《醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)》課件

第一篇細(xì)胞生物學(xué)

細(xì)胞生物學(xué)概論生命的基本單位－－細(xì)胞細(xì)胞膜細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核1醫(yī)學(xué)PPT第一篇細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞生物學(xué)概論1醫(yī)學(xué)PPT第一章醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)概論

研究?jī)?nèi)容研究方法2醫(yī)學(xué)PPT第一章醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)概論研究?jī)?nèi)容研究方法2醫(yī)學(xué)PPT第一節(jié)

醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)研究?jī)?nèi)容

細(xì)胞生物學(xué)是從細(xì)胞、亞細(xì)胞和分子三個(gè)水平研究生命現(xiàn)象和本質(zhì)的科學(xué)

醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)是一門(mén)專(zhuān)門(mén)研究與人體醫(yī)學(xué)有關(guān)的細(xì)胞生物學(xué)

形態(tài)：觀察和分析細(xì)胞內(nèi)各部分的超微結(jié)構(gòu)和分子結(jié)構(gòu)功能：探索和揭示生命活動(dòng)的具體反應(yīng)過(guò)程，真正了解人體的生、老、病、死等各種生命現(xiàn)象。3醫(yī)學(xué)PPT第一節(jié)

醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)研究?jī)?nèi)容細(xì)胞生物學(xué)是從細(xì)胞、亞細(xì)胞第二節(jié)

醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)的研究方法顯微技術(shù)生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)細(xì)胞分離技術(shù)細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞雜交4醫(yī)學(xué)PPT第二節(jié)

醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)的研究方法顯微技術(shù)4醫(yī)學(xué)PPT一、顯微技術(shù)

顯微鏡是觀察細(xì)胞的主要工具。根據(jù)光源不同，可分為光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡兩大類(lèi)。

5醫(yī)學(xué)PPT一、顯微技術(shù)顯微鏡是觀察細(xì)胞的主要工具。根據(jù)光源不同，可分普通光學(xué)顯微鏡

6醫(yī)學(xué)PPT普通光學(xué)顯微鏡6醫(yī)學(xué)PPT熒光顯微鏡

細(xì)胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光；另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光

7醫(yī)學(xué)PPT熒光顯微鏡細(xì)胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒熒光顯微鏡照片（微管呈綠色、微絲紅色、核藍(lán)色）8醫(yī)學(xué)PPT熒光顯微鏡照片8醫(yī)學(xué)PPT激光共聚焦掃描顯微鏡

9醫(yī)學(xué)PPT激光共聚焦掃描顯微鏡9醫(yī)學(xué)PPT藍(lán)色為細(xì)胞核綠色為微管激光共聚焦掃描顯微鏡用激光作掃描光源，由于激光束的波長(zhǎng)較短，光束很細(xì)，所以共焦激光掃描顯微鏡有較高的分辨力，大約是普通光學(xué)顯微鏡的3倍。調(diào)焦深度不一樣時(shí)，就可以獲得樣品不同深度層次的圖像，這些圖像信息都儲(chǔ)于計(jì)算機(jī)內(nèi)，通過(guò)計(jì)算機(jī)分析和模擬，就能顯示細(xì)胞樣品的立體結(jié)構(gòu)。

10醫(yī)學(xué)PPT藍(lán)色為細(xì)胞核激光共聚焦掃描顯微鏡用激光作掃描暗視野顯微鏡照明光線不直接進(jìn)人物鏡，只允許被標(biāo)本反射和衍射的光線進(jìn)入物鏡，因而視野的背景是黑的，物體的邊緣是亮的。利用這種顯微鏡能見(jiàn)到小至4~200nm的微粒子，分辨率可比普通顯微鏡高50倍。11醫(yī)學(xué)PPT暗視野顯微鏡照明光線不直接進(jìn)人物鏡，只允許被標(biāo)本反射和衍射的

相差顯微鏡把透過(guò)標(biāo)本的可見(jiàn)光的光程差變成振幅差，從而提高了各種結(jié)構(gòu)間的對(duì)比度，使各種結(jié)構(gòu)變得清晰可見(jiàn)。這種顯微鏡最大的特點(diǎn)是可以觀察未經(jīng)染色的標(biāo)本和活細(xì)胞。一種介殼蟲(chóng)的染色體

