核苷酸代謝及DNA的生物合成課件

1教學(xué)目標(biāo)掌握：嘌呤環(huán)與嘧啶環(huán)上各原子來源熟悉：核酸的降解過程以及參與降解的酶類人體內(nèi)嘌呤的分解過程嘌呤核苷酸的從頭合成途徑了解:

嘧啶的分解與合成途徑第十二章核酸與核苷酸代謝1教學(xué)目標(biāo)掌握：嘌呤環(huán)與嘧啶環(huán)上各原子來源第十二章核酸1第一節(jié)核酸的分解代謝第一節(jié)核酸的分解代謝2核酸分解簡圖核酸核苷酸核酸酶（磷酸二酯酶）核苷酸酶（磷酸單酯酶）核苷磷酸核苷酶戊糖堿基堿基磷酸戊糖核苷磷酸化酶磷酸酶戊糖磷酸核酸分解簡圖核酸核苷酸核酸酶（磷酸二酯酶）核苷酸酶（磷酸單酯3一、核酸酶(nuclease)根據(jù)底物類型分類

DNA酶（Dnase）：水解DNARNA酶（RNase）：水解RNA根據(jù)作用位點(diǎn)分類核酸內(nèi)切酶：水解核酸分子內(nèi)部的磷酸二酯鍵核酸外切酶：從核酸鏈的一端逐個水解核苷酸一、核酸酶(nuclease)根據(jù)底物類型分類45′

p

p

p

pOHPyPuPyPy1′

p

p

pGACU

p

p

pGA3′RNaseT1RNaseARNaseT1作用于鳥苷酸3’端磷酸

RNaseA作用于胞苷酸和尿苷酸3’端磷酸

1.核酸內(nèi)切酶（1）RNase

作用于RNA內(nèi)部的磷酸二酯鍵5′ppppOHPyPuPyPy1′pppGA55′

p

p

p

pOHPyPuPyPy1′

p

p

pGACT

p

p

pGA3′DNaseⅠ（2）DNaseDNaseⅠ：真核生物，水解雙鏈或單鏈DNA。限制性DNA內(nèi)切酶：原核生物抵御病毒入侵的利器5′ppppOHPyPuPyPy1′pppGA6核苷酸代謝及DNA的生物合成課件7核苷酸代謝及DNA的生物合成課件81.嘌呤的分解（氧化脫氨）

靈長類、鳥類、爬行類和昆蟲體內(nèi)嘌呤降解的終產(chǎn)物是尿酸。人體內(nèi)腺嘌呤的分解∶腺嘌呤核苷經(jīng)脫氨酶及核苷磷酸化酶作用分解成次黃嘌呤;次黃嘌呤再經(jīng)黃嘌呤氧化酶的作用轉(zhuǎn)變成尿酸。1.嘌呤的分解（氧化脫氨）靈長類、鳥類、爬行類和昆蟲體內(nèi)9人體內(nèi)人體內(nèi)10代謝產(chǎn)物動物尿酸靈長類、鳥類、爬行類、昆蟲尿囊素除靈長類外其它哺乳類動物尿囊酸某些硬骨魚類尿素、乙醛酸大多數(shù)魚類、兩棲類動物氨、二氧化碳甲殼類動物、軟體動物代謝產(chǎn)物動物尿酸靈長類、鳥類、爬行類、昆蟲尿囊素除靈長類外其11小知識小知識122.嘧啶的分解(還原降解)

胞嘧啶首先脫氨轉(zhuǎn)變成尿嘧啶。尿嘧啶經(jīng)還原、開環(huán)水解，最后生成氨、CO2和β-丙氨酸，β-丙氨酸經(jīng)轉(zhuǎn)氨作用脫去氨基后可參加有機(jī)酸代謝。2.嘧啶的分解(還原降解)胞嘧啶首先脫氨轉(zhuǎn)變成尿嘧啶13UCT乙酰CoA琥珀酰CoAUCT乙酰CoA琥珀酰CoA14一.嘌呤核苷酸的合成代謝I.

從頭合成途徑磷酸核糖aa一碳單位CO2

嘌呤核苷酸（肝）酶第二節(jié)核苷酸的生物合成一.嘌呤核苷酸的合成代謝I.從頭合成途徑嘌呤核苷酸酶第二節(jié)15II．補(bǔ)救合成途徑游離的嘌呤PRPP(5-磷酸核糖-1-焦磷酸

)嘌呤核苷酸(腦、骨髓)II．補(bǔ)救合成途徑嘌呤核苷酸16N1―-----AspC2、C8---N10-甲酰

FH4N3、N9---GlnC6―-----CO2C4,5,7---Gly嘌呤核苷酸的從頭合成途徑(1)原料:N1―-----Asp嘌呤核苷酸的從頭合成途徑(1)原料:17來源磷酸戊糖途徑

核酸降解

ATPAMP*5-磷酸核糖5-磷酸核糖-1-磷酸磷酸核糖焦磷酸激酶

(PRPP合成酶)(2)磷酸戊糖---活性形式:PRPP來源磷酸戊糖途徑(2)磷酸戊糖---活18(3)過程:胞漿①在PRPP的基礎(chǔ)上,逐步加上簡單原料而形成嘌呤核苷酸(11步反應(yīng))②IMP是重要的中間產(chǎn)物，AMP、GMP的前體第一階段:IMP的合成，在PRPP的基礎(chǔ)上，逐步加上嘌呤環(huán)合成所需的原料，合成IMP（次黃嘌呤）(3)過程:胞漿19定向步驟,重要酶第一階段:IMP生成定向步驟,重要酶第一階段:IMP生成20第二階段:AMP、GMP生成重要的中間產(chǎn)物AMP、GMP的前體第二階段:AMP、GMP生成重要的中間產(chǎn)物21*核苷三磷酸-------核酸合成的底物

