植物組織培養(yǎng) 網(wǎng)通線路 電信線路課件

????1細胞工程（細胞克隆技術）

第一節(jié)

植物細胞工程北京四中

畢詩秀細胞工程（細胞克隆技術）

第一節(jié)植物細胞工程北京四中2一、克隆（clone）和細胞工程的概念㈠克隆即無性繁殖系（名詞）指不經(jīng)過兩個分子、兩個細胞或兩個個體的結(jié)合，只由一個模板分子、母細胞或母體直接形成的新一代分子、細胞或個體克隆作動詞用，指獲得無性繁殖系的過程一、克?。╟lone）和細胞工程的概念㈠克隆即無性繁殖系（名31.分子水平的克隆:DNA很多堿基序列相同的DNA復制1.分子水平的克隆:DNA很多堿基序列相同的DNA復制42.細胞水平的克隆3.個體水平的克隆細胞很多遺傳物質(zhì)相同的細胞有絲分裂遺傳背景相同的新個體組織、器官2.細胞水平的克隆3.個體水平的克隆細胞很多遺傳物質(zhì)相同的細5㈡細胞工程的概念

應用細胞生物學和分子生物學的原理和方法，通過細胞水平或細胞器水平上的操作,按照人們的意愿來改變細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細胞產(chǎn)品的一門綜合科學技術

分為植物細胞工程和動物細胞工程㈡細胞工程的概念應用細胞生物學和分子生物學的原理和方法，通6二、植物細胞工程㈠植物細胞工程的發(fā)展簡史1.1902年，德國科學家哈伯蘭特（G.Haberlandt）發(fā)表《植物細胞培養(yǎng)》，認為在某種情況下，采用培養(yǎng)基培養(yǎng)植物細胞，用新的觀點來實驗研究各種重要問題是可能的；并提出細胞全能性的設想，即：單細胞經(jīng)過人工培養(yǎng)，通過細胞分裂而恢復成完整植株并具有原植物的全部遺傳性。他也被后人稱為“組織培養(yǎng)之父”。二、植物細胞工程㈠植物細胞工程的發(fā)展簡史1.1902年，德國72.1904年：德國植物學胚胎學家E.Hanning用蘿卜、辣根的胚培養(yǎng)，提前長成小植株，首次獲得胚培養(yǎng)成功。3.1922年：W.Kott用稀釋的Knop液加入有機物培養(yǎng)豌豆、玉米離體根尖獲得成功。4.1925年----1929年，培養(yǎng)亞麻種間雜種離體胚，證明遠源雜交可行性。5.1937年：White首先建立了植物組織培養(yǎng)的綜合培養(yǎng)基，其成分均為已知化合物，并發(fā)現(xiàn)B族維生素和生長素對離體根生長的重要作用。后稱為White培養(yǎng)基。2.1904年：德國植物學胚胎學家E.Hanning用蘿卜86.1941年，Overbeck等首次將椰子汁加入到培養(yǎng)基中，發(fā)現(xiàn)其可以刺激曼陀羅胚的發(fā)育，當時雖然不知道椰子汁中含有細胞分裂素，但其廣泛應用于植物組織培養(yǎng)過程中。7.1943年：White發(fā)表《植物組織培養(yǎng)手冊》，這是第一部有關植物組織培養(yǎng)技術的專著，使植物組織培養(yǎng)成為一門新興學科。8.1948年：Skoog和崔澄在煙草切段和髓的培養(yǎng)研究中發(fā)現(xiàn)腺嘌呤與生長素的比例是控制芽和根分化的決定因素之一。9.1952年：崔澄發(fā)表《化學物質(zhì)對植物器官形成的影響》6.1941年，Overbeck等首次將椰子汁加入到培養(yǎng)基中910.1958年：F.C.Steward和J.Reinert以胡蘿卜直根的單細胞懸浮培養(yǎng)誘導分化經(jīng)胚狀體（體細胞胚）發(fā)育成完整的小植株，使細胞全能性首次真正得到科學驗證。11.1960年，用真菌纖維素酶分離原生質(zhì)體成功;1971年，煙草原生質(zhì)再生植株成功12.1972年,煙草原生質(zhì)體融合獲得煙草體細胞雜種。10.1958年：F.C.Steward和J.Reinert10外植體—用于離體培養(yǎng)的植物組織、細胞或器官1.植物組織培養(yǎng)的過程非洲紫羅蘭的葉片流水清洗→消毒㈡植物組織培養(yǎng)（planttissueculture）外植體—用于離體培養(yǎng)的植物組織、細胞或器官1.植物組織培養(yǎng)的11外植體接種于培養(yǎng)基上超凈臺無菌紙上切割外植體用酒精擦拭雙手加蓋封口膜、培養(yǎng)外植體接種于培養(yǎng)基上超凈臺無菌紙上切割外植體用酒精擦拭雙手加12植物組織培養(yǎng)網(wǎng)通線路電信線路13愈傷組織叢苗（叢芽）移栽的小苗開花成株瓶中開花成株愈傷組織：由相對無分化的活薄壁細胞團組成的新生組織細胞小、細胞核大、細胞質(zhì)濃、細胞壁薄—胚性細胞愈傷組織叢苗（叢芽）移栽的小苗開花成株瓶中開花成株愈傷組織：14外植體愈傷組織有絲分裂脫（去）分化再分化植株外植體愈傷組織有絲分裂脫（去）分化再分化植株152.植物組織培養(yǎng)的條件⑴離體的植物器官、組織或細胞⑵無菌條件

