蛋白質(zhì)與酶工程復(fù)習(xí)題

一．選擇題：影響蛋白質(zhì)化學(xué)修飾反應(yīng)的主要因素有： （）一是蛋白質(zhì)功能基的反應(yīng)活性；二是修飾劑的反應(yīng)活性。蛋白質(zhì)化學(xué)修飾有以下作用（以酶為例），請指出錯誤的一條：（）（1）改造酶的作用特性（包括改變酶活性、專一性、對效應(yīng)物響應(yīng)性能及對輔助因子的要求）;（2）提高酶的穩(wěn)定性;（3）擴大在體內(nèi)應(yīng)用可能性（防止在體內(nèi)非專一性水解、減少和消除免疫原性以利于醫(yī)療應(yīng)用）.TOC\o"1-5"\h\z3．蛋白質(zhì)側(cè)鏈上的巰基在進行烷基化修飾時，常用的烷基化試劑是： （）碘乙酸、碘乙酰胺、 N-乙基馬來酰亞胺、5,5-二硫-2-硝基苯甲酸下面哪一項敘述是錯誤的：（）人類基因組計劃的啟動和草圖完成時間在： （）1990年正式啟動，2000年6月26日人類基因組工作草圖完成。人類基因組計劃的啟動到人類基因組序列圖測序完成時間在： （）1990年正式啟動到2003年4月14日通過比較兩個或多個蛋白質(zhì)序列的相似區(qū)域和保守性位點，確定相互間具有共同功能的序列模式和分子進化關(guān)系，進一步分析其結(jié)構(gòu)和功能。此方法為：（）序列兩兩比對通過對目標(biāo)蛋白質(zhì)進行定位突變或化學(xué)修飾改變其結(jié)構(gòu)和功能，為蛋白質(zhì)分子設(shè)計中的：（）稱為“小改“，最廣泛使用的方法，主要是通過定點突變或盒式替換技術(shù)來有目的地改變幾個氨基酸殘基通過對來源于不同蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)域進行拼接和組裝，為蛋白質(zhì)分子設(shè)計中的： （）“中改“，”分子剪裁“完全從頭設(shè)計出一種具有特異結(jié)構(gòu)與功能的全新蛋白質(zhì)，為蛋白質(zhì)分子設(shè)計中的：（）“全新蛋白質(zhì)設(shè)計“或”蛋白質(zhì)從頭設(shè)計“下面哪一條不是真核基因在原核中正確表達的必備條件： （ ）第一，克隆到原核表達系統(tǒng)中的序列必須是去掉內(nèi)含子的 cDNA序列；第二，要用原核的啟動子；第三，真核基因可能在表達過程中需要有分子伴侶幫助折疊成正確的構(gòu)象才會有活性；第四，注意控制表達條件，盡量不要形成包涵體。外源基因在大腸桿菌（）高效表達時，常會發(fā)生一種特殊的生理現(xiàn)象，形成包涵體。13由歐洲生物信息學(xué)研究所進行維護和管理的 SWISS-PRO■數(shù)據(jù)庫： （）SWISS-PROT是經(jīng)過注釋的蛋白質(zhì)序 列數(shù)據(jù)庫，由歐洲生物信息學(xué)研究所（EBI）維護。數(shù)據(jù)庫由蛋白質(zhì)序列條目構(gòu)成，每個條目包含蛋白質(zhì)序列、引用文獻信息、分類學(xué)信息、注釋等，注釋中包括蛋白質(zhì)的功能、轉(zhuǎn)錄后修飾、特殊位點和區(qū)域、二級結(jié)構(gòu)、四級結(jié)構(gòu)、與其它序列的相似性、序列殘缺與疾病的關(guān)系、序列變異體和沖突等信息。SWISS-PROT中盡可能減少了冗余序列， 并與其它30多個數(shù)據(jù)建立了交叉引用，其中包括核酸序列庫、 蛋白質(zhì)序列庫和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)庫等。 利用序列提取系統(tǒng)（SRS）可以方便地檢索SWISS-PROT和其它EBI的數(shù)據(jù)庫。SWISS-PROT只接受直接測序獲得的蛋白質(zhì)序列，序列提交可以在其Web頁面上完成。核酸序列數(shù)據(jù)庫GenBank是由： （）美國國立生物技術(shù)信息數(shù)據(jù)庫是由美國國立生物技術(shù)信息 中心（中心（NCBI）維護的一級核酸序列數(shù)據(jù)庫。）