激酶

激酶AMPADPATP

ATPADPATPADP

激酶

激酶GMPGDPGTP

ATPADPATPADP*核苷三磷酸-------核酸合成的底物22腦、骨髓內(nèi)缺乏有關(guān)合成酶，因此只能采用補(bǔ)救合成。

補(bǔ)救合成（salvagepathway）*APRT腺嘌呤

+PRPPAMP+PPI

*HGPRT次黃嘌呤

+PRPPIMP+PPI

HGPRT鳥嘌呤

+PRPPGMP+PPI

HGPRT缺乏-----自毀容貌癥（leschNyhan綜合癥）腦、骨髓內(nèi)缺乏有關(guān)合成酶，因此只能采用補(bǔ)救合成。補(bǔ)救合23嘧啶核苷酸的從頭合成途徑二.嘧啶核苷酸的合成代謝1.元素來源嘧啶核苷酸的從頭合成途徑二.嘧啶核苷酸的合成代謝1.元素來242.過程：肝細(xì)胞*特點(diǎn)：（1）合成嘧啶環(huán)的基礎(chǔ)上，再加上PRPP（2）UMP是CTP與dTMP的共同前體*第一步：UMP的合成*第二步：UTP、CTP的合成2.過程：肝細(xì)胞25UMPGInGIuUMPGInGIu26教學(xué)目標(biāo)掌握：半保留復(fù)制、半不連續(xù)復(fù)制、岡崎片段、前導(dǎo)鏈、隨從鏈等基本概念；突變的分類熟悉：復(fù)制的基本過程；參與DNA復(fù)制過程的各種酶的特點(diǎn)及作用；損傷修復(fù)的類型；突變的后果。了解：DNA損傷修復(fù)的過程、單核苷酸多態(tài)性第十四章DNA的復(fù)制與修復(fù)教學(xué)目標(biāo)掌握：半保留復(fù)制、半不連續(xù)復(fù)制、岡崎片段、前導(dǎo)鏈、隨27第一節(jié)DNA復(fù)制DNA的半保留復(fù)制

DNA復(fù)制的半不連續(xù)性原核生物的DNA復(fù)制(E.coli)

真核生物的DNA復(fù)制第一節(jié)DNA復(fù)制DNA的半保留復(fù)制28復(fù)制（replication）：以親代DNA或RNA為模板，根據(jù)堿基配對的原則，在一系列酶的作用下，生成與親代相同的子代DNA或RNA的過程復(fù)制子（Replicon）：含有一定復(fù)制起點(diǎn)和復(fù)制終點(diǎn)的復(fù)制單位?；靖拍顝?fù)制（replication）：以親代DNA或RNA為模板，29DNA復(fù)制在細(xì)胞周期的S期DNA復(fù)制在細(xì)胞周期的S期30一、DNA的復(fù)制特點(diǎn)（一）半保留復(fù)制(semi-conservativereplication)DNA在復(fù)制時，以親代DNA的每一股作模板，合成完全相同的兩個雙鏈子代DNA，每個子代DNA中都含有一股親代DNA鏈。1958Meselson-stahl設(shè)計(jì)的N15標(biāo)記結(jié)合CsCl密度梯度離心試驗(yàn)證實(shí)了DNA復(fù)制的這一特性一、DNA的復(fù)制特點(diǎn)31·

細(xì)胞生長在15N標(biāo)記培養(yǎng)基中·

轉(zhuǎn)入正常N源培養(yǎng)基中·

分離各代DNA·

分析各代DNA的浮力密度15N標(biāo)記DNA未標(biāo)記DNADNA類型

浮力密度

N15－DNA1.742g/mlN15－N14－DNA1.717g/mlN14－DNA1.710g/ml15N標(biāo)記實(shí)驗(yàn)·細(xì)胞生長在15N標(biāo)記培養(yǎng)基中15N標(biāo)記DNA未標(biāo)32DNA的半保留復(fù)制的生物學(xué)意義DNA的半保留復(fù)制表明DNA在代謝上的穩(wěn)定性，是保證親代的遺傳信息穩(wěn)定地傳遞給后代的必要措施。DNA的半保留復(fù)制的生物學(xué)意義DNA的半保留復(fù)制表明DNA在33

（二）、復(fù)制原點(diǎn)、方向和方式1、復(fù)制原點(diǎn)、復(fù)制子

DNA的復(fù)制有特定的起始位點(diǎn)，稱為復(fù)制原點(diǎn)，常用ori表示。從復(fù)制原點(diǎn)到復(fù)制終點(diǎn)，組成一個復(fù)制單位，稱為復(fù)制子。

原核生物：單復(fù)制起點(diǎn)，即整個染色體只有一個復(fù)制單位（二）、復(fù)制原點(diǎn)、方向和方式1、復(fù)制原點(diǎn)、復(fù)制子34真核生物（Eukaryote）:多復(fù)制起點(diǎn)，即一個genome中有多個復(fù)制單位真核生物（Eukaryote）:多復(fù)制起點(diǎn)，35復(fù)制起點(diǎn)是以一條鏈為模板起始DNA合成的一段序列。兩條鏈的復(fù)制起點(diǎn)不一定在同一點(diǎn)上，如不對稱復(fù)制。多數(shù)生物的復(fù)制起點(diǎn)，都是DNA呼吸作用（配對堿基之間的氫鍵持續(xù)斷裂和再生的過程）強(qiáng)烈的區(qū)段，即經(jīng)常開放的區(qū)段，富含AT。在一個完整的細(xì)胞周期中，每一個復(fù)制起點(diǎn)只使用一次，完成一次復(fù)制過程。復(fù)制起點(diǎn)是以一條鏈為模板起始DNA合成的一段序列。兩條鏈的復(fù)36復(fù)制叉（Replicationfork）：染色體中參與復(fù)制的活性區(qū)域，即復(fù)制正在發(fā)生的位點(diǎn)

復(fù)制眼（replicationeye）：電子顯微鏡下觀察正在復(fù)制的DNA，復(fù)制的區(qū)域形如一只眼睛

2、復(fù)制方向復(fù)制叉（Replicationfork）：染色體中參與復(fù)37真核生物的多復(fù)制子多個復(fù)制眼真核生物的多復(fù)制子多個復(fù)制眼38

單雙向復(fù)制取決于起點(diǎn)處有一個還是兩個復(fù)制叉

單向復(fù)制

雙向復(fù)制單雙向復(fù)制取決于起點(diǎn)處有一個還是兩個復(fù)制叉單向復(fù)制393、原核生物DNA復(fù)制方式大多數(shù)以對稱方式進(jìn)行—即兩條鏈同時復(fù)制，也有一定時期內(nèi)DNA只復(fù)制一條鏈的情況（1）從頭起始

a.θ復(fù)制（E.coli,λphage，某些病毒）雙鏈環(huán)狀DNA的復(fù)制眼可以形成一種θ結(jié)構(gòu)，形狀像希臘字母θ3、原核生物DNA復(fù)制方式大多數(shù)以對稱方式進(jìn)行—即兩條鏈同40核苷酸代謝及DNA的生物合成課件41b.D環(huán)復(fù)制