12醫(yī)學(xué)PPT

相差顯微鏡把透過(guò)標(biāo)本的可見(jiàn)光的光程差變成振幅差，微分干涉差顯微鏡

優(yōu)點(diǎn)是能顯示結(jié)構(gòu)的三維立體投影影像，使細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，特別是一些較大的細(xì)胞器，如核、線粒體等，立體感特別強(qiáng)，適合于顯微操作。目前像基因注入、核移植、轉(zhuǎn)基因等的顯微操作常在這種顯微鏡下進(jìn)行。

13醫(yī)學(xué)PPT微分干涉差顯微鏡優(yōu)點(diǎn)是能顯示結(jié)構(gòu)的三維立體投影影像，使細(xì)胞倒置顯微鏡

用于觀察培養(yǎng)的活細(xì)胞

14醫(yī)學(xué)PPT倒置顯微鏡用于觀察培養(yǎng)的活細(xì)胞14醫(yī)學(xué)PPT透射電子顯微鏡

1932年Ruska發(fā)明了以電子束為光源，用電磁場(chǎng)作透鏡的電子顯微鏡。電子顯微鏡的放大倍數(shù)最高可達(dá)近百萬(wàn)倍

透射電子顯微鏡

掃描電子顯微鏡

15醫(yī)學(xué)PPT透射電子顯微鏡1932年Ruska發(fā)明了以電子束為光源，用RER的形態(tài)

16醫(yī)學(xué)PPTRER的形態(tài)16醫(yī)學(xué)PPT顯微操作/注射儀

17醫(yī)學(xué)PPT顯微操作/注射儀17醫(yī)學(xué)PPT二、生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)

細(xì)胞化學(xué)技術(shù)組織化學(xué)或細(xì)胞化學(xué)染色：是利用染色劑可同細(xì)胞的某種成分發(fā)生反應(yīng)而著色的原理，對(duì)某種成分進(jìn)行定性或定位研究的技術(shù)。利用這種方法對(duì)細(xì)胞的各種成分幾乎都能顯示，包括有無(wú)機(jī)物、醛、蛋白質(zhì)、糖類(lèi)、脂類(lèi)、核酸、酶等。

18醫(yī)學(xué)PPT二、生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)細(xì)胞化學(xué)技術(shù)18醫(yī)學(xué)PPT免疫細(xì)胞化學(xué)根據(jù)免疫學(xué)原理，利用抗體同特定抗原專(zhuān)一結(jié)合，對(duì)抗原進(jìn)行定位測(cè)定的技術(shù)。如果將抗體結(jié)合上標(biāo)記物，再與組織中的抗原發(fā)生反應(yīng)，即可在光鏡或電鏡下顯示出該抗原存在于組織中的部位。常用的標(biāo)記物有熒光素和酶。熒光素標(biāo)記的稱(chēng)為免疫熒光法酶標(biāo)記的稱(chēng)為酶標(biāo)免疫法19醫(yī)學(xué)PPT免疫細(xì)胞化學(xué)19醫(yī)學(xué)PPT顯微光譜分析技術(shù)細(xì)胞中有一些成分具有特定的吸收光譜，核酸、蛋白質(zhì)、細(xì)胞色素、維生素等都有自己特征性的吸收曲線。例如，核酸的吸收波長(zhǎng)為260nm，而蛋白質(zhì)的則為280nm。根據(jù)細(xì)胞成分所具有的這種特性，可利用顯微分光光度計(jì)對(duì)某些成分進(jìn)行定位、定性，甚至定量測(cè)定20醫(yī)學(xué)PPT顯微光譜分析技術(shù)20醫(yī)學(xué)PPT放射自顯影術(shù)用于研究標(biāo)記化合物在機(jī)體、組織和細(xì)胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用機(jī)理、作用部位等等。原理是將放射性同位素（如14C和3H）標(biāo)記的化合物導(dǎo)入生物體內(nèi)，將標(biāo)本制成切片或涂片，涂上鹵化銀乳膠，組織中的放射性即可使乳膠感光。顯示還原的黑色銀顆粒，即可得知標(biāo)本中標(biāo)記物的準(zhǔn)確位置和數(shù)量。

21醫(yī)學(xué)PPT放射自顯影術(shù)21醫(yī)學(xué)PPT分子雜交技術(shù)具有互補(bǔ)核苷酸序列的兩條單鏈核苷酸分子片段，在適當(dāng)條件下，通過(guò)氫鍵結(jié)合，形成DNA-DNA，DNA-RNA或RNA-RNA雜交的雙鏈分子。這種技術(shù)可用來(lái)測(cè)定單鏈分子核苷酸序列間是否具有互補(bǔ)關(guān)系。