維護的一級核酸序列數(shù)據(jù)庫；數(shù)據(jù)庫的數(shù)據(jù)來源有三種 （1）、直接來源于測序工作者提交的序列； （2）、與其它數(shù)據(jù)機構(gòu)協(xié)作交換的數(shù)據(jù)； （3）、美國專利局提供的專利數(shù)據(jù)。通過改變某些條件或添加某種試劑，使酶的溶解度降低，而從溶液中沉淀析出，與其他溶質(zhì)分離的技術(shù)，為：（）（1）鹽析法；（2）等電點沉淀法；（3）有機溶劑沉淀法；（4）非離子型聚合物沉淀法；（5）聚電解質(zhì)沉淀法；（6）親和沉淀法；（7）選擇性沉淀法。酶反應(yīng)器類型很多，不同的反應(yīng)器特點各不相同。對于那些有氣體參與的酶催化反應(yīng)，可選擇：（）鼓泡式反應(yīng)器酶反應(yīng)器類型很多，不同的反應(yīng)器特點各不相同。對于那些產(chǎn)量有限、價格昂貴的酶，酶的回收利用特別重要，可選擇：（）膜式反應(yīng)器16酶反應(yīng)器類型很多，不同的反應(yīng)器特點各不相同。 對于一些耐高溫酶（如耐高溫a-淀粉TOC\o"1-5"\h\z酶），可選擇： （）噴射式反應(yīng)器采用物理吸附法固定化酶有以下特點： （）條件溫和，操作簡便，酶活力損失少采用包埋法固定化酶有以下特點： （）1）固定化酶顆粒小，有利于底物和產(chǎn)物擴散。 2）半透膜能阻止蛋白質(zhì)分子滲漏和進入，注入體內(nèi)既可避免引起免疫過敏反應(yīng)，也可使酶免遭蛋白水解酶的降解，具有較大的醫(yī)學(xué)價值。不與酶蛋白氨基酸殘基反應(yīng)，很少改變酶的高級結(jié)構(gòu)，酶活回收率高。采用共價結(jié)合法固定化酶有以下特點： （）酶與載體結(jié)合牢固，不會輕易脫落，可連續(xù)使用。酶反應(yīng)器與化學(xué)反應(yīng)器和發(fā)酵罐的區(qū)別是： （）見下面采用磷酸鈣共沉淀法將重組載體導(dǎo)入受體細胞的方法屬于： （）轉(zhuǎn)染采用花粉管通道法將重組載體導(dǎo)入受體細胞的方法屬于： （）共轉(zhuǎn)染采用基因槍法將重組載體導(dǎo)入受體細胞的方法屬于： （）基因轉(zhuǎn)移利用免疫學(xué)方法可以篩選重組子，其篩選過程主要是檢測： （）插入基因表達產(chǎn)物與抗體反應(yīng)形成的沉淀圈利用抗藥性方法可以篩選重組子，其篩選過程主要是檢測： （）抗藥基因利用藍白斑方法可以篩選重組子，其篩選過程主要是檢測： （）LacZ基因下列對氨基酸分類正確的是： （）（1）脂肪族氨基酸：①R為烷基的中性氨基酸：甘氨酸Gly、丙氨酸Ala、纈氨酸Vai、亮氨酸Lue、亮氨酸Lue;②R基含羥基或硫的氨基酸：絲氨酸（Ser）、蘇氨酸（Thr）、半胱氨酸（Cys）、甲硫氨酸（Met）；③R基中含有羧基或酰胺的氨基酸：天冬氨酸 （Asp）、谷氨酸（Glu）、天冬酰胺（Asn）、谷氨酰胺（Gln）:④R基中含有氨基或亞氨基的氨基酸：賴氨酸（Lys）、精氨酸（Arg）、組氨酸（His）；（2）芳香族氨基酸：苯丙氨酸（ Phe,F）、苯丙氨酸（Phe,F）、色氨酸（Trp,W）;（3）雜環(huán)氨基酸：組氨酸（His,H）、脯氨酸（Pro,P）（4）脯氨酸（亞氨基酸）下列哪項稱述是錯誤的：

四?名詞解釋：生物信息學(xué)：是研究生物信息的采集，處理，存儲，傳播，分析和解釋等各方面的一門學(xué)科，它通過綜合利用生物學(xué)，計算機科學(xué)和信息技術(shù)而揭示大量而復(fù)雜的生物數(shù)據(jù)所賦有的生物學(xué)奧秘。定點突變：是指通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR等方法對已知的目的基因 DNA片段進行堿基的添加、刪除、點突變等，從而改變對應(yīng)的氨基酸序列和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)的化學(xué)修飾：凡通過活性基團的引入或除去，而使蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)發(fā)生改變的過程基因融合技術(shù)：是將不同的基因連接起來從而表達具有復(fù)合功能的融合蛋白報告基因：是指一組編碼易被檢測的蛋白質(zhì)或酶的基因，將其與目的基因融合表達后，可通過報告基因產(chǎn)物的表達來“報告”目的基因的表達調(diào)控。