不對稱復(fù)制，線粒體和葉綠體DNA

的復(fù)制。b.D環(huán)復(fù)制42（2）共價延伸方式（滾環(huán)式復(fù)制）由于復(fù)制時產(chǎn)生的滾環(huán)結(jié)構(gòu)形狀象σ，又稱σ復(fù)制

M13,T2phage等病毒、細(xì)菌因子

（2）共價延伸方式43（三）半不連續(xù)復(fù)制

由于DNA聚合酶只能以5'→3'方向聚合子代DNA鏈，即模板DNA鏈的方向必須為3'→5'。因此，分別以兩條親代DNA鏈作為模板聚合子代DNA鏈時的方式是不同的。（三）半不連續(xù)復(fù)制由于DNA聚合酶只能以5'→3'方向聚44以3'→5'方向的親代DNA鏈作模板的子代鏈在復(fù)制時基本上是連續(xù)進(jìn)行的，其子代鏈的聚合方向?yàn)?'→3'，這一條鏈被稱為前導(dǎo)鏈(leadingstrand)。以5'→3'方向的親代DNA鏈為模板的子代鏈在復(fù)制時則是不連續(xù)的，其鏈的聚合方向也是5'→3'，這條鏈被稱為隨從鏈或滯后鏈(laggingstrand)。以3'→5'方向的親代DNA鏈作模板的子代鏈在復(fù)制時基本上是45岡崎片段（Okazakifragment）：DNA復(fù)制時，一條以5'→3'方向的母鏈作為模板，指導(dǎo)新合成的鏈沿5'→3'合成不連續(xù)的小片段。崗崎片段由DNA連接酶連成一條完整的新鏈。岡崎片段的大小:在原核生物中約為1000～2000個核苷酸，而在真核生物中約為100個核苷酸。岡崎片段（Okazakifragment）：DNA復(fù)制時，465'3'

前導(dǎo)鏈隨從鏈崗崎片段5'3'3'3'3'3'5'5'5'5'5'3'前導(dǎo)鏈隨從鏈崗崎片段5'3'3'3'3'3'5'547二、參與DNA復(fù)制的酶和蛋白因子

名稱

功能DnaA蛋白辯認(rèn)起始點(diǎn)解螺旋酶(DnaB蛋白,rep蛋白）解開DNA雙鏈DnaC蛋白協(xié)助解螺旋酶引物酶(DnaG蛋白)催化RNA引物合成SSB（單鏈結(jié)合蛋白）穩(wěn)定解開的單鏈拓?fù)洚悩?gòu)酶理順DNA鏈DNA聚合酶復(fù)制、填補(bǔ)缺口、校正錯誤DNA連接酶連接岡崎片段二、參與DNA復(fù)制的酶和蛋白因子名稱功能D481.DNA聚合酶原料：四種dNTPs（dATP、dGTP、dCTP、dTTP)模板：以DNA為模板鏈，合成子代DNA，模板可以是雙鏈，也可以是單鏈DNA。合成產(chǎn)物與模板互補(bǔ)。引物：一小段RNA(或DNA）為引物，在大腸桿菌中，DNA的合成需要一段RNA鏈作為引物，引物含3'-OH.合成方向：531.DNA聚合酶原料：四種dNTPs（dATP、dGTP、495'→3'聚合酶活性（但持續(xù)合成DNA的能力差）；3'→5'外切酶活性；5'→3'外切酶活性（雙鏈DNA或DNA:RNA雜交體）（1）E.coliDNA聚合酶

(a)DNA聚合酶Ⅰ（單體多功能酶）該酶主要是對DNA損傷的修復(fù)，以及在DNA復(fù)制時RNA引物切除及其缺口的填補(bǔ)。5'→3'聚合酶活性（但持續(xù)合成DNA的能力差）；（1）E50(b)DNA聚合酶Ⅱ(多亞基酶)具有3'→5'外切酶活性聚合活力比DNA聚合酶Ⅰ高(持續(xù)合成DNA的能力差)可能在修復(fù)紫外光引起的DNA損傷中起作用。(b)DNA聚合酶Ⅱ(多亞基酶)具有3'→5'外切酶活性可51(c)DNA聚合酶Ⅲ多亞基酶（10種亞基）（αεθ）稱為核心酶，β2稱為夾子，（γ2δδ’χΨ）組成γ復(fù)合物，其主要功能是幫助β亞基夾住DNA，故稱為夾子裝配器;該酶DNA合成的持續(xù)能力強(qiáng)，主要與該結(jié)構(gòu)有關(guān);該酶是DNA的真正復(fù)制酶。(c)DNA聚合酶Ⅲ多亞基酶（10種亞基）52核苷酸代謝及DNA的生物合成課件53在真核生物中，目前發(fā)現(xiàn)的DNA聚合酶有五種，分別命名為聚合酶α（polα），聚合酶β（polβ），聚合酶γ（polγ），聚合酶δ（polδ），聚合酶ε（polε）。其中，參與染色體DNA復(fù)制的是polα（延長隨從鏈）和polδ（延長前導(dǎo)鏈），參與線粒體DNA復(fù)制的是polγ，polε與DNA損傷修復(fù)、校讀和填補(bǔ)缺口有關(guān)，polβ只在其他聚合酶無活性時才發(fā)揮作用。(2)真核細(xì)胞DNA聚合酶在真核生物中，目前發(fā)現(xiàn)的DNA聚合酶有五種，分別命名為聚合酶543'5'

5'3'2.DNA連接酶(DNAligase)若雙鏈DNA中一條鏈有切口，切口一端是3‘-OH，另一端是5’-Pi，DNA連接酶可催化二者之間形成磷酸二酯鍵，從而使切口連接起來。不能連接兩條游離的DNA單鏈OHPi3'55需要消耗能量，在原核生物中由NAD+供能，在真核生物中由ATP供能。在DNA復(fù)制、損傷修復(fù)、重組等過程中起重要作用。T4噬菌體DNA連接酶不僅能連接接口，還能連接平頭雙鏈DNA。需要消耗能量，在原核生物中由NAD+供能，在真核生物中由AT563.拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶I：使DNA一條鏈發(fā)生斷裂和再連接，以解開負(fù)超螺旋，同轉(zhuǎn)錄有關(guān)。拓?fù)洚悩?gòu)酶II：使DNA兩條鏈發(fā)生斷裂和再連接，可以引入負(fù)超螺旋，同復(fù)制有關(guān)。3.拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶I：使DNA一條鏈發(fā)生斷裂和再連接574.解螺旋酶（解鏈酶）