消毒（殺死細菌、放線菌、霉菌等微生物營養(yǎng)體）滅菌（殺死微生物營養(yǎng)體、繁殖體孢子、休眠體芽孢）2.植物組織培養(yǎng)的條件⑴離體的植物器官、組織或細胞16植物組織培養(yǎng)網(wǎng)通線路電信線路17植物組織培養(yǎng)網(wǎng)通線路電信線路18⑷適宜濃度和一定比例的激素誘導

細胞分裂素和生長素（或類似物）⑸適宜的溫度、pH、光照等⑷適宜濃度和一定比例的激素誘導⑸適宜的溫度、pH、光照等193.植物組織培養(yǎng)的概念植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官、組織、細胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株3.植物組織培養(yǎng)的概念植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制的條件20????21細胞工程（細胞克隆技術）

第一節(jié)

植物細胞工程北京四中

畢詩秀細胞工程（細胞克隆技術）

第一節(jié)植物細胞工程北京四中22一、克?。╟lone）和細胞工程的概念㈠克隆即無性繁殖系（名詞）指不經(jīng)過兩個分子、兩個細胞或兩個個體的結(jié)合，只由一個模板分子、母細胞或母體直接形成的新一代分子、細胞或個體克隆作動詞用，指獲得無性繁殖系的過程一、克?。╟lone）和細胞工程的概念㈠克隆即無性繁殖系（名231.分子水平的克隆:DNA很多堿基序列相同的DNA復制1.分子水平的克隆:DNA很多堿基序列相同的DNA復制242.細胞水平的克隆3.個體水平的克隆細胞很多遺傳物質(zhì)相同的細胞有絲分裂遺傳背景相同的新個體組織、器官2.細胞水平的克隆3.個體水平的克隆細胞很多遺傳物質(zhì)相同的細25㈡細胞工程的概念

應用細胞生物學和分子生物學的原理和方法，通過細胞水平或細胞器水平上的操作,按照人們的意愿來改變細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細胞產(chǎn)品的一門綜合科學技術