蛋白質(zhì)芯片：是一種高通量的蛋白功能分析技術(shù)， 可用于蛋白質(zhì)表達譜分析， 研究蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用，甚至 DNA-蛋白質(zhì)、RNA-蛋白質(zhì)的相互作用，篩選藥物作用的蛋白靶點等。7?噬菌體展示技術(shù)：是一種基因表達產(chǎn)物和親和選擇相結(jié)合的技術(shù)，以改構(gòu)的噬菌體為載體，把待選基因片段定向插入噬菌體外殼蛋白質(zhì)基因區(qū)， 使外源多肽或蛋白質(zhì)表達并展示于噬菌體表面，再通過親和富集法表達有特異肽或蛋白質(zhì)的噬菌體。細菌表面展示技術(shù)： 運用DNA重組技術(shù)在噬菌體、細菌、真菌、病毒等微生物表面呈現(xiàn)外源蛋白和多肽。酵母表面展示技術(shù)：是將外源靶蛋白基因與特定的載體基因序列融合后導(dǎo)入到酵母細胞，利用酵母細胞內(nèi)蛋白轉(zhuǎn)運到膜表面的機制使靶蛋白固定化表達在酵母表面。蛋白質(zhì)組：指由一個基因組（genOME）,或一個細胞、組織表達的所有蛋白質(zhì)（PROTein）.11蛋白質(zhì)組的時空性：DNA通常位于細胞核內(nèi)，且保持穩(wěn)定，因此測定基因組的 DNA序列不受時空的影響。12二維凝膠電泳技術(shù)：是指建立等電聚焦/SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（IEF/SDS分離和分析蛋白質(zhì)組分的技術(shù)。13酶反應(yīng)器：用于酶進行催化反應(yīng)的容器及其附屬設(shè)備14酶傳感器：以酶作為分子識別元件上的敏感材料，同各種不同的轉(zhuǎn)換器結(jié)合所構(gòu)成的一類生物傳感器15固定化酶：用物理或化學(xué)手段定位在限定的空間區(qū)域， 并使其保持催化活性，可重復(fù)利用的酶。16固定化細胞：將具有一定生理功能的生物細胞（如微生物細胞、植物細胞或動物細胞等）用一定的方法將其固定，作為固體生物催化劑而加以利用的一門技術(shù)。17傳感器：能感受（或響應(yīng)）一種信息并變換成可測量信號（一般指電學(xué)量）的器件DNA激素）或生物體本身（細胞、DNA在體外人工連接，構(gòu)建成遺傳物質(zhì)和狀態(tài)的轉(zhuǎn)移和重新18生物傳感器：將生物體的成份（酶、抗原、抗體、細胞器、組織）固定化在一器件上作為敏感元件的傳感器。20DNA激素）或生物體本身（細胞、DNA在體外人工連接，構(gòu)建成遺傳物質(zhì)和狀態(tài)的轉(zhuǎn)移和重新21融合酶：指一條多肽鏈上含有 2種或2種以上催化活性的酶。22蛋白質(zhì)工程：通過基因工程技術(shù)或化學(xué)修飾技術(shù)改造現(xiàn)有蛋白或組建新型蛋白的現(xiàn)代生物技術(shù)。23酶工程：是將酶或者微生物細胞，動植物細胞，細胞器等在一定的生物反應(yīng)裝置中， 利用酶所具有的生物催化功能，借助工程手段將相應(yīng)的原料轉(zhuǎn)化成有用物質(zhì)并應(yīng)用于社會生活的一門科學(xué)技術(shù)。肽鍵：一個氨基酸的x—NH2與另一個氨基酸的x—COOHI合脫去一分子水，可以形成一個共價酰胺鍵。蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)：指肽鏈主鏈不同區(qū)段通過自身的相互作用，形成氫鍵，沿某一主軸盤旋折疊而形成的局部空間結(jié)構(gòu)，是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的構(gòu)象單元．蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)域：對于較大的蛋白質(zhì)分子或亞基，多肽鏈往往由兩個或兩個以上相對獨立的三維實體締合而成三級結(jié)構(gòu)，這種相對獨立的三維實體稱結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)變性：天然蛋白質(zhì)分子受到某些物理因素或化學(xué)因素的影響時， 會引起蛋白質(zhì)天然構(gòu)象的破壞，導(dǎo)致生物活性的降低或完全喪失。蛋白質(zhì)復(fù)性：當(dāng)變性因素去除后，變性蛋白又可以恢復(fù)到天然構(gòu)象。分子伴侶：是一類相互之間有關(guān)系的蛋白，它們的功能是幫助其他含多肽結(jié)構(gòu)的物質(zhì)在體內(nèi)進行非共價健的組裝和卸裝，但不是這些結(jié)構(gòu)在發(fā)揮其正常生物學(xué)功能的永久組成成分（從功能上定義）。第二遺傳密碼：氨基酸順序與蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)之間存在著對應(yīng)的關(guān)系。生物柴油：以動植物油脂為原料，用甲醇或乙醇在催化劑作用下經(jīng)脂交換制成的柴油。五．簡答題：蛋白質(zhì)化學(xué)修飾的反應(yīng)類型有哪些？主要修飾部位是什么？（1）巰基的化學(xué)修飾，半胱氨酸的巰基； （2）氨基的化學(xué)修飾；賴氨酸、精氨酸、組氨酸和谷氨酰胺的氨基；（3）羧基的化學(xué)修飾，天冬氨酸和谷氨酸的羧基；（4）二硫鍵的化學(xué)修飾，二硫鍵。基因突變的種類有幾種？各自的特點是什么？（1）定點突變，特點：突變位點是確定的、突變的個數(shù)也是預(yù)知的、突變的效應(yīng)往往是未知的、定點突變的方法一般是以 PCR技術(shù)為基礎(chǔ)的；（2）定向突變，特點：突變位點是隨機的，不確定的、突變位點的數(shù)目也是不確定的、突變的效應(yīng)更是不可預(yù)知的。為什么要發(fā)展基因融合技術(shù)？利于回收（衍生因子之一為親和標(biāo)簽） ；②產(chǎn)生新的多功能蛋白；③利于檢查和產(chǎn)物定位；④避免產(chǎn)物的快速溶解；⑤防止包涵體的形成；⑥外源蛋白定位在宿主的不同區(qū)段；⑦融合蛋白再體外切割提高產(chǎn)量穩(wěn)定性；⑧研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。簡述大腸桿菌表達外源基因的優(yōu)勢與不足。優(yōu)勢：全基因組測序，遺傳背景清楚；基因克隆表達系統(tǒng)成熟完善；繁殖迅速、培養(yǎng)簡單、操作方便、遺傳穩(wěn)定；被美國FDA批準(zhǔn)為安全的基因工程受體生物。 劣勢：缺乏對真核生物蛋白質(zhì)的復(fù)性功能；缺乏對真核生物蛋白質(zhì)的修飾加工系統(tǒng)；內(nèi)源性蛋白酶降解空間構(gòu)象不正確的異源蛋白；細胞質(zhì)內(nèi)含有種類繁多的內(nèi)毒素。蛋白質(zhì)芯片技術(shù)有什么特點，有哪些具體應(yīng)用？特點：①快速、定量分析大量蛋白質(zhì)；②使用簡單，結(jié)果正確率較高，只需要血樣標(biāo)本即可進行分析和檢測；③采用光敏染料標(biāo)記，靈敏度高，準(zhǔn)確性好；④所需試劑少，可直接應(yīng)用血清樣本，便于診斷，實用性強；⑤穩(wěn)定性差及操作復(fù)雜等。應(yīng)用：①基礎(chǔ)研究；②臨床；③新藥研制；④環(huán)境監(jiān)測及食品檢驗。如何理解酵母雙雜交系統(tǒng)的原理？舉例說明其在蛋白質(zhì)相互作用研究中的應(yīng)用。將DNA-BD與已知的誘餌蛋白質(zhì)X融合，構(gòu)建出BD-X質(zhì)粒載體；將AD基因與cDNA文庫,基因片段或基因突變體（以Y表示）融合，構(gòu)建出AD—Y質(zhì)粒載體。