22醫(yī)學(xué)PPT分子雜交技術(shù)22醫(yī)學(xué)PPT人類(lèi)染色體端粒DNA的熒光原位雜交

最初是使用帶放射性的DNA探針，通過(guò)放射自顯影來(lái)顯示位置。后來(lái)又發(fā)明了免疫探針?lè)ǎ瑢⑻结樅塑账岬膫?cè)鏈加以改造，探針雜交后，其側(cè)鏈可被帶有熒光標(biāo)記的抗體所識(shí)別，從而顯示出位置。

23醫(yī)學(xué)PPT人類(lèi)染色體最初是使用帶放射性的DNA探針，通過(guò)放射自顯影來(lái)顯PCR技術(shù)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerasechainreaction，PCR）用于在體外將微量的目標(biāo)DNA大量擴(kuò)增，以便進(jìn)行分析。

24醫(yī)學(xué)PPTPCR技術(shù)24醫(yī)學(xué)PPT三、細(xì)胞分離技術(shù)

離心技術(shù)流式細(xì)胞術(shù)細(xì)胞電泳

25醫(yī)學(xué)PPT三、細(xì)胞分離技術(shù)離心技術(shù)25醫(yī)學(xué)PPT離心技術(shù)－－差速離心

速度逐漸提高，樣品按大小先后沉淀

26醫(yī)學(xué)PPT離心技術(shù)－－差速離心速度逐漸提高，樣品按大小先后沉淀26用差速離心法分離已破碎的細(xì)胞各組份

27醫(yī)學(xué)PPT用差速離心法分離已破碎的細(xì)胞各組份27醫(yī)學(xué)PPT

A等速度沉降，B等密度沉降

離心技術(shù)－－密度梯度離心28醫(yī)學(xué)PPT

A等速度沉降，B等密度沉降離心技術(shù)－－密度梯度離心28醫(yī)流式細(xì)胞術(shù)流式細(xì)胞術(shù)是對(duì)單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行快速定量分析與分選的一門(mén)技術(shù)。在分析或分選過(guò)程中，包在鞘液中的細(xì)胞通過(guò)高頻振蕩控制的噴嘴，形成包含單個(gè)細(xì)胞的液滴，在激光束的照射下，這些細(xì)胞發(fā)出散射光和熒光，經(jīng)探測(cè)器檢測(cè)，轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，送入計(jì)算機(jī)處理，輸出統(tǒng)計(jì)結(jié)果，并可根據(jù)這些性質(zhì)分選出高純度的細(xì)胞亞群，分離純度可達(dá)99%。包被細(xì)胞的液流稱(chēng)為鞘液，所用儀器稱(chēng)為流式細(xì)胞計(jì)。

29醫(yī)學(xué)PPT流式細(xì)胞術(shù)29醫(yī)學(xué)PPT30醫(yī)學(xué)PPT30醫(yī)學(xué)PPT細(xì)胞電泳在一定PH值下細(xì)胞表面帶有凈的正或負(fù)電荷，能在外加電場(chǎng)的作用下發(fā)生泳動(dòng)的現(xiàn)象稱(chēng)為細(xì)胞電泳。引起細(xì)胞電泳的電位值稱(chēng)為ξ電位。各種細(xì)胞或處于不同生理狀態(tài)的同種細(xì)胞電荷量有所不同，故在一定的電場(chǎng)中的泳動(dòng)速度不同，因此可用來(lái)分離不同種類(lèi)的細(xì)胞。在恒定的電場(chǎng)條件下，同種細(xì)胞的電泳速度相當(dāng)穩(wěn)定，因而可通過(guò)測(cè)定電泳速度來(lái)推算出細(xì)胞的ξ電位。ξ電位常因細(xì)胞生理狀態(tài)和病理狀態(tài)而異，因此在診斷疾病上有一定價(jià)值。31醫(yī)學(xué)PPT細(xì)胞電泳31醫(yī)學(xué)PPT四、細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞雜交

細(xì)胞培養(yǎng)

選用最佳生存條件對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和研究的技術(shù)。細(xì)胞融合通過(guò)培養(yǎng)和誘導(dǎo)，兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞合并成一個(gè)雙核或多核細(xì)胞的過(guò)程稱(chēng)為細(xì)胞融合或細(xì)胞雜交。32醫(yī)學(xué)PPT四、細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞雜交細(xì)胞培養(yǎng)32醫(yī)學(xué)PPT動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