通過水解ATP將DNA兩條鏈打開。E.coli中的

rep蛋白就是解螺旋酶，還有解螺旋酶I、II、

III。每解開一對堿基需要水解2個ATP分子。

穩(wěn)定DNA解開的單鏈，防止復(fù)性和保護(hù)單鏈部分不被核酸酶水解。5.單鏈結(jié)合蛋白4.解螺旋酶（解鏈酶）通過水解ATP將DNA兩條58思考題：為什么使用RNA作引物？6.引物合成酶與引發(fā)前體

引物合成酶（引發(fā)酶）：此酶以DNA為模板合成一段RNA，這一段RNA作為合成DNA的引物。實(shí)質(zhì)是以DNA為模板的RNA聚合酶。

引發(fā)前體:它由多種蛋白質(zhì)dnaA、dnaB、dnaC、n、n'、n''和i組成。引發(fā)前體再與引發(fā)酶結(jié)合組裝成引發(fā)體。思考題：為什么使用RNA作引物？6.引物合成酶與引發(fā)前體59三、DNA的復(fù)制過程三、DNA的復(fù)制過程60（一）復(fù)制的起始

1.預(yù)引發(fā)（1）解旋解鏈，形成復(fù)制叉：由拓?fù)洚悩?gòu)酶和解鏈酶作用，使DNA的超螺旋及雙螺旋結(jié)構(gòu)解開，堿基間氫鍵斷裂，形成兩條單鏈DNA。單鏈DNA結(jié)合蛋白（SSB）結(jié)合在兩條單鏈DNA上，形成復(fù)制叉。（一）復(fù)制的起始61（2）引發(fā)體組裝：由蛋白因子（如dnaB等）識別復(fù)制起始點(diǎn)，并與其他蛋白因子以及引物酶一起組裝形成引發(fā)體。

2.引發(fā)在引物酶的催化下，以DNA為模板，合成一段短的RNA片段，從而獲得3'端自由羥基。（2）引發(fā)體組裝：2.引發(fā)622、復(fù)制的延長（1）聚合子代DNA：由DNA聚合酶催化，以3'→5'方向的親代DNA鏈為模板，從5'→3'方向聚合子代DNA鏈。在原核生物中，參與DNA復(fù)制延長的是DNA聚合酶Ⅲ；而在真核生物中，是DNA聚合酶α(延長隨從鏈)和δ（延長前導(dǎo)鏈）。2、復(fù)制的延長（1）聚合子代DNA：63（2）引發(fā)體移動：引發(fā)體向前移動，解開新的局部雙螺旋，形成新的復(fù)制叉，隨從鏈重新合成RNA引物，繼續(xù)進(jìn)行鏈的延長。

（2）引發(fā)體移動：64（三）復(fù)制的終止1.去除引物，填補(bǔ)缺口：在原核生物中，由DNA聚合酶Ⅰ來水解去除RNA引物，并由該酶催化延長引物缺口處的DNA，直到剩下最后一個磷酸酯鍵的缺口。而在真核生物中，RNA引物的去除，由一種特殊的核酸酶來水解，而岡崎片段仍由DNA聚合酶來延長。（三）復(fù)制的終止1.去除引物，填補(bǔ)缺口：652.連接岡崎片段：在DNA連接酶的催化下，形成最后一個磷酸酯鍵，將岡崎片段連接起來，形成完整的DNA長鏈。

2.連接岡崎片段：66第二節(jié)DNA的損傷、修復(fù)與突變一、損傷與修復(fù)DNA的損傷：指生物體生命過程中DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)生的任何改變?？梢苑譃閮深悾簡蝹€堿基改變和結(jié)構(gòu)扭曲。第二節(jié)DNA的損傷、修復(fù)與突變DNA的損傷：指生物體生命67引起DNA損傷的原因：DNA在復(fù)制時產(chǎn)生錯配，病毒基因整合，某些物化因子如紫外線、電離輻射和化學(xué)誘變劑等。DNA的損傷修復(fù)：四種修復(fù)途徑:直接修復(fù)、錯配修復(fù)、切除（堿基或核苷酸）修復(fù)、重組修復(fù)。引起DNA損傷的原因：DNA在復(fù)制時產(chǎn)生錯配，病毒基因整合，68直接修復(fù)：當(dāng)紫外線引起DNA嘧啶二聚體時，光復(fù)活酶的活性被可見光激活，將嘧啶二聚體分解。直接修復(fù)：當(dāng)紫外線引起DNA嘧啶二聚體時，光復(fù)活酶的活性被可69錯配修復(fù)：錯配修復(fù)系統(tǒng)可以識別新舊鏈，一旦發(fā)現(xiàn)錯配堿基，即將未甲基化的新鏈切除，并以甲基化的鏈為模板進(jìn)行修復(fù)合成。丟失堿基和去堿基部位的修復(fù)：由C脫氨基為U，A變?yōu)镮時，DNA糖苷酶可以切除不正確的堿基，由PolⅠ和連接酶修復(fù)。錯配修復(fù)：錯配修復(fù)系統(tǒng)可以識別新舊鏈，一旦發(fā)現(xiàn)錯配堿基，即將70核苷酸代謝及DNA的生物合成課件71切除修復(fù)：核酸內(nèi)切酶切除損傷部位，產(chǎn)生的缺口以另一條鏈為模板被補(bǔ)平。重組修復(fù)：發(fā)生在復(fù)制后，復(fù)制時，跳過損傷部位，新鏈產(chǎn)生缺口由同源母鏈上相應(yīng)的核苷酸序列片段彌補(bǔ)，然后再合成的序列補(bǔ)上母鏈的空缺。原損傷部位并沒有切除但在后代逐漸稀釋。切除修復(fù)：核酸內(nèi)切酶切除損傷部位，產(chǎn)生的缺口以另一條鏈為模板72核苷酸代謝及DNA的生物合成課件73二、突變突變（mutation）：基因組DNA分子在結(jié)構(gòu)上發(fā)生堿基對組成或排列順序的改變（通常它只涉及基因中部分序列的變化），并引起個體表型的改變,而使生物體發(fā)生遺傳性變異。二、突變突變（mutation）：基因組DNA分子在結(jié)構(gòu)上發(fā)74

