免疫學(xué)性能驗證課件

免疫檢驗的質(zhì)量控制及性能驗證2015.08.12質(zhì)量控制報告單申請樣本采集/接收樣本檢測檢測結(jié)果的獲得結(jié)果分析及報告發(fā)放影響檢驗結(jié)果的要素人員設(shè)施和環(huán)境條件實驗室設(shè)備溫濕度控制培訓(xùn)、比對設(shè)備操作、校準(zhǔn)內(nèi)部質(zhì)量控制操作規(guī)程試劑性能驗證SOP文件室內(nèi)質(zhì)控程序EP5A2EP15A2EP6AEP17AEP12ClinicalLaboratoryandStandardsInstitute(CLSI)涉及免疫評價方法醫(yī)學(xué)實驗室精密度和準(zhǔn)確度的確認(rèn)定量測定方法精密度方法定量測定方法線性的評價檢出限與定量限的評價定性檢測評價臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會EP17A空白限、檢測低限、定量限的驗證Limitofblank(LOB)空白限Limitofdetection(LOD)檢出限Limitofquantitation(LOQ)定量限LOB<LOD≤LOQ是一定概率下(α)測量空白時可能得到的最高檢測結(jié)果，低濃度LOD的樣本在一定概率下(β)能得到的最低測量結(jié)果。誤判概率α、β：聲稱在給定物質(zhì)中存在某成分的誤判概率為α?xí)r（Ⅰ類錯誤，假陽性），聲稱不存在該成分的誤判概率為β（Ⅱ類錯誤，假陰性）。α、β默認(rèn)值為0.05。空白限（LOB）α=假陽性可能β=假陰性可能相對頻率0LoBLoDLoQ總誤差報告αβ不能檢出能檢出能檢出可檢測<LoB<LoD<LoQ空白限（LOB）測定空白樣本20次測定結(jié)果與試劑廠家給定的LOB比較，不超過3個結(jié)果大于LOB驗證通過。驗證空白限（LOB）定量檢出限（LOQ）選擇濃度≥LOD的樣本，測定25次（多樣本，多天，重復(fù)完成），每個樣本測定結(jié)果與參考值的偏差和TEa（實驗室總誤差）相比較。計算小于TEa所占比例是否符合（β=0.05）的要求。符合要求，驗證通過；不符合，聯(lián)系廠家。定性檢出限（LOQ）系列濃度樣本制備（有證，康徹斯坦標(biāo)準(zhǔn)品稀釋）標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作臨界值附近濃度樣本制備樣本的檢測：對臨界值附近濃度樣本進行連續(xù)20次測定當(dāng)實驗結(jié)果陽性率≥95%的最低濃度確認(rèn)為檢出限，表明被測物在該濃度及以上樣本，實驗方法將給出穩(wěn)定的結(jié)果。定性精密度（只報告陰性、陽性、無反應(yīng)性）不宜用陰性或強陽性標(biāo)本衡量定性試驗的重復(fù)性選擇分析物濃度應(yīng)接近醫(yī)學(xué)決定水平（臨界值）評價指標(biāo)：臨界值驗證以COI(cut-off)或以s/co值報告結(jié)果的精密度評價。定性-重復(fù)性（精密度）-EP12A臨界值：作為判斷特定疾病、狀態(tài)或被測量存在或不存在的界限的量值。也就是指試驗結(jié)果處于（陰性、陽性）分界點時的樣品中分析物的濃度。對純粹的定性檢測來說，臨界值就是（唯一）醫(yī)學(xué)決定水平。臨界值(cut-offvalue)臨界點:對陽性樣本進行系列稀釋，然后對系列稀釋樣本進行重復(fù)檢測（20-40次），能獲得50%陽性和50%陰性結(jié)果的濃度。20次（+20%與-20%濃度各10次），30%-70%40次（+20%與-20%濃度各20次）,35%-65%臨界點接近臨界值濃度的分析物（臨界值+20%與-20%）對接近臨界值濃度分析物的重復(fù)性檢測（各20次）10天（每日測定2次）或20天（每日單次測定）陰性、陽性質(zhì)控監(jiān)測數(shù)據(jù)是否有效（10天，失效≤1次；20天失控≤2次），失控后該該批數(shù)據(jù)舍棄，在當(dāng)日或其他補充新一批檢測。計算陰陽性率數(shù)據(jù)分析（C50或臨界值95%區(qū)間是否正確）定性-重復(fù)性（精密度）-EP12A臨界值+20%與臨界值-20%濃度分別進行20次檢測。+20%濃度的樣本產(chǎn)生的陽性率≥95%-20%濃度的樣本產(chǎn)生的陰性率≥95%。意味著與臨界值相差20%以上的樣本就可預(yù)期用這種方法得到一致的結(jié)果。臨界值的95%區(qū)間驗證定性：以臨床診斷、金標(biāo)準(zhǔn)方法比較、血清盤檢測或參加衛(wèi)計委能力驗證的來評價。評價指標(biāo)：符合率定性：符合率≥80%正確度證實分析測量范圍有效時：需5-7個樣品，每個樣品重復(fù)測定2次。驗證聲明范圍或改良方法：需7-9個樣品，每個樣品重復(fù)測定2-3次。樣品：可比預(yù)期的分析測量范圍寬20-30%，以期檢測到“拐點”。線性范圍評價可用計算濃度或標(biāo)定濃度作為X值，儀器測量結(jié)果或儀器輸出值（均值）作為Y值。也可用相對濃度作為X值，如果濃度間為等間隔，可用樣品編號（如1、2、3、4、5等）代表X值。如所制備的樣品系列非等間隔，其濃度間的關(guān)系應(yīng)明確，在測定時可以這些間隔間的相對比值做為X值，此時的樣品編號可以不為整數(shù)。曲線制作做一次、二次和三次多項式回歸分析。SPS統(tǒng)計軟件+統(tǒng)計學(xué)知識確定線性范圍界別回歸方