利用雜交基因通過激活報道基因的表達探測蛋白 蛋白的相互作用。利用酵母雙雜交技術(shù)發(fā)現(xiàn)新的蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)的新功能、研究抗原與抗體的相互作用、篩選藥物的作用位點以及藥物對蛋白質(zhì)之間的相互作用。7細胞破碎的方法有哪些？原理是什么？①機械破碎，通過機械運動產(chǎn)生的剪切力，使組織、細胞破碎；②物理破碎，通過各種物理因素的作用，使組織、細胞的外層結(jié)構(gòu)破壞，而使細胞破碎；③化學(xué)破碎，通過各種化學(xué)試劑對細胞膜的作用，而使細胞破碎；④酶促破碎，通過細胞本身的酶系或外加酶制劑的催化作用，使細胞外層結(jié)構(gòu)受到破壞，而達到細胞破碎。8酶反應(yīng)器與化學(xué)反應(yīng)器和發(fā)酵罐有何區(qū)別？①在常溫常壓下操作，但要求能耐受蒸汽滅菌， 制作嚴(yán)密無隙以防染菌， 且用對微生物或酶無毒害的材質(zhì)制作；②當(dāng)用微生物為催化劑時，催化劑本身是在發(fā)酵罐中產(chǎn)生的 （開始時需接入菌種），為防止雜菌污染和活性衰退，一般采用分批釜式反應(yīng)器；③酶常因底物（即酶的作用物）的濃度過高發(fā)生抑制作用，微生物細胞因胞內(nèi)外滲透壓平衡問題， 要求底物濃度也不能太高，因而反應(yīng)器體積相當(dāng)龐大；④在發(fā)酵過程中，生化反應(yīng)機理和途徑相當(dāng)復(fù)雜，有的尚不清楚，很難進行的計算及的研究，加上反應(yīng)時常是氣、液、固三相并存，有的反應(yīng)液粘度很大，流變學(xué)性質(zhì)復(fù)雜，對反應(yīng)器中物料的和傳遞帶來不利， 使采用的原理和方法解決生物反應(yīng)器的設(shè)計放大問題存在較大困難。9試分析攪拌罐式反應(yīng)器的優(yōu)缺點。優(yōu)點：結(jié)構(gòu)簡單、造價低廉；內(nèi)容物充分混勻、反應(yīng)比較完全；反應(yīng)條件容易調(diào)節(jié)控制。缺點：攪拌漿剪切力大，易打碎磨損固定化酶顆粒。10試分析固定床式反應(yīng)器的優(yōu)缺點。優(yōu)點：單位體積內(nèi)酶含量較多，催化效率高；易操作、結(jié)構(gòu)簡單；適合固定化酶的應(yīng)用。缺點：只適合可溶性底物；溫度和 pH難以控制；底物和產(chǎn)物會產(chǎn)生軸向濃度分布；傳熱系數(shù)相對較低。11試分析膜式反應(yīng)器的優(yōu)缺點。優(yōu)點：有利于游離酶的回收利用；減少產(chǎn)物的抑制作用；提高大分子底物的轉(zhuǎn)化效率； 壓降小、酶的更換容易、容易放大生產(chǎn)。缺點：單位體積內(nèi)催化劑的有效面積?。恢圃斐杀鞠鄬^咼。12.簡述酶反應(yīng)器設(shè)計的一般步驟。（1）確定酶反應(yīng)器的類型；（2）生產(chǎn)工藝參數(shù)及技術(shù)指標(biāo)的確定； （3）物料平衡計算；（4）熱量平衡計算；（5）設(shè)備材料的選擇；（6）反應(yīng)器結(jié)構(gòu)設(shè)計；（7）反應(yīng)器數(shù)目設(shè)計13什么是酶基因的克隆，其基本步驟有哪些？①酶基因的獲得；②載體的選擇；③酶基因與載體分子的體外連接反應(yīng)；④將人工重組 DNA分子導(dǎo)入到能夠正常復(fù)制的宿主細胞中；⑤重組子的鑒定和篩選。14原核生物基因表達系統(tǒng)有什么特點？①原核生物大多數(shù)為單細胞異養(yǎng)， 生長快，代謝易于控制，可通過發(fā)酵迅速獲得大量基因表達產(chǎn)物。②基因組結(jié)構(gòu)簡單，便于基因操作和分析。 ③多數(shù)原核生物細胞內(nèi)含有質(zhì)?；蚴删w，便于構(gòu)建相應(yīng)的表達載體。 ④生理代謝途徑及基因表達調(diào)控機制比較清楚。 ⑤不具備真核生物的蛋白質(zhì)加工系統(tǒng)，表達產(chǎn)物無特定的空間構(gòu)象。 ⑥內(nèi)源蛋白酶會降解表達的外源蛋白，造成表達產(chǎn)物的不穩(wěn)定性。15在酶基因的克隆過程中，對理想的克隆載體要求是：①分子較小，可攜帶比較大的DNA片段； ②能獨立于染色體而進行自主復(fù)制并且是高效的復(fù)制；③要有盡可能多種限制酶的切割位點， 但每一種限制酶又要最少的切割位點 （多克隆位點multiplecloningsites,MCS;④有適合的標(biāo)記，易于選擇；⑤有時還要求載體要能啟動外源基因進行轉(zhuǎn)錄及表達， 并且盡可能是高效的表達； ⑥從安全角度考慮，要求載體不能隨便轉(zhuǎn)移，僅限于在某些實驗室內(nèi)特殊菌種內(nèi)才可復(fù)制等等。16簡述蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能：①酶的作用；②運載作用；③存營養(yǎng)素；④收縮或運動作用；⑤結(jié)構(gòu)材料；⑥防御功能；⑦調(diào)節(jié)功能；⑧緩沖作用。17簡述蛋白質(zhì)工程的程序。篩選純化需改造的目的蛋白T研究其特性常數(shù)等T制備結(jié)晶， 分析研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能T結(jié)合生物信息學(xué)對蛋白質(zhì)改造、 分析T預(yù)測蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)，確定結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系，找出可修飾的位點和途徑t設(shè)計核酸引物或探針，并從 cDNA文庫或基因文庫中獲取編碼該蛋白質(zhì)的基因序列t改造編碼蛋白質(zhì)的基因序列， 并在不同的表達系統(tǒng)中表達t分離純化表達產(chǎn)物，對表達產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)和功能進行檢測簡述多肽鏈氨基酸序列的Sanger測定方法。(1)測定蛋白質(zhì)分子中多肽鏈數(shù)目；(2)拆分蛋白質(zhì)的多肽鏈，斷開多肽鏈內(nèi)二硫鍵；(3)分析每一條多肽鏈的氨基酸組成； (4)鑒定多肽鏈N-末端、C-末端氨基酸殘基；(5)裂解多肽鏈成較小的片段；(6)測定各肽段的氨基酸順序；(7)片段重疊法重建完整多肽鏈一級結(jié)構(gòu)；(8)確定半胱氨酸殘基間形成二硫鍵交聯(lián)橋的位置。簡要敘述酶非水相催化的幾種類型。①有機介質(zhì)中的酶催化；②氣相介質(zhì)中的酶催化；③超臨界介質(zhì)中的酶催化簡要敘述單相共溶劑體系(水/水溶性有機溶劑)中酶促反應(yīng)特點。酶和底物都是以溶解狀態(tài)存在于均一體系中。不存在傳質(zhì)阻礙，但由于極性大的有機溶劑對一般酶的催化活性影響較大，所以能在該反應(yīng)體系的進行催化反應(yīng)的酶較少。簡要敘述兩相體系(水/水不溶性有機溶劑)中酶促反應(yīng)特點。游離酶、親水性底物或產(chǎn)物溶解于水相，疏水性底物或產(chǎn)物溶解于有機溶劑相；催化反應(yīng)通常在兩相的界面進行。一般適用于底物和產(chǎn)物兩者或其中一種是屬于疏水化合物的催化反應(yīng)。簡要敘述(正)膠束體系中酶促反應(yīng)特點。表面活性劑的極性端朝外，非極性端朝內(nèi)，有機溶劑包在液滴內(nèi)部；反應(yīng)時，酶在膠束外面的水溶液中，疏水性的底物或產(chǎn)物在膠束內(nèi)部。反應(yīng)在膠束的兩相界面中進行。簡要敘述有機介質(zhì)中酶催化的優(yōu)點。①有利于疏水性底物的反應(yīng)；②能催化在水中不能進行的反應(yīng)；③可改變反應(yīng)平衡移動方向；④可控制底物專一性；⑤可防止由水引起的副反應(yīng)；⑥酶易于實現(xiàn)固定化；