在自然界中生物體由于受到某種突變劑的作用，偶然會由于基因復(fù)制的錯誤而發(fā)生突變，這種突變稱為自發(fā)突變（spontaneousmutation）。自發(fā)突變的頻率較低，基因的每個核苷酸突變率平均為10-9～10-10。相反如果在人為條件下，使用某種突變劑處理生物體而產(chǎn)生的突變稱為誘發(fā)突變（inducedmutation）。在自然界中生物體由于受到某種突變劑的作用，偶然會由于基因75按突變的形式分類點(diǎn)突變（pointmutation）缺失（deletion）插入（insertion）重排（rearrangement）按突變的形式分類76基因突變的表型（后果）分類體細(xì)胞突變和性細(xì)胞突變形態(tài)突變(morphologicalmutations)

矮小突變，白眼突變生化突變(biochemicalmutations)

營養(yǎng)缺陷型致死突變(lethalmutations)

導(dǎo)致生物體死亡的突變條件致死突變基因突變的表型（后果）分類體細(xì)胞突變和性細(xì)胞突變77失去功能的突變(loss-of-functionmutation)Nullmutation,完全喪失功能的突變

Leakymutation,滲漏突變，部分功能的喪失獲得功能的突變(gain-of-functionmutation)

突變導(dǎo)致新功能的獲得失去功能的突變(loss-of-functionmutat78自然界基因突變廣泛存在白化自然界基因突變廣泛存在白化79果蠅眼色變異貓的眼色變異四條腿的雞蜜蜂綠眼變異果蠅眼色變異貓的眼色變異四條腿的雞蜜蜂綠眼變異80三、DNA多態(tài)性定義

在人類進(jìn)化過程中，其DNA序列會發(fā)生變異，而且能不斷積累這類變異，在人群中其DNA序列某特定位點(diǎn)變異頻率高于1%就叫DNA分子多態(tài)性。三、DNA多態(tài)性定義81類型限制性核酸內(nèi)切酶片斷長度多態(tài)性（RFLP）;數(shù)目可變的串聯(lián)重復(fù)多態(tài)性（VNTR）；串聯(lián)重復(fù)序列多態(tài)性（STR）；單核苷酸多態(tài)性（SNP）。類型82定義在某一人群中的正常個體間的基因組DNA的某些位點(diǎn)存在單個堿基對的差異，稱為單核苷酸多態(tài)性?；蚪M中單個核苷酸的缺失、插入或重復(fù)都不屬于SNP。單核苷酸多態(tài)性（SNP）定義單核苷酸多態(tài)性（SNP）83特點(diǎn)是最主要的多態(tài)性（占90%），是一種在進(jìn)化早期發(fā)生的突變，能夠穩(wěn)定遺傳。種類少，等位基因數(shù)量少，SNP數(shù)量多，密度高，呈現(xiàn)高度的多態(tài)性，可以提供高信息度，可自動化，大規(guī)模篩查。特點(diǎn)84endend8586教學(xué)目標(biāo)掌握：嘌呤環(huán)與嘧啶環(huán)上各原子來源熟悉：核酸的降解過程以及參與降解的酶類人體內(nèi)嘌呤的分解過程嘌呤核苷酸的從頭合成途徑了解:

嘧啶的分解與合成途徑第十二章核酸與核苷酸代謝1教學(xué)目標(biāo)掌握：嘌呤環(huán)與嘧啶環(huán)上各原子來源第十二章核酸86第一節(jié)核酸的分解代謝第一節(jié)核酸的分解代謝87核酸分解簡圖核酸核苷酸核酸酶（磷酸二酯酶）核苷酸酶（磷酸單酯酶）核苷磷酸核苷酶戊糖堿基堿基磷酸戊糖核苷磷酸化酶磷酸酶戊糖磷酸核酸分解簡圖核酸核苷酸核酸酶（磷酸二酯酶）核苷酸酶（磷酸單酯88一、核酸酶(nuclease)根據(jù)底物類型分類

DNA酶（Dnase）：水解DNARNA酶（RNase）：水解RNA根據(jù)作用位點(diǎn)分類核酸內(nèi)切酶：水解核酸分子內(nèi)部的磷酸二酯鍵核酸外切酶：從核酸鏈的一端逐個水解核苷酸一、核酸酶(nuclease)根據(jù)底物類型分類895′

p

p

p

pOHPyPuPyPy1′

p

p

pGACU

p

p

pGA3′RNaseT1RNaseARNaseT1作用于鳥苷酸3’端磷酸

RNaseA作用于胞苷酸和尿苷酸3’端磷酸

1.核酸內(nèi)切酶（1）RNase

作用于RNA內(nèi)部的磷酸二酯鍵5′ppppOHPyPuPyPy1′pppGA905′

p

p

p

pOHPyPuPyPy1′

p

p

pGACT

p

p

pGA3′DNaseⅠ（2）DNaseDNaseⅠ：真核生物，水解雙鏈或單鏈DNA。限制性DNA內(nèi)切酶：原核生物抵御病毒入侵的利器5′ppppOHPyPuPyPy1′pppGA91核苷酸代謝及DNA的生物合成課件92核苷酸代謝及DNA的生物合成課件931.嘌呤的分解（氧化脫氨）

靈長類、鳥類、爬行類和昆蟲體內(nèi)嘌呤降解的終產(chǎn)物是尿酸。人體內(nèi)腺嘌呤的分解∶腺嘌呤核苷經(jīng)脫氨酶及核苷磷酸化酶作用分解成次黃嘌呤;次黃嘌呤再經(jīng)黃嘌呤氧化酶的作用轉(zhuǎn)變成尿酸。1.嘌呤的分解（氧化脫氨）靈長類、鳥類、爬行類和昆蟲體內(nèi)94人體內(nèi)人體內(nèi)95代謝產(chǎn)物動物尿酸靈長類、鳥類、爬行類、昆蟲尿囊素除靈長類外其它哺乳類動物尿囊酸某些硬骨魚類尿素、乙醛酸大多數(shù)魚類、兩棲類動物氨、二氧化碳甲殼類動物、軟體動物代謝產(chǎn)物動物尿酸靈長類、鳥類、爬行類、昆蟲尿囊素除靈長類外其96小知識小知識972.嘧啶的分解(還原降解)

胞嘧啶首先脫氨轉(zhuǎn)變成尿嘧啶。尿嘧啶經(jīng)還原、開環(huán)水解，最后生成氨、CO2和β-丙氨酸，β-丙氨酸經(jīng)轉(zhuǎn)氨作用脫去氨基后可參加有機(jī)酸代謝。2.嘧啶的分解(還原降解)胞嘧啶首先脫氨轉(zhuǎn)變成尿嘧啶98UCT乙酰CoA琥珀酰CoAUCT乙酰CoA琥珀酰CoA99一.嘌呤核苷酸的合成代謝I.