群體培養(yǎng)（左）和克隆培養(yǎng)（右）

33醫(yī)學(xué)PPT動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)群體培養(yǎng)（左）和克隆培養(yǎng)（右）33醫(yī)學(xué)PP植物細(xì)胞培養(yǎng)1、組織培養(yǎng)：誘發(fā)產(chǎn)生愈傷組織，如果條件適宜，可培養(yǎng)出再生植株。2、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)：適合于進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)，制取植物代謝產(chǎn)物。3、原生質(zhì)體培養(yǎng)：脫壁后的植物細(xì)胞稱(chēng)為原生質(zhì)體。4、單倍體培養(yǎng)：通過(guò)花藥或花粉培養(yǎng)可獲得單倍體植株，經(jīng)人為加倍后可得到完全純合的個(gè)體。34醫(yī)學(xué)PPT植物細(xì)胞培養(yǎng)1、組織培養(yǎng)：誘發(fā)產(chǎn)生愈傷組織，如果條件適宜，正常淋巴細(xì)胞具有分泌抗體的能力，但不能在體外長(zhǎng)期培養(yǎng)，瘤細(xì)胞可以在體外長(zhǎng)期培養(yǎng)，但不分泌抗體。于是英國(guó)人Kohler和Milstein1975將兩種細(xì)胞雜交而創(chuàng)立了單克隆抗體技術(shù)，獲1984年諾貝爾獎(jiǎng)。35醫(yī)學(xué)PPT正常淋巴細(xì)胞具有分泌抗體的能力，但不能在體外長(zhǎng)期培養(yǎng)，瘤細(xì)胞第一篇細(xì)胞生物學(xué)

細(xì)胞生物學(xué)概論生命的基本單位－－細(xì)胞細(xì)胞膜細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核36醫(yī)學(xué)PPT第一篇細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞生物學(xué)概論1醫(yī)學(xué)PPT第一章醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)概論

研究?jī)?nèi)容研究方法37醫(yī)學(xué)PPT第一章醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)概論研究?jī)?nèi)容研究方法2醫(yī)學(xué)PPT第一節(jié)

醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)研究?jī)?nèi)容

細(xì)胞生物學(xué)是從細(xì)胞、亞細(xì)胞和分子三個(gè)水平研究生命現(xiàn)象和本質(zhì)的科學(xué)

醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)是一門(mén)專(zhuān)門(mén)研究與人體醫(yī)學(xué)有關(guān)的細(xì)胞生物學(xué)

形態(tài)：觀察和分析細(xì)胞內(nèi)各部分的超微結(jié)構(gòu)和分子結(jié)構(gòu)功能：探索和揭示生命活動(dòng)的具體反應(yīng)過(guò)程，真正了解人體的生、老、病、死等各種生命現(xiàn)象。38醫(yī)學(xué)PPT第一節(jié)

醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)研究?jī)?nèi)容細(xì)胞生物學(xué)是從細(xì)胞、亞細(xì)胞第二節(jié)

醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)的研究方法顯微技術(shù)生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)細(xì)胞分離技術(shù)細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞雜交39醫(yī)學(xué)PPT第二節(jié)

醫(yī)學(xué)細(xì)胞生物學(xué)的研究方法顯微技術(shù)4醫(yī)學(xué)PPT一、顯微技術(shù)

顯微鏡是觀察細(xì)胞的主要工具。根據(jù)光源不同，可分為光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡兩大類(lèi)。

40醫(yī)學(xué)PPT一、顯微技術(shù)顯微鏡是觀察細(xì)胞的主要工具。根據(jù)光源不同，可分普通光學(xué)顯微鏡

41醫(yī)學(xué)PPT普通光學(xué)顯微鏡6醫(yī)學(xué)PPT熒光顯微鏡

細(xì)胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光；另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光

42醫(yī)學(xué)PPT熒光顯微鏡細(xì)胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒熒光顯微鏡照片（微管呈綠色、微絲紅色、核藍(lán)色）43醫(yī)學(xué)PPT熒光顯微鏡照片8醫(yī)學(xué)PPT激光共聚焦掃描顯微鏡

