樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋后涂布于固體培養(yǎng)基上，每個(gè)稀釋度做4個(gè)重復(fù)，37℃厭氧培養(yǎng)20h后菌落計(jì)數(shù)。囊材液的配制95備用?？諝鈶腋》ㄖ苽湮⒛z囊人工胃液和人工腸液的配制人工胃液：取稀鹽酸16.4mL，加水約800mL及胃蛋白酶10g，攪勻后加水定容至1000mL即得。6.8g500mL。用pH至10g1000mL即得。無菌微孔濾膜過濾除菌。微膠囊在人工胃液中的溶出測(cè)定方法1g50mL人工胃液(pH1.2再置于150r/min0，20600nm的工胃液中微膠囊的溶出情況。微膠囊在人工腸液中的崩解測(cè)定方法1g50mL人工腸液(pH6.8再置于150r/min0，10600nm的透光率。微膠囊包衣處方的設(shè)計(jì)以微囊增重、增塑劑鄰苯二甲酸二乙酯DEP)2h1。1微膠囊包囊產(chǎn)率和包囊效率的測(cè)定產(chǎn)品中活菌數(shù)的測(cè)定：取微膠囊1g左右，置于50mL人工2.745min加入的活菌數(shù)測(cè)定：根據(jù)微膠囊較菌粉增重計(jì)算，取與1g微膠囊相當(dāng)?shù)木郏m當(dāng)稀釋后活菌計(jì)數(shù)。微膠囊中的活菌數(shù)=產(chǎn)品中的活菌數(shù)－微膠囊表面的活菌數(shù)1g50mL、pH5.02.645min稀釋后活菌計(jì)數(shù)。微膠囊穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)60～65373粉作對(duì)比實(shí)驗(yàn)。結(jié)果與分析微膠囊化操作條件的確定速度、空氣流量、進(jìn)風(fēng)溫度和物料處理量等。盡量加大噴液速度，以縮短包衣時(shí)間。粘結(jié)。空氣流量的大小決定物料通過包衣區(qū)的速度和物料的流化綜合考慮上述因素，經(jīng)過反復(fù)實(shí)驗(yàn)，確定流化床微膠囊化操0.2MPa10～12m3/min；流化床進(jìn)氣溫度35～451mL/min5～10g囊液濃度的確定956％，8％，10％36％囊液黏度小，噴射時(shí)呈霧區(qū)高，單位體積囊材少，溶劑蒸發(fā)較慢；1088％聚丙烯酸樹脂Ⅱ。微膠囊包衣處方優(yōu)化結(jié)果2、3正交試驗(yàn)3個(gè)因素對(duì)微膠囊在人工腸液中崩解性的影響順>DEP用量，最佳組合為：A1B1C3或A2B1C3擇A2B1C320102L9(33)正交試驗(yàn)方案與結(jié)果(n=5)3微膠囊在人工胃液中的耐酸性2h22h44(n=5)2h54.0840min1。40min2h人工胃液中基本不發(fā)生泄漏，耐酸性良好。1(n=5)5。微膠囊在人工腸液中逐漸溶解，處理至30min時(shí)，透光率降至最低值，且人工腸液中未見固體顆粒，30min后透光率和釋放率基本穩(wěn)定，表明微膠囊已完全崩解，見圖2。由此推斷，該法制備的微膠囊具有良好的腸溶性。微膠囊包囊產(chǎn)率和包囊效率測(cè)得微膠囊產(chǎn)品中的活菌數(shù)為9.56×109CFU/g，微膠囊表--面的活菌數(shù)為，則微膠囊中的活菌數(shù)=9.561091.2201g微囊含菌粉0.83g1010CFU/g微囊。微膠囊貯存穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)6。3760～653310室溫下貯存1能夠較好地解決微生態(tài)活菌制劑貯存穩(wěn)定性問題。微膠囊形態(tài)與大小3400～5004結(jié)論空氣懸浮法制備長雙歧桿菌和嗜酸乳桿菌二聯(lián)活菌微膠囊的0.2MPa10～12m3/h流化床進(jìn)氣溫度：35～451mL/min；物料處理5～10g810DEP