從頭合成途徑磷酸核糖aa一碳單位CO2

嘌呤核苷酸（肝）酶第二節(jié)核苷酸的生物合成一.嘌呤核苷酸的合成代謝I.從頭合成途徑嘌呤核苷酸酶第二節(jié)100II．補(bǔ)救合成途徑游離的嘌呤PRPP(5-磷酸核糖-1-焦磷酸

)嘌呤核苷酸(腦、骨髓)II．補(bǔ)救合成途徑嘌呤核苷酸101N1―-----AspC2、C8---N10-甲酰

FH4N3、N9---GlnC6―-----CO2C4,5,7---Gly嘌呤核苷酸的從頭合成途徑(1)原料:N1―-----Asp嘌呤核苷酸的從頭合成途徑(1)原料:102來源磷酸戊糖途徑

核酸降解

ATPAMP*5-磷酸核糖5-磷酸核糖-1-磷酸磷酸核糖焦磷酸激酶

(PRPP合成酶)(2)磷酸戊糖---活性形式:PRPP來源磷酸戊糖途徑(2)磷酸戊糖---活103(3)過程:胞漿①在PRPP的基礎(chǔ)上,逐步加上簡單原料而形成嘌呤核苷酸(11步反應(yīng))②IMP是重要的中間產(chǎn)物，AMP、GMP的前體第一階段:IMP的合成，在PRPP的基礎(chǔ)上，逐步加上嘌呤環(huán)合成所需的原料，合成IMP（次黃嘌呤）(3)過程:胞漿104定向步驟,重要酶第一階段:IMP生成定向步驟,重要酶第一階段:IMP生成105第二階段:AMP、GMP生成重要的中間產(chǎn)物AMP、GMP的前體第二階段:AMP、GMP生成重要的中間產(chǎn)物106*核苷三磷酸-------核酸合成的底物

激酶

激酶AMPADPATP

ATPADPATPADP

激酶

激酶GMPGDPGTP

ATPADPATPADP*核苷三磷酸-------核酸合成的底物107腦、骨髓內(nèi)缺乏有關(guān)合成酶，因此只能采用補(bǔ)救合成。

補(bǔ)救合成（salvagepathway）*APRT腺嘌呤

+PRPPAMP+PPI

*HGPRT次黃嘌呤

+PRPPIMP+PPI

HGPRT鳥嘌呤

+PRPPGMP+PPI

HGPRT缺乏-----自毀容貌癥（leschNyhan綜合癥）腦、骨髓內(nèi)缺乏有關(guān)合成酶，因此只能采用補(bǔ)救合成。補(bǔ)救合108嘧啶核苷酸的從頭合成途徑二.嘧啶核苷酸的合成代謝1.元素來源嘧啶核苷酸的從頭合成途徑二.嘧啶核苷酸的合成代謝1.元素來1092.過程：肝細(xì)胞*特點(diǎn)：（1）合成嘧啶環(huán)的基礎(chǔ)上，再加上PRPP（2）UMP是CTP與dTMP的共同前體*第一步：UMP的合成*第二步：UTP、CTP的合成2.過程：肝細(xì)胞110UMPGInGIuUMPGInGIu111教學(xué)目標(biāo)掌握：半保留復(fù)制、半不連續(xù)復(fù)制、岡崎片段、前導(dǎo)鏈、隨從鏈等基本概念；突變的分類熟悉：復(fù)制的基本過程；參與DNA復(fù)制過程的各種酶的特點(diǎn)及作用；損傷修復(fù)的類型；突變的后果。了解：DNA損傷修復(fù)的過程、單核苷酸多態(tài)性第十四章DNA的復(fù)制與修復(fù)教學(xué)目標(biāo)掌握：半保留復(fù)制、半不連續(xù)復(fù)制、岡崎片段、前導(dǎo)鏈、隨112第一節(jié)DNA復(fù)制DNA的半保留復(fù)制

DNA復(fù)制的半不連續(xù)性原核生物的DNA復(fù)制(E.coli)

真核生物的DNA復(fù)制第一節(jié)DNA復(fù)制DNA的半保留復(fù)制113復(fù)制（replication）：以親代DNA或RNA為模板，根據(jù)堿基配對的原則，在一系列酶的作用下，生成與親代相同的子代DNA或RNA的過程復(fù)制子（Replicon）：含有一定復(fù)制起點(diǎn)和復(fù)制終點(diǎn)的復(fù)制單位。基本概念復(fù)制（replication）：以親代DNA或RNA為模板，114DNA復(fù)制在細(xì)胞周期的S期DNA復(fù)制在細(xì)胞周期的S期115一、DNA的復(fù)制特點(diǎn)（一）半保留復(fù)制(semi-conservativereplication)DNA在復(fù)制時，以親代DNA的每一股作模板，合成完全相同的兩個雙鏈子代DNA，每個子代DNA中都含有一股親代DNA鏈。1958Meselson-stahl設(shè)計(jì)的N15標(biāo)記結(jié)合CsCl密度梯度離心試驗(yàn)證實(shí)了DNA復(fù)制的這一特性一、DNA的復(fù)制特點(diǎn)116·

細(xì)胞生長在15N標(biāo)記培養(yǎng)基中·

轉(zhuǎn)入正常N源培養(yǎng)基中·

分離各代DNA·

分析各代DNA的浮力密度15N標(biāo)記DNA未標(biāo)記DNADNA類型

浮力密度

N15－DNA1.742g/mlN15－N14－DNA1.717g/mlN14－DNA1.710g/ml15N標(biāo)記實(shí)驗(yàn)·細(xì)胞生長在15N標(biāo)記培養(yǎng)基中15N標(biāo)記DNA未標(biāo)117DNA的半保留復(fù)制的生物學(xué)意義DNA的半保留復(fù)制表明DNA在代謝上的穩(wěn)定性，是保證親代的遺傳信息穩(wěn)定地傳遞給后代的必要措施。DNA的半保留復(fù)制的生物學(xué)意義DNA的半保留復(fù)制表明DNA在118