44醫(yī)學(xué)PPT激光共聚焦掃描顯微鏡9醫(yī)學(xué)PPT藍(lán)色為細(xì)胞核綠色為微管激光共聚焦掃描顯微鏡用激光作掃描光源，由于激光束的波長(zhǎng)較短，光束很細(xì)，所以共焦激光掃描顯微鏡有較高的分辨力，大約是普通光學(xué)顯微鏡的3倍。調(diào)焦深度不一樣時(shí)，就可以獲得樣品不同深度層次的圖像，這些圖像信息都儲(chǔ)于計(jì)算機(jī)內(nèi)，通過(guò)計(jì)算機(jī)分析和模擬，就能顯示細(xì)胞樣品的立體結(jié)構(gòu)。

45醫(yī)學(xué)PPT藍(lán)色為細(xì)胞核激光共聚焦掃描顯微鏡用激光作掃描暗視野顯微鏡照明光線不直接進(jìn)人物鏡，只允許被標(biāo)本反射和衍射的光線進(jìn)入物鏡，因而視野的背景是黑的，物體的邊緣是亮的。利用這種顯微鏡能見(jiàn)到小至4~200nm的微粒子，分辨率可比普通顯微鏡高50倍。46醫(yī)學(xué)PPT暗視野顯微鏡照明光線不直接進(jìn)人物鏡，只允許被標(biāo)本反射和衍射的

相差顯微鏡把透過(guò)標(biāo)本的可見(jiàn)光的光程差變成振幅差，從而提高了各種結(jié)構(gòu)間的對(duì)比度，使各種結(jié)構(gòu)變得清晰可見(jiàn)。這種顯微鏡最大的特點(diǎn)是可以觀察未經(jīng)染色的標(biāo)本和活細(xì)胞。一種介殼蟲(chóng)的染色體

47醫(yī)學(xué)PPT

相差顯微鏡把透過(guò)標(biāo)本的可見(jiàn)光的光程差變成振幅差，微分干涉差顯微鏡

優(yōu)點(diǎn)是能顯示結(jié)構(gòu)的三維立體投影影像，使細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，特別是一些較大的細(xì)胞器，如核、線粒體等，立體感特別強(qiáng)，適合于顯微操作。目前像基因注入、核移植、轉(zhuǎn)基因等的顯微操作常在這種顯微鏡下進(jìn)行。

48醫(yī)學(xué)PPT微分干涉差顯微鏡優(yōu)點(diǎn)是能顯示結(jié)構(gòu)的三維立體投影影像，使細(xì)胞倒置顯微鏡

用于觀察培養(yǎng)的活細(xì)胞

49醫(yī)學(xué)PPT倒置顯微鏡用于觀察培養(yǎng)的活細(xì)胞14醫(yī)學(xué)PPT透射電子顯微鏡

1932年Ruska發(fā)明了以電子束為光源，用電磁場(chǎng)作透鏡的電子顯微鏡。電子顯微鏡的放大倍數(shù)最高可達(dá)近百萬(wàn)倍

透射電子顯微鏡

掃描電子顯微鏡

50醫(yī)學(xué)PPT透射電子顯微鏡1932年Ruska發(fā)明了以電子束為光源，用RER的形態(tài)

51醫(yī)學(xué)PPTRER的形態(tài)16醫(yī)學(xué)PPT顯微操作/注射儀

52醫(yī)學(xué)PPT顯微操作/注射儀17醫(yī)學(xué)PPT二、生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)

細(xì)胞化學(xué)技術(shù)組織化學(xué)或細(xì)胞化學(xué)染色：是利用染色劑可同細(xì)胞的某種成分發(fā)生反應(yīng)而著色的原理，對(duì)某種成分進(jìn)行定性或定位研究的技術(shù)。利用這種方法對(duì)細(xì)胞的各種成分幾乎都能顯示，包括有無(wú)機(jī)物、醛、蛋白質(zhì)、糖類(lèi)、脂類(lèi)、核酸、酶等。