分為植物細胞工程和動物細胞工程㈡細胞工程的概念應用細胞生物學和分子生物學的原理和方法，通26二、植物細胞工程㈠植物細胞工程的發(fā)展簡史1.1902年，德國科學家哈伯蘭特（G.Haberlandt）發(fā)表《植物細胞培養(yǎng)》，認為在某種情況下，采用培養(yǎng)基培養(yǎng)植物細胞，用新的觀點來實驗研究各種重要問題是可能的；并提出細胞全能性的設想，即：單細胞經(jīng)過人工培養(yǎng)，通過細胞分裂而恢復成完整植株并具有原植物的全部遺傳性。他也被后人稱為“組織培養(yǎng)之父”。二、植物細胞工程㈠植物細胞工程的發(fā)展簡史1.1902年，德國272.1904年：德國植物學胚胎學家E.Hanning用蘿卜、辣根的胚培養(yǎng)，提前長成小植株，首次獲得胚培養(yǎng)成功。3.1922年：W.Kott用稀釋的Knop液加入有機物培養(yǎng)豌豆、玉米離體根尖獲得成功。4.1925年----1929年，培養(yǎng)亞麻種間雜種離體胚，證明遠源雜交可行性。5.1937年：White首先建立了植物組織培養(yǎng)的綜合培養(yǎng)基，其成分均為已知化合物，并發(fā)現(xiàn)B族維生素和生長素對離體根生長的重要作用。后稱為White培養(yǎng)基。2.1904年：德國植物學胚胎學家E.Hanning用蘿卜286.1941年，Overbeck等首次將椰子汁加入到培養(yǎng)基中，發(fā)現(xiàn)其可以刺激曼陀羅胚的發(fā)育，當時雖然不知道椰子汁中含有細胞分裂素，但其廣泛應用于植物組織培養(yǎng)過程中。7.1943年：White發(fā)表《植物組織培養(yǎng)手冊》，這是第一部有關植物組織培養(yǎng)技術的專著，使植物組織培養(yǎng)成為一門新興學科。8.1948年：Skoog和崔澄在煙草切段和髓的培養(yǎng)研究中發(fā)現(xiàn)腺嘌呤與生長素的比例是控制芽和根分化的決定因素之一。9.1952年：崔澄發(fā)表《化學物質(zhì)對植物器官形成的影響》6.1941年，Overbeck等首次將椰子汁加入到培養(yǎng)基中2910.1958年：F.C.Steward和J.Reinert以胡蘿卜直根的單細胞懸浮培養(yǎng)誘導分化經(jīng)胚狀體（體細胞胚）發(fā)育成完整的小植株，使細胞全能性首次真正得到科學驗證。11.1960年，用真菌纖維素酶分離原生質(zhì)體成功;1971年，煙草原生質(zhì)再生植株成功12.1972年,煙草原生質(zhì)體融合獲得煙草體細胞雜種。10.1958年：F.C.Steward和J.Reinert30外植體—用于離體培養(yǎng)的植物組織、細胞或器官1.植物組織培養(yǎng)的過程非洲紫羅蘭的葉片流水清洗→消毒㈡植物組織培養(yǎng)（planttissueculture）外植體—用于離體培養(yǎng)的植物組織、細胞或器官1.植物組織培養(yǎng)的31外植體接種于培養(yǎng)基上超凈臺無菌紙上切割外植體用酒精擦拭雙手加蓋封口膜、培養(yǎng)外植體接種于培養(yǎng)基上超凈臺無菌紙上切割外植體用酒精擦拭雙手加32植物組織培養(yǎng)網(wǎng)通線路電信線路33愈傷組織叢苗（叢芽）移栽的小苗開花成株瓶中開花成株愈傷組織：由相對無分化的活薄壁細胞團組成的新生組織細胞小、細胞核大、細胞質(zhì)濃、細胞壁薄—胚性細胞愈傷組織叢苗（叢芽）移栽的小苗開花成株瓶中開花成株愈傷組織：34外植體愈傷組織有絲分裂脫（去）分化再分化植株外植體愈傷組織有絲分裂脫（去）分化再分化植株352.植物組織培養(yǎng)的條件⑴離體的植物器官、組織或細胞⑵無菌條件

消毒（殺死細菌、放線菌、霉菌等微生物營養(yǎng)體）滅菌（殺死微生物營養(yǎng)體、繁殖體孢子、休眠體芽孢）2.植物組織培養(yǎng)的條件⑴離體的植物器官、組織或細胞36植物組織培養(yǎng)網(wǎng)通線路電信線路37植物組織培養(yǎng)網(wǎng)通線路電信線路38⑷適