（二）、復(fù)制原點(diǎn)、方向和方式1、復(fù)制原點(diǎn)、復(fù)制子

DNA的復(fù)制有特定的起始位點(diǎn)，稱為復(fù)制原點(diǎn)，常用ori表示。從復(fù)制原點(diǎn)到復(fù)制終點(diǎn)，組成一個復(fù)制單位，稱為復(fù)制子。

原核生物：單復(fù)制起點(diǎn)，即整個染色體只有一個復(fù)制單位（二）、復(fù)制原點(diǎn)、方向和方式1、復(fù)制原點(diǎn)、復(fù)制子119真核生物（Eukaryote）:多復(fù)制起點(diǎn)，即一個genome中有多個復(fù)制單位真核生物（Eukaryote）:多復(fù)制起點(diǎn)，120復(fù)制起點(diǎn)是以一條鏈為模板起始DNA合成的一段序列。兩條鏈的復(fù)制起點(diǎn)不一定在同一點(diǎn)上，如不對稱復(fù)制。多數(shù)生物的復(fù)制起點(diǎn)，都是DNA呼吸作用（配對堿基之間的氫鍵持續(xù)斷裂和再生的過程）強(qiáng)烈的區(qū)段，即經(jīng)常開放的區(qū)段，富含AT。在一個完整的細(xì)胞周期中，每一個復(fù)制起點(diǎn)只使用一次，完成一次復(fù)制過程。復(fù)制起點(diǎn)是以一條鏈為模板起始DNA合成的一段序列。兩條鏈的復(fù)121復(fù)制叉（Replicationfork）：染色體中參與復(fù)制的活性區(qū)域，即復(fù)制正在發(fā)生的位點(diǎn)

復(fù)制眼（replicationeye）：電子顯微鏡下觀察正在復(fù)制的DNA，復(fù)制的區(qū)域形如一只眼睛

2、復(fù)制方向復(fù)制叉（Replicationfork）：染色體中參與復(fù)122真核生物的多復(fù)制子多個復(fù)制眼真核生物的多復(fù)制子多個復(fù)制眼123

單雙向復(fù)制取決于起點(diǎn)處有一個還是兩個復(fù)制叉

單向復(fù)制

雙向復(fù)制單雙向復(fù)制取決于起點(diǎn)處有一個還是兩個復(fù)制叉單向復(fù)制1243、原核生物DNA復(fù)制方式大多數(shù)以對稱方式進(jìn)行—即兩條鏈同時復(fù)制，也有一定時期內(nèi)DNA只復(fù)制一條鏈的情況（1）從頭起始

a.θ復(fù)制（E.coli,λphage，某些病毒）雙鏈環(huán)狀DNA的復(fù)制眼可以形成一種θ結(jié)構(gòu)，形狀像希臘字母θ3、原核生物DNA復(fù)制方式大多數(shù)以對稱方式進(jìn)行—即兩條鏈同125核苷酸代謝及DNA的生物合成課件126b.D環(huán)復(fù)制

不對稱復(fù)制，線粒體和葉綠體DNA

的復(fù)制。b.D環(huán)復(fù)制127（2）共價延伸方式（滾環(huán)式復(fù)制）由于復(fù)制時產(chǎn)生的滾環(huán)結(jié)構(gòu)形狀象σ，又稱σ復(fù)制

M13,T2phage等病毒、細(xì)菌因子

（2）共價延伸方式128（三）半不連續(xù)復(fù)制

由于DNA聚合酶只能以5'→3'方向聚合子代DNA鏈，即模板DNA鏈的方向必須為3'→5'。因此，分別以兩條親代DNA鏈作為模板聚合子代DNA鏈時的方式是不同的。（三）半不連續(xù)復(fù)制由于DNA聚合酶只能以5'→3'方向聚129以3'→5'方向的親代DNA鏈作模板的子代鏈在復(fù)制時基本上是連續(xù)進(jìn)行的，其子代鏈的聚合方向?yàn)?'→3'，這一條鏈被稱為前導(dǎo)鏈(leadingstrand)。以5'→3'方向的親代DNA鏈為模板的子代鏈在復(fù)制時則是不連續(xù)的，其鏈的聚合方向也是5'→3'，這條鏈被稱為隨從鏈或滯后鏈(laggingstrand)。以3'→5'方向的親代DNA鏈作模板的子代鏈在復(fù)制時基本上是130岡崎片段（Okazakifragment）：DNA復(fù)制時，一條以5'→3'方向的母鏈作為模板，指導(dǎo)新合成的鏈沿5'→3'合成不連續(xù)的小片段。崗崎片段由DNA連接酶連成一條完整的新鏈。岡崎片段的大小:在原核生物中約為1000～2000個核苷酸，而在真核生物中約為100個核苷酸。岡崎片段（Okazakifragment）：DNA復(fù)制時，1315'3'

前導(dǎo)鏈隨從鏈崗崎片段5'3'3'3'3'3'5'5'5'5'5'3'前導(dǎo)鏈隨從鏈崗崎片段5'3'3'3'3'3'5'5132二、參與DNA復(fù)制的酶和蛋白因子

名稱

功能DnaA蛋白辯認(rèn)起始點(diǎn)解螺旋酶(DnaB蛋白,rep蛋白）解開DNA雙鏈DnaC蛋白協(xié)助解螺旋酶引物酶(DnaG蛋白)催化RNA引物合成SSB（單鏈結(jié)合蛋白）穩(wěn)定解開的單鏈拓?fù)洚悩?gòu)酶理順DNA鏈DNA聚合酶復(fù)制、填補(bǔ)缺口、校正錯誤DNA連接酶連接岡崎片段二、參與DNA復(fù)制的酶和蛋白因子名稱功能D1331.DNA聚合酶原料：四種dNTPs（dATP、dGTP、dCTP、dTTP)模板：以DNA為模板鏈，合成子代DNA，模板可以是雙鏈，也可以是單鏈DNA。合成產(chǎn)物與模板互補(bǔ)。引物：一小段RNA(或DNA）為引物，在大腸桿菌中，DNA的合成需要一段RNA鏈作為引物，引物含3'-OH.合成方向：531.DNA聚合酶原料：四種dNTPs（dATP、dGTP、1345'→3'聚合酶活性（但持續(xù)合成DNA的能力差）；3'→5'外切酶活性；5'→3'外切酶活性（雙鏈DNA或DNA:RNA雜交體）（1）E.coliDNA聚合酶