53醫(yī)學(xué)PPT二、生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)細(xì)胞化學(xué)技術(shù)18醫(yī)學(xué)PPT免疫細(xì)胞化學(xué)根據(jù)免疫學(xué)原理，利用抗體同特定抗原專(zhuān)一結(jié)合，對(duì)抗原進(jìn)行定位測(cè)定的技術(shù)。如果將抗體結(jié)合上標(biāo)記物，再與組織中的抗原發(fā)生反應(yīng)，即可在光鏡或電鏡下顯示出該抗原存在于組織中的部位。常用的標(biāo)記物有熒光素和酶。熒光素標(biāo)記的稱(chēng)為免疫熒光法酶標(biāo)記的稱(chēng)為酶標(biāo)免疫法54醫(yī)學(xué)PPT免疫細(xì)胞化學(xué)19醫(yī)學(xué)PPT顯微光譜分析技術(shù)細(xì)胞中有一些成分具有特定的吸收光譜，核酸、蛋白質(zhì)、細(xì)胞色素、維生素等都有自己特征性的吸收曲線。例如，核酸的吸收波長(zhǎng)為260nm，而蛋白質(zhì)的則為280nm。根據(jù)細(xì)胞成分所具有的這種特性，可利用顯微分光光度計(jì)對(duì)某些成分進(jìn)行定位、定性，甚至定量測(cè)定55醫(yī)學(xué)PPT顯微光譜分析技術(shù)20醫(yī)學(xué)PPT放射自顯影術(shù)用于研究標(biāo)記化合物在機(jī)體、組織和細(xì)胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用機(jī)理、作用部位等等。原理是將放射性同位素（如14C和3H）標(biāo)記的化合物導(dǎo)入生物體內(nèi)，將標(biāo)本制成切片或涂片，涂上鹵化銀乳膠，組織中的放射性即可使乳膠感光。顯示還原的黑色銀顆粒，即可得知標(biāo)本中標(biāo)記物的準(zhǔn)確位置和數(shù)量。

56醫(yī)學(xué)PPT放射自顯影術(shù)21醫(yī)學(xué)PPT分子雜交技術(shù)具有互補(bǔ)核苷酸序列的兩條單鏈核苷酸分子片段，在適當(dāng)條件下，通過(guò)氫鍵結(jié)合，形成DNA-DNA，DNA-RNA或RNA-RNA雜交的雙鏈分子。這種技術(shù)可用來(lái)測(cè)定單鏈分子核苷酸序列間是否具有互補(bǔ)關(guān)系。

57醫(yī)學(xué)PPT分子雜交技術(shù)22醫(yī)學(xué)PPT人類(lèi)染色體端粒DNA的熒光原位雜交

最初是使用帶放射性的DNA探針，通過(guò)放射自顯影來(lái)顯示位置。后來(lái)又發(fā)明了免疫探針?lè)?，將探針核苷酸的?cè)鏈加以改造，探針雜交后，其側(cè)鏈可被帶有熒光標(biāo)記的抗體所識(shí)別，從而顯示出位置。

58醫(yī)學(xué)PPT人類(lèi)染色體最初是使用帶放射性的DNA探針，通過(guò)放射自顯影來(lái)顯PCR技術(shù)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerasechainreaction，PCR）用于在體外將微量的目標(biāo)DNA大量擴(kuò)增，以便進(jìn)行分析。

59醫(yī)學(xué)PPTPCR技術(shù)24醫(yī)學(xué)PPT三、細(xì)胞分離技術(shù)

離心技術(shù)流式細(xì)胞術(shù)細(xì)胞電泳

60醫(yī)學(xué)PPT三、細(xì)胞分離技術(shù)離心技術(shù)25醫(yī)學(xué)PPT離心技術(shù)－－差速離心

速度逐漸提高，樣品按大小先后沉淀

61醫(yī)學(xué)PPT離心技術(shù)－－差速離心速度逐漸提高，樣品按大小先后沉淀26用差速離心法分離已破碎的細(xì)胞各組份

62醫(yī)學(xué)PPT用差速離心法分離已破碎的細(xì)胞各組份27醫(yī)學(xué)PPT

A等速度沉降，B等密度沉降

離心技術(shù)－－密度梯度離心63醫(yī)學(xué)PPT

A等速度沉降，B等密度沉降離心技術(shù)－－密度梯度離心28醫(yī)流式細(xì)胞術(shù)流式細(xì)胞術(shù)是對(duì)單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行快速定量分析與分選的一門(mén)技術(shù)。在分析或分選過(guò)程中，包在鞘液中的細(xì)胞通過(guò)高頻振蕩控制的噴嘴，形成包含單個(gè)細(xì)胞的液滴，在激光束的照射下，這些細(xì)胞發(fā)出散射光和熒光，經(jīng)探測(cè)器檢測(cè)，轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，送入計(jì)算機(jī)處理，輸出統(tǒng)計(jì)結(jié)果，并可根據(jù)這些性質(zhì)分選出高純度的細(xì)胞亞群，分離純度可達(dá)99%。包被細(xì)胞的液流稱(chēng)為鞘液，所用儀器稱(chēng)為流式細(xì)胞計(jì)。

64醫(yī)學(xué)PPT流式細(xì)胞術(shù)