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致病菌的檢驗(yàn)程序標(biāo)本直接涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定病原菌抗原檢測(cè)其它檢測(cè)形態(tài)、結(jié)構(gòu)、染色性涂片鏡檢菌落特征生化反應(yīng)藥敏試驗(yàn)血清學(xué)反應(yīng)沉淀反應(yīng)協(xié)同凝集免疫熒光對(duì)流免疫電泳酶免疫測(cè)定免疫印跡細(xì)菌代謝產(chǎn)物(氣相色譜)細(xì)菌核酸(PCR)噬菌體分離細(xì)菌素測(cè)定分子生物學(xué)技術(shù)動(dòng)物試驗(yàn)致病菌的檢驗(yàn)程序標(biāo)本直接涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定病原菌抗原1人體受致病菌感染后,其免疫系統(tǒng)被刺激后發(fā)生免疫應(yīng)答而產(chǎn)生特異性抗體??贵w的量常隨感染過(guò)程而增多,表現(xiàn)為效價(jià)(滴度)的升高。因此,用已知的細(xì)菌或其特異性抗原檢測(cè)患者體液中有無(wú)相應(yīng)特異抗體和其效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化,可作為某些傳染病的輔助診斷。一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serologicaldiagnosis)。血清學(xué)診斷試驗(yàn)最好取患者急性期和恢復(fù)期雙份血清標(biāo)本,當(dāng)后者的抗體效價(jià)比前者升高大于等于4倍時(shí)方有意義。常用方法:直接凝集試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、沉淀試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、ELISA。第二節(jié)血清學(xué)診斷人體受致病菌感染后,其免疫系統(tǒng)被刺激后發(fā)生免疫應(yīng)答而產(chǎn)生特異2第二節(jié)病毒學(xué)診斷

一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)1早期(前驅(qū)期、急性期、發(fā)病前1~2天)2根據(jù)不同病毒感染,采集不同部位標(biāo)本3病毒易被滅活(細(xì)胞內(nèi)寄生,怕熱不怕冷),低溫保存,快速送檢4標(biāo)本無(wú)菌采集與處理(加抗生素,除菌并防止污染)5血清學(xué)實(shí)驗(yàn)檢查抗體(雙分血清)第二節(jié)病毒學(xué)診斷一標(biāo)本的采集與送檢(principl3二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationanddetermination)

(一)病毒的分離方法動(dòng)物接種選擇易感動(dòng)物及接種部位,觀察發(fā)病情況雞胚培養(yǎng)不同病毒選擇不同接種部位(絨毛尿囊膜,尿囊腔,羊膜腔,卵黃囊),分離流感病毒最常用。細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。(3)傳代細(xì)胞—能在體外無(wú)限傳代的細(xì)胞多由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而來(lái)。二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationa4病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中增殖的指標(biāo)細(xì)胞的變化(1)出現(xiàn)細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE):即某些病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖引起的特有的細(xì)胞病變(細(xì)胞變圓、聚集、壞死、脫落等)(2)形成細(xì)胞融合(多巨核細(xì)胞)(3)形成包涵體:某些病毒在細(xì)胞漿或核內(nèi)增殖后形成的嗜酸或嗜堿性的團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。(病毒增殖場(chǎng)所)紅細(xì)胞吸附干擾現(xiàn)象細(xì)胞代謝改變(pH)病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中增殖的指標(biāo)細(xì)胞的變化5正常細(xì)胞病變細(xì)胞正常細(xì)胞病變細(xì)胞6(二)病毒的數(shù)量與感染性測(cè)定(三)新分離病毒的鑒定核酸類型、理化性狀、形態(tài)、血清學(xué)鑒定、基因測(cè)序和生物對(duì)比。(二)病毒的數(shù)量與感染性測(cè)定7一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serologicaldiagnosis)。(3)形成包涵體:某些病毒在細(xì)胞漿或核內(nèi)增殖后形成的嗜酸或嗜堿性的團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。2根據(jù)不同病毒感染,采集不同部位標(biāo)本酶免疫技術(shù)(EIA)等。細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法四、病毒感染的快速診斷(3)形成包涵體:某些病毒在細(xì)胞漿或核內(nèi)增殖后形成的嗜酸或嗜堿性的團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)?;蛑委煟ǚ戳x寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)四、病毒感染的快速診斷基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)聚合酶鏈反應(yīng)(polymerasechainreaction,PCRDNA)光鏡——大病毒和包涵體——抑制病毒基因轉(zhuǎn)錄各種癬癥——外用抗真藥(易復(fù)發(fā))電鏡和免疫電鏡——直接觀察病毒DNA印跡雜交(Southernblot)4標(biāo)本無(wú)菌采集與處理(加抗生素,除菌并防止污染)——抑制病毒基因轉(zhuǎn)錄(2)形成細(xì)胞融合(多巨核細(xì)胞)(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。三、病毒感染的血清學(xué)診斷用已知病毒抗原檢測(cè)病人血清中相應(yīng)抗體以診斷病毒性疾?。ㄖ泻蛯?shí)驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)、血凝抑制實(shí)驗(yàn)、凝膠免疫擴(kuò)散等)一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serolog8

四、病毒感染的快速診斷

(一)

形態(tài)學(xué)

電鏡和免疫電鏡——直接觀察病毒光鏡——大病毒和包涵體四、病毒感染的快速診斷(一)

形態(tài)學(xué)9基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)酶免疫技術(shù)(EIA)等。RNA印跡雜交(northernblot)光鏡——大病毒和包涵體4標(biāo)本無(wú)菌采集與處理(加抗生素,除菌并防止污染)(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。人工被動(dòng)免疫(artificialpasstiveimmunity):注射含有特異性抗體的免疫血清或純化免疫球蛋白,或細(xì)胞因子等免疫制劑,使機(jī)體即刻獲得特異性免疫,因而作用及時(shí)。(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。各種癬癥——外用抗真藥(易復(fù)發(fā))人工被動(dòng)免疫(artificialpasstiveimmunity):注射含有特異性抗體的免疫血清或純化免疫球蛋白,或細(xì)胞因子等免疫制劑,使機(jī)體即刻獲得特異性免疫,因而作用及時(shí)。動(dòng)物接種選擇易感動(dòng)物及接種部位,觀察發(fā)病情況血清學(xué)診斷試驗(yàn)最好取患者急性期和恢復(fù)期雙份血清標(biāo)本,當(dāng)后者的抗體效價(jià)比前者升高大于等于4倍時(shí)方有意義。(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。5血清學(xué)實(shí)驗(yàn)檢查抗體(雙分血清)胎盤球蛋白、丙種球蛋白(3)傳代細(xì)胞—能在體外無(wú)限傳代的細(xì)胞多由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而來(lái)。基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)10病原學(xué)診斷與防治課件11病原學(xué)診斷與防治課件12病原學(xué)診斷與防治課件13病原學(xué)診斷與防治課件14病原學(xué)診斷與防治課件15(二)檢測(cè)病毒蛋白抗原用已知特異性抗體直接檢測(cè)病毒蛋白抗原(簡(jiǎn)便、敏感、特異)常用方法:免疫熒光技術(shù)(IF)

固相放射免疫測(cè)定(SPRIT)

酶免疫技術(shù)(EIA)等。(二)檢測(cè)病毒蛋白抗原16(三)檢測(cè)病毒特異性IgM抗體

檢測(cè)病毒特異性IgM抗體可診斷急性感染或證明病毒復(fù)制。(三)檢測(cè)病毒特異性IgM抗體 檢17(四)檢測(cè)病毒核酸

1核酸雜交

斑點(diǎn)雜交(dothybridization)

原位雜交(insitehybridization)

DNA印跡雜交(Southernblot)

RNA印跡雜交(northernblot)

2

核酸擴(kuò)增聚合酶鏈反應(yīng)

(polymerasechainreaction,PCRDNA)連接酶鏈反應(yīng)(ligasechainreaction,LCR)反轉(zhuǎn)錄PCR(ReversetranscrptasePCR,RT—PCR(RNA)

3

基因芯片技術(shù)(genechip)

(四)檢測(cè)病毒核酸1核酸雜交18第三節(jié)真菌學(xué)診斷標(biāo)本直接鏡檢深部標(biāo)本染色標(biāo)本G染色G+圓形大小不均有芽生孢子分離培養(yǎng)沙氏培養(yǎng)基菌落觀察角質(zhì)標(biāo)本不染色標(biāo)本10%KOH觀察菌絲、孢子類型大小顏色皺摺鑒定動(dòng)物實(shí)驗(yàn)(致病性真菌)接種觀察發(fā)病情況死亡后取標(biāo)本進(jìn)一步鑒定皮膚超敏反應(yīng)快速診斷血清學(xué)實(shí)驗(yàn)核酸檢測(cè)真菌毒素檢測(cè)第三節(jié)真菌學(xué)診斷標(biāo)本直接鏡檢深部標(biāo)本分離培養(yǎng)角質(zhì)標(biāo)本類19死疫苗活疫苗類毒素新型活疫苗基因工程疫苗重組載體疫苗第四節(jié)特異性預(yù)防與治療一、人工主動(dòng)免疫(artificialactiveimmunity):將疫苗(vaccine)或類毒素接種于人體,使機(jī)體產(chǎn)生獲得性免疫力的一種防治微生物感染的措施,主要用于預(yù)防。合成疫苗亞單位疫苗DNA疫苗轉(zhuǎn)基因植物疫苗治療性疫苗死疫苗第四節(jié)特異性預(yù)防與治療一、人工主動(dòng)免疫(artifi20抗毒素抗菌血清胎盤球蛋白、丙種球蛋白細(xì)胞免疫制劑二、人工被動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫(artificialpasstiveimmunity):注射含有特異性抗體的免疫血清或純化免疫球蛋白,或細(xì)胞因子等免疫制劑,使機(jī)體即刻獲得特異性免疫,因而作用及時(shí)。但這些免疫物質(zhì)不是病人自己產(chǎn)生的,故維持時(shí)間短。主要用于治療或緊急預(yù)防??苟舅囟?、人工被動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫(artificial21二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationanddetermination)(三)檢測(cè)病毒特異性IgM抗體(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationanddetermination)RNA印跡雜交(northernblot)一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serologicaldiagnosis)。干擾素及干擾素誘生劑治療一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)類型大小顏色皺?。ǘ┎《镜臄?shù)量與感染性測(cè)定酶免疫技術(shù)(EIA)等。血清學(xué)診斷試驗(yàn)最好取患者急性期和恢復(fù)期雙份血清標(biāo)本,當(dāng)后者的抗體效價(jià)比前者升高大于等于4倍時(shí)方有意義。(3)傳代細(xì)胞—能在體外無(wú)限傳代的細(xì)胞多由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而來(lái)。一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。(3)形成包涵體:某些病毒在細(xì)胞漿或核內(nèi)增殖后形成的嗜酸或嗜堿性的團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serologicaldiagnosis)。(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代?!种撇《净蜣D(zhuǎn)錄雞胚培養(yǎng)不同病毒選擇不同接種部位(絨毛尿囊膜,尿囊腔,羊膜腔,卵黃囊),分離流感病毒最常用。兩種人工免疫的比較區(qū)別要點(diǎn)人工主動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫免疫物質(zhì)抗原抗體或細(xì)胞因子等接種次數(shù)1-3次1次免疫出現(xiàn)時(shí)間慢(注射后2-4W)快(注射后立刻出現(xiàn))免疫維持時(shí)間長(zhǎng)(數(shù)月~數(shù)年)短(2-3W)用途多用于預(yù)防多用于治療或應(yīng)急預(yù)防二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationa22三、細(xì)菌感染的治療抗菌藥物種類(抗生素及人工合成化學(xué)制劑)主要作用機(jī)制影響細(xì)胞壁合成影響細(xì)胞膜功能影響細(xì)菌蛋白合成影響細(xì)菌核酸合成三、細(xì)菌感染的治療抗菌藥物種類(抗生素及人工合成化學(xué)制劑)23四、病毒感染的治療藥物治療核苷類藥物——抑制病毒基因復(fù)制

——抑制病毒基因轉(zhuǎn)錄蛋白酶抑制劑天然藥物(中草藥)其他藥物(金剛烷胺)干擾素及干擾素誘生劑治療基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)免疫治療(特異性抗體、免疫調(diào)節(jié)劑、治療性疫苗等。四、病毒感染的治療藥物治療24五、真菌的治療各種癬癥——外用抗真藥(易復(fù)發(fā))深部真菌病——除去誘因,提高免疫力,用抗真菌藥物(副作用大)五、真菌的治療各種癬癥——外用抗真藥(易復(fù)發(fā))25致病菌的檢驗(yàn)程序標(biāo)本直接涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定病原菌抗原檢測(cè)其它檢測(cè)形態(tài)、結(jié)構(gòu)、染色性涂片鏡檢菌落特征生化反應(yīng)藥敏試驗(yàn)血清學(xué)反應(yīng)沉淀反應(yīng)協(xié)同凝集免疫熒光對(duì)流免疫電泳酶免疫測(cè)定免疫印跡細(xì)菌代謝產(chǎn)物(氣相色譜)細(xì)菌核酸(PCR)噬菌體分離細(xì)菌素測(cè)定分子生物學(xué)技術(shù)動(dòng)物試驗(yàn)致病菌的檢驗(yàn)程序標(biāo)本直接涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定病原菌抗原26二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationanddetermination)

(一)病毒的分離方法動(dòng)物接種選擇易感動(dòng)物及接種部位,觀察發(fā)病情況雞胚培養(yǎng)不同病毒選擇不同接種部位(絨毛尿囊膜,尿囊腔,羊膜腔,卵黃囊),分離流感病毒最常用。細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。(3)傳代細(xì)胞—能在體外無(wú)限傳代的細(xì)胞多由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而來(lái)。二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationa27

四、病毒感染的快速診斷

(一)

形態(tài)學(xué)

電鏡和免疫電鏡——直接觀察病毒光鏡——大病毒和包涵體四、病毒感染的快速診斷(一)

形態(tài)學(xué)28動(dòng)物接種選擇易感動(dòng)物及接種部位,觀察發(fā)病情況(3)傳代細(xì)胞—能在體外無(wú)限傳代的細(xì)胞多由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而來(lái)。死亡后取標(biāo)本進(jìn)一步鑒定DNA印跡雜交(Southernblot)(三)檢測(cè)病毒特異性IgM抗體動(dòng)物接種選擇易感動(dòng)物及接種部位,觀察發(fā)病情況電鏡和免疫電鏡——直接觀察病毒類型大小顏色皺?。?)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。RNA印跡雜交(northernblot)因此,用已知的細(xì)菌或其特異性抗原檢測(cè)患者體液中有無(wú)相應(yīng)特異抗體和其效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化,可作為某些傳染病的輔助診斷。3基因芯片技術(shù)(genechip)一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。免疫治療(特異性抗體、免疫調(diào)節(jié)劑、治療性疫苗等。1早期(前驅(qū)期、急性期、發(fā)病前1~2天)——抑制病毒基因轉(zhuǎn)錄5血清學(xué)實(shí)驗(yàn)檢查抗體(雙分血清)但這些免疫物質(zhì)不是病人自己產(chǎn)生的,故維持時(shí)間短。一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)動(dòng)物接種選擇易感動(dòng)物及接種部位,觀察發(fā)病情況29光鏡——大病毒和包涵體一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)各種癬癥——外用抗真藥(易復(fù)發(fā))四、病毒感染的快速診斷(3)形成包涵體:某些病毒在細(xì)胞漿或核內(nèi)增殖后形成的嗜酸或嗜堿性的團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。主要用于治療或緊急預(yù)防。一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)抗體的量常隨感染過(guò)程而增多,表現(xiàn)為效價(jià)(滴度)的升高。用已知病毒抗原檢測(cè)病人血清中相應(yīng)抗體以診斷病毒性疾病(中和實(shí)驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)、血凝抑制實(shí)驗(yàn)、凝膠免疫擴(kuò)散等)RNA印跡雜交(northernblot)基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法2根據(jù)不同病毒感染,采集不同部位標(biāo)本血清學(xué)診斷試驗(yàn)最好取患者急性期和恢復(fù)期雙份血清標(biāo)本,當(dāng)后者的抗體效價(jià)比前者升高大于等于4倍時(shí)方有意義。(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。核苷類藥物——抑制病毒基因復(fù)制二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationanddetermination)抗菌藥物種類(抗生素及人工合成化學(xué)制劑)4標(biāo)本無(wú)菌采集與處理(加抗生素,除菌并防止污染)(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。光鏡——大病毒和包涵體30主要用于治療或緊急預(yù)防。(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serologicaldiagnosis)。免疫治療(特異性抗體、免疫調(diào)節(jié)劑、治療性疫苗等。原位雜交(insitehybridization)1早期(前驅(qū)期、急性期、發(fā)病前1~2天)細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法DNA印跡雜交(Southernblot)4標(biāo)本無(wú)菌采集與處理(加抗生素,除菌并防止污染)電鏡和免疫電鏡——直接觀察病毒2根據(jù)不同病毒感染,采集不同部位標(biāo)本(二)病毒的數(shù)量與感染性測(cè)定(3)形成包涵體:某些病毒在細(xì)胞漿或核內(nèi)增殖后形成的嗜酸或嗜堿性的團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)RNA印跡雜交(northernblot)一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serologicaldiagnosis)。一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)酶免疫技術(shù)(EIA)等。第四節(jié)特異性預(yù)防與治療細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serologicaldiagnosis)。一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)(1)出現(xiàn)細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE):即某些病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖引起的特有的細(xì)胞病變(細(xì)胞變圓、聚集、壞死、脫落等)細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serologicaldiagnosis)。一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)四、病毒感染的快速診斷(三)新分離病毒的鑒定斑點(diǎn)雜交(dothybridization)基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)人工被動(dòng)免疫(artificialpasstiveimmunity):注射含有特異性抗體的免疫血清或純化免疫球蛋白,或細(xì)胞因子等免疫制劑,使機(jī)體即刻獲得特異性免疫,因而作用及時(shí)。常用方法:直接凝集試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、沉淀試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、ELISA。四、病毒感染的快速診斷(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。動(dòng)物接種選擇易感動(dòng)物及接種部位,觀察發(fā)病情況(2)形成細(xì)胞融合(多巨核細(xì)胞)二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationanddetermination)(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。四、病毒感染的快速診斷一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)各種癬癥——外用抗真藥(易復(fù)發(fā))3基因芯片技術(shù)(genechip)5血清學(xué)實(shí)驗(yàn)檢查抗體(雙分血清)DNA印跡雜交(Southernblot)抗菌藥物種類(抗生素及人工合成化學(xué)制劑)細(xì)菌代謝產(chǎn)物(氣相色譜)(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。抗體的量常隨感染過(guò)程而增多,表現(xiàn)為效價(jià)(滴度)的升高。RNA印跡雜交(northernblot)抗菌藥物種類(抗生素及人工合成化學(xué)制劑)(3)形成包涵體:某些病毒在細(xì)胞漿或核內(nèi)增殖后形成的嗜酸或嗜堿性的團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。雞胚培養(yǎng)不同病毒選擇不同接種部位(絨毛尿囊膜,尿囊腔,羊膜腔,卵黃囊),分離流感病毒最常用。細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)(3)傳代細(xì)胞—能在體外無(wú)限傳代的細(xì)胞多由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而來(lái)。1早期(前驅(qū)期、急性期、發(fā)病前1~2天)(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。(3)形成包涵體:某些病毒在細(xì)胞漿或核內(nèi)增殖后形成的嗜酸或嗜堿性的團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。各種癬癥——外用抗真藥(易復(fù)發(fā))斑點(diǎn)雜交(dothybridization)基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)四、病毒感染的快速診斷二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationanddetermination)抗菌藥物種類(抗生素及人工合成化學(xué)制劑)用已知病毒抗原檢測(cè)病人血清中相應(yīng)抗體以診斷病毒性疾?。ㄖ泻蛯?shí)驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)、血凝抑制實(shí)驗(yàn)、凝膠免疫擴(kuò)散等)酶免疫技術(shù)(EIA)等。電鏡和免疫電鏡——直接觀察病毒動(dòng)物接種選擇易感動(dòng)物及接種部位,觀察發(fā)病情況(2)形成細(xì)胞融合(多巨核細(xì)胞)一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)3基因芯片技術(shù)(genechip)電鏡和免疫電鏡——直接觀察病毒一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)血清學(xué)診斷試驗(yàn)最好取患者急性期和恢復(fù)期雙份血清標(biāo)本,當(dāng)后者的抗體效價(jià)比前者升高大于等于4倍時(shí)方有意義。(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。細(xì)菌代謝產(chǎn)物(氣相色譜)細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。四、病毒感染的治療藥物治療核苷類藥物——抑制病毒基因復(fù)制

——抑制病毒基因轉(zhuǎn)錄蛋白酶抑制劑天然藥物(中草藥)其他藥物(金剛烷胺)干擾素及干擾素誘生劑治療基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)免疫治療(特異性抗體、免疫調(diào)節(jié)劑、治療性疫苗等。主要用于治療或緊急預(yù)防。酶免疫技術(shù)(EIA)等。四、病毒感31致病菌的檢驗(yàn)程序標(biāo)本直接涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定病原菌抗原檢測(cè)其它檢測(cè)形態(tài)、結(jié)構(gòu)、染色性涂片鏡檢菌落特征生化反應(yīng)藥敏試驗(yàn)血清學(xué)反應(yīng)沉淀反應(yīng)協(xié)同凝集免疫熒光對(duì)流免疫電泳酶免疫測(cè)定免疫印跡細(xì)菌代謝產(chǎn)物(氣相色譜)細(xì)菌核酸(PCR)噬菌體分離細(xì)菌素測(cè)定分子生物學(xué)技術(shù)動(dòng)物試驗(yàn)致病菌的檢驗(yàn)程序標(biāo)本直接涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定病原菌抗原32人體受致病菌感染后,其免疫系統(tǒng)被刺激后發(fā)生免疫應(yīng)答而產(chǎn)生特異性抗體??贵w的量常隨感染過(guò)程而增多,表現(xiàn)為效價(jià)(滴度)的升高。因此,用已知的細(xì)菌或其特異性抗原檢測(cè)患者體液中有無(wú)相應(yīng)特異抗體和其效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化,可作為某些傳染病的輔助診斷。一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serologicaldiagnosis)。血清學(xué)診斷試驗(yàn)最好取患者急性期和恢復(fù)期雙份血清標(biāo)本,當(dāng)后者的抗體效價(jià)比前者升高大于等于4倍時(shí)方有意義。常用方法:直接凝集試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、沉淀試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、ELISA。第二節(jié)血清學(xué)診斷人體受致病菌感染后,其免疫系統(tǒng)被刺激后發(fā)生免疫應(yīng)答而產(chǎn)生特異33第二節(jié)病毒學(xué)診斷

一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)1早期(前驅(qū)期、急性期、發(fā)病前1~2天)2根據(jù)不同病毒感染,采集不同部位標(biāo)本3病毒易被滅活(細(xì)胞內(nèi)寄生,怕熱不怕冷),低溫保存,快速送檢4標(biāo)本無(wú)菌采集與處理(加抗生素,除菌并防止污染)5血清學(xué)實(shí)驗(yàn)檢查抗體(雙分血清)第二節(jié)病毒學(xué)診斷一標(biāo)本的采集與送檢(principl34二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationanddetermination)

(一)病毒的分離方法動(dòng)物接種選擇易感動(dòng)物及接種部位,觀察發(fā)病情況雞胚培養(yǎng)不同病毒選擇不同接種部位(絨毛尿囊膜,尿囊腔,羊膜腔,卵黃囊),分離流感病毒最常用。細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。(3)傳代細(xì)胞—能在體外無(wú)限傳代的細(xì)胞多由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而來(lái)。二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationa35病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中增殖的指標(biāo)細(xì)胞的變化(1)出現(xiàn)細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE):即某些病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖引起的特有的細(xì)胞病變(細(xì)胞變圓、聚集、壞死、脫落等)(2)形成細(xì)胞融合(多巨核細(xì)胞)(3)形成包涵體:某些病毒在細(xì)胞漿或核內(nèi)增殖后形成的嗜酸或嗜堿性的團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。(病毒增殖場(chǎng)所)紅細(xì)胞吸附干擾現(xiàn)象細(xì)胞代謝改變(pH)病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中增殖的指標(biāo)細(xì)胞的變化36正常細(xì)胞病變細(xì)胞正常細(xì)胞病變細(xì)胞37(二)病毒的數(shù)量與感染性測(cè)定(三)新分離病毒的鑒定核酸類型、理化性狀、形態(tài)、血清學(xué)鑒定、基因測(cè)序和生物對(duì)比。(二)病毒的數(shù)量與感染性測(cè)定38一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serologicaldiagnosis)。(3)形成包涵體:某些病毒在細(xì)胞漿或核內(nèi)增殖后形成的嗜酸或嗜堿性的團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。2根據(jù)不同病毒感染,采集不同部位標(biāo)本酶免疫技術(shù)(EIA)等。細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法四、病毒感染的快速診斷(3)形成包涵體:某些病毒在細(xì)胞漿或核內(nèi)增殖后形成的嗜酸或嗜堿性的團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)?;蛑委煟ǚ戳x寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)四、病毒感染的快速診斷基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)聚合酶鏈反應(yīng)(polymerasechainreaction,PCRDNA)光鏡——大病毒和包涵體——抑制病毒基因轉(zhuǎn)錄各種癬癥——外用抗真藥(易復(fù)發(fā))電鏡和免疫電鏡——直接觀察病毒DNA印跡雜交(Southernblot)4標(biāo)本無(wú)菌采集與處理(加抗生素,除菌并防止污染)——抑制病毒基因轉(zhuǎn)錄(2)形成細(xì)胞融合(多巨核細(xì)胞)(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。三、病毒感染的血清學(xué)診斷用已知病毒抗原檢測(cè)病人血清中相應(yīng)抗體以診斷病毒性疾病(中和實(shí)驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)、血凝抑制實(shí)驗(yàn)、凝膠免疫擴(kuò)散等)一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serolog39

四、病毒感染的快速診斷

(一)

形態(tài)學(xué)

電鏡和免疫電鏡——直接觀察病毒光鏡——大病毒和包涵體四、病毒感染的快速診斷(一)

形態(tài)學(xué)40基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)酶免疫技術(shù)(EIA)等。RNA印跡雜交(northernblot)光鏡——大病毒和包涵體4標(biāo)本無(wú)菌采集與處理(加抗生素,除菌并防止污染)(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。人工被動(dòng)免疫(artificialpasstiveimmunity):注射含有特異性抗體的免疫血清或純化免疫球蛋白,或細(xì)胞因子等免疫制劑,使機(jī)體即刻獲得特異性免疫,因而作用及時(shí)。(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。各種癬癥——外用抗真藥(易復(fù)發(fā))人工被動(dòng)免疫(artificialpasstiveimmunity):注射含有特異性抗體的免疫血清或純化免疫球蛋白,或細(xì)胞因子等免疫制劑,使機(jī)體即刻獲得特異性免疫,因而作用及時(shí)。動(dòng)物接種選擇易感動(dòng)物及接種部位,觀察發(fā)病情況血清學(xué)診斷試驗(yàn)最好取患者急性期和恢復(fù)期雙份血清標(biāo)本,當(dāng)后者的抗體效價(jià)比前者升高大于等于4倍時(shí)方有意義。(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。5血清學(xué)實(shí)驗(yàn)檢查抗體(雙分血清)胎盤球蛋白、丙種球蛋白(3)傳代細(xì)胞—能在體外無(wú)限傳代的細(xì)胞多由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而來(lái)。基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)41病原學(xué)診斷與防治課件42病原學(xué)診斷與防治課件43病原學(xué)診斷與防治課件44病原學(xué)診斷與防治課件45病原學(xué)診斷與防治課件46(二)檢測(cè)病毒蛋白抗原用已知特異性抗體直接檢測(cè)病毒蛋白抗原(簡(jiǎn)便、敏感、特異)常用方法:免疫熒光技術(shù)(IF)

固相放射免疫測(cè)定(SPRIT)

酶免疫技術(shù)(EIA)等。(二)檢測(cè)病毒蛋白抗原47(三)檢測(cè)病毒特異性IgM抗體

檢測(cè)病毒特異性IgM抗體可診斷急性感染或證明病毒復(fù)制。(三)檢測(cè)病毒特異性IgM抗體 檢48(四)檢測(cè)病毒核酸

1核酸雜交

斑點(diǎn)雜交(dothybridization)

原位雜交(insitehybridization)

DNA印跡雜交(Southernblot)

RNA印跡雜交(northernblot)

2

核酸擴(kuò)增聚合酶鏈反應(yīng)

(polymerasechainreaction,PCRDNA)連接酶鏈反應(yīng)(ligasechainreaction,LCR)反轉(zhuǎn)錄PCR(ReversetranscrptasePCR,RT—PCR(RNA)

3

基因芯片技術(shù)(genechip)

(四)檢測(cè)病毒核酸1核酸雜交49第三節(jié)真菌學(xué)診斷標(biāo)本直接鏡檢深部標(biāo)本染色標(biāo)本G染色G+圓形大小不均有芽生孢子分離培養(yǎng)沙氏培養(yǎng)基菌落觀察角質(zhì)標(biāo)本不染色標(biāo)本10%KOH觀察菌絲、孢子類型大小顏色皺摺鑒定動(dòng)物實(shí)驗(yàn)(致病性真菌)接種觀察發(fā)病情況死亡后取標(biāo)本進(jìn)一步鑒定皮膚超敏反應(yīng)快速診斷血清學(xué)實(shí)驗(yàn)核酸檢測(cè)真菌毒素檢測(cè)第三節(jié)真菌學(xué)診斷標(biāo)本直接鏡檢深部標(biāo)本分離培養(yǎng)角質(zhì)標(biāo)本類50死疫苗活疫苗類毒素新型活疫苗基因工程疫苗重組載體疫苗第四節(jié)特異性預(yù)防與治療一、人工主動(dòng)免疫(artificialactiveimmunity):將疫苗(vaccine)或類毒素接種于人體,使機(jī)體產(chǎn)生獲得性免疫力的一種防治微生物感染的措施,主要用于預(yù)防。合成疫苗亞單位疫苗DNA疫苗轉(zhuǎn)基因植物疫苗治療性疫苗死疫苗第四節(jié)特異性預(yù)防與治療一、人工主動(dòng)免疫(artifi51抗毒素抗菌血清胎盤球蛋白、丙種球蛋白細(xì)胞免疫制劑二、人工被動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫(artificialpasstiveimmunity):注射含有特異性抗體的免疫血清或純化免疫球蛋白,或細(xì)胞因子等免疫制劑,使機(jī)體即刻獲得特異性免疫,因而作用及時(shí)。但這些免疫物質(zhì)不是病人自己產(chǎn)生的,故維持時(shí)間短。主要用于治療或緊急預(yù)防。抗毒素二、人工被動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫(artificial52二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationanddetermination)(三)檢測(cè)病毒特異性IgM抗體(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationanddetermination)RNA印跡雜交(northernblot)一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serologicaldiagnosis)。干擾素及干擾素誘生劑治療一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)類型大小顏色皺?。ǘ┎《镜臄?shù)量與感染性測(cè)定酶免疫技術(shù)(EIA)等。血清學(xué)診斷試驗(yàn)最好取患者急性期和恢復(fù)期雙份血清標(biāo)本,當(dāng)后者的抗體效價(jià)比前者升高大于等于4倍時(shí)方有意義。(3)傳代細(xì)胞—能在體外無(wú)限傳代的細(xì)胞多由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而來(lái)。一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。(3)形成包涵體:某些病毒在細(xì)胞漿或核內(nèi)增殖后形成的嗜酸或嗜堿性的團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serologicaldiagnosis)。(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代?!种撇《净蜣D(zhuǎn)錄雞胚培養(yǎng)不同病毒選擇不同接種部位(絨毛尿囊膜,尿囊腔,羊膜腔,卵黃囊),分離流感病毒最常用。兩種人工免疫的比較區(qū)別要點(diǎn)人工主動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫免疫物質(zhì)抗原抗體或細(xì)胞因子等接種次數(shù)1-3次1次免疫出現(xiàn)時(shí)間慢(注射后2-4W)快(注射后立刻出現(xiàn))免疫維持時(shí)間長(zhǎng)(數(shù)月~數(shù)年)短(2-3W)用途多用于預(yù)防多用于治療或應(yīng)急預(yù)防二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationa53三、細(xì)菌感染的治療抗菌藥物種類(抗生素及人工合成化學(xué)制劑)主要作用機(jī)制影響細(xì)胞壁合成影響細(xì)胞膜功能影響細(xì)菌蛋白合成影響細(xì)菌核酸合成三、細(xì)菌感染的治療抗菌藥物種類(抗生素及人工合成化學(xué)制劑)54四、病毒感染的治療藥物治療核苷類藥物——抑制病毒基因復(fù)制

——抑制病毒基因轉(zhuǎn)錄蛋白酶抑制劑天然藥物(中草藥)其他藥物(金剛烷胺)干擾素及干擾素誘生劑治療基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)免疫治療(特異性抗體、免疫調(diào)節(jié)劑、治療性疫苗等。四、病毒感染的治療藥物治療55五、真菌的治療各種癬癥——外用抗真藥(易復(fù)發(fā))深部真菌病——除去誘因,提高免疫力,用抗真菌藥物(副作用大)五、真菌的治療各種癬癥——外用抗真藥(易復(fù)發(fā))56致病菌的檢驗(yàn)程序標(biāo)本直接涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定病原菌抗原檢測(cè)其它檢測(cè)形態(tài)、結(jié)構(gòu)、染色性涂片鏡檢菌落特征生化反應(yīng)藥敏試驗(yàn)血清學(xué)反應(yīng)沉淀反應(yīng)協(xié)同凝集免疫熒光對(duì)流免疫電泳酶免疫測(cè)定免疫印跡細(xì)菌代謝產(chǎn)物(氣相色譜)細(xì)菌核酸(PCR)噬菌體分離細(xì)菌素測(cè)定分子生物學(xué)技術(shù)動(dòng)物試驗(yàn)致病菌的檢驗(yàn)程序標(biāo)本直接涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定病原菌抗原57二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationanddetermination)

(一)病毒的分離方法動(dòng)物接種選擇易感動(dòng)物及接種部位,觀察發(fā)病情況雞胚培養(yǎng)不同病毒選擇不同接種部位(絨毛尿囊膜,尿囊腔,羊膜腔,卵黃囊),分離流感病毒最常用。細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。(3)傳代細(xì)胞—能在體外無(wú)限傳代的細(xì)胞多由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而來(lái)。二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationa58

四、病毒感染的快速診斷

(一)

形態(tài)學(xué)

電鏡和免疫電鏡——直接觀察病毒光鏡——大病毒和包涵體四、病毒感染的快速診斷(一)

形態(tài)學(xué)59動(dòng)物接種選擇易感動(dòng)物及接種部位,觀察發(fā)病情況(3)傳代細(xì)胞—能在體外無(wú)限傳代的細(xì)胞多由癌細(xì)胞或二倍體細(xì)胞突變而來(lái)。死亡后取標(biāo)本進(jìn)一步鑒定DNA印跡雜交(Southernblot)(三)檢測(cè)病毒特異性IgM抗體動(dòng)物接種選擇易感動(dòng)物及接種部位,觀察發(fā)病情況電鏡和免疫電鏡——直接觀察病毒類型大小顏色皺?。?)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。RNA印跡雜交(northernblot)因此,用已知的細(xì)菌或其特異性抗原檢測(cè)患者體液中有無(wú)相應(yīng)特異抗體和其效價(jià)的動(dòng)態(tài)變化,可作為某些傳染病的輔助診斷。3基因芯片技術(shù)(genechip)一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。免疫治療(特異性抗體、免疫調(diào)節(jié)劑、治療性疫苗等。1早期(前驅(qū)期、急性期、發(fā)病前1~2天)——抑制病毒基因轉(zhuǎn)錄5血清學(xué)實(shí)驗(yàn)檢查抗體(雙分血清)但這些免疫物質(zhì)不是病人自己產(chǎn)生的,故維持時(shí)間短。一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)動(dòng)物接種選擇易感動(dòng)物及接種部位,觀察發(fā)病情況60光鏡——大病毒和包涵體一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)各種癬癥——外用抗真藥(易復(fù)發(fā))四、病毒感染的快速診斷(3)形成包涵體:某些病毒在細(xì)胞漿或核內(nèi)增殖后形成的嗜酸或嗜堿性的團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。主要用于治療或緊急預(yù)防。一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)抗體的量常隨感染過(guò)程而增多,表現(xiàn)為效價(jià)(滴度)的升高。用已知病毒抗原檢測(cè)病人血清中相應(yīng)抗體以診斷病毒性疾?。ㄖ泻蛯?shí)驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合實(shí)驗(yàn)、血凝抑制實(shí)驗(yàn)、凝膠免疫擴(kuò)散等)RNA印跡雜交(northernblot)基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法2根據(jù)不同病毒感染,采集不同部位標(biāo)本血清學(xué)診斷試驗(yàn)最好取患者急性期和恢復(fù)期雙份血清標(biāo)本,當(dāng)后者的抗體效價(jià)比前者升高大于等于4倍時(shí)方有意義。(2)二倍體細(xì)胞—在體外分裂50-100代后仍保持2倍體染色體數(shù)目的單層細(xì)胞。核苷類藥物——抑制病毒基因復(fù)制二病毒的分離培養(yǎng)與鑒定(virusisolationanddetermination)抗菌藥物種類(抗生素及人工合成化學(xué)制劑)4標(biāo)本無(wú)菌采集與處理(加抗生素,除菌并防止污染)(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。光鏡——大病毒和包涵體61主要用于治療或緊急預(yù)防。(1)原代細(xì)胞—來(lái)源于動(dòng)物、雞胚、人胚組織細(xì)胞,對(duì)多種病毒敏感,但只能傳2-3代。一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serologicaldiagnosis)。免疫治療(特異性抗體、免疫調(diào)節(jié)劑、治療性疫苗等。原位雜交(insitehybridization)1早期(前驅(qū)期、急性期、發(fā)病前1~2天)細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法DNA印跡雜交(Southernblot)4標(biāo)本無(wú)菌采集與處理(加抗生素,除菌并防止污染)電鏡和免疫電鏡——直接觀察病毒2根據(jù)不同病毒感染,采集不同部位標(biāo)本(二)病毒的數(shù)量與感染性測(cè)定(3)形成包涵體:某些病毒在細(xì)胞漿或核內(nèi)增殖后形成的嗜酸或嗜堿性的團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)RNA印跡雜交(northernblot)一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serologicaldiagnosis)。一標(biāo)本的采集與送檢(principleofcollectionspecimen)基因治療(反義寡核苷酸、抑制病毒復(fù)制)酶免疫技術(shù)(EIA)等。第四節(jié)特異性預(yù)防與治療細(xì)胞培養(yǎng):分離病毒最常用的方法一般采取病人的血清進(jìn)行試驗(yàn),故稱為血清學(xué)診斷(serologicaldiagnosi

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