(a)DNA聚合酶Ⅰ（單體多功能酶）該酶主要是對DNA損傷的修復(fù)，以及在DNA復(fù)制時RNA引物切除及其缺口的填補(bǔ)。5'→3'聚合酶活性（但持續(xù)合成DNA的能力差）；（1）E135(b)DNA聚合酶Ⅱ(多亞基酶)具有3'→5'外切酶活性聚合活力比DNA聚合酶Ⅰ高(持續(xù)合成DNA的能力差)可能在修復(fù)紫外光引起的DNA損傷中起作用。(b)DNA聚合酶Ⅱ(多亞基酶)具有3'→5'外切酶活性可136(c)DNA聚合酶Ⅲ多亞基酶（10種亞基）（αεθ）稱為核心酶，β2稱為夾子，（γ2δδ’χΨ）組成γ復(fù)合物，其主要功能是幫助β亞基夾住DNA，故稱為夾子裝配器;該酶DNA合成的持續(xù)能力強(qiáng)，主要與該結(jié)構(gòu)有關(guān);該酶是DNA的真正復(fù)制酶。(c)DNA聚合酶Ⅲ多亞基酶（10種亞基）137核苷酸代謝及DNA的生物合成課件138在真核生物中，目前發(fā)現(xiàn)的DNA聚合酶有五種，分別命名為聚合酶α（polα），聚合酶β（polβ），聚合酶γ（polγ），聚合酶δ（polδ），聚合酶ε（polε）。其中，參與染色體DNA復(fù)制的是polα（延長隨從鏈）和polδ（延長前導(dǎo)鏈），參與線粒體DNA復(fù)制的是polγ，polε與DNA損傷修復(fù)、校讀和填補(bǔ)缺口有關(guān)，polβ只在其他聚合酶無活性時才發(fā)揮作用。(2)真核細(xì)胞DNA聚合酶在真核生物中，目前發(fā)現(xiàn)的DNA聚合酶有五種，分別命名為聚合酶1393'5'

5'3'2.DNA連接酶(DNAligase)若雙鏈DNA中一條鏈有切口，切口一端是3‘-OH，另一端是5’-Pi，DNA連接酶可催化二者之間形成磷酸二酯鍵，從而使切口連接起來。不能連接兩條游離的DNA單鏈OHPi3'140需要消耗能量，在原核生物中由NAD+供能，在真核生物中由ATP供能。在DNA復(fù)制、損傷修復(fù)、重組等過程中起重要作用。T4噬菌體DNA連接酶不僅能連接接口，還能連接平頭雙鏈DNA。需要消耗能量，在原核生物中由NAD+供能，在真核生物中由AT1413.拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶I：使DNA一條鏈發(fā)生斷裂和再連接，以解開負(fù)超螺旋，同轉(zhuǎn)錄有關(guān)。拓?fù)洚悩?gòu)酶II：使DNA兩條鏈發(fā)生斷裂和再連接，可以引入負(fù)超螺旋，同復(fù)制有關(guān)。3.拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶I：使DNA一條鏈發(fā)生斷裂和再連接1424.解螺旋酶（解鏈酶）

通過水解ATP將DNA兩條鏈打開。E.coli中的

rep蛋白就是解螺旋酶，還有解螺旋酶I、II、

III。每解開一對堿基需要水解2個ATP分子。

穩(wěn)定DNA解開的單鏈，防止復(fù)性和保護(hù)單鏈部分不被核酸酶水解。5.單鏈結(jié)合蛋白4.解螺旋酶（解鏈酶）通過水解ATP將DNA兩條143思考題：為什么使用RNA作引物？6.引物合成酶與引發(fā)前體

引物合成酶（引發(fā)酶）：此酶以DNA為模板合成一段RNA，這一段RNA作為合成DNA的引物。實(shí)質(zhì)是以DNA為模板的RNA聚合酶。

引發(fā)前體:它由多種蛋白質(zhì)dnaA、dnaB、dnaC、n、n'、n''和i組成。引發(fā)前體再與引發(fā)酶結(jié)合組裝成引發(fā)體。思考題：為什么使用RNA作引物？6.引物合成酶與引發(fā)前體144三、DNA的復(fù)制過程三、DNA的復(fù)制過程145（一）復(fù)制的起始

1.預(yù)引發(fā)（1）解旋解鏈，形成復(fù)制叉：由拓?fù)洚悩?gòu)酶和解鏈酶作用，使DNA的超螺旋及雙螺旋結(jié)構(gòu)解開，堿基間氫鍵斷裂，形成兩條單鏈DNA。單鏈DNA結(jié)合蛋白（SSB）結(jié)合在兩條單鏈DNA上，形成復(fù)制叉。（一）復(fù)制的起始146（2）引發(fā)體組裝：由蛋白因子（如dnaB等）識別復(fù)制起始點(diǎn)，并與其他蛋白因子以及引物酶一起組裝形成引發(fā)體。

2.引發(fā)在引物酶的催化下，以DNA為模板，合成一段短的RNA片段，從而獲得3'端自由羥基。（2）引發(fā)體組裝：2.引發(fā)1472、復(fù)制的延長（1）聚合子代DNA：由DNA聚合酶催化，以3'→5'方向的親代DNA鏈為模板，從5'→3'方向聚合子代DNA鏈。在原核生物中，參與DNA復(fù)制延長的是DNA聚合酶Ⅲ；而在真核生物中，是DNA聚合酶α(延長隨從鏈)和δ（延長前導(dǎo)鏈）。2、復(fù)制的延長（1）聚合子代DNA：148（2）引發(fā)體移動：引發(fā)體向前移動，解開新的局部雙螺旋，形成新的復(fù)制叉，隨從鏈重新合成RNA引物，繼續(xù)進(jìn)行鏈的延長。

（2）引發(fā)體移動：149（三）復(fù)制的終止1.去除引物，填補(bǔ)缺口：在原核生物中，由DNA聚合酶Ⅰ來水解去除RNA引物，并由該酶催化延長引物缺口處的DNA，直到剩下最后一個磷酸酯鍵的缺口。而在真核生物中，RNA引物的去除，由一種特殊的核酸酶來水解，而岡崎片段仍由DNA聚合酶來延長。（三）復(fù)制的終止1.去除引物，填補(bǔ)缺口：1502.連接岡崎片段：在DNA連接酶的